可溶性和颗粒性Ca~（2＋）／CaM PKⅡ对脑缺血与再灌注敏感程度差异性的研究

研究了蒙古沙土鼠脑缺血和再灌注时１０００００×ｇ离心的大脑皮质可溶性和颗粒性Ｃａ（２＋）／ＣａＭＰＫⅡ活性变化的规律性及差异性。实验结果为：（１）随着脑缺血时间的增加,两部分酶活性均逐渐降低,但可溶性酶活性比颗粒性酶活性下降得更快。（２）随着脑缺血后再灌注时间的延长,两部分酶活性均逐渐升高,但可溶性酶活性比颗粒性酶活性上升得更快。结果表明,可溶性酶比颗粒性酶对脑缺血与再灌注更敏感,该酶活性的变化反映了脑缺血的状态,是脑缺血的重要生物化学指标,可用以研究缺血性脑损伤机制和治疗。     

Ca^2＋／CaM PKⅡ与脑缺血兴奋毒性关系的研究

采用大鼠海马脑片体外缺血模型,观察了“缺血”或谷氨酸及氯胺酮对海马脑片Ｃａ￣（２＋）／ＣａＭＰＫⅡ活性的影响,同时观察了缺血对神经元胞外谷氨酸堆积的影响。结果如下：（１）Ｃａ￣（２＋）／ＣａＭＰＫⅡ活性随“缺血”时间的延长而逐渐下降,缺血１０,２０和３０ｍｉｎ,酶活性分别为对照组的６３％,４４％和２９％（１０ｍｉｎ,Ｐ＜０．００２;２０和３０ｍｍ,Ｐ＜０．００１）,提示该酶对缺血非常敏感。（２）单纯过量外源性谷氨酸作用３０ｍｉｎ,能引起酶活性显著下降到仅为对照组的２４％,提示脑缺血时酶活性的抑制与兴奋毒性有关。（３）海马脑片在体外缺血３０ｍｉｎ时,谷氨酸在胞外的堆积增加２倍多（从１２８±２０升高到４３１±７４ｎｍｏｌ·ｍｇ￣（－１）ｐｒｏ·ｍｉｎ￣（－１）,ｎ＝６）。（４）氯胺酮对“缺血”和单纯外源性谷氨酸所诱导的酶活性抑制均有明显的拮抗作用,但其拮抗作用显著不同,前者可使酶活性恢复至对照的６２％,后者高达９２％。说明脑缺血引起酶活性下降不仅与ＮＭＤＡ受体有关,而且与其它因素有关。     

体温对沙鼠前脑缺血／再灌注Ca^2＋／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ？…

目的和方法：本文以蒙古沙土鼠侧颈动脉夹闭（ＢＣＡＯ）形成前脑缺血模型,不同体温对脑缺血／再灌注海马、皮质、纹状体、小脑Ｃａ＾２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性变化的影响。结果：９１）除小脑外,海马、皮质、纹状体Ｃａ＾２ＣａＭＰＫⅡ活性在缺血后均有不同程度下降。该下降对缺血过程中体温十分敏感;如分别于３６．５℃、３０．０℃、３９．０℃同时样缺血１０ｍｉｎ,海马酶活性分别为对照组的３２．２％、１０１．３％、９．１     

Ca^2＋对小麦种根及春根毛生长发育的影响

低浓度的ＣａＣｌ２对小麦种根生长,根毛发生和生长无明显影响,高浓度的ＣａＣｌ２对种根和根毛生长的抑制作用,但不影响根毛的发生。Ｃａ＾２专一性螯事剂ＥＧＴＡ抑制种根生长和根毛的发生及生长,添加一定浓度的外源ＣａＣｌ２,这种抑制作用可被消除。ＣａＭ抑制剂ＴＦＰ（三氟拉嗪）和ＣＰＺ对种根生长、根毛发生和生长均有抑制作用,添加外源ＣａＭ可减弱或消除这种抑制作用。     

ABA与Ca^2＋／CaM信使系统关系

介绍了胞间信号ABA在信号传递过程中对胞内钙信号的影响及其两者的关系。     

脑缺血诱导Ca~（2＋）／CaM依赖性蛋白激酶Ⅱ自身磷酸化的抑制作用

脑缺血诱导Ｃａ~（２＋）／ＣａＭ依赖性蛋白激酶Ⅱ自身磷酸化的抑制作用张光毅,唐放鸣,赵昇皓（徐州医学院生化教研室,２２１００２）关键词脑缺血;Ｃａ~（２＋）／ＣａＭ依赖性蛋白激酶Ⅱ;自身磷酸化兴奋住氨基酸通过其突触后膜受体导致ｏｄｅ内流,不仅具有诱导和...     

大鼠海马脑片缺氧诱导Ca^2＋／CaMPKⅡ活性抑制机理的研究

采用大鼠海马脑片体外缺氧模型,观察了Ｃａ＾２＋和氯受酮对海马脑片Ｃａ＾２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性的影响,同时观察了缺氧对神经外谷氨酸堆积的影响。     

牛磺酸对血管紧张素Ⅱ改变培养心肌细胞内游离Ca^2＋深度作？…

目的和方法：用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光显示测定细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ）的方法,我们研究了牛磺酸（Ｔａｕ）对血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）引起的培养心肌细胞（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ）变化的影响。结果：在有Ｃａ＾２＋和无Ｃａ＾２＋的缓冲液中,ＡｎｇⅡ（１,１０,１００,１０００ｎｍｏｌ／Ｌ）引起的〖Ｃａ＾２＋）ｉ和蔼同。在含Ｃａ＾２＋的缓冲液中,Ｔａｕ（１０,２０ｍｏｌ／Ｌ）可隽浓度地抑制Ａｎｇ     

Ca^2＋与CaM对大白鼠离体叶圆片Ca^2＋—ATPase和β—1,3—葡聚糖？…

经Ｃａ＾２＋与ＣａＭ促进剂和抑制剂处理的大白菜离体叶圆片,其细胞膜Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性同进受Ｃａ＾２＋与ＣａＭ的调节,而β－１,３－葡聚糖合成酶活性仅受Ｃａ＾２＋的调节,与ＣａＭ无关。     

激活细胞膜Na^＋／H^＋交换对心肌缺血再灌注损伤的影响

在离体大鼠等容收缩心脏灌流模型上,观察激活细胞膜Ｎａ＋／Ｈ＋交换对心肌缺血后再灌注性损伤的影响。采用经典ＮＨ４Ｃｌ负荷方法以激活细胞膜Ｎａ＋／Ｈ＋交换,结果表明,激活Ｎａ＋／Ｈ＋交换加重缺血后再灌注心脏血液动力学障碍,增加冠脉流出液中乳酸脱氢酶的活性,并使心肌组织中Ｎａ＋、Ｃａ２＋超负荷及Ｋ＋丢失加重。提示细胞膜Ｎａ＋／Ｈ＋交换是心肌缺血后再灌注损伤的发病机理之一。     

外源Ca^2＋预处理对高温胁迫下辣椒吧片细胞膜透性和GSH、AsA含量及Ca^2＋分布的影响

以辣椒（Capsicum annuum）幼苗的叶片为材料,研究了外源Ca^2 预处理对热胁迫下细胞质膜透性和谷胱甘肽（GSH）、抗坏血酸（AsA)含量变化及Ca^2 分布的影响。结果表明：外源Ca^2 预处理能减轻办迫引起的细胞膜破坏,能够减少叶片中GSH和AsA的破坏,热胁迫后,Ca^2 具有从胞外转运到胞质内和叶绿体中的趋势,外施Ca^2 预处理能够明显增加细胞间隙、液光和叶绿体中的Ca^2 颗粒密度,能够稳定热胁迫下叶肉细胞膜和叶绿体的超微结构,结果表明,外施Ca^2 预处理可能通过改变细胞内外的Ca^2 分布,减轻热胁迫对叶肉细胞的伤害。     

低温处理对冬、春小麦细胞Ca^2＋时空变化的影响

用Fluo-3/AM染色,通过激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）方法,对静息态及连续降温条件下不同抗寒性小麦（Triticum aestivum L.）叶肉细胞原生质体[Ca^2 ]cyt（the free Ca^2 concentration in the cytoplasm）的时空变化进行了比较。结果表明,静息态下小麦原生质体整体荧光强度基本不变,暗示[Ca^2 ]cyt能维持在一稳定水平;同时,不同品种小麦间也显示了[Ca^2 ]cyt水平荧光强度的不同。温度由15℃连续降至约2℃时,抗寒冬小麦[Ca^2 ]cyt出现升高后的回复,2℃之后逐渐升高;冷敏感春小麦则无此回复过程,而是一直升高到最大值。推测这一不同的动态变化最终决定了植物在低温下产生冷适应的不同能力。这进一步为“Ca^2 是低温下生理信号的传导”这一假说提供了新的证据。     

两类Ca^2＋通道拮抗剂对脑缺血时Ca^2＋／CaM PKhⅡ活性抑制的保护 …

本文以蒙古沙土鼠双颈总动脉结扎（ＢＣＡＯ）前脑缺血模型Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性变化为指标,研究了以氯胺酮（ＫＴ）、右美沙芬（ＤＭ）、苄丙咯（ＢＰ）及硝苯吡啶（ＮＤ）为代表的配体门控Ｃａ＾２＋通道（ＬＧＣＣ）及电压门控Ｃａ＾２＋通道（ＶＧＣＣ）两类Ｃａ＾２＋通道拮抗剂对缺血性脑损伤的保护作用。结果如下：（１）脑缺血后,胞浆型及颗粒型Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性均明显下降;（２）缺血前单独用药     

多巴胺D1和D2受体激动剂和拮抗剂对脑缺血/再灌注损伤的影响

实验应用开阔法、组织病理学方法、原位末端标记(in situ terminal deoxynucleotidyl transferase-metliated de-oxy-UTP mick end labeling,TUNEL)法及免疫组织化学等方法,探讨多巴胺D1、D2受体激动剂和拮抗剂对沙土鼠前脑缺血／再灌注损伤海马CA1区神经元凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。结果显示：前脑缺血5min可引起沙土鼠探索活动增加;再灌注3d,海马CA1区约95％的锥体细胞凋亡;再灌注7d,海马CA1区仅残存约2％—7％的存活锥体细胞;前脑缺血5min可抑制bcl-2的表达并诱导bax表达增高;预先应用D2受体激动剂培高利特可减轻缺血后沙土鼠行为学异常、抑制海马CA1区锥体细胞凋亡、提高锥体细胞存活数、显著诱导bcl-2的表达并抑制bax的表达。预先应用SKF38393、SCH23390及螺哌隆对以上结果无明显影响。实验结果提示,培高利特具有确切的脑保护作用,诱导bcl-2并抑制bax的表达可能是其脑保护作用机制之一。     

高压氧对脑缺血再灌注海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的：进一步探讨高压氧治疗脑缺血再灌注损伤,减轻神经元调亡朋而发挥保护作用的机理。方法：采用“双侧颈总动脉阻断法”前脑缺血模型,对沙土鼠前脑缺血２０ｍｉｎ后再灌注３ｄ,并用０．１５ＭＰａ和０．２５ＭＰａ压力的高压氧治疗（６０ｍｉｎ／ｄ,连续３ｄ）后,应用免疫组化ＬＳＡＢ方法,观察高压氧对海巴ＣＡ１,区神经元凋亡相关基因ｂｃｌ－２和ｂａｘ的蛋白表达的影响。结果：沙土鼠脑缺血再灌注３ｄ组海马ＣＡ１区大     

线栓法建立大鼠局灶性脑缺血／再灌注模型的改进与探讨

目的：提供一种比较简易的大鼠局灶性脑缺血／再灌注模型制备方法。方法：对Zea Longa线栓法进行改进,并与Zea Longa法从rCBF、神经功能缺陷评分以及梗塞灶体积等三个方面进行对比研究。结果：我们改进的线栓法与Zea Longa法相比,在rCBF、神经功能缺陷评分以及梗塞灶体积等方面,两者之间无显著性差异（t检验,P＞0．05）。结论：改进线栓法建立的大鼠局灶性脑缺血／再灌注模型也同样可靠、稳定,且较Zea Longa法易操作。