工程菌产霍乱肠毒素B亚单位的纯化

 本实验室使霍乱肠毒素(CT)B亚单位基因在大肠杆菌中获得表达,并能分泌到胞外。将该菌株培养物上清经过超滤浓缩后,用偶联上霍乱毒素IgG的CNBr-Sepharose 4B进行亲和层析,得到表达产物霍乱毒素B亚单位纯蛋白。经PA-GE、HPLC及琼脂免疫扩散等方法鉴定证明该蛋白与天然霍乱肠毒素B亚单位完全相同。     

冻干口服霍乱rBS-WC菌苗安全及效率评价的小鼠模型探讨

我们构建了高产、分泌霍乱毒素B亚单位的工程菌株E.coli MM2,并用该菌株生产的重组霍乱毒素B亚单位(rBS)与灭活霍乱弧菌菌体制成冻于口服rBS-WC菌苗。这一菌苗的实验室动物研究亦已进行,肯定其在多种动物安全、有效。目前已能较大量地生产rBS,正在探索放大与工业化生     

用鸡蛋抗体预防鳗(鱼鹿)的感染症

三重大学生物资源学部教授上野隆二、助教授宫崎照雄和太阳化学小组使用对鳗(?)副霍乱病病毒Edwardgella tarda的鸡蛋抗体,在实验室水平能预防副霍乱病的感染。而且在养鳗场试验证明有效性,在92年3月东京召开的日本农艺化学会上发表。鳗(?)副霍乱病,一旦发病,就非常严重,感染很快,死亡率也高。现在用抗生物质等治疗。但是存在水产物中的残留药物和运出前禁止投药期发病无法解决的问题。鸡蛋抗体能作为新型预防药、治疗药。     

口服霍乱菌苗在孟加拉的现场试验——评价口服菌苗后母乳抗菌和抗毒免疫之应答

<正>在霍乱流行区,婴幼儿霍乱发病率颇低。这种观察已经导致乳饲可能对霍乱提供保护的学说。通过一种可能的机制(即乳饲可能保护霍乱的机制),应服用富含抗体的母乳,这种抗体能够防止,至少减轻由01群霍乱弧菌所致的感染。     

第18次日美霍乱联合会议侧记

<正>第18次日美霍乱联合会议,自1982年11月29日起到12月1日止,历时三天,在位于日本仓敷市郊的川崎医大学博物馆礼堂举行,这次会议美方有十人参加,较往年稍少,全体与会者近一百人。发表了内容丰富的论文34篇,展开了涉及霍乱各个领域的热烈讨论。下面简介这次会议内容。 第一日,会议开始、首先由日方部会长桑原东邦教授、对筹备本次会议给予大力支持的川崎医大柴田校长以及美方部会长约翰·霍普金斯大学Pierce氏致词感谢。上午会期就细菌学与病因学有关问题发表了7篇论文。     

发现霍乱一百年来的研究

<正>霍乱,众所周知,本来是孟加拉地区恒河、布拉马普特拉河二大流域三角地带的地方病。自19世纪以来,出现数次世界范围内大流行。然而进入20世纪后,其流行区域逐渐缩小,首先从美洲大陆消失,接着在西欧自1920年以后也未发生。到第二次大战前,霍乱仅出现于印度、东南亚、中国及其周围地区。日本1946年复员以后霍乱再未发生。至少在文明社会里,霍乱已被看成是过去的     

霍乱毒素

霍乱毒素是一种很强的粘膜免疫佐剂,本介绍了霍乱毒素的结构、霍乱毒素毒性的分子机理及近年来在霍乱毒素佐剂活性方面的研究进展,并探讨了霍乱毒素佐剂活性的分子机理。     

霍乱毒素B亚基基因具有自己的启动子

本研究发现并证实霍乱毒素B亚基基因上游Xba Ⅰ～Cla Ⅰ限制性片段内存在具有启动子活性的序列;在该启动子作用下,霍乱毒素B亚基表达水平可达200mg/L,氯霉素乙酰基转移酶基因表达水平随培养条件不同在0.3～10mg/L之间,大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因的表达量达4100U/ml。在该启动子的控制下霍乱毒素B亚基基因可以高效表达,该启动子的存在可能是由于霍乱毒素操纵子中霍乱毒素B亚基表达量是A亚基的6倍。     

霍乱毒素B亚基基因具有自己的启动子

本研究发现并证实霍乱毒素Ｂ亚基基因上游ＸｂａＩ～ＣｌａＩ限制性片段内存在具有启动子活性的序列;在该启动子作用下,霍乱毒素Ｂ亚基表达水平可达２００ｍｇ／Ｌ,氯霉素乙酰基转移酶基因表达水平随培养条件不同在０．３～１０ｍｇ／Ｌ之间,大肠杆菌β－半乳糖苷酶基因的表达量达４１００单位／ｍｌ。在该启动子的控制下霍乱毒素Ｂ亚基基因可以高效表达,该启动子的存在可能是霍乱毒素操纵子中霍乱毒素Ｂ亚基表达量是Ａ亚基的６倍的原因。     

抗霍乱毒素B亚单位合成肽抗体的特性

<正> 有几个研究小组已报道霍乱毒素B亚单位合成肽能有效激发产生抗霍乱毒素的中和抗体。该合成肽有希望表现出霍乱毒素的生物功能,它对于研究霍乱毒素B亚单位的结构与功能(霍乱毒素结合GM_1-神精节苷脂和毒素进入细胞膜内分化)很有帮助。 我们根据霍乱毒素B亚单位结构制备出合成肽并检测了它的生物学活性。 1)根据Merrified的固相法我们合成了3个肽,CTB30-48,CTB41-50和CTB84-97(数字代表B亚单位N末端氨基酸残基的限定位置)。在合成中承蒙大阪大学Dr_1 Shimonish合作。 2)用肽-BSA(牛血清白蛋白)结合体免疫家免制备的抗肽血清与霍乱毒素呈     

霍乱病与其它弧菌有关的腹泻(续完)

<正>A 流行病学和细菌学 a.O I霍乱弧菌 霍乱在人群中的传播形式需要结合最有效的流行病学技术和环境卫生微生物学做更细致的研究。这些研究应统一方法,要可能是防治霍乱最有效的特殊措施。 需要同时进行流行病学、微生物学和社会学的研究以便统一的确定霍乱的地方流行,在外环境中的持久性和季节性。 继续监测O I霍乱弧菌对抗菌素的耐药性,在自然界搜索含R因子菌株的规划须加速进行     

多重PCR方法检测霍乱弧菌的研究

霍乱弧菌是霍乱的病原体,可以分为O1群、O139群和非O1/非O139群。O1群和O139群霍乱弧菌产生的霍乱肠毒素(也称霍乱毒素)是产生霍乱的主要原因,也只有O1群和O139群霍乱弧菌可引起霍乱。其他群的霍乱弧菌毒性不高,但在食品中也不允许被检出。实验以霍乱胶原酶基因和霍乱毒素基因为目的基因,试图建立一种PCR方法对霍乱弧菌进行检测研究,结果表明此方法可以用于食品中的霍乱弧菌检测。     

瑞典人口服B亚单位—全菌体霍乱菌苗后肠粘液、唾液和血清抗毒素和抗菌抗体应答

<正>临床霍乱似乎能产生抗霍乱再感染的自然免疫力达数年,表现在流行区为有症状的再感染率低,非流行区给志愿者的感染以保护性。另一方面胃肠道外免疫的全菌体霍乱菌苗仅有小于6个月的部分免疫力。这些菌苗可能由于缺乏毒素衍生抗原和胃肠道外途径不足以刺激肠道局部的免疫应答而失败。 临床霍乱在肠道和血清中能引起有效的     

霍乱弧菌01群E1 Tor型溶血素的氨基末端区在古典型菌株中的表达及其细胞毒性

<正>产生霍乱毒素(CT)的01群霍乱弧菌引起人霍乱。某些非01群霍乱弧菌株能产生与霍乱毒素相似的肠毒素,而另一些来自临床腹泻病例的非01群菌却不产生这种毒素,这表明还有其它因素能引起腹泻反应。现已证明这些菌株能产生溶血素——一种可能的腹泻因素,尽管其致病机理尚不清楚。Yamamoto等人证实了非01群菌株和周群E1 Tor型菌株所产生的溶血素在生物学、理化住质和免疫学方面是难区分的。Southern杂交分析表明两者的基因基本上是相同的。     

与霍乱毒素一致的模拟弧菌Vibrio Mimicus肠毒素的提纯

<正>霍乱病原菌、古典型和EI Tor生物型霍乱弧菌与一些其它弧菌即非O1群霍乱弧菌和模拟弧菌(最近才按蔗糖阴性分类为非O1群霍乱弧菌)密切相关。这些菌群的大多数菌种是非肠道致病性的或弱致病性的、或者引起不同于霍乱因子所致的腹泻,但有些菌种能产生一种与古典型霍乱弧菌的霍乱毒素密切相关的肠毒素。     

不同地区分离的霍乱0139菌株交叉保护力试验

本文对得自不同地区的四株０１３９菌株做了毒力、免疫力及交叉免疫力试验;四个地区０１３９菌株免疫小鼠后血清ＩｇＧ、肠液ｓＩｇＡ抗体滴度的比较以及０１群霍乱与０１３９型霍乱的交叉保护力试验。结果表明：０１群霍乱与０１３９型霍乱无交叉免疫力。０１群霍乱菌苗对０１３９型霍乱弧菌基本无保护作用;四株菌株的自身毒力基本相同。３＃株免疫力高于其它株,用３＃株免疫后能抵抗２＃、３＃及５＃株的感染。四株菌株免疫小鼠     

霍乱弧菌肠毒素基因在大肠杆菌的表达

霍乱毒素基因在大肠杆菌获得了表达,在大肠杆菌中产生的毒素,具有霍乱毒素同样的生物活性、抗原性和免疫原性。但它产生的霍乱毒索,90％是保持在胞内的,其毒性可被胰酶激活。     

第19次日美霍乱协作会议侧记

<正>第19次日美霍乱协作会议于1983年10月17日至19日在美国国立卫生研究所召开。会议宣读的论文日本方面11篇,美国方面28篇,共计39篇。此外还有美国的23篇书面材料,所有资料均很有意义。美国方面的研究范围广泛,以上接论文报告顺序作一扼要介绍。     

预防伤寒和霍乱——埃希氏大肠杆菌腹泻—有效口服二价活菌苗的研制

<正>霍乱的大量腹泻是由有活力的肠毒素引起,这种外毒素激活了腺苷酸环化酶,继后增加细胞内环磷酸腺苷(CMP)的含量。 自从郭霍氏鉴定出霍乱的病源以来,发展了不同的霍乱菌苗,最常用的是肠道外接种的灭活菌体菌苗。遗憾的是,这些菌苗仅引起有限的短时期保护。已经提出许多类毒     

鉴定霍乱弧菌的快速肉眼直接察观试验

<正>霍乱弧菌包括几种抗原变异株,可被群特异性抗血清鉴定。大多数变异株中,01群变异株是最主要的,因为一般认为它是引起霍乱的病原。人们认为霍乱弧菌在人的肠道外一点儿不能增殖。然而在霍乱暴发期间流行地区的外环境中也能发现它们,但它们的生存是短暂的。在英国、美国和巴西等所谓多年来无霍乱的国家中,由于分离出01群变异株,动摇了这种牢固的观念。这些分离物通常都不产生毒素。事实上,人源菌可能找