脂类对盐酸,乙醇致大鼠胃粘膜损伤的保护作用

本实验用Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠胃内给予二山酰卵磷脂与三棕榈酰甘油酯１：４（ｗ／ｗ）混合物（每只鼠１ｍｌ,含５ｍｇ混合物）保护０．６ｍｏｌ／Ｌ盐酸致胃粘膜损伤,使溃疡指数及溃疡面积与胃总面积比分别降低了７６．２７％及８０．２４％（Ｐ＜０．０１）,胃粘膜表面疏水性及跨膜电位值显著增加（Ｐ＜０．０５）。该混合物对无水乙醇所致胃粘膜损伤无明显保护作用。提示脂类对盐酸致胃粘膜损伤的保护作用与其维持表面疏水性有关,但这种疏水表面对不同致损伤因子的作用是有差异的。     

蛋白质表面疏水性的研究

用Ｐｈｅｎｙｌ－ＳｕｐｅｒｏｓｅＨＲ５／５疏水柱在ＦＰＬＣ仪上测定了一些蛋白的表面疏水性。在被测量的蛋白样品中,细胞色素Ｃ的亲水性最强,胰凝乳蛋白酶的疏水性最强。说明蛋白质的疏水性与其表面性质密切相关,而与蛋白质的分子量、疏水残基总数并不直接相关;去辅基细胞色素Ｃ和Ｃ端缩短的金黄色葡萄球菌核酸酶与天然态比较疏水性变化很大。疏水柱层析还用于监测在低浓度胍的作用下蛋白质的构象变化。以Ｎ－乙酰酪氨酸为模型化合物探测盐酸胍对疏水柱结合能力的影响,在０４Ｍ胍存在时,Ｎ－乙酰酪氨酸在疏水柱上的结合能力略有减弱,但核糖核酸酶Ａ的变化较大,表明胍引起的蛋白质的微小构象变化有效地引起其表面性质的变化;在０．１—０．３Ｍ盐酸胍存在时,甘油醛－３－磷酸脱氢酶表面疏水性明显增大,并伴随聚合态的出现。说明在低胍作用下,酶分子发生的构象变化,导致天然态内埋疏水面的暴露,暴露的疏水面间的相互作用是形成聚合的主要原因。     

青枯菌细胞表面的疏水性

分别采用BATH和HIC方法测定青枯菌细胞表面疏水性(CSH), 并比较菌液与正十二烷比例(BATH方法)和菌液上样量(HIC方法)对CSH测定结果的影响。确定在BATH方法中菌液(OD₆₀₀=0.5)与正十二烷的比例为2:1, HIC方法中菌液(OD₆₀₀=1.0)上样量为0.2 mL; 在此条件下, BATH和HIC两种方法之间呈现出良好的线性关系(r=0.99)。进一步采用HIC方法测定青枯菌在生长过程中CSH的变化情况, 结果显示随培养时间的延长, CSH逐渐降低, 24 h后CSH趋于稳定, CSH与青枯菌细胞表面的EPSⅠ (胞外酸性多糖)含量呈负相关。3株不同致病强度的青枯菌的试验结果进一步验证了青枯菌细胞表面的CSH随EPSⅠ含量的增加而降低。     

MATH法表征环境微生物细胞表面疏水性的研究进展

环境微生物的细胞表面疏水性对其生长代谢过程以及在环境领域的应用效率具有重要影响。目前用于测试细胞表面疏水性最常用的方法是碳氢吸附能力(Microbial adhesion to hydrocarbons,MATH),该方法因具有操作简便、有一定的准确度等优点在环境、生物工程、医学、食品等领域应用广泛。本文综述了MATH法在环境微生物领域中的污泥絮体性能表征、有机物降解、膜污染和破乳方面的应用,同时介绍了MATH法在实验操作、计数方法和数据分析方面的优化。最后展望了该方法今后的研究方向。     

稀土荧光探针在生物大分子研究中的应用

钙(Ⅱ)、镁(Ⅱ)离子是生物体内最重要的闭壳层无机阳离子。引入具有适当光性质的、与钙(Ⅱ)等离子成键性质相近的铽(Ⅲ)或铕(Ⅲ),利用荧光光谱技术,是研究一些与钙(Ⅱ)有关的生物大分子在水溶液中构象的一条有效途径。本文综述了稀土荧光探针技术的研究进展。     

细胞色素分子疏水性与进化的关系

本文在先前研究结果的基础上,通过对细胞色素分子一维结构间疏水相似性的计算,建立了相应的分子系统树,并对细胞色素分子间的进化关系进行了探讨。结果表明,从蛋白质分子的疏水相似性和非线性三维结构来研究分子间的进货关系,不仅得到了与用其它方法所得到的结果基本一致的结论,而且还在一定程度上克服了其它一些方法的局限性,取得了较佳的结果。     

荧光探针研究新进展

自从Southern(1975)首次进行DNA探针杂交后,至今核酸分子杂交已成为分子生物学的最基本方法。Matthews和Kricka[1]总结了各种杂交方法,将其归为两大类:一是异相杂交(heterogeneousassay)即固相杂交,目的核酸结合于不溶性支持物上;二是同相杂交(homogeneousassay)即液相杂交,一般同时使用两个探针。为了检测杂交,寡核苷酸探针需要标记,探针的标记物有放射性同位素和非放射性标记物。固相杂交常使用放射性同位素,荧光素是一种非放射性标记物,它能检测到的DNA浓度比吸收减色测定方法所需DNA浓度低100-1000倍[2],在同相杂交中广泛用于探针的标记。最近,荧光探针研究获得了新的进展,Tyagi和Krammer(1996)建立了一种新的荧光探针-分子信标探针,并得到许多应用,我们实验室也开展了这方面的研究。本文拟对荧光探针的研究进展作一综述。     

荧光探针研究新进展

自从Ｓｏｕｔｈｅｒｎ（１９７５）首次进行ＤＮＡ探针杂交后,至今核酸分子杂交已成为分子生物学的最基本方法。Ｍａｔｈｅｗｓ、Ｋｒｉｉｃｋａ总结了各种杂交方法,将其归为两大类;一是异相杂交（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓ ａｓｓａｙ）即固相杂交,目的核酸结合于不溶性支持物上;二是同相杂交（ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ ａｓｓａｙ）即液相杂交,一般届时使用两个探针。为了检测杂交,寡核苷酸探针需要标记,探针的标记物有     

酵母菌在疏水性有机污染物去除方面的应用

介绍了酵母菌处理技术在疏水性有机污染物降解中的研究和应用进展,并分析了酵母菌表面特征与其降解活性及在废水处理系统中的稳定性之间的关系。酵母菌技术可以在高含油色拉油废水及含高分于量多环芳烃（PAH）废水的处理中发挥细菌无法替代的作用,酵母菌重要表面特征,特别是其疏水性和乳化能力对于其在疏水性有机污染物处理体系中的稳定性具有重要影响。     

初生扬子鳄胃粘膜表面及胃腺的形态

观察了２例初生扬子鳄（Ａｌｌｉｇａｔｏｒｓｉｎｅｎｓｉｓ）胃粘膜表面及胃腺的形态。扫描电镜观察：胃贲门具１１—１３个贲门瓣,贲门区及幽门区粘膜上皮凹陷稀而浅,胃体部上皮凹陷密而深,排列很规则,胃小凹明显。组织切片观察：贲门腺及幽门腺均为短的单管腺,腺上皮由单一类型的腺细胞组成,胃底腺为分校管状腺,晚上皮由多种腺细胞组成。对扬子鳄胃粘膜表面及胃腺的形态特点作了讨论。     

大鼠鼻粘膜肽能神经末梢分布的研究

用免疫组化技术（ＡＢＣ法）系统研究了大鼠鼻粘膜９种肽能神经末梢分布的特征,这９种神经肽分别是Ｐ物质（ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ,ＳＰ）,神经激肽Ａ（ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎＡ,ＮＫＡ）,神经激肽Ｂ（ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎＢ,ＮＫＢ）,降钙素基因相关肽（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｇｅｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄｐｅｐｔｉｄｅ,ＣＧＲＰ）,血管活性肠多肽（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ,ＶＩＰ）,神经肽Ｙ（ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ,ＮＰＹ）,甘丙肽（ｇａｌａｎｉｎ,ＧＡＬ）,生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ,ＳＯＭ）及神经降压素（ｎｅｕｒｏｔｅｎｓｉｎ,ＮＴ）,同时选择与鼻粘膜神经肽（ＮＰ）作用密切相关的三叉神经节（ＴＧ）细胞进行上述ＮＰ的定位。用重组ＰＳＰ６５质粒（４００ＳＯＭｃＤＮＡ）制备ＳＯＭｍＲＮＡ单链探针,以地高辛精标记,在鼻粘膜及ＴＧ细胞进行ＳＯＭｍＲＮＡ的原位杂交组化研究。结果提示大鼠鼻粘膜有丰富的肽能神经末梢;ＴＧ细胞含有多种ＮＰ并且可以合成ＳＯＭ。该研究结果对重新认识鼻粘膜神经分布规律有一定意义。     

动物胃粘膜提取物对双歧杆菌的促生长作用

本文阐述了不同浓度的动物胃粘膜提取物对双歧杆菌生长繁殖的影响。试验结果表明,胃粘膜提取物对双歧杆菌有明显的促进作用,而且随着浓度增加为1％时,其菌数为4.45亿/ml,而不加提取物的菌数为2.53亿/ml,加胃粘膜提取物的比不加的菌数增长175.9％,促生长作用明显。证明胃粘膜提取物中含有促进双歧杆菌生长因子。     

胃粘膜血流量对大鼠胃粘膜适应性细胞保护作用的影响

采用氢气清除法测定胃粘膜血流量,观察大鼠胃内灌洗低浓度盐酸酒精后灌注高浓度盐酸酒精（０．６ｍｏｌ／ＬＨＣｌ＋１５％ＥｔＯＨ）对ＧＭＢＦ和胃粘膜损害的影响。以及ＧＭＢＦ在适应性细胞保护中的作用。结果如下：（１）先用低浓度盐酸酒精作为弱刺激灌注随之以高浓度盐酸酒精作为强刺激灌注,引起胃粘膜适应性保护现象,它表现为：大体操作和损伤深度分别比单独泊组减少４７．０９％和４４．５７％应性现象,它表现为：大体损     

巯基参与胃粘膜防御机制

本工作研究了胃粘膜非蛋白质巯基物质(NPSH)在粘膜防御功能中的作用。结果表明,酸性乙醇灌胃或冷冻加束缚应激引起大鼠胃粘膜 NPSH 含量显著下降;补充含-SH 的化合物半胱胺或还原型谷胱甘肽可防止酸性乙醇引起的胃粘膜损伤;在酸性乙醇灌胃或应激后,胃粘膜谷胱甘肽还原酶活性明显降低,并与 NPSH 含量的下降在时间上一致;丙二醛含量在酸性乙醇灌胃后显著升高,自由基清除剂二甲亚砜可减轻胃粘膜损伤。上述结果提示,胃粘膜NPSH 可能通过对自由基的清除作用参与粘膜的局部防御机制;谷胱甘肽还原酶活性下降和自由基生成增加所导致的粘膜 NPSH 含量下降可能是损伤发生过程的重要环节。     

胃粘膜肠上皮化生与胃癌关系的组织化学和免疫组织化学研究

应用ＡＢ（ｐＨ１．０）ＫＯＨ／ＰＡＳ粘液组织化学和ＡＢＣ法凝集素标记,对１９０例胃粘膜病变标本进行观察。结果表明,结肠不完全型肠上皮化生多见于肠型癌（ＩＴＣ）及其癌旁组织。两型肠化在弥漫型癌（ＤＴＣ）中无显著差异。５种凝集素受体的含量和分布的差异与胃癌的组织学类型和分化程度有关。ＷＧＡ、ＲＣＡ和ＰＮＡ主要标记在ＤＴＣ中,与ＩＴＣ相比,有非常显著的差异（Ｐ＜０．０１）。其染色水平随肿瘤分化程度的降低而升高。ＣｏｎＡ和ＤＢＡ主要标记在ＩＴＣ和伴有肠化的慢性萎缩性胃炎中。凝集素肠化分型与粘液肠化分型基本相符。我们认为结肠不完全肠化与ＩＴＣ的发生关系密切,而小肠型和结肠完全型肠化可能与ＤＴＣ的发生有关。     

大鼠实验性脾虚证胃粘膜内分泌细胞变化的免疫组织化学研究

用正常成年雄性Wistar大鼠53只,体重100～150g,分为正常对照组、实验性脾虚组、自然恢复组和四君子汤治疗组。取胃,固定于Bouin液。制成石蜡切片,进行(1)HE染色;(2)免疫组织化学染色,按Sternberger PAP法显示胃泌素细胞(G细胞)、生长抑素细胞(D细胞)和5-HT细胞。根据细胞的免疫反应程度,将细胞分为强阳性、中等阳性和弱阳性三级,每例动物计数三种细胞各1,000个,并计算各级细胞占的百分比;(3)从正常对照组,脾虚组随机选择各5例动物,对D细胞和G细胞进行显微分光光度计的定量测定;(4)由四组动物随机选择各5例,进行G细胞和D细胞密度及G/D细胞比值的测定。本文的观察表明:(1)脾虚组胃粘膜未见明显的组织学变化;(2)内分泌细胞:与对照组相比,脾虚组G细胞和5-HT细胞中,弱阳性细胞增多,表明分泌活动增强;D细胞弱阳性和中等阳性细胞减少,强阳性细胞增多,表明分泌释放减弱,合成增强。与自然恢复组比较,治疗组G细胞和D细胞的分泌活动接近于对照组;5-HT细胞无明显的恢复;(3)显微分光光度计的测定结果与光镜观察一致,脾虚组G细胞胃泌素反应物的含量低于对照组,D细胞内生长抑素反应物的含量高于对照组;(4)脾虚组G细胞密度低于对照组(P<0.01),D细胞密度略高于对照组,G/D细胞比值也低于对照组(P<0.01)。本文结果提示,脾虚证这些内分泌细胞的分泌活动出现异常,可能是导致消化功能紊乱的原因之一。经四君子汤治疗后,内分泌细胞的分泌活动接近于对照组,说明此药对脾虚证有一定的治疗作用。     

31例胃癌患者胃液SIgA及胃粘膜产亚硝酸真杆菌测定结果分析

探讨了胃癌病变局部免疫功能及胃粘膜细菌分布与发病机制的关系.采用放射免疫法对31例胃癌患者(实验组)与56例其它胃病患者(实验组)进行胃液SIgA含量的测定并对胃粘膜病变部位进行细菌分离培养、涂片染色镜检.结果显示,实验组较对照组胃液SIgA含量显著增多(p<0.05),胃粘膜产亚硝酸真杆菌阳性检出率亦明显升高(p<0.01).胃癌患者胃粘膜局部免疫功能失常,其发病可能与产亚硝酸真杆菌有关,胃液SIgA的测定对估价预后有一定意义.     

cAMP在急性胃粘膜损害中作用的研究

本研究应用ＲＩＡ法,观察了大鼠胃组织ｃＡＭＰ含量与急性胃粘膜损害之间的关系。结果表明：（１）由消炎痛或失血性休克引起的急性胃粘膜损害时,胃组织ｃＡＭＰ含量明显降低;事先使用异搏定（１０ｍｇ／ｋｇ）可使胃组织ｃＡＭＰ含量明显增加,并使由消炎痛引起的急性胃粘膜损害相应减轻。（２）在正常情况下,胃窦、胃体组织间ｃＡＭＰ含量并非相等,胃窦部组织ｃＡＭＰ含量高于胃体部组织,与此相应的是急性胃粘膜损害主要局限在胃体部。上述引起急性胃粘膜损害的诸因素均可使这种差别加大。５和１０ｍｇ／ｋｇ剂量的异搏定可使消炎痛所致急性胃粘膜损害的大鼠胃体部组织的ｃＡＭＰ含量明显增加,与胃窦部组织ｃＡＭＰ含量的差值变小,结果是胃体部粘膜的损害明显减轻。提示胃组织ｃＡＭＰ含量变化在急性胃粘膜损害中有一定的作用。