虎纹捕鸟蛛毒腺cDNA文库的构建

从 2 5只虎纹捕鸟蛛 (Selenocosmia huwena)中得到约 0 .6g左右的毒腺 ,从中提取出5μg m RNA.以此 m RNA为模板 ,经反转录合成双链 c DNA.再经包装成 c DNA文库 .文库的滴度达到 3.2× 1 0 7pfu/m L     

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ cDNA克隆及序列

 从中国珍稀毒蛛种虎纹捕鸟蛛 (Selenocosmia huwena)毒腺中分离纯化的虎纹捕鸟蛛毒素 - (Huwentoxin ,HWTX- ) ,其一级结构、二级结构和溶液构象均已阐明 ,生理功能实验已证实 HWTX- 是一种作用于突触前膜的神经毒素和高阈值钙通道抑制剂 .为深入开展对 HWTX- 的应用研究 ,根据 HWTX- 多肽氨基酸序列 ,设计其 N-端、C-端和中间段 3组简并引物 (引物 、引物 和引物 ) .从虎纹捕鸟蛛毒腺提取制备 m RNA,逆转录合成 c DNA.以引物 和引物 为引物 ,采用 PCR方法对虎纹捕鸟蛛毒腺总 c DNA进行简并引物扩增 ,得到两条相对特异性的 DNA片段 ,产物直接与 PCR克隆载体 p UC- T连接 .重组子经原引物再次 PCR扩增和同位素标记引物 进行 Southern分子杂交鉴定 .对 4个重组子测序结果表明 ,有 1个重组子所对应的氨基酸顺序与 HWTX- 一致 ,Gen Bank数据检索说明 HWTX- c DNA编码序列确实是一个从未报道的序列 .本研究结果为 HWTX- 在真核细胞表达 ,大量获取蜘蛛毒素组分奠定了基础 .     

虎纹捕鸟蛛生物学的初步观察

虎纹捕鸟蛛Selenocosmia huwena Wang et al.,产自广西宁明县。雌蛛比雄蛛个体大,体长约6～9mm;步足长约7～10 cm,重46～58g;遍体多黑褐色绒毛和长毛,腹部背面有5条虎皮状花纹。螯爪长约1cm。该蛛穴居地下,穴呈圆形,结构简单,深约50～100 cm,洞口布以蛛网。据文献报道,该蛛毒液具有较强的哺乳动物毒性和一定的昆虫毒性,在开发新型抗感染、抗肿瘤药物方面可能有一定的前景。1995～1998年期间,笔者在室内自然变温条件下对虎纹捕鸟蛛生活史进行了初步观察,现整理报道如下。     

三种蜘蛛粗毒对NG108—15细胞电压门控钠通道的抑制作用

利用小鼠神经细胞瘤×大鼠神经胶质细胞的杂交细胞NG108-15,通过全细胞记录(whole-cellrecording)模式的膜片钳技术,检验了虎纹捕鸟蛛(Selenocosmia huwena)、海南捕鸟蛛(Selenocosmia hainana)和广西大疣蛛(Macrothele guangxiasp)的粗毒对NG108-15细胞膜上电压门控TTX敏感型钠电流和延迟整流钾电流的作用.结果表明,三种蜘蛛粗毒对外向延迟整流钾电流没有明显作用,但对TTX敏感型的快钠电流表现出较强的抑制效应.抑制效应呈量效关系.三种粗毒抑制钠电流的EC     

病态虎纹捕鸟蛛器官元素特点分析

采用火焰原子吸收分光光度计,对不同病症的虎纹捕鸟蛛Selenocosmia huwena（Wang et al,1993）的4种器官组织中的5种元素（铁（Fe）、铜（Cu）、锌（Zn）、锰（Mn）、镁（Mg）、钙（Ca））的含量进行了测定。结果表明：这5种元素在病症蜘蛛中的含量与正常蜘蛛相比均有很大差异。本文首次从元素的缺乏或过多积累方面分析了蜘蛛的致病原因。为其人工繁育、开发利用和资源保护提供基础资料。     

虎纹捕鸟蛛毒素-III及其天然突变体的纯化与鉴定(英文)

虎纹捕鸟蛛毒素 III及其天然突变体是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离得到的两个毒素多肽。虎纹捕鸟蛛毒素 III含 33个氨基酸残基 ,其中包含 6个半胱氨酸残基 ;而其天然突变体只比虎纹捕鸟蛛毒素 III少了C端的色氨酸残基。MALDI TOF质谱测得虎纹捕鸟蛛毒素 III及其天然突变体的分子量分别为 385 3.35和 36 6 7.4 0。通过比较其理论分子量和质谱测定的分子量表明两个多肽的 6个半胱氨酸残基分别形成了三对二硫键。虎纹捕鸟蛛毒素 III与从同一种蜘蛛分离得到的凝集素 I具有 70 .5 %的序列相似性。生物学活性实验表明 ,虎纹捕鸟蛛毒素 III具有使美洲蜚蠊可逆的致瘫作用 ,其半有效剂量 (ED50 )为 (1 92 .95±1 2 0 .84 ) μg/g (P =0 .95 ) ,而且能加强由电刺激引起的大鼠输精管收缩 ;而其天然突变体却不具有上述生物学活性 ,表明C端色氨酸残基为虎纹捕鸟蛛毒素 III生物学活性相关残基 ;同时虎纹捕鸟蛛毒素 III及其天然突变体都不具有类似于凝集素 I对红细胞的凝集活性 ,表明虎纹捕鸟蛛毒素 III和凝集素 I两者氨基酸序列中不同氨基酸残基对于决定两者的生物学活性有着重要的作用     

虎纹捕鸟蛛毒素HWTX—Ⅱ的^1H—NMR信号归属和二级结构分析

虎纹捕鸟蛛毒素HWTX-Ⅱ是从虎纹捕鸟蛛Selenocosmia huwena的毒液中分离出的一种新型杀虫肽。应用2D－NMR技术研究该毒素分子的溶液结构特点,通过分析水及重水DQF－COSY、COSY、TOCSY和NOESY等^1H－NMR谱,识别出HWTX-Ⅱ全部37个氨基酸残基自旋体系;通过NOESY谱中的dαN、dαδ、dβN和dNN联系完成了序列专一的谱峰归属,确认了所有主链质子和除了Lys侧链εNH2质子外的所有侧链质子的化学位移,为完全解析HWTX-Ⅱ的溶液三维象奠定了基础,并且通过核磁数据分析,确定HWTX-Ⅱ的二级结构特点是含有较多的伸展构象,尤其是C端有一个典型的双股反平行的β折叠（Trp27-Cys29和Cys34-Lys36),分子中缺乏螺旋结构,这些二级结构特点与已探明结构的其他蜘蛛毒素的基本相同。     

我国南方捕鸟蛛一新种的生物化学鉴定(蜘蛛目,捕鸟蛛科)

采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、激光解析基质辅助电离飞行时间质谱（ＭＡＩＤＩ－ＴＯＦＭＳ）和蛋白质序列分析方法,对从我国海南通什地区发现的一种捕鸟蛛与广西虎纹捕鸟蛛（Ｓｅｌｅｎｏｃｏｓｍ ｉａｈｕｗ ｅｎａ）的毒液进行了比较分析． 虽然两种蜘蛛形态十分相似,但其毒液的化学组成和主要毒素的氨基酸序列存在明显的差异,说明两种蜘蛛在进化上有同源性但分化很早．应列为不同种,特将海南发现的蜘蛛新种定名为海南捕鸟蛛,新种Ｓｅｌｅｎｏｃｏｓｍ ｉａ ｈａｉｎａｎａ ｓｐ．ｎｏｖ．     

用RAPD技术检测不同生态类型蜘蛛代表品种的基因组DNA多态性

蜘蛛有3种生态类型,即洞穴型、结网型和游猎型。利用RAPD技术检测3种生态类型蜘蛛的代表品种,即白额巨蟹蛛(游猎型)、漏斗蛛(结网型)、虎纹捕鸟蛛和七纺器蛛(洞穴型)的基因组DNA的多态性。用11个随机引物对3种生态类型的代表蜘蛛的基因组DNA进行扩增,平均每个品种观察到约22.5个标记,单个引物获得的标记在4～13个之间。实验结果经统计学分析表明,L纺器蛛和虎纹捕鸟蛛的随机扩增多态DNA共享度(F)高,在分子水平上进一步证实了同生态类型蜘蛛的亲缘天系最近,聚类结果表明,3种类型蜘蛛的总体演化趋势为:洞穴型 结网型—游猎型,与以往的形态学研究相符。     

虎纹捕鸟蛛毒的生物学活性鉴定

本文报道了采集广西产虎纹捕鸟蛛（Selenocosmia huwena)毒液的方法,并对粗毒进行了部分生物学活性的测定,该粗毒对小鼠和蜚蠊的LD50分钟为1．16mg/kg和300ug/g,该粗毒具有透明质酸酶,碱性磷酸酶,蛋白水解酶和脱氧核糖核酸酶活性,未测到磷脂酶A和胆碱脂酶性,通过电生理实验发现该粗毒含有阻断蟾蜍神经肌肉接头传递的毒素,并观察到当小鼠接受腹腔注射致死剂量（5mg/kg)粗毒后便迅速出现呼吸麻痹。     

春玉米不同产量群体叶面积指数动态特征与生态因子资源量的分配特点

利用吉林桦甸连续3年的田间试验结果,结合气象观测资料,对春玉米群体叶面积指数动态特征及不同产量水平下的生态因子资源量的分配特点进行了研究.结果表明：以相对生长天数、相对有效积温、相对日照时数和相对降雨量为自变量的相对叶面积指数动态模型均符合有理方程：y=（a+bx）/（1+cx+dx²）;产量（y）与吐丝前后生长天数比值（x₁）、吐丝前后有效积温比值（x₂）、吐丝前后降雨量比值（x₃）以及吐丝前后日照时数比值（x₄）的回归方程为y=5465.19+17810.64x₁-23236.14x₂+4093.41x₃+6287.37x₄(R²=0.8187,P<0.01),各生态因子对产量的影响按照偏回归系数绝对值排序为x₁>x₂>x₃>x₄;超高产（15499.86 kg·hm^-2）生态因子资源量在吐丝前与吐丝后的比值分别为：生长天数1.43、有效积温1.41、降雨量1.44、日照时数1.40.在东北地区,适期早播,在延长总生长天数的前提下适当增加吐丝前的生长天数、降雨量以及日照时数均能提高产量,当生长天数、有效积温、降雨量以及日照时数在吐丝前与吐丝后的分配比值均约为1.4时,可获得高产、超高产.     

养分供应对3种舞花姜属植物繁殖方式的影响

该研究选用的3种舞花姜属植物中,毛舞花姜(Globba barthei)和双翅舞花姜(G. schomburgkii)自然条件下开花不结实,以珠芽进行繁殖;异果舞花姜(G. racemosa)则同时以种子和珠芽进行繁殖。在人工栽培条件下,高养分处理显著增加毛舞花姜的珠芽干重((1.11±0.10) g vs. (3.08±0.69) g,p=0.010 7)、珠芽数量((30.58±2.92) vs. (74.74±9.73),p=0.000 4)、珠芽大小((10.5±1.48) mg vs. (53.50±11.42) mg,p=0.001 5)、植株营养体重((3.99±0.23) g vs. (9.67±1.17) g,p=0.000 2)和双翅舞花姜的珠芽数量((51.74±3.64) vs. (108.71±21.52),p=0.018 1)。不同养分条件下两种舞花姜的开花数量无显著差异。人工去除珠芽、花对两种舞花姜植株当年生花和珠芽的数量无显著影响(p<0.05)。自然条件下异果舞花姜不同居群间珠芽大小、珠芽数、珠芽重、果实重、种子数和营养体重等均存在极显著差异(p<0.001)。异果舞花姜各居群植株珠芽数和营养体重(r=0.901,p<0.05)、珠芽重和珠芽大小 (r=0.849,p<0.05) 呈显著正相关;果实重和种子数(r=0.998,p<0.05) 呈显著正相关。土壤因子主成分分析表明前3个主成分提供的信息量分别为50.575%、18.204% 和11.883%,其中第一主成分中的全氮(0.959)、速效氮(0.885)和有机质(0.821)负荷量最大,第二主成分中土壤速效磷(0.824)负荷量最大。植株营养体重和土壤速效磷极显著正相关(r=0.906,p<0.01),珠芽大小与全氮(r=0.798)、速效氮(r=0.780)和有机质(r=0.821)均呈显著正相关(p<0.05)。果实重和种子数与土壤因子相关性不显著(p<0.05)。3种舞花姜的无性繁殖器官更易受到养分供应的影响,有性繁殖器官对养分供应变化响应不显著,有性和无性繁殖之间似不存在补偿关系。     

人工圈养瓶鼻海豚的体重与体长的相关性分析

运用简单线性相关及回归分析方法,对人工圈养条件下20头太平洋瓶鼻海豚(Tursiopsgilli)的体重与体长的相关性分析结果表明,海豚体重与体长呈显著正相关(r=0.960,P<0.01),其体重随体长变化的回归方程为^Y=2.19X-368.65;体重与体长的比值随着体长的增加而增加,且呈直线趋势。依据海豚体重与体长的相关分析来控制其体重,从而提高科学饲养管理水平,使海豚的摄食量、训练行为与健康之间保持平衡,是很有必要的。     

应用混合模型和分位数回归分析东黄海小黄鱼肥满度空间异质性

基于2008-2010年黄海南部近海(SYS)、东海北部外海(NECS)和东海中部近海(MECS)小黄鱼体长和体质量数据,采用均值回归和分位数回归模型,解析了小黄鱼幼鱼和成鱼群体体长-体质量关系的空间变异.结果表明: 协方差模型和线性混合模型的残差标准误基本一致,线性模型残差标准误最高.从线性混合模型对特定区域和总体区域平均体质量计算的相对比值来看,SYS和NECS幼鱼群体的平均体质量高于总体平均值,但MECS低于总体平均值;成鱼群体则为NECS平均体质量高于总体平均值,MECS和SYS低于总体平均值.分位回归估计的肥满度和异速生长指数结果显示,幼鱼群体在不同分位的估计参数呈显著变化,SYS异速生长指数均值为2.85,在0.1~0.95分位的估计值变化范围为2.63~2.96.MECS和NECS参数估计值和置信区间在各分位数呈异质性变化,低分位时,NECS估计值在3个调查区域中最低,MECS最高;高分位时,MECS和NECS均高于SYS.对低分位0.25、中分位0.5和高分位0.75分位数的异速体长体质量关系的方差分析结果显示,低分位和高分位数之间体长 体质量关系极为显著(0.25∶0.75,F=6.38,df=1737,P<0.01),低分位数和中分位数之间为显著(0.25∶0.5,F=2.35,df=1737,P=0.039),中分位数和高分位数之间接近显著(0.5∶0.75,F=2.21,df=1737,P=0.051).成鱼群体SYS异速生长指数均值为3.01,在0.1~0.95分位的估计值变化范围为2.77~3.10.低分位和高分位数之间体长 体质量关系差异达到显著水平(0.25∶0.75,F=3.31,df=2793,P=0.01),低分位和中分位之间差异不显著(0.25∶0.5,F=0.98,df=2793,P=0.43),而高分位和中分位之间则差异极显著(0.5∶0.75,F=3.56,df=2793,P<0.01).     

意蜂王浆生产性能形态学遗传标记的研究

测定19只工蜂头部咽下腺的两条腺体长度和重量,经生统t检验,发现同一工蜂的左、右两条咽下腺长度、重量差异都不显著（P＜0.05）。测定11群 "浙农大1号"意蜂(Apis mellifera ligustica)的330只工蜂的头重、体重、头体重比、咽下腺小囊数和咽下腺长度。在2001年3月30日至4月26日浙江淳安的油菜和紫云英花期测定试验蜂群的王浆产量,分析工蜂头重、头体重比、咽下腺小囊数和咽下腺长度与每千克蜂的王浆产量之间的相关性,发现咽下腺长度与王浆产量的相关性最大,小囊数次之,咽下腺长度可作为意蜂王浆生产性能较理想的形态学遗传标记。 Abstract:The lengths of hypopharyngeal glands (HG) from the left and right side were determined in 19 workers of honeybee(Apis mellifera ligustica).There were no significant differences (P＜0.05) in length between the left and the right in one worker′s hypopharyngeal gland.Three hundred and thirty workers were collected from eleven colonies of "ZND No.1" Italian honeybee(Apis mellifera ligustica) respectively.Head weight,body weight,ratio between head weight and body weight,bursa number and length of hypopharyngeal gland(HG)were tested in these samples.Royal jelly productions were determined during the flowing period of rape and Chinese milk retch from March 30 to April 26 in Chun′an County of Zhejiang Province in 2001.The correlation analysis between royal jelly production and head weight,ratio between head weight and body weight,bursa number of HG,and length of HG were conducted.The correlation coefficient between royal jelly production and length of HG was the largest.The correlation coefficient between royal jelly production and bursa number was the second.It was suggested that the length of HG could be used as one of genetic markers for the production performance of royal jelly.     

Multivariable analysis of serum 3,5,3'-L-triiodothyronine concentration in patients of diabetes mellitus by blood glucose level and body weight

Serum thyroid hormone concentrations, 1-thyroxine (T4), free T4 and 3,5,3'-l-triiodothyronine (T3) were measured in 213 patients of diabetes and analyzed their correlation with metabolic parameters, hyperglycemia and body weight. Haemoglobin A1 (HbA1) was used as an index of hyperglycemia. Body weight was expressed by relative body weight (body weight/standard weight). Among the thyroid hormones, only T3 had significant correlation with HbA1 and body weight (r = -0.476, P less than 0.01 and r = 0.369, P less than 0.01, respectively). Multivariable analysis of serum T3 by HbA1 and relative body weight gave the following regression equation. Serum T3 (ng/dl) = 108 + 0.362 x relative body weight (%) - 3.88 x HbA 1 (%). Though relative body weight had inverse correlation with HbA1, the contribution of the two metabolic parameters to the serum T3 was independent from each other. Our results confirm the previous reports that low T3 in diabetes correlates with severity of hyperglycemia and we report for the first time that serum T3 of diabetic patients has positive correlation with body weight, probably due to still available carbohydrate in spite of disturbances in the metabolism.     

基于20 cm蒸发皿蒸发量制定的华北地区温室黄瓜滴灌灌水制度

试验分别于2013和2014年在中国农业科学院新乡综合试验基地进行,以20 cm蒸发皿蒸发量（E_p -20）为灌水依据,设置5种水面蒸发系数（K_cp1:0.25;K_cp2:0.5;K_cp3:0.75;K_cp4:1.0;K_cp5:1.25）代表5种灌水水平,分析了不同水量（I_r）对温室黄瓜滴灌耗水量（ET）、产量、品质以及水分利用效率（WUE）的影响,探讨了以E_p -20制定温室滴灌灌水计划的可行性.结果表明：温室滴灌黄瓜整个生育期内的耗水量在129~314 mm,耗水量随着灌水量的增加而增加.当灌水量超过0.75E_p 20时,各处理之间的产量无差异,平均单果质量、单株瓜条数和平均瓜长对灌水量的响应均存在一个阈值（0.75E_p 20）;品质方面,可溶性固形物、维生素C和可溶性糖含量均随着灌水量的增加而降低,而可溶性蛋白质含量为：K_cp2＞K_cp3＞K_cp4＞K_cp1＞K_cp5;采用修正后的Penman Monteith公式计算温室滴灌黄瓜参考蒸发蒸腾量所得结果与E_p -20呈极显著线性相关关系.可见,在华北地区日光温室黄瓜的滴灌灌水制度选用0.75倍的20 cm蒸发皿水面蒸发量作为灌水依据简单可行.     

滨海盐土土壤水分的高光谱参数及估测模型

基于滨海盐土5个试验点的土壤含水量和室内土壤表面高光谱反射率,综合分析了350～2500 nm波段范围内土壤含水量与土壤光谱之间的关系,并基于比值光谱指数(RSI)、归一化光谱指数(NDSI)和差值光谱指数(DI)确定了光谱参数,进而构建土壤含水量估测定量模型.结果表明： 滨海盐土原始光谱反射率与土壤含水量呈显著负相关关系,且最大负相关出现在1930 nm(r=0.86)附近.对RSI、NDSI和DI的直线回归方程、幂函数回归方程进行对比,以RSI(R₁₄₀₇,R₁₄₅₉)为自变量构建的土壤含水量指数函数线性回归方程决定系数最大(0.780),标准误较小(0.016),拟合方程为y=0.00001e^9.72053x.估测模型能够更好地监测滨海盐土土壤水分状况.基于RSI(R₁₄₀₇,R₁₄₅₉)构建的模型可实现对江苏省滨海盐土土壤水分的精确监测.     

西双版纳热带季节雨林与橡胶林土壤呼吸

季节雨林和橡胶(Hevea brasiliensis)林是西双版纳热带森林生态系统中原始林和大面积种植人工林的两种代表类型。热带季节雨林层次结构复杂,多样性丰富,而橡胶林结构简单,乔木层只有橡胶树1种。应用碱吸收法,研究了这两种植被类型土壤呼吸速率、地下5 cm土壤温度、气温和土壤含水率的季节变化规律,以及土壤呼吸速率与地下5 cm土壤温度、气温和土壤含水率的关系。结果表明:1)季节雨林和橡胶林土壤呼吸速率、土壤温度、气温和土壤含水率都有明显的季节变化,而且两种林型的变化趋势基本一致;2)季节雨林和橡胶林土壤呼吸速率与地下5 cm土壤温度和气温之间具有显著的指数相关关系,显著水平达1%,与地下5 cm温度的相关性(r²分别为0.87和0.82)明显高于与气温的相关性(r²分别是0.80和0.72);3)季节雨林和橡胶林土壤呼吸速率与土壤含水率具有显著的线性相关(r²分别是0.73和0.63),显著水平达1%;4)橡胶林的土壤呼吸速率明显高于季节雨林,这与两种林型的结构有关;5)季节雨林和橡胶林土壤呼吸的Q₁₀分别为2.16和2.18,比文献报道的热带土壤的Q₁₀(1.96)稍高。     

吉林省西部生态支撑能力与社会经济发展的动态耦合

利用协调发展模型和剪刀差方法,对1986—2004年间吉林省西部生态支撑能力［F(x)］和社会经济［F(y)］的耦合关系进行了分析.结果表明：研究期间,吉林省西部F(x)呈先下降后略有上升的趋势,而F(y)总体呈指数形式增长;受自然和人为因素影响,F(x)和F(y)具有明显的脆弱性;F(x)和F(y)的剪刀差α从1986年的4.93°下降到1996年的0.28°,后又上升至2004年的12.30°;1995—2004年间,吉林省西部由以损害F(x)促进F(y)发展的状态正逐渐向两者协调发展状态过渡,F(x)和F(y)的耦合协调度由轻度或濒临失调衰退类型转变为勉强或初级协调类型,但这种刚发展起来的初级协调状态仍存在较大的不稳定性;1995年后,α增长较快且协调度C波动强烈F(x)和F(y)冲突较强烈,研究区处于生态环境问题的多发期;相比单一的协调发展模型,与剪刀差方法结合可从发展状态和演变速率2个角度来表征F(x)和F(y)的相互作用,它既能反映两者发展的均衡程度又能反映两者的冲突强度,可更加全面和深入地探讨生态支撑能力和社会经济发展的耦合关系.