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水稻谷氨酰胺合成酶同工酶免疫学性质比较研究 总被引:5,自引:0,他引:5
用纯化的水后(Oryza sativa L.)根部存在的两种谷氨酰胺合成酶(GS)同工酶GSra和CSrb分别免疫兔子,得到相应的抗体。免疫扩散和免疫印迹实验表明,CSra、GSrb的抗体对GS及其同工酶是的。免疫沉淀试验表明,GSra、GSrb不仅识别它的相应的抗原,而且也能很好地识别彼此的抗原。这两种抗体也能较好地识别水稻叶片胞液型的GST,但对水稻叶片和菠菜(Spinacia olerace 相似文献
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谷氨酰胺合成酶基因GS1和GS2的高效表达增强转基因水稻对氮素缺乏的耐性 总被引:13,自引:0,他引:13
构建了同时含有胞质谷氨酰胺合成酶(GS1)cDNA和叶绿体谷氨酰胺合成酶(GS2)cDNA的植物表达载体p2GS,通过农杆菌介导法用它们转化了水稻品种"中花10号"的成熟胚愈伤组织,经潮霉素(Hyg)筛选培养及分化再生,获得了抗Hyg的转基因水稻植株.PCR和基因组Southern杂交分析结果证明,GS1和GS2基因均已经整合到转基因水稻的基因组内.Northern杂交实验结果证实,GS1和GS2基因在转基因水稻的转录水平上得到了有效表达.在以0.7 mmol/L的(NH4)2SO4取代了其中氮成分的MS培养基上测试植株生长量,结果表明转基因植株鲜重增长量显著高于对照,证明高效表达GS增强了转基因水稻对土壤氮素缺乏的耐性. 相似文献
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叶绿体发育和光对小麦叶谷氨酰胺合成酶基因表达的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
利用电镜、DEAE-纤维素柱层析技术和小麦叶谷氨酰胺合成酶(GS)酶活性测定,研究了小麦叶片不同发育梯度的叶绿体超微结构和GS同功酶活性之间的关系。结果表明,从叶基至叶尖,随着叶绿体的成熟,净光合率增加,GS活性增加。各发育阶段离体叶绿体的3H-Ura,3H-Leu 掺入试验和GS的Northern blot表明,基部是基因表达活性最高的部位。GSm RNA 在叶绿体发育阶段最多,而GS酶活性则在成熟叶绿体的部位最高。对黄化苗进行光照,GSm RNA 和GS活性明显增加,72小时达到正常绿苗同等水平。由此说明核编码的叶绿体GS基因为光调控基因,明显促进了叶绿体GS基因的转录,而后叶绿体GS合成量增加 相似文献
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报道了在光照和暗处培养下,不同的浓度的蔗水稻幼苗叶片GS及其同工酶、1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)的影响。无论是在光照或在暗处,蔗糖对GS活性均有抑制作用,尤其是在较高蔗糖下作用更为明显;虽然Rubisco及可溶性蛋白的水平在光照和暗处有显著的差别,但蔗糖对其未见明显影响。NativePAGE与活性染色表明,在光照下或在暗处,蔗糖对GS2的抑制蔗糖浓度升同而加强,但对GS1未有明显影响。这些结果提示,在水稻幼苗生长中,蔗糖不能象不光一样诱导叶水GS活性及其同工酶表达。 相似文献
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光呼吸和谷氨酰胺合成酶抑制剂对水稻冠层NH3挥发的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
在营养液培养条件下,对两个不同氮效率基因型水稻品种扬稻6号和武育粳3号采用光呼吸抑制剂异烟肼(INH)和谷氨酰胺合成酶(GS)抑制剂蛋氨酸亚砜亚胺(MSO)处理,研究其对水稻光合速率、光呼吸速率、GS酶活性及冠层的NH。挥发速率的影响。结果发现:(1)MSO导致剑叶光合速率下降,光呼吸速率升高;INH导致光呼吸速率显著下降,同时一定程度上引起光合速率降低。(2)MSO处理显著降低了GS酶活性,相应地引起NH。挥发速率增加;INH在一定程度上导致NH。挥发速率降低。(3)扬稻6号NH。挥发速率比武育粳3号低的生理原因是光呼吸速率较低和GS酶活性较高。 相似文献
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水稻种子萌发期间谷氨酰胺合成酶和NADH-谷氨酸合酶的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
测定了水稻种子不同萌发时期胚乳、胚芽鞘和幼根的谷氨酰胺合成酶(GS)和依赖于NADH的谷氨酸合酶(NADH-GOGAT)活性变化。胚乳和胚芽鞘的GS活性在萌发过程中升高,幼根的GS活性则有所降低。NADH-GOGAT的活性变化趋势与GS相同。Native-PAGE活性染色表明,在萌发阶段的水稻种子胚乳和幼根里,始终只观察到一种GS活性带。但是,在水稻种子萌发3d后,在胚芽鞘中除继续检测到GS1的活性外,还可以观察到GS2的活性。蛋白质印迹显示,水稻种子胚乳中的GS(GSe)和GS1和GSra一样是一种胞质型GS。实验结果提示,这些不同组织中的GS与NADH-GOGAT构成的循环途径也许是水稻种子萌发时氨同化的主要途径。 相似文献
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光质对水稻幼苗超弱发光和谷氨酸胺合成酶活性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
生长在不同光质下的水稻幼苗叶片的超弱发光随着其生长进程不断增强,光质对UBE有显著影响,生长在白光下的水稻幼苗的UBE明显高于生长在红光或蓝光下的水稻幼苗的UBE,而红光和蓝光处理之间无显著差异。 相似文献
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蔗糖对不同氮源培养下水稻根部氨同化相关酶活性的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
糖、有机酸以及氨基酸影响碳-氮代谢过程中的相关酶的基因表达和活性。将蔗糖分别加入到含有相同氮素浓度的(NH4)2SO4(NH4^+)或丙氨酸(Ala)作为氮源的营养液中培养水稻,测定幼苗根的谷氨酰胺合成酶(GS)、依赖于NADH的谷氨酸合酶(NADH-GOGAT)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)和依赖于NADP的异柠檬酸脱氢酶(NADP-ICDH)的活性。结果显示,蔗糖诱导NH4^+氮源中幼苗根的GS、NADH-GOGAT活性,抑制Ala氮源中幼苗根的这两种酶活性,蔗糖对PEPC和NADP-ICDH活性的影响也不同;未加蔗糖时,以Ala作为氮源的幼苗根的GS、NADH-GOGAT、PEPC和NADP-ICDH的活性明显高于以NH4^+为氮源时的活性;生物量和蛋白质水平的变化与上述参数的变化基本一致。基于Ala碳骨架的存在,这些结果表明,碳/氮平衡是影响这些酶活性差别表达的主要原因。 相似文献
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不同氮源对小麦幼苗谷氨酰胺合成酶的影响 总被引:21,自引:0,他引:21
利用DEAE-纤维素柱层析、酶活性测定、Northern 分子杂交等技术,研究了小麦(Triticum aestivum L.)幼苗的根、叶和离体叶在不同氮源培养条件下谷氨酰胺合成酶(GS)活性和同工酶变化, 以及不同氮源对GS基因转录-GS-m RNA 的影响. 同时与硝酸还原酶(NR)活性进行比较, 结果表明∶当以NH+4 作唯一氮源时,小麦幼苗根谷氨酰胺合成酶(GSr)和叶细胞质谷氨酰胺合成酶(GS1)活性要比以NO-3 作唯一氮源的高.当以NO-3 为唯一氮源时, NO-3 则促进完整叶片和离体叶片叶绿体谷氨酰胺合成酶(GS2)活性. 从转录水平上看,NH+4 促进根GS-m RNA 的合成,而NO-3 促进叶GS-m RNA 的合成 相似文献
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A novel procedure has been developed to produce rice (Oryza sativa L.) tolerant to the herbicide phosphinothricin (PPT) by means of in vitro selection. First, sublethal and lethal concentrations
of PPT on 7-day-old seedlings were determined and morphogenetic events in response to the PPT treatment evaluated. Differentiation
of 6–30 microshoots on 5–40% of the treated plant material was observed on a hormone-free culture medium supplemented with
a sublethal concentration of PPT. We proved that PPT is morphogenetically active, similar to the action of many other herbicides,
showing cytokinin-like effects in rice tissue culture. Fertile plants were grown from those microshoots having PPT tolerance
under greenhouse conditions. To the best of our knowledge, this is the first report on the production of rice plants tolerant
to this herbicide without genetic transformation. Since PPT is a competitive inhibitor of glutamine synthetase (GS), total
GS activity in PPT-tolerant and PPT-sensitive plants was examined comprehensively in order to decide whether this enzyme has
any role in PPT tolerance. An elevated GS activity was detected in PPT-tolerant plant material which could result in an elevated
PPT tolerance at unchanged concentrations of the herbicide.
Received: 20 February 2000 / Accepted: 19 June 2000 相似文献
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南瓜种子萌发及子叶发育时谷氨酰胺合成酶和其它氨同化酶的变化 总被引:3,自引:0,他引:3
在发育的新生组织中 ,来自种子胚乳储存蛋白的降解和氨基酸分解代谢产生的氨由谷氨酰胺合成酶 ( Glutamine synthetase,GS)重新同化 ,生成的谷氨酰胺 ( Gln)被转运到正在生长着的部分。GS是高等植物氮素代谢的关键酶 [1] ,这个酶能同化不同来源的氨。 GS有多种同工酶 ,存在于植物的各种组织和器官中。它们是由一小的同源但分离的核基因家族编码的 [2 3 ] ,这些不同的 GS在植物氮素同化中起着非重叠的作用 [4] ,它们的表达受到环境、发育进程以及组织或细胞类型等许多因素的影响。在大多数已研究过的植物叶片中存在两种 GS,即胞液型GS(… 相似文献
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Abstract Glutamine synthetase (GS) from the purple non-sulfur bacterium Rhodomicrobium vannielii has been purified to electrophoretic homogeneity by affinity chromatography. Molecular weight and catalytic properties of the enzy,e are similar to those described for other species of Rhodospirillaceae. However, the enzyme from this organism appears to be antigenically different from the glutamine synthetases of other species of Rhodospirillaceae studied. 相似文献
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Suvendra N. Bagchi Upendra N. Rai Amar N. Rai Hriday N. Singh 《Physiologia plantarum》1985,63(3):322-326
Nitrogen regulation of nitrate uptake and nitrate reductase (EC 1.7.99.4) was studied in the cyanobacterium Anabaena cycadeae Reinke and its glutamine auxotroph. Development of the nitrate uptake system preceded, and was independent of, the development of the nitrate reductase system. The levels of both systems were several-fold higher in the glutamine auxotroph lacking glutamine synthetase (EC 6.3.1.2) than in the wild type strain having normal glutamine synthetase activity. The nitrate uptake system was found to be NH4-repressible and the nitrate reductase system NO3 − -inducible. NH4 + was the initial repressor signal for the uptake process which was involved in the control of the NO3 − inducible reductase system. 相似文献