金黄色葡萄球菌耐药基因及新型抗菌药物的研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus),简称金葡菌,是一种临床常见致病菌,可引起皮肤化脓性感染、肺炎、心包炎、败血症及脓毒血症等多种疾病。目前临床上金黄色葡萄球菌的多重耐药情况已十分严峻,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的出现,已成为临床抗感染治疗的棘手难题,严重危害人类健康。本文主要介绍金黄色葡萄球菌基因水平的耐药性、新型抗菌药物的研发及临床治疗金黄色葡萄球菌感染三方面的进展,为金黄色葡萄球菌的耐药性研究及耐药菌株的临床有效治疗提供科学依据。     

乳源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌icaA/D基因缺失株的构建及其生物被膜形成能力与耐药性分析

[背景]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是一种具有多重耐药性的人畜共患病原菌,常引起奶牛乳房炎等疾病.形成生物被膜是MRSA重要的耐药机制之一.研究发现ica操纵子调控的胞间多糖黏附素(Polysaccharide Interc...     

类SCC样甲氧西林敏感性金黄色葡萄球菌的基因组学分析

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S. aureus), 作为一种常见的致病菌常可导致严重感染性疾病. 金黄色葡萄球菌的主要特点是易产生耐药性. 临床上运用多重PCR方法对S. aureus耐药菌株进行分型. SCC作为一种mecA基因的转运载体, 介导金黄色葡萄球菌产生耐药性. 本研究报道了一株新甲氧西林敏感性金黄色葡萄球菌的全基因组序列信息, 即类SCC样MSSA463菌株, 经多重PCR方法, 该菌株被误鉴定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌, 结果与药敏结果相冲突. 为此, 运用焦磷酸测序方法完成了该菌株的全基因组测序, 并与已知金黄色葡萄球菌的基因组序列信息不同, 发现可读框(CZ049; AB037671)存在于attL, attR反向重复序列的临近下游. 这些结果提示, 在金黄色葡萄球菌与其他微生物之间可能存在一种水平基因转移, 并改变了金黄色葡萄球菌对药物的敏感性, 推测attL, attR反向重复序列可能作为外源性基因的插入部位而存在.     

2016-2017年宁夏地区牛源金黄色葡萄球菌的全基因组分析

【目的】了解宁夏地区奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)代表菌株的基因组序列基本特征,进一步探究其耐药基因型、毒力及进化关系,为兽医临床防治提供理论依据。【方法】采用纸片法对97株金黄色葡萄球菌临床分离株进行抗菌药物敏感性试验,同时进行葡萄球菌蛋白A(Staphylococcus aureus protein A,spa)分型、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST),根据分型结果选取16株代表菌株进行全基因组测序,并对获得的测序序列进行处理分析。【结果】药敏试验结果显示97株分离株对18种抗菌药物存在不同程度的耐药,其中9株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、头孢噻呋、磺胺异噁唑、红霉素、庆大霉素和克林霉素等8种抗菌药物完全耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)菌株对青霉素、氨苄西林、磺胺异噁唑耐...     

克林霉素诱导试验在金黄色葡萄球菌药敏检测中的应用CSCD

目的 研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)对克林霉素的诱导型耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法 采用VITEK-2 Compact微生物分析系统对临床分离的S. aureus菌株进行鉴定和药物敏感性测定。采用微量肉汤稀释法检测诱导型克林霉素耐药情况。结果共分离得到428株S. aureus,其中耐甲氧西林S. aureus(MRSA)占23.13%(99/428),甲氧西林敏感S. aureus(MSSA)占76.87%(329/428)。对红霉素耐药、克林霉素敏感的S. aureus有237株,其中克林霉素诱导试验阳性174株,占73.41%。结论 S. aureus克林霉素诱导型耐药发生率较高,临床微生物试验室应加强对葡萄球菌的克林霉素诱导耐药检测,以指导临床合理选用抗菌药物。     

抗金黄色葡萄球菌感染的新药研究进展

金黄色葡萄球菌因抗菌药耐药性而引起广泛关注,其耐药株感染所引起的皮肤和软组织感染、肺炎、菌血症以及骨髓炎等增加了患者的发病率和死亡率。金黄色葡萄球菌通常通过携带多种耐药基因、毒力基因或形成生物被膜等方式快速适应生存环境而产生耐药性,使得常规抗菌药物难以达到理想的治疗效果,因此,金黄色葡萄球菌感染的治疗一直是一个难题。从抗菌肽、植物次生代谢物及其他独特作用机制的新药等三方面进行阐述,以期为抗金黄色葡萄球菌感染的新药研发提供新的思路。     

泰州市奶牛乳房炎调查及其病原菌的分离

奶牛乳房炎是奶牛场的常发病和难以防治的疾病,为进一步了解引起奶牛乳房炎的病原微生物,本研究通过对泰州市3个奶牛场572头泌乳牛的乳房炎发病率进行了调查并对乳房炎主要病原菌进行分离和鉴定。结果表明,奶牛临床型乳房炎的发病率为7.69%,隐性型乳房炎发病率为56.64%,乳区阳性率为33.8%,其中临床型:隐性=1:7.36。从65份确定患有乳房炎的奶样中共分离获得8种细菌、156株分离株,且引起乳房炎的主要病原菌是金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌,其次是停乳链球菌、大肠杆菌、乳房链球菌和无乳链球菌,其检出率分别为42.31%、23.08%、8.97%、6.41%、5.13%和1.28%。该项调查结果初步明确了泰州市乳房炎发病情况,同时为进一步综合防治奶牛乳房炎和研制乳房炎治疗药物提供了科学依据。     

74例金黄色葡萄球菌乳腺炎的耐药性分析

目的分析哺乳期乳房脓肿患者的金黄色葡萄球菌的耐药情况,指导临床合理使用抗菌药物。方法将厦门市妇幼保健院乳腺门诊及病房2009年2月至2011年1月抽取的128例哺乳期乳房脓肿患者的乳腺脓液接种于哥伦比亚血平板,置35℃培养箱,过夜孵育18~24 h。革兰阳性球菌,触酶阳性,血浆凝固酶试验(+),必要时采用ATB-Expression细菌鉴定系统确认。用K-B纸片法检测其对苯唑西林等10种抗菌药物的敏感度。结果 128例检出细菌86例,阳性率67.2%,其中检出74株金黄色葡萄球菌(86.0%),其对青霉素、红霉素和克林霉素有较强的耐药性,耐药率分别为94.6%、64.9%和59.5%;耐苯唑西林19株(25.7%),对复方新诺明、磷霉素和庆大霉素较为敏感,对万古霉素、替考拉宁和左旋氧氟沙星100%敏感。结论哺乳期乳房脓肿致病菌主要为金黄色葡萄球菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占25.7%,其耐药情况不容忽视,青霉素类、大环内酯类等耐药率较高不能作为经验用药。建议临床使用抗菌药物前及时送检乳腺脓液细菌培养,以药敏结果指导临床合理经济用药。     

金黄色葡萄球菌D试验和耐药性分析

目的 了解本地区金黄色葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药表型及其对常用抗菌药物的耐药性.方法 用K-B琼脂扩散法检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)及双纸片法(D试验)检测红霉素对克林霉素诱导耐药表型,用VITEK 2 Compact进行菌株鉴定和药敏试验.结果 156株金黄色葡萄球菌中MRSA有51株,占32.7％.红霉素对克林霉素诱导耐药共29株,占18.6％,其中MRSA有10株,甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MRSS)有19株.金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物具有不同的耐药性,对青霉素的耐药性超过95％,对万古霉素、奎努普汀/达福普汀、利奈唑烷和替加环素敏感.结论 临床微生物实验室应加强对金黄色葡萄球菌中克林霉素诱导耐药的检测,临床治疗中也应加强抗菌药物的合理应用以防多耐药菌株的产生.     

复方蛇床子灌注液对奶牛乳房炎6种主要致病菌的抑杀作用

目的通过实验证明复方蛇床子灌注液对奶牛乳房炎病原菌的抑杀作用。方法复方蛇床子灌注液为受试药物,6种引起奶牛乳房炎的常见病原菌（金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、停乳链球菌、白色念珠菌和热带假丝酵母菌）为实验菌株,采用测定抑菌圈的琼脂平板扩散法和测定最小抑菌浓度（M IC）的药物固体培养基法来评价复方蛇床子灌注液的体外抗菌活性。结果复方蛇床子灌注液对6种供试菌株均有较好的抑菌作用,其中0.1 g/mL的原药液对无乳链球菌和金黄色葡萄球菌表现了强大的抑制作用（M IC值达0.0015 g/mL）,抑菌圈直径分别高达33 mm和28 mm。结论复方蛇床子灌注液对奶牛乳房炎6种主要致病菌有较强的抑杀作用,抗菌谱广,药物浓度与抑菌效应呈正相关。     

禽源多重耐药金黄色葡萄球菌耐药基因检测及分子分型

【背景】金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性菌,在动物和人身上能引起一系列疾病。【目的】了解安徽省不同地区禽源多重耐药金黄色葡萄球菌耐药性的情况及基因分型特征。【方法】以安徽不同地区的病禽肝脏作为标本,分离鉴定得到103株多重耐药金黄色葡萄球菌,并进行耐药基因型检测和ERIC-PCR分子分型。【结果】耐药菌株从三重到八重耐药均有分布,主要集中在五重(43/103)、四重(21/103)和六重耐药(22/103)。药敏结果显示,β-内酰胺类的耐药率最高(79.6%),氨基糖苷类次之(71.8%)。耐药基因检出率由高到低分别为mec A(92.2%)、aac(6′)/aph(2″)(76.7%)、ermC(37.9%)、ermA(13.6%)和fem A(3.9%)。ERIC-PCR分子分型获得6种不同类群,优势流行菌群为类群Ⅱ(38/103)。【结论】安徽地区金黄色葡萄球菌存在较严重的耐药性,氨基糖苷类、β-内酰胺类和大环内酯类抗生素的耐药基因携带率较高。分型结果表明安徽部分区域耐药金黄色葡萄球菌具有遗传多样性,但耐药谱与ERIC-PCR分子分型无明显关联。     

1517株金黄色葡萄球菌的临床分布及药敏结果分析

目的了解金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的分布及耐药率,为临床合理用药提供参考。方法对2008年1月至2013年12月从各类临床标本中分离的S.aureus进行统计分析。判断标准均按CLSI 2013年规定标准判定结果,以WHONET 5.6统计软件进行数据分析。结果共检出1 517株S.aureus,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)669株,占44.1%;构成比居前的标本来源是皮肤分泌物(693株)、痰液(487株)及血液(70株),MRSA在其中检出率分别为30.9%、71.0%和37.0%,痰液来源中的MRSA分离率比其余两者高,差别有统计学意义(P<0.05);科室分布居前的有皮肤科(440株)、重症监护室(156株)、肿瘤科(118株)、耳鼻喉科(114株)及神经科(101株),MRSA检出率分别是27.7%、75.9%、40.4%、27.2%和69.1%,重症监护室及神经科检出的MRSA比例比其他三个科高,差异有统计学意义(P<0.05)。S.aureus对青霉素耐药严重,高达94.6%,对大环内酯类、四环素耐药率较高,均为50%以上,对喹诺酮类、庆大霉素为35%以下,对利福平及复方新诺明较敏感,未达到20%,未发现对万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁耐药的S.aureus。结论 S.aureus感染的标本来源与分离科室不同,MRSA检出率有差别,耐药率有较大差异,临床医师应根据药敏结果选择使用抗菌药物。     

临沂市奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定与药敏试验

目的为弄清临沂市奶牛乳房炎主要病原菌种类及其药物敏感情况,为科学防治本病提供依据。方法采集患乳房炎奶牛的乳样进行细菌分离鉴定,并对主要病原菌做药敏试验。结果从115份乳样中,分离出6种127株病原菌,其中金黄色葡萄球菌46株,占36.22%,无乳链球菌33株,占25.98%,停乳链球菌21株,占16.53%,大肠埃希菌17株,占13.39%,乳房链球菌8株,占6.3%,沙门菌2株,占1.57%;主要病原菌均对头孢喹诺和左氧氟沙星高度敏感。结论临沂市奶牛乳房炎主要致病菌为金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠埃希菌。首选药物为头孢喹诺和左氧氟沙星。因此,治疗奶牛乳房炎应通过药敏试验,合理地选择药物。     

深圳市金黄色葡萄球菌耐药性分析及分子分型

目的了解深圳市金黄色葡萄球菌的耐药性特点及分子分型特征。方法收集2012年来自深圳市7所医院的428株金黄色葡萄球菌,以琼脂稀释法测定其对12种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),采用聚合酶链式反应(PCR)检测杀白细胞毒素(PVL),并对携带PVL基因的菌株进行多位点基因序列分型(MLST)。结果428株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)共116株(26.2%),甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)共312株(73.8%)。在12种抗菌药物中,该菌对青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为88.8%和44.2%;未发现替考拉宁、利奈唑胺和万古霉素的耐药株。MRSA对青霉素和环丙沙星的耐药率显著高于MSSA。428株金黄色葡萄球菌中,有60株(14.02%)携带PVL基因。MLST分型结果显示共有14种已知序列型和4种新的序列型,其中ST59和ST338最多,分别为16株和12株。结论深圳地区金黄色葡萄球菌MRSA检出率以及对多种抗菌药物的耐药率均低于全国平均水平,PVL基因阳性率处于中等水平;存在多种ST分型,以ST59和ST338多见,具有遗传多样性和独特的遗传背景。     

金黄色葡萄球菌壁磷壁酸致病与免疫的分子机制研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)壁磷壁酸(wall teichoic acids, WTAs)是多元醇经由磷酸二酯键共价连接组成的细胞壁表面阴离子糖类聚合物,参与调节细胞壁的稳态并介导细菌毒力。金黄色葡萄球菌WTAs与宿主细胞表面特定的受体结合,可诱导天然免疫和获得性免疫应答。此外,金黄色葡萄球菌WTAs还参与调控毒力基因的表达,有助于细菌的定殖感染,在基因工程靶标治疗和噬菌体药物治疗方面具有广泛的应用前景。本文对金黄色葡萄球菌WTAs的合成进行了概述,综述了WTAs对宿主免疫应答的调控作用,以及在细菌对宿主侵袭与定殖中的致病机制,并归纳WTAs的耐药分子机制和作为药物治疗靶标的研究现状。这些研究为揭示WTAs的致病与免疫分子机制提供研究思路,为预防和治疗金黄色葡萄球菌的感染提供新的策略。     

253株金黄色葡萄球菌耐药现状分析

目的 了解医院金黄色葡萄球菌临床分布情况及其对常用抗菌药物的耐药率,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 回顾分析医院2010年5月至2011年4月检出的金黄色葡萄球菌,采用VITEK-AMS全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏分析.结果 共检出金黄色葡萄球菌253株,菌株的主要来源为痰130株(51.4％)、血液39株(15.4％)、创面24株(9.5％);菌株主要科室分布前3位是神内科35株(13.8％)、ICU30( 11.8％)、脑外科26株(10.3％);其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( MRSA)为165株(65.2％),MRSA对多种抗菌药物耐药率＞70.0％,MSSA为88株(34.8％),对除青霉素、红霉素外的大多数抗菌药物敏感,未发现耐万古霉素菌株.结论 MRSA检出率高,耐药现状严重,应加强对金黄色葡萄球菌耐药性的监测,并根据药敏试验结果合理使用抗菌药物.     

体外诱导耐万古霉素金黄色葡萄球菌及分子机制

【目的】通过前期体外诱导获得耐万古霉素金黄色葡萄球菌,从基因突变方面对万古霉素耐药性菌株进行研究。【方法】通过低浓度万古霉素逐步诱导13株敏感性金黄色葡萄球菌,用琼脂稀释法和E-test法检测所有菌株对万古霉素的耐药性(最低抑菌浓度,MIC),PCR扩增与万古霉素耐药性密切相关的4个重要基因:rpo B、vra S、gra R和gra S,并测序分析,比较诱导前后不同菌株的基因序列。【结果】通过60 d的体外诱导实验,13株对万古霉素敏感性金黄色葡萄球菌中有6株被诱导为中介耐药金黄色葡萄球菌(Vancomycin intermediate Staphylococcus aureus,VISA),7株菌被诱导之后对万古霉素仍处于敏感状态,MIC4 mg/L。检测诱导前后所有菌株的rpo B、vra S、gra R和gra S基因发现:有3株VISA的rpo B基因同时有L466S和H481N的突变,gra S基因同时有R232K的突变。【结论】对万古霉素敏感的金黄色葡萄球菌经过较长时间的体外诱导可发展为VISA。在已检测的重要基因中,rpo B和gra S的突变对耐药性的发展很可能起关键作用,而vra S和gra R对这一过程没有显著影响。     

临床微生物检验和细菌耐药性监测探析

目的：探讨临床微生物检验和细菌耐药性监测。方法：对临床分离出的致病菌的耐药情况以及敏感性进行回顾分析,检查出各种病菌对各类抗菌药物的敏感率和耐药率,本文以葡萄球菌属、肠杆菌科、非发酵菌的代表菌种的耐药性和敏感性为例。结果：通过选取金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌为例进行回顾分析,它们对抗菌药物的耐药率、敏感率具体情况如文中表格所示。结论：临床病原菌的耐药性问题不容忽视,治疗时要根据药物的敏感性和耐药性选择适当的抗菌药物,合理使用抗菌药物,减轻抗菌药物的耐药寿命。     

奶牛源MRSA肠毒素基因、耐药基因及分子分型分析

为了解宁夏地区奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的肠毒素基因和耐药基因分布及其分子流行病学特征,本研究通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)技术对前期分离于宁夏地区的9株奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)进行了18种肠毒素基因和16种耐药基因的检测,同时采用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)、正向重复序列(direct-repeat unit, dru)和辅助基因调节因子(accessory gene regulator, agr)分子分型技术对MRSA菌株进行分型研究。结果显示所有MRSA菌株均携带经典型肠毒素基因和新型肠毒素基因,共检出12种肠毒素基因,其中selk基因的检出率最高,达到了100%,未检出see、selj、selo、selp、ser和selu基因;11种耐药基因被检出,其中norA、gyrA、grlA和blaZ 4种基因的检出率均达到了100%,未检出tet (O)、optrA、Lin (A)、fexA和cfr基因。PFGE分型结果显示受试菌株间亲缘关系较近;dru分型检出dt11v和dt10a两种型,其中以dt11v(77.8%, 7/9)为主;agr分型主要为agr-Ⅰ型(88.9%, 8/9),agr-Ⅱ型仅有1株。研究表明宁夏地区奶牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的肠毒素基因和耐药基因分布广泛,菌株间亲缘关系较近,agr-Ⅰ-dt11v为MRSA菌株中的流行基因型。这为以后宁夏地区奶牛源MRSA的产毒性、耐药性和分子流行病学特征的进一步研究提供理论依据。     

金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药特点及其Panton—Valentine杀白细胞素基因的携带状况分析

目的分析金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药性特点及其Panton—Valentine杀白细胞素基因的携带状况。方法回顾性调查了温州医学院第一附属医院2005年1月至2006年1月医院感染的金黄色葡萄球菌所致肺部感染患者132例,对其体外药敏试验进行分析;并利用多重PCR检测其PVL基因,应用多位点基因序列分型（multilocus sequence typing,MLST）技术对PVL基因阳性的菌株进行序列分型。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）的SCCmec基因分型采用多重聚合酶链反应。结果致肺部感染的132株金黄色葡萄球菌的耐药现象较为严重,仅对万古霉素、呋喃妥因及复方新诺明等药物的敏感率较高;其中经多重PCR筛选出10株携带PVL基因的金葡菌,全部为MRSA菌株,3株为ST239-SCCⅢ,2株为ST398-SCCmecⅢ,2株为ST398-SCCmecⅣ,ST25-SCCmecⅢ、ST59-SCCmecⅠ和ST88-SCCmecⅢ各1株。结论肺部感染的金黄色葡萄球菌对多种抗生素耐药,呈多重耐药性;其携带PVL基因占一定比例。