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γ辐射诱导质粒DNA单链断裂的反向氧效应 总被引:2,自引:2,他引:0
以凝胶电泳法研究了γ辐射引起质粒DNA单链断裂(SSB)的氧效应,发现含自由基清除剂-甘露醇的DNA溶液在N2饱和条件下的SSB产额大于空气饱和时的产额,使得S析氧增比(OER)小于1,即DNA之SSB存在反向氧效应,同时,G(SSB)及其氧增比均随甘露醇浓度的增大而减小。 相似文献
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碳离子诱导的DNA双链断裂 总被引:8,自引:2,他引:6
DNA双链断裂(DSBs)是电离辐射诱导的最重要的原发损伤,研究DSBs有利于揭示细胞辐射敏感性的机理。用倒转脉冲场凝胶电泳结合荧光扫描进行DNA定量研究75MeV/u12C6+对小鼠B16黑色素瘤细胞DSBs的诱导,结果表明:DSBs产额约为0.74DSBs/100Mbp/Gy;DNA片段分布在两个区域。大片段区分子量约为1.4Mbp~3.2Mbp,分子量小于1.2Mbp的为小片段区;并且随着剂量的增加,大片段区DNA含量逐渐下降,而小片段区的DNA含量显著增加。表明B16DNA分子上可能存在对重离子较为敏感的位点。 相似文献
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滇重楼地上部分的配糖体 总被引:13,自引:0,他引:13
从滇重楼ParispolyphyllaSm.var.yunnanensis(Fr.)H-M,地上部分,分离出4个微量的配糖体,经光谱分析和化学降解证明其化学结构分别为25S-异钮替皂甙元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)[α-L-鼠李吡喃糖基(1→4)]-β-D-葡萄吡喃甙(A),26-β-D-葡萄吡喃糖基-纽替皂甙元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)[α-L-鼠李吡喃糖基(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖甙(B),山奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基(1→6)-β-D-葡萄吡喃甙(C),7-O-α-L-鼠李吡喃糖基-山奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基(1→6)-β-D-葡萄糖甙(D)。 相似文献
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大鼠20α羟类固醇脱氢酶(20α-Hydroxysteroiddehydrogenase,20αHSD)cDNA片段,被插入杆状病毒(BacuIovirus)的转移载体pBlueBacⅢ,经野生型病毒DNA的共转染,从被转染的昆虫细胞中获得重组病毒。Northernblot分析,重组病毒感染细胞有20αHSD基因表达。感染细胞裂解液的Western印迹法分析,37kD的蛋白带被20αHSD抗体识别.体外酶活性测定发现,感染细胞裂解液中含有20αHSD酶促活性以上结果提示,大鼠20αHSD在杆状病毒昆虫表达系统成功地获得表达,为今后大量制备和纯化20αHSD创造条件。 相似文献
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大鼠20α羟类固醇脱氢酶(20α-Hydroxysteroid dehydrogenase,20αHSD)cDNA片段,被插入杆状病毒的转移载体pBlueBacⅢ,经野生型病毒DNA的共转染,从被转染的昆虫细胞中获得重组病毒。Northern blot分析,重组病毒感染细胞有20αHSD基因表达。感染细胞裂解液的Western印迹法分析,37kD的蛋白带被20αHSD抗体识别。体外酶活性测定发现, 相似文献
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通过测试γ射线辐照下超螺旋pBR322 DNA分子单链断裂(SSB),双链剂量效应,得到SSB、αDSB产额与DNA现含一定浓度甘露醇的DNA溶液体系中,G(SSB)、G(αDSB)的例数与c(DNA)的倒数成线性关系,并以二级动力学描述了DNA和甘露醇分子对.OH的竞争反应,得到.OH引起SSαDSB的速率常数及其效率。 相似文献
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观察了亚硒酸钠(Na2SeO3)在体外作用于大鼠晶状体上皮细胞(RLEcells)而造成的DNA单链断裂(singlestrandbreaks,SSB),并对其DNA损伤、修复动力学做了初步研究.发现SSB严重程度与亚硒酸钠的浓度呈线性相关,其SSB重接修复约在30~60min内完成.还作了有关非程序DNA合成(UDS)的检测,发现与SSB相比,UDS发生迟且持续时间更长,提示Na2SeO3可能在体外对大鼠晶状体上皮细胞除造成SSB以外,还可能造成其它种类的DNA损伤. 相似文献
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人食管鳞状上皮癌糖复合物表达的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
凝集素可与其相对应的糖复合物特异性结合。在癌症形成过程中细胞表面经历着显著的变化,本文用十种生物素化凝集素即UEA-I、RCA-I、DBA、PSA、PNA、BSL、LCA、WGA、ConA和SBA作为探针,对正常食管上皮和食管鳞状上皮癌进行研究,以确定正常食管上皮和食管鳞状上皮癌中糖复合物的改变,结果发现,PNA和PSA在正常食管和食管鳞状上皮癌中均无反应,RCA-I、DBA、BSL、LCA、ConA和SBA受体在正常和癌组织中有着特征性变化,BSL和DBA在食管中无反应,LCA、SBA和RCA-1正常食管和食管鳞状上皮癌中反应方式不同,ConA和WGA则在同一癌组织的不同部位都显示出不同的反应。尽管UEA-I在正常食管和食管鳞状上皮癌均呈阳性反应,但似乎未表现出有意义的变化。上述结果提示食管癌的发生与含α-D-GalNAc(DBA和SBA)、β-D-Gal/β-N-acetyl-D-Galactosamine(RCA-I)、α-D-Glc/α-D-Man(LCA和ConA)、[β-(1-4)-D-GlcNAc]2/NeuNAc(WGA)和α-D-Gal(BSL)等的糖复合物的改变有较为密切的关系。 相似文献
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NNK诱发BEP2D细胞产生活性氧及其对DNA的损伤 总被引:4,自引:0,他引:4
通过测定细胞内和细胞上清中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,以及DNA 加合物——8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-hydroxydeoxyguanosine,OH8dG)含量,对烟草特异亚硝胺类化合物4-甲基亚硝胺-1(3-吡啶基)-1-丁酮(4-(m ethylnitrosam ino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone,NNK)诱发人乳头状病毒永生化的人支气管上皮细胞(hum an papillom avirus-im m ortalized hum anbronchialepithelialcellline,BEP2D)产生的ROS及其对DNA 的氧化损伤进行研究,并观察纳米硒的保护作用.结果表明,BEP2D 细胞经不同浓度的NNK 作用后,细胞内和细胞上清中ROS以及OH8dG含量均显著增加,并有较好的剂量效应关系.1 μm ol·L- 1纳米硒(nanoselenuim ,NS)能明显抑制NNK 诱发BEP2D细胞产生的ROS及OH8dG 水平.揭示NNK 能造成细胞的氧化损伤,而NS对NNK 所致细胞的氧化损伤有保护作用. 相似文献
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金属硫蛋白清除自由基及其对自由基引起的核酸损伤保护作用的研究 总被引:9,自引:0,他引:9
通过化学反应体系产生OH-和O自由基,采用荧光和化学发光检测体系,比较研究了不同亚型及不同结合金属的金属硫蛋白(MT)清除自由基能力的大小。结果表明,对于同一亚型,Zn结合MT清除自由基的能力大于Cd结合MT同一结合金属的MT,MT1清除自由基的能力大于MT2。通过比较ZnMT1与谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)清除自由基的能力大小发现,ZnMT1清除OH的能力是GSH的100倍,清除O自由基的能力分别是GSH和SOD的25和0.01倍。即MT是一种很好的OH自由基清除剂。以OH对核酸(DNA)的损伤为例,研究了MT对核酸损伤的保护作用,其变化规律与上述结果相一致。 相似文献
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以Epstein-Barr病毒(EBV)DNA聚合酶为抗原,建立了简便、快速、敏感和特异的鼻咽癌诊断方法。构建原表达载体pRSET-DNA聚合酶及其亚克隆PRSET-A1和BL21(DE3)中表达的产物,经Western-blot检测其抗原性并用于检测鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)病人血清中的抗体。在DPC病人血清中存在抗EB病毒DNA聚合酶的IgG抗体,并证明 相似文献
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地衣芽孢杆菌1Baciuus Licheniformis)BL-306产生的胞外β-甘露聚糖酶经硫酸铵分级盐析,DEAE-纤维素柱层析。Sephadex-G100柱凝胶过滤和DEAE-纤维素柱再层析分离纯化,得到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)均一样品。用SDS-PAGE测得纯化后β-甘露聚糖酶分子量为26000道尔顿。用凝胶等电聚焦电泳(PAGEIEF)测得等电点PI为5.0。该酶 相似文献
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本文研究了新的层析介质(Cellufine)对原纯化工艺中SepharseCL-4B柱层析纯化后的乙肝表面抗原(HBsAg)组分及DNA组分的进一步纯化效果。结果表明:该层析介质可以提高HBsAg的纯度和收量,并对初步提纯DNA组分中的乙肝表面抗原有一定意义。并首次发现DNA组分中乙肝表面抗原的SDS-PAGB图谱较正常基因乙肝表面抗原的图谱缺少30KD的条带。 相似文献
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亚硒酸钠诱发的晶状体上皮细胞DNA损伤及修复 总被引:3,自引:0,他引:3
观察了亚硒酸钠(Na2SeO3)在体外作用于大鼠晶状体上皮细胞(RLE cells)而造成的DNA单链断裂(SSB),并对其DNA损伤、修复动力学做了初步研究。发现SSB严重程度与亚硒酸钠的浓度呈线性相关,其SSB重接修复约在30 ̄60min内完成,还作了有关非程序DNA合居(UDS)的检测,发现与SSB相比,UDS发生迟且持续时间更长,提示Na2SeO3可能在体外对大鼠晶状体上皮细胞除造成SSB 相似文献
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地衣芽孢杆菌β—甘露聚糖酶的纯化及酶学性质 总被引:10,自引:1,他引:9
地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)NK-27菌株发酵产生的β-甘露聚糖酶(β-mannanase)经硫酸铵盐析沉淀,两次DEAE纤维素和Sephadex G-100离子交换柱层析以及制备PAGE等步骤,获得了凝胶电泳均一的样品。用SDS-凝胶电泳测得纯化后的β-甘露聚糖酶分子量为26kD,用凝胶聚焦电泳测得等电点P1为5.0。酶反应的最适pH为9.0,最适温度为60℃,稳 相似文献