Etude enzymatique comparée de champignons entomopathogènes des genres Beauveria et Metarhizium

Résumé Les extraits antigéniques de trois champignons entomopathogènes (Beauveria bassiana, Beauveria brongniartii et Metarhizium anisopliae), soumis à l'analyse éléctrophorétique en gel d'agar révèlent au total 23 activités enzymatiques différentes (5 oxydo-réductases et 18 hydrolases), dont 18 ont été retrouvées à l'analyse immunoélectrophorétique. La carte enzymatique de ces germes complète leur analyse immunoélectrophorétique; la comparaison des isoenzymes des divers isolats permet de mettre en évidence des différences interspécifiques et intraspécifiques.Chaque souche cryptogamique se caractérise par des profils enzymatiques particuliers. Ces résultats montrent donc que l'étude des enzymogrammes est un complément utile à l'analyse immunoélectrophorétique appliquée à la caractérisation des hyphomycètes entomopathogènes. Enfin, les souches n 44 et 51 de M. anisopliae paraissent être suffisamment apparentées pour être réunies au sein d'un même biotype.     

Analyse immunoélectrophorétique des antigènes fongiques et systématique des champignons. Répercussions pratiques sur le diagnostic des mycoses

Conclusion En 1959, dans une note (2) à l'Académie des Sciences, nous écrivions, en conclusion d'un travail préliminaire sur l'étude immunoélectrophorétique desCandida: Si l'avenir apportait la démonstration de résultats similaires obtenus avec d'autres champignons que les levures du genreCandida, on disposerait en mycologie d'une méthode générale d'analyse des fractions antigéniques...; de plus, les connaissances acquises dans ce domaine auraient vraisemblablement d'heureuses répercussions pratiques sur les problèmes taxonomiques en suspens et sur le diagnostic sérologique des mycoses. Six ans plus tard, il nous semble que l'application de l'immunoélectrophorèse à la mycologie ait tenu ses promesses. Sans se substituer à d'autres techniques, ne fut-ce que parce que son objet est limité à l'étude des fractions antigéniques solubles ou à celle des anticorps précipitants, et parce que sa mise en oeuvre est souvent longue et délicate, elle complète heureusement ces techniques, apportant effectivement, dans bien des cas, un argument nouveau, analytique et élégant, à la taxonomie des champignons et ouvrant une voie nouvelle au diagnostic sérologique de certaines mycoses.(avec la collaboration technique deM. Brugge)Communication présentée à l' International Society for human and animal mycology, Third meeting. Edinburgh, July 31st-August 2nd, 1964.     

Étude Électrophorétique Et Immunochimique Comparée Des Antigènes De Quelques Levures Du GenreCandida (C. Albicans,C. Stellatoidea,C. Tropicalis,C. Zeylanoides,C. Krusei,C. Pseudotropicalis,C. Macedoniensis)

Résumé L'électrophorèse en gélose pratiquée sur les antigènes des espèces deCandida étudiées, met en évidence 6 fractions. La séparation bien que sommaire a permis l'appréciation de la nature chimique de ces antigènes. La zone de faible mobilité anodique constitue le composant majeur de nature essentiellement protéique, tandis que la fraction lente est intensément révélée par la coloration à l'acide périodique-réactif de Schiff. L'électrophorèse en gel d'amidon, grâce au grand pouvoir de résolution du support a fourni une meilleure séparation des protéines. Intéressants mais insuffisants, les résultats acquis par ces deux types d'électrophorèse de zone sont très largement complétés par ceux de l'immunoélectrophorèse. Cette dernière méthode d'une haute spécificité encore qu'elle reste tributaire de la qualité des immunsérums employés a conduit à un dénombrement précis des fractions antigéniques desCandida puis à la mise en évidence des antigènes communs et spécifiques des espèces étudiées. Les résultats obtenus confirment ceux que nous avons obtenus précédemment (Biguet & coll., 1959a, 1959b, 1960) quant aux affinités réciproques de certaines espèces. Reposant sur des bases physico-chimiques très différentes, ils rejoignent et confirment les travaux extrêment importants de l'école japonaise deTsuchiya et apportent un nouvel argument immunologique à l'hétérogénéité du genreCandida. Sous l'angle taxonomique au moins, il semble que notre méthode présente sur celle des auteurs japonais l'avantage de révéler un nombre beaucoup plus considérable de fractions, partant de permettre en particulier la mise en évidence de divergences de structure qui échapperaient par l'utilisation de leur technique (par exemple, celle qui séparentC. pseudotropicalis deC. macedoniensis).

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Summary Agar electrophoresis carried out on antigens ofCandida species studied yielded six fractions. The separation, though summary, permitted the evaluation of the chemical nature of the antigens. The zone of the weak anionic motility constitutes the major component, essentially proteinic in nature, while the slow fraction is intensely revealed by the PAS stain. Starch gel electrophoresis, due to its great power of resolution, yielded better separation of proteins. The results obtained by these two types of zone electrophoresis, interesting but not sufficient, are a great deal complemented by the results of immuno-electrophoresis. The latter method of high specificity, even though it depends on the quality of the immune serum used, led to a precise enumeration of the antigenic fractions ofCandida, furthermore to the evidence of common and specific antigens of the species studied. The results obtained confirmed those previously obtained (Biguet et coll., 1959a, 1959b, 1960) concerning the reciprocal affinities of certain species. Resting on very different physico-chemical bases, they confirm the extremely important work of the school ofTsuchiya and bring a new immunologic argument as to the heterogeneity of the genusCandida. At least under taxonomic point of view, it seems that our method shows an advantage compared with that of the Japanese authors in revealing a much greater number of fractions, consequently in permitting the proof of divergence of structure which would escape by using their technique (e.g. those which separateC. pseudotropicalis fromC. macedoniensis).

     

A comparative study of several strains of the Tetranychus neocaledonicus complex and sterilization tests of males by X-rays

Five populations of Tetranychus neocaledonicus, collected in various biotopes from different plants, were studied in order to become informed about variation in this species. It appeared that all strains differed with respect to longevity and fecundity. Crossings resulted in incompatibility, hybrid inviability, hybrid sterility and hybrid breakdown. It is suggested that the great interpopulational variation as found in T. neocaledonicus is a consequence of the haplo-diploid system.An important difference in longevity and fecundity between mated and unmated females has been stated for all strains. Outcrosses with males from another species indicated that it is not the fertilization, but the insemination only which induces the enhanced fecundity in T. neocaledonicus. Irradiated males appeared to be able to inseminate females effectively, resulting in the prevention of viable diploid offspring.

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Résumé A la suite d'une étude morphologique concluant à l'homogénéité d'un grand nombre de prélèvements de Tetranychus neocaledonicus, dans plusieurs régions de la zone intertropicale, les auteurs proposent 3 séries d'expériences portant sur la physiologie et la compatibilité de quelques souches de ce taxon.La première série d'essais, porte sur la comparaison de la longévité et de la fécondité de femelles fécondées ou non, appartenant à 4 souches prélevées à Madagascar et à une souche originaire de Louisiane (U.S.A.). Pour ces souches élevées dans des conditions identiques, les femelles fécondées pondent davantage et vivent moins longtemps que les femelles vierges. Les graphiques fournis et les tests statistiques employés, montrent que suivant leur appartenance à l'une des 5 souches, les femelles étudiées ont une longévité propre et présentent du point de vue de la reproduction, des différences très nettes.La seconde série d'expériences a pour but de vérifier la compatibilité entre les différentes souches malgaches précédentes, aussi bien entre elles qu'avec la souche Louisiane white eye, marquée génétiquement et dérivant de la souche Louisiane précédente. Un croisement a été également tenté entre une souche de T. neocaledonicus et une souche de T. urticae. Huit croisements ont été ainsi réalisés avec chaque fois le croisement réciproque. La composition des F₁, F₂ et F₃ est analysée. Une très forte agressivité des mâles à l'égard des jeunes femelles est chaque fois constatée. Le croisement de T. neocaledonicus avec T. urticae n'entraîne aucune hybridation. Entre les souches de T. neocaledonicus il y a formation de femelles, dans l'un des 2 sens au moins mais les femelles produites en F₁ se révèlent stériles dans 5 cas sur 12 et peu de souches semblent vraiment compatibles au-delà de la F₃. Finalement, les différences entre les souches du point de vue physiologique et les incompatibilités génétiques, amènent les auteurs à considérer qu'il y a, en fait, plusieurs espèces d T. neocaledonicus devant être groupées en un complexe. Ces croisements permettent aussi de remarquer, que l'abaissement de la longévité des femelles fécondées, dépend étroitement du taux de fécondation des ufs.La troisième série d'expériences tente d'expliquer l'augmentation de la production d'ufs chez les femelles fécondées. Les pontes des 14 premiers jours de vie, de femelles de la souche Lousiane fécondées ou non, sont comparées à celles de femelles fécondées, par des mâles de la même souche, irradiés aux rayons X ou par des mâles de T. urticae. La technique d'élevage employée ici permet l'intervention de plusieurs mâles. L'analyse de la F₁ et la quantité d'ufs produits à la suite du croisement avec les mâles de T. urticae, prouvent que l'augmentation de la ponte est dûe à un phénomène indépendant du taux de fécondation des ufs.Les auteurs signalent, en conclusion, que les incompatibilités entre les différentes souches de T. neocaledonicus pourraient être utilisées en lutte biologique par voie génétique, mais que la stérilisation des mâles aux rayons X, obtenue au cours de la dernière série d'expériences, aboutit aux mêmes résultats et paraît plus sûre.

     

Monoclonal antibodies obtained through insect brain homogenates: Tools for cell-specific neuroanatomical studies in the Colorado potato beetle

Immunization of mice with crude or purified homogenates of brain and endocrine organs of the Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata (Say), generated antibodies against specific antigens in the insect tissue. Hybridomas were prepared and screened immunocytochemically for the production of monoclonal antibodies (MAB) that recognized specific cells and that were useful for neuroanatomical studies. A relatively high proportion of MABs recognized one or more cells or tissues in neuronal, neuroendocrine or nonneural compartments of the brain or in fatbody or haemocytes, using standard immunocytochemical procedures. We could make a clear differentiation in subsets of neurons (both normal and peptidergic) and neuron-specific neuroglial cells. A full account of the obtained responses is given. The preparation of the immunogen and the immunization protocol affects the selection of MABs produced. It is argued that not all possibilities have been exploited and that continued experiments would probably increase the number of selective MABs.

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Résumé L'utilisation de techniques immunocytochimiques lors d'études neuro-anatomiques est encore dans l'enfance par suite de l'absence de données sur la chimie de structures spécifiques et, par conséquent, de l'absence d'anticorps spécifiques d'antigènes et de tissus. Nous apportons la preuve que de nombreuses substances réelles d'homogénats bruts de cerveaux sont de bons antigènes et que les souris peuvent être induites à produire des anticorps contre ceux-ci. Nous avons produit et testé de nombreux anticorps monoclonaux qui reconnaissent ces antigènes sur des lames de microscope, en utilisant des techniques immunocytochimiques courantes ou plus élaborées.Les immunogènes ont été préparés de différentes façons pour examiner si le taux de mélange de tissus du cerveau et/ou des ganglions associés et de glandes endocrines, et si les procédés ultérieurs de purification et d'immunisation, influeraient sur la spécificité des anticorps. L'intégralité de l'ensemble cerveau-glandes endocrines a été le plus immunogénique quand l'homogénat a subi le minimum de manipulations. Une grande diversité d'anticorps a été obtenue après des injections répétées chez la souris. Ces anticorps reconnaissent les épitopes dans toutes les catégories de tissus considérés, c'est-à-dire, les tissus spécifiquement nerveux, neuro-endocrines, et non nerveux. La purification progressive et le cross-linking des constituants de l'homogénat réduisent la variabilité des anticorps. Tout en l'espérant, on ne s'attendait pas à ce que les substances jusqu'alors dans des centres peptidergiques indéfinis fussent parmi les structures les plus souvent identifiées. Les chances de produire de tels anticorps spécifiques de peptides ont augmenté quand les tissus endocrines ont servi d'immunogènes.Nous avons résumé les types de tissus et de cellules mis en évidence par cette sélection d'anticorps monoclonaux. Nous soulignons que l'expérimentateur peut difficilement influencer les préférences du système immunologique de la souris, mais les anticorps produits jusqu'ici sont valables pour les études neuroanatomiques et pour la récolte d'antigènes intéressants à partir de procédés biochimiques de séparation. Il reste à explorer la spécificité sensu stricto des anticorps.

     

Behavioural variations among strains of Trichogramma spp.: Host-age selection

Host-age selection by several Trichogramma spp. strains was examined in laboratory choice-tests, in order to use this as a criterion to select a candidate strain for inundative releases against lepidopterous pests of cabbage in the Netherlands. The behaviour of individual females toward combinations of host eggs of two different ages (zero vs 2 and 1 vs 3-day-old) of the host species Mamestra brassicae, Pieris brassicae and P. rapae was observed directly. Host age generally did not appear to affect contact or acceptance of eggs of either host species, except that oviposition was generally lower in the oldest M. brassicae eggs. The duration of the oviposition behaviour was sometimes influenced by host-age. All strains were able to discriminate between parasitized and unparasitized hosts by external or internal examation. The lack of variation among the strains suggests that the host-age selection pattern of a given host-Trichogramma combination is predominantly dependent on the host species. The results are discussed in relation to optimal foraging theory.

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Résumé Afin de sélectionner une souche candidate de Trichogramma sp. pour des lâchés inondatifs contre les Lépidoptères, pestes du chou aux Pays-Bas, la sélection hôte-âge de plusieurs souches de Trichogramma spp., issues d'un éventail de 60 souches, a été examinée en laboratoire par des tests de choix. Le comportement de femelles individuelles, mises en présence de combinaisons d'oeufs-hôtes d'âges différents (zero ou 2 jours et 1 ou 3 jours) des espèces-hôtes Mamestra brassicae, Pieris brassicae et P. rapae, a été observé directement. En général, l'âge de l'hôte ne semble pas affecter le contact et l'acceptation des oeufs quelque soit l'espèce-hôte. La ponte diminue généralement dans les oeufs les plus âgés de M. brassicae, mais pas chez les autres espèces. La durée du comportement de ponte est parfois influencée par l'âge de l'hôte. Toutes les souches ont montré la capacité de discriminer entre les hôtes parasités et nonparasités, a l'examen externe ou interne et ceci, indépendamment de l'âge de l'hôte. Le manque de variation parmi les souces suggère que le mode de sélection hôte-âge est surtout caractéristique de l'espèce-hôte. Les resultats sont discutés en relation avec la théorie de fourrage optimal.

     

La détermination sérologique de la poliomyélite asymptomatique dans la famille

Résumé Dans 4 familles où se trouvait un malade atteint de poliomyélite on a examiné les sérums de la phase aiguë et de la phase de convalescence des malades et des autres membres de famille pour chercher la présence d'anticorps neutralisant trois souches du virus poliomyélitique (Lansing, SK et MM) et le virus de la chorioméningite lymphocytaire. Dans deux familles au moins, les recherches indiquent que les anticorps contre la souche Lansing ne se forment que comme conséquence spécifique d'une infection, éventuellement asymptomatique, par un virus poliomyélitique d'une structure antigène apparentée à celle de la souche Lansing. Dans une famille le sérum de la phase aiguë d'un malade et le sérum de sa mère, contenaient des anticorps tandis que le sérum de son père et d'une soeur ne neutralisait pas la souche Lansing. Dix semaines après, les sérums du père et de la soeur avaient obtenu un pouvoir neutralisant contre cette souche, bien que ni l'un ni l'autre n'aient été malades. Ceci pourrait indiquer la possibilité d'une infection par contact direct dans la famille.     

Immunological characterization of the entomopathogenic hyphomycetes Beauveria and Metarhizium

Immunological comparison among Beauveria species and Metarhizium strains isolated from insect larvae were made using immunoelectrophoresis. Antigens consisted of somatic or metabolic buffer-soluble proteins. Antisera were produced in rabbits against each of the 6 fungal strains. Each antigen was tested against the homologous antiserum non-adsorbed or cross-adsorbed with one other antigen and against the heterologous antisera. The immunoelectrophoresis slides were analyzed in terms of the number of precipitin arcs obtained with cross-reacting and reference antigens, with any one antiserum. Immunoelectrophoregrams were also considered.These tests revealed numerous antigenic similarities between different isolates. Moreover, results indicate that distinct and reproducible differences exist, both between two species of Beauveria and between four strains of M. anisopliae. The groupings of strains obtained from immunoelectrophoretic data correspond well with those based on spore morphology. Some methodological aspects are discussed. The present results are in agreement with our preliminary studies. They confirm that immunoelectrophoresis proves to be a very useful aid for the characterization of the Hyphomycetes candidates for biological control of insect pests.

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Résumé Beauveria bassiana et B. brongnianii d'une part et 4 souches de Metarhizium anisopliae d'autre part, ont été analysés par immunoélectrophorèse de leurs protéines cellulaires ou métaboliques. Chaque antigène a été éprouvé contre le sérum homologue non adsorbé ou adsorbé avec un antigène hétérologue et contre les sérums hétérologues. Les parentés et les différences entre les 2 Beauveria et entre les 4 Metarhizium ont été définies quantitativement par le nombre d'arcs de précipitation communs ou specifiques. Nous avons aussi considéré les immunoelectrophorégrammes des divers isolats.Les résultats des réactions croisées montrent d'importantes communautés antigéniques entre les pathotypes étudiés, toutefois l'utilisation de l'immunoadsorption a permis de mettre en évidence les fractions spécifiques aussi bien entre les 2 Beauveria qu'entre les 4 souches de l'espèce M. anisopliae. Les distinctions établies sur les données sérologiques correspondent aux différences morphologiques sporales entre isolats. Ces résultats précisent et confirment nos études préliminaires en démontrant l'intérêt de la caractérisation immunoélectrophorétique des Hyphomycètes candidats à la lutte biologique contre les insectes nuisibles.

     

Behavioural variation among strains ofTrichogramma spp.: host-species selection

The host-selection behaviour of nine strains ofTrichogramma spp., towards eggs ofMamestra brassicae, Pieris brassicae andP. rapae, was investigated in laboratory experiments in order to select candidate strains for inundative releases against these species. Experiments were carried out by continuously observing the behaviour of individual females, which were offered equal numbers of eggs of two host species arranged in a grid.M. brassicae was a highly acceptable host species for all strains, whereas the acceptability of the twoPieris species was similar within strains, but varied between strains. Considering the variation in acceptance ofPieris eggs, strains either showed: (1) no preference betweenMamestra andPieris (High PierisAcceptance = HPA strains), (2) a preference forMamestra (Variable PierisAcceptance = VPA strains), or (3) an aversion forPieris (Low PierisAcceptance = LPA strains). Females of VPA strains showed a high acceptance ofPieris eggs if the preferredMamestra eggs were absent. They contacted comparatively fewerPieris eggs in presence ofMamestra eggs, which indicates selection of hosts at a distance. HPA strains probably are the best candidates for inundative releases.

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Sélection hôte-espèce par différences souches de l'æuf-parasiteTrichogramma spp.

Résumé Le comportement de sélection de l'hôte par neuf souches deTrichogrammes, vis-à-vis d'ufs deMamestra brassicae, Pieris brassicae etP. rapae a été étudié au laboratoire afin de sélectioner des souches candidates pour des lâchers inondatifs contre ses espèces. Des expériences ont été menées par observations en continu du comportement de femelles auxquelles était offert un nombre égal d'ufs de deux espèces d'hôtes, disposés selon un grille.M. brassicae est un espèce-hôte fortement acceptée par toutes les souches. Au contraire, l'acceptabilité des deux espèces dePieris, semblable pour chaque souche, varie entre les souches. En tenant compte de la variation d'acceptance des ufs dePieris les souches (1) ne montrent aucune préférence entreMamestra etPieris, (2) montrent une préférence pourMamestra, ou(3) une aversion pourPieris. Des femelles des souches du second groupe acceptent fortement les ufs dePieris si les ufs deMamestra, préférés, sont absents. Comparativement, elles rentrent en contact avec moins d'ufs dePieris en présence d'ufs deMamestra. Ceci indique une sélection des hôtes à distance. Les souches du premier groupe sont probablement les meilleures candidates pour des lâchers inondatifs.

     

Influence des tanins condensés du tégument de fèves (Vicia faba) sur le développement larvaire de Callosobruchus maculatus

Des tanins condensés sont extraits et isolés à partir du tégument de Vicia faba var. Géante Portugaise. Quatre polymères sont quantifiés et identifiés à quatre fractions: A, B, C et D. Ces fractions sont incorporées, en mélange ou séparées à différentes concentrations, dans un milieu nutritif favorable au développement de Callosobruchus maculatus (F.) (Coleoptera, Bruchidae).Les composés phénoliques provoquent la mortalité d'une partie de la population et retardent le développement des survivants. La mortalité observée varie suivant les fractions, leurs doses et le stade de développement de la bruche.La barrière constituée par le tégument des fèves est bien de nature chimique et concerne les tanins condensés.Dans un système de production agricole, l'utilisation des cultivars de fèves riches en tanins faiblement condensés pourrait permettre de réduire les taux d'infestation des graines de V. faba par C. maculatus.     

Association of a fungal endophyte in perennial ryegrass with antibiosis to larvae of the southern armyworm, Spodoptera eridania

Larvae of the Southern armyworm Spodoptera eridania Cramer (Lepidoptera:Noctuidae), feeding on perennial ryegrasses (Lolium perenne L.) infected with an endophytic fungus (Acremonium loliae Latch, Christensen and Samuels), had a much lower survival rate (7–13%) than larvae feeding on endophyte-free ryegrasses (82–90%). Death of the larvae on endophyte-infected entries occurred rapidly between 144 h and 168 h of feeding. This corresponded with armyworms feeding on the base of the plant, where endophyte concentration is highest. Twenty-four hours after the start of the bioassay the larval mass and rate of larval development were significantly higher on endophytic entries. From 48–144 h no differences were seen, but after 144 h the mass of larvae on endophyte-infected grasses sharply declined. Observations from this bioassay further substantiate the association between A. loliae-infected ryegrass and antibiosis to several lepidopterous and coleopterous insect pests.

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Résumé Le ray-grass vivace (Lolium perenne), contaminé par le champignon endophyte Acremonium loliae Latch, Christensen & Samuels, a présenté une augmentation de la resistance à de nombreux coléoptères et lépidoptères nuisibles. Cette note examine les réactions de Spodoptera eridania Cramer (Lépido., Noctuidae) alimenté sur trois lignées de ray-grass contaminées par le champignon et trois lignées saines. Après 168 h d'alimentation sur ray-grass contaminé, les chenilles presentent une très forte mortalité; la survie n'est que de 7 à 13% contre 82 à 90% pour le ray-grass sain. Le décès brutal des chenilles correspond à leur alimentation sur la base de la plante ou la concentration du champignon est la plus forte. Les chenilles consomment constamment, broutant plus des 2/3 du feuillage du ray-grass; les broutements des six séries ne différaient pas significativement.Au bout de 24 h, la nombre de chenilles passées du 3ème au 4ème stade, et l'augmentation de poids sont plus élevés pour les séries sur plante contaminée, ce qui suggère un avantage initial pour les chenilles en présence de champignon endophyte, l'analyse en poids sec a montré que l'augmentation de poids initial est réel. Entre 48 et 144 h, cependant, le nombre de 4ème stade et le poids des chenilles sont les mêmes dans les deux séries. Après 144 h, le poids des chenilles sur ray-grass contaminé diminue significativement; aucune n'était parvenue au 5ème stade, contre 11% sur ray-grass sain. Nous n'avons pas observé de signes apparents de neurotoxicité. Au lieu de cela, il ya a eu interaction avec un processus physiologique fondamental, ce qui a provoqué une forte perte de poids larvaire et la mort, indiquant l'intervention d'inhibiteurs métaboliques.

     

Photoproduction d'hydrogène sur soufre et sulfure par des Chromaticeae

Résumé La possibilité de photoproduire de l'hydrogène à partir de soufre et de sulfure par des Chromatiaceae appartenant aux genres Chromatium, Thiocapsa, Thiocystis et Ectothiorhodospira a été examiniée. Sur huit souches testées, six seulement libèrent de l'hydrogène en présence de sulfure. Sur soufre, les Ectothiorhodospira forment du H₂ alors que les autres souches excrétent du sulfure. Des expériences manométriques avec une souche d'Ectothiorhodospira montrent que la photoproduction de H₂ est étroitement corrélée à l'assimilation du CO₂ et que l'utilisation des substrats endogènes est exacerbée par le sulfure.

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Photoproduction of hydrogen from sulfur and sulfide by chromatiaceae

H₂ photoevolution from sulfur and sulfide by Chromatiaceae belonging to the genera Chromatium, Thiocapsa, Thiocystis and Ectothiorhodospira has been investigated. In the presence of sulfide, six of the eight strains studied evolve hydrogen. With sulfur, Ectothiorhodospira produce H₂ but the other strains excrete sulfide. Manometric experiments show a correlation between H₂ evolution and CO₂ assimilation and an increase of endogenous substrate utilization with sulfide in Ectothiorhodospira.

     

Incidence of parasitism by Aphidius rhopalosiphi in colour forms of the aphid Sitobion avenae

Aphidius rhopalosiphi parasitises green colour forms of Sitobion avenae more frequently than brown forms. The handling time is longer for brown than for green nymphs, even when the two forms are members of the same clone. Parasite development lasts longer in brown forms than in green forms, and mortality is higher.

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Résumé A. rhopalosiphi a parasité les stades jeunes de S. avenae avec plus de succès que les stades âgés, et les types verts plus fréquemment que les bruns. Dans tous les cas, la mortalité était élevée; significativement plus de pucerons du premier et du second stade ont été tués par l'attaque du parasite que ceux des 3è et 4è stades. La fréquence de pucerons bruns formant des momies a augmenté avec le nombre de pipûres, de 0,1 pour une piqûre à 0,4 pour 8 piqûres. Lorsqu'il n'y a qu'une piqûre, le nombre d'oeufs émis est le même pour les deux types. A 20–22 °C, le développement du parasite dure jusqu'à 9 jours dans les pucerons verts et 12 jours dans les bruns. Lorsqu'il y a choix, les parasites préfèrent les verts aux bruns (Même quand ils sont du même clone) et les bruns clair aux bruns sombres. Les verts ont besoin de moins de rencontres que les bruns pour être piqués, mais pour une souche de parasites recueillie depuis peu, la différence était faible, pourtant cette nouvelle souche ne parasitait pas les pucerons bruns avec plus de succès que l'ancienne souche.

     

Production and partial characterization of monoclonal antibodies for detection of entomopoxvirus from Melanoplus sanguinipes

Entomopoxviruses (EPV) are currently being considered as candidate grasshopper (Orthoptera: Acrididae) microbial control agents. Classical techniques for diagnosing infections in grasshoppers are laborious, time consuming, and sometimes inaccurate. Specific murine monoclonal antibodies were developed against an EPV from Melanoplus sanguinipes (Fab) for use in a nitrocellulose-based enzyme-linked immunoassay (dot-blot). An IgG_2b monoclonal antibody was used to diagnose infections in grasshoppers 13 days following injection with virions. Of 25 grasshoppers that had patent infections microscopically, 22 produced positive results on the dot-blot. In a second test, 39 patently infected grasshoppers all produced positive results. Seven additional grasshoppers in the first test and 2 in the second test gave positive reactions in the dot-blot method but virus was not detected upon microscopic examination. The monoclonal antibody did not cross-react with other commonly occurring grasshopper pathogens. The dot-blot method detected as few as 2.5×10⁶ purified EPV virions. The improvement over existing detection techniques should facilitate evaluation of EPV for field use.

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Prodution et caractérisation partielle d'anticorps monoclonaux pour la détection d'entomopoxyvirus de Melanoplus sanguinipes

Résumé Les criquets sont très nuisibles aux pâturages de l'Ouest des USA et du Canada. Les méthodes classiques de protection sont basées sur les traitements chimiques lors des pullulations. Un entomopoxvirus (EPV) extrait de M. sanguinipes est généralement considéré comme un outil, pour le contrôle des populations sur une longue période, en vue de la suppression des criquets. Les méthodes actuelles d'isolement de EPV sont longues, pénibles et peu fiables. Les tests d'adsorption des antigènes sur l'anticorps fixé et le dosage per l'anticorps enzymatiquement marqué sont efficaces, sûrs et donnent à temps des résultats pour déceler des entomopathogènes. Nous avons produit des anticorps monoclonaux de souris contre EPV de M. sanguinipes, et les avons utilisés dans des dosages immunoenzymatiques d'extraits protéiques adsorbés sur nitrocellulose. Les EPV sont recherchés sur des criquets injectés de virions 13 jours avant. Sur 25 criquets qui présentaient des infections nettes lors d'examens microscopiques, 22 ont donné des résultats positifs par sérologie. Dans un second test, sur 38 criquets nettement contaminés, tous ont donné des résultats positifs; 7 criquets suppl'ementaires mentaires dans le premier test et 2 dans le second test ont donné des résultats positifs en sérologie alors que l'examen microsopique n]avait pas test ont donné des résultats positifs en sérologie alors que l'examen microsopique n'avait pas révélé de virus. Ceci montre que ce type de détection est plus sûr que la méthode ordinaire. Les anticorps monoclonaux ne donnent pas de réactions avec les autres pathogènes courants des criquets. La méthode sérologique a permis de détecter même une concentration de 2,5×10⁶ virions EPV.

     

Diapause behavior of genetically-improved strains of the spider mite predator Metaseiulus occidentalis (Acarina: Phytoseiidae)

Diapause behaviou of two strains of Metaseiulus occidentalis (Nesbitt) was compared as part of a project to evaluate this predator as a control agent for Tetranychus urticae Koch on roses in greenhouses in Berkeley, California. One strain had a normal diapause and the other had been genetically selected for non-diapause. Predators in diapause sought shelters on a simple bean plant test system. Females lacking the ability to diapause and the normal strain under long photophases tended to disperse aerially from the bean plant systems, particularly when prey were scarce. M. occidentalis females with the capacity to diapause reared near the critical photophase (11.2h) at fluctuating temperatures of 17.5 to 24.5°C within a 24 h period were influenced by the availability of prey: if prey were lacking, predators were more likely to enter diapause than if prey were abundant.Starved females left the plant system, probably through aerial dispersal, and mated females dispersed more readily than males and virgin females under long daylengths. No differences in aerial dispersal tendency were observed at short photophases. Aerial dispersal of adult females occurred at air speeds of ca. 1.5 m/s.

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Comportement lors de la diapause de souches génétiquement sélectionnées du prédateur Metaseiulus occidentalis (Acari; Phytoseiidae)

Résumé Au cours d'un programme destiné à évaluer la valeur du prédateur, Metaseiulus occidentalis Nesbitt pour lutter contre Tetranychus urticae Koch sur roses dans les serres de Berkeley (California) nous avons comparé chez deux souches le comportement lié à la diapause. Une souche a une diapause normale, l'autre a été sélectionnée génétiquement pour son absence de diapause. Les adultes avec diapause normale recherchent des abris sur un dispositif expérimental conçu à partir d'un pied de haricot. Les femelles perdant l'aptitude à la diapause ainsique celles de la souche normale soumise à une longue photophase ont tendance à se disperser par voie aérienne à partir du dispositif expérimental, surtout quand les proies sont rares.Les femelles de M. occidentalis aptes à la diapause élevées aux environs de la photophase critique (11.2h) avec des températures variant entre 17°5 et 24°5 pendant le nyctémère réagissent en fonction de la disponibilité en proies: quand les proies manquent, les prédateurs ont plus tendance à entrer en diapause que quand les proies sont abondantes.Avec une longue photopériode, les femelles à jeûn abandonnent le système expérimental, (probablement par dispersion aérienne) et les femelles fécondées se dispersent plus facilement que les mâles et les femelles vierges. Aucune différence dans la tendance à la dispersion aérienne n'a été observée aux courtes photophases. La dispersion aérienne des femelles adultes s'est produite à des vitesses de 1.5 m/sec.

     

Dietary modulation of α-amylase activity in eight geographical strains of Sitophilus oryzae and Sitophilus zeamais

Rank transformation of specific activity values of -amylase across four strains of Sitophilus oryzae (L.) and four strains of S. zeamais Motschulsky indicates that levels of these predominant enzymes are highest in adults feeding on hulled barley or long-grain brown rice. Intermediate activity levels are found in weevils feeding on yellow corn (maize) and lowest levels are found in wheat-fed weevils. Although extracts prepared from barley contain inhibitory activity against two purified isoamylases from S. oryzae, levels of the naturally-occurring -amylase inhibitors against these two enzymes are about 2.2-fold and 6.1-fold, respectively, more concentrated in wheat. Ingestion of these amylase inhibitors and formation of an inactive enzyme:inhibitor complex with previously secreted amylase may account for the lower activity of amylase in weevils of both species feeding on wheat. Amylase levels across all strains feeding on a given diet are about 2-fold higher in S. oryzae than in S. zeamais. Significant differences in activity levels were also found between strains in both species. Since -amylase is a predominant digestive hydrolase in these species, the degree to which cereal diets affect amylase levels may indicate their suitability as potential hosts.

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Résumé La transformation de rang des valeur d'activité spécifique de l'-amylase de 4 souches de S. oryzae et de 4 souches de S. zeamais montre que les niveaux les plus élevés de ces enzymes prédominantes s'observent chez les adultes nourris d'orge mondé ou de riz brun á grains longs. Des niveaux intermédiaires d'activité ont été obtenus chez les insectes élevés sur maïs jaune, et les niveaux les plus faibles chez ceux élevés sur blé. Bien que les extraits préparés à partir d'orge présentent une activité inhibitrice de deux isoamylases purifiées de S. oryzae, les niveaux des inhibiteurs naturels -amylase de ces deux enzymes sont environ respectivement 2,2 et 6,1 fois plus concentrés dans le blé. L'ingestion de ces inhibiteurs d'amylase et la formation d'un complexe enzyme inactive/inhibiteur avec l'amylase secrétée antérieurement, peut rendre compte de la plus faible activité de l'amylase chez les charançons consommant du blé. Le niveau d'amylase de S. oryzae est 2 fois plus élevé que celui de S. zeamais pour toutes les souches élevées sur un régime donné. Des niveaux d'activité significativement différents ont été trouvés suivant les souches pour chacune des deux espèces. Puisque l'amylase est la principale hydrolase digestive de ces espèces, l'intensité de la modification des teneurs en amylase par la consommation de céréales peut indiquer leur adéquation comme hôtes potentiels.

     

Réponses des adultes de Lasiomma melania,ravageur des cônes de Larix decidua, à des pièges colorés de différents types

La réponse visuelle des adultes de Lasiomma melania Ackl. (Diptera, Anthomyiidae) à des carrés englués de diverses couleurs ou combinaisons de couleurs a été étudiée durant 5 années consécutives dans plusieurs mélèzins (Larix decidua) des Hautes-Alpes. Une préférence pour le jaune et le jaune à bandes pourpres a été mise en évidence chez ce ravageur dont la femelle pond sur les cônes de mélèze. L'attractivité de chaque type de piège est fonction à la fois du sexe et du stade de maturation sexuelle des individus. La couleur jaune attire en majorité des insectes émergents immatures. Elle semble représenter, selon le plan dans lequel elle est située, un signal nutritionnel de type fleur (plan horizontal) ou un signal de reconnaissance du feuillage de mélèze (plan vertical). Les individus mûrs sexuellement, recherchant les arbres produisant des cônes, sont en revanche capturés essentiellement sur les pièges verticaux jaunes à bandes pourpres. Ceux-ci miment, en l'amplifiant, le contraste de réflectance existant entre le feuillage des mélèzes et les cônes. Ce contraste paraît correspondre à un signal permettant la reconnaisance des arbres possédant des cônes. La ponte est cependant limitée à un stade particulier de développment de ces derniers alors que le contraste est à peu près stable dans le temps. D'autres signaux émis par les cônes, vraisemblablement d'ordre olfactif, doivent guider le vol d'approche et l'atterrissage des femelles.     

A geographic comparison of pseudogamous populations of the fall cankerworm (Alsophila pometaria)

Phenological and genetic observations were made during two outbreak seasons on a population of the fall cankerworm, Alsophila pometaria Harris (Lepidoptera, Geometridae), at Beltsville, Maryland, U.S.A. As in intensively-studied populations 300 km to the northeast on Long Island, new York, this population consisted mostly of asexual females requiring conspecific mating to reproduce. The estimated fraction of outcrossing (15–20%), however, was several times that typical for Long Island. Numerous intersexes were found, concentrated in a few families, suggesting that pseudogamy is controlled by more than one heritable factor. The genetic diversity and ecological heterogeneity among asexual females in the Maryland population appear similar to that on Long Island, but there is little overlap in common axexual genotypes. Electromorph frequencies at three loci in males, by contrast, show little geographic variation. The adult activity period is later and longer in Maryland than in colder parts of the range.

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Comparaison de population géographiques d'Alsophila pometria

Résumé Au cours d'une pullulation d'Alsophila pometaria, à Beltsville, Maryland, U.S.A, nous avons contrôlé les émergences des papillons pendant deux saisons, échantillonné les sexes et les génotypes par électrophorèse pour quatre loci, puis nous avons examiné l'héritabilité de ces marqueurs électrophorétiques dans la descendance élevée au laboratoire. Comme pour les populations étudiées avec précision à 300 km au N.E à Long Island, New York, cette population comprenait essentiellement des femelles asexuées exigeant des accouplements conspécifiques pour se reproduire. Environ 15% de la descendance examinée présentait une ségrégation, contre 5% ou moins à Long Island. De nombreux intersexués élevés à partir des populations de Maryland et de New York, se trouvaient uniquement dans quelques lignées, ceci suggère que le rejet des spermatozoïdes et la diploïde des oeufs qui caractérise la pseudogamie, ont des déterminismes génétiques séparés. La diversité des femelles asexuées de la population de Beltsville, dominée par quatre génotypes asexués, paraît semblable à celle de Long Island, mais les clones similaires se chevauchent très peu. Par contre, les fréquences allèliques de tois loci sont presque identiques chez les mâles de deux localités. Les fréquences génétiques des chenilles diffèrent pour des échantillons prélevés à quelques kilomètres de distance sur des hôtes différents dans la même population; il en est de même pour des femelles prélevées à différentes époques. Tout ceci suggère une hétérogénéité écologique parmi les clones, comme cela a été suggéré pour Long Island. La période d'activité des adultes est plus tardive, plus marquée et plus longue au Maryland que dans les parties les plus froides de l'aire; elle s'étend de décembre à mars, avec les captures les plus fortes en janvier et février.

     

Behavioural variations among strains of Trichogramma spp.: Adaptability to field-temperature conditions

In order to select a candidate strain of Trichogramma sp. for inundative releases against lepidopteran pests in cabbage field-crops in the Netherlands, the parasitization activity of a collection of 60 different Trichogramma spp. strains was studied during 2 h and 24 h exposures at 12°C. Activity and parasitism varied significantly among strains and the two characteristics were not correlated, suggesting the action of two differentially temperature-dependent mechanisms influencing both characteristics. Native strains were characterized by a low activity at 12°C, making their usefulness for inundative releases doubtful. In three strains tested at 12, 17, 20, 25 and 30°C, activity increased linearly with temperature, until nearly all females parasitized at 20 or 25°C. Parasitism increased with increasing temperature to a maximum at 20–25°C and declined at 30°C. Handling time decreased asymptotically with increasing temperature. The results of this study suggest that Trichogramma strains vary in adaptability to low temperature, making this characteristic a useful criterion for evaluation of candidate strains.

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Résumé Afin de sélectionner une souche de Trichogramma sp. (Hymenoptera, Trichogrammatidae) candidate pour des lâchés inondatifs contre les Lépidoptères pestes de chou aux Pays-Bas, l'activité de parasitisation d'une collection de 60 souches différentes de Trichogramma spp. a été étudiée à 12°C pendant des durées d'exposition de 2 h et 24 h. L'activité proportionnelle et le degré de parasitisation des femelles varient significativement selon des souches et ne sont par corrélés. Ceci suggère l'action des deux mécanismes distincts, dépendant de la température et contrôlant independamment chacun de ces processus. Les souches indigènes sont caractérisées par une faible activité à 12°C, mettant en doute leur utilisation pour les lâchés inondatifs. Dans 3 souches testées à 12, 17, 20, 25 et 30°C, l'activité augmente linéairement avec la température, jusqu'a ce que quasi toutes les femelles parasitent les oeufs hôtes à 20°C et 25°C. Le taux de parasitisation augmente avec la température atteignant un maximum à 20–25°C puis diminue à 30°C. Le temps de manipulation d'un oeuf hôte diminue asymptotiquement lorsque la température croît. Les résultats de cette étude suggèrent que la capacité d'adaptation aux températures basses varie selon les souches de Trichogramma. Cette caractéristique constitue un critère utile pour l'évaluation de souches candidates potentielles.

     

Étude comparée de vibrions de haute mer et de leurs homologues non marins: biochimie,nutrition et taxonomie numérique

Résumé Sept souches ont été isolées d'eau de mer (Atlantique Nord) par 400 m de fond. 17 souches de référence (14 Vibrio et 3 Aeromonas) provenant des collections CIP et NCMB ont été également étudiées. 215 caractères biochimiques et nutritionnels sont définis pour chaque souche et les coefficients de similitude sont calculés sur ordinateur. Le dendrogramme représente l'assemblage des souches par liaisons pondérées.Les sept souches marines sauvages sont des biotypes d'une même espèce de Vibrio. Ces souches sont très semblables à V. marinus et V. noctiluca également isolées de l'eau de mer. Ces 9 germes forment un groupe dont le spectre nutritionnel est beaucoup plus étroit que celui des vibrions pathogènes et de plus, nécessitent une température inférieure à 20° C et une salinité comprise entre 1% et 7% de NaCl. V. anguillarum et V. piscium semblent appartenir à une même espèce; V. proteus et V. metschnikovii sont également très proches l'un de l'autre.

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A comparative study of pelagic Vibrio species and their nonmarine homologous strains: Biochemical and nutritional characters and numerical taxonomy

Summary Seven strains were isolated from deep-sea atlantic seawater (4,000 m). Seventeen reference strains (14 Vibrio and 3 Aeromonas) coming from CIP and NCMB collections were added. 215 biochemical and nutritional features were determinated for each isolate and similarity coefficients were obtained by computer analysis. The dendrogram was obtained by moderate linkage.The seven marine wild strains are biotypes of one species of Vibrio. V. marinus and V. noctiluca are close to these strains; they have also been isolated from seawater. The numerical range of organic compounds utilisable as sole sources of carbon and energy by the seawater group of these bacteria is smaller than that of the pathogenic group of strains. Specific conditions of temperature and salinity are required by the marine bacteria. V. anguillarum and V. piscium seem to be the same species; also V. proteus and V. metschnikovii are grouped relatively together.