果蝇唾腺染色体制片方法的改进

1　果蝇的培养培养基为常规的玉米粉培养基 ,培养基要松软、含水量较高、发酵良好。放入 7～ 8对果蝇 ,在 18℃恒温培养。待幼虫出现后 ,将其移至 10～ 12℃恒温培养 ,稍低的温度有利于幼虫的充分生长发育 ,实验时选用肥大的三龄幼虫作为材料 (最好选雌性幼虫 )。2　唾腺的剥离将幼虫放在滴有一滴低渗液 ( 0 .0 75% KCl)的载片口 ,实验者两手各持一枚解剖针 (或大头针 ) ,在解剖镜下左手用解剖针压住幼虫尾端 1/ 3处 ,右手用解剖针自幼虫口沟慢慢地向前拉出 ,一对唾腺也随之被拉出。拉出的唾腺带有脂肪体 ,在低渗液下处理几分钟 ,用解剖针…     

条背萤幼虫水生适应性形态与游泳行为研究

研究了条背萤Luciolasubstriata幼虫的形态特征及其对游泳行为的适应。形态及扫描电镜观察发现,条背萤幼虫存在二态现象。1～2龄幼虫虫体扁平,多毛。有7对呼吸鳃,分别位于腹部第1～7节。3～6龄幼虫虫体扁平呈船形,无呼吸鳃,靠气管呼吸。二者均具有扁平桨状的足、燕尾状尾节及位于尾节末端的圆柱形粘附器官。条背萤幼虫游动时身体腹面朝上,呈仰泳姿态,足向后划水。3～6龄幼虫仰泳时足共有8种摆动姿势。幼虫仰泳时足摆动1个周期所需时间为(0.611±0.16)s。腹部末端可上下左右摆动,当幼虫向前游动时,尾部上下摆动1个周期所需时间为(1.795±0.44)s。幼虫的游泳速度为(0.85±0.16)mh。仰泳中的幼虫改变方向时,头部和尾部同时向身体的一侧弯曲,当头部与尾部呈近90°时,幼虫用力将尾部伸直,此时水产生一个反作用力继续推动幼虫转向,幼虫转向的范围为0～90°。条背萤2种类型幼虫呼吸系统的不同决定着幼虫外部形态的差异及游泳行为的不同,而导致这种呼吸系统、形态及运动行为不同的原因很可能是条背萤对环境的适应性进化。     

利用体腔显微注射法实现非编码RNA在家蚕头部稳定过表达

【目的】通过体腔显微注射非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)过表达载体,研究注射后ncRNA在家蚕Bombyx mori幼虫不同组织中的表达情况,探索研究家蚕ncRNA功能的便捷方法。【方法】利用显微注射仪(玻璃显微注射针)在家蚕5龄第3天幼虫第7-8腹节褶皱处分别注射家蚕ncRNA Bm-15和Bm-152过表达载体piggyBac[A3-EGFP-A3-Bm-15]和piggyBac[A3-EGFP-A3-Bm-152],注射48 h后提取家蚕幼虫头、胸、尾部、腹部背板、腹部腹板和丝腺总RNA,荧光定量PCR检测Bm-15和Bm-152在家蚕幼虫不同组织中的表达情况。【结果】采用玻璃显微注射针造成的创伤面小,注射后家蚕出现感染和死亡的比例低于10%。注射ncRNA Bm-15过表达载体后,在家蚕幼虫头部和尾部都检测到Bm-15的显著性过表达,头部中Bm-15表达量较注射piggyBac[A3-EGFP]空载体时上升了17倍,在其他4个组织中Bm-15表达量与正常饲养组家蚕对照相比变化不显著。注射Bm-152过表达载体后,同样在家蚕幼虫头部和尾部都检测到Bm-152的显著过表达,其中头部中的表达量较注射piggyBac[A3-EGFP]空载体时上升了6. 6倍。腹部背板和丝腺中Bm-152过表达效果也较明显,分别是注射piggyBac[A3-EGFP]空载体时表达量的3. 4和4. 5倍。【结论】体腔显微注射ncRNA过表达载体可以实现ncRNA在家蚕头部中稳定过表达。本研究为后续研究神经相关ncRNA的功能提供了较好的思路和方法。     

几种不同因子对哥伦比亚食道口线虫离体发育的影响

本文研究了二氧化碳、温度、犊血清和鸡胚提取物等对哥伦比亚食道口线虫(O.columbianum)感染性幼虫(L_3)发育至第四期幼虫(L_4)的影响;对培养前后虫体的形态学(着重在头部、口、排泄系统、肠和尾部)变化进行了详细的观察和描述。     

果蝇幼虫唾液腺简易分离法

由于分离果蝇幼虫唾液腺需要解剖镜或带支架的放大镜,而且操作难度较大,所以果蝇唾液腺染色体观察的实验在许多中学难以进行。作者经过摸索实践,找到了一个只需解剖针和吸水纸(可用草纸代替),凭肉眼即能有效分离幼虫唾液腺的简便方法,现简介如下。     

我国结膜吸吮线虫在是间宿主—变色纵眼果蝇体内发育过程的研究

以结膜吸吮线虫产在家兔眼分泌物仙的初产蚴和解剖雌虫子宫内的幼虫,喂饲实验室繁殖的变色纵眼果蝇进行感染,证明了变色纵眼果蝇可作为我国结膜吸吮线虫的是间宿主。经终宿主眼分泌物中的初产蚴喂饲果蝇,结果在感染后第１６天,于存活的１１只果蝇中,在２只雄蝇的口器和头部检出感染期幼虫９条。用取自雌虫体内的幼虫,平均每蝇５条幼虫的比例喂饲感染６０８只果蝇,结果检出阳性蝇１０６只,其感染率为１７．４％。并发现幼虫在     

用苍蝇幼虫观察多线染色体

用苍蝇幼虫即蛆观察多线染色体,能达到取材方便、剖离观察容易、成功率高的效果。在公共厕所内用镊子轻轻夹取体大、将化蛹的蛆放在清水中冲洗三次,置于载玻片上。将蛆的头部与身体分开,使头部连带着消化道等内脏暴露出来,在消化道两侧有两个透明长囊状腺体为唾液腺。由于苍蝇幼虫比果蝇幼虫大5倍,长达1-1.5cm,所以唾液腺也较大,长约4-6mm,肉眼即可分辨,不需使用解剖镜。脂肪体     

胸窗萤幼虫对灰巴蜗牛的捕食机制初探

本文对胸窗萤Pyrocoelia pectoralis Oliver 4龄幼虫捕食灰巴蜗牛Bradybaena ravida Benson的机制进行了初步探索。通过解剖幼虫消化道进行观察,发现幼虫的食道在与上颚基部骨化结构相连处分为2支,呈Y型结构,分别与2个上颚的中空管道相通;无毒腺结构存在。将幼虫头部及消化道各部分提取液注射到灰巴蜗牛体内后发现中肠提取液对蜗牛的致死效果显著高于头部和消化道其它部分提取液对蜗牛的致死效果(df=68,P<0.05),比较不同浓度中肠提取液对蜗牛致死效果的差异后发现,浓度为5 mg/mL的中肠提取液对蜗牛的致死时间(15.96±4.48)min与幼虫正常捕食的时间(14.47±2.32)min最为相近。     

绿带翠凤蝶

绿带翠凤蝶 Papilio maackii,又称琉璃翠凤蝶 ,是一种翅展超过 10 0 mm的大型凤蝶科种类。由于翅表分布着艳丽的金绿色鳞片 ,使它成为北京比较华丽的蝶种 ,在我国分布于东北、河北及北京的山地。每年 4月时 ,春型的绿带翠凤蝶由越冬的蛹中羽化 ,婚飞交尾 ,并在黄檗这种寄主植物上产下蝶卵 ,孵化出黑色幼虫。随着龄期的增长 ,幼虫从黑色的毛虫变成酷似鸟粪的杂色 ;进入 4龄的幼虫不再保持黯淡的体色 ,而是变成翠绿的蠕虫 ,直至化蛹。绿带翠凤蝶幼虫头部拥有臭腺 ,当受到惊扰时 ,它们会扬起头部 ,迅速翻出一对长长的臭角 ,如图中头顶黄色呈“…     

东北虎3个部位针毛表面超微结构的观察分析

应用扫描电镜技术对东北虎的头部、背部和尾部针毛的表面超微结构进行了观察和比较研究.结果表明,东北虎3个部位针毛均近似为纺锤形;3个部位针毛的3个典型节段之间在鳞片类型、鳞片排列方式、高度和密度差异及游离缘平滑度上均具有较高的相似性和一致性.3个不同部位针毛的近根部鳞片均为扁平型;主体部分鳞片均为杂波型;近梢部鳞片均为冠...     

柑桔爆皮虫幼期各虫态的形态学观察

采用田间观察和室内观察相结合的方法,使用Leica MZ 16A研究型体视解剖镜,对柑桔爆皮虫Agrilus auriventris Saunders幼期各虫态的形态进行了系统的观察。结果发现：卵初产时为乳白色,后变为浅褐色并开始皱缩,末期变为黄褐色,孵化前部分卵壳分离为白色蜡质外层和黄褐色内层两层;幼虫孵化的同时直接从卵壳贴近树皮的一侧蛀入韧皮部,同时将大量虫粪排入卵壳;幼虫随着虫龄的增加钳状突的阶数和口上片的宽度发生有规律的变化,末龄幼虫在木质部作一椭圆形蛹室化蛹,身体的头部和尾部以3∶7的比例对折; 化蛹前的幼虫经历一个身体缩短的预蛹状态;刚化的蛹为乳白色,复眼颜色与身体相似,化蛹后蛹的颜色逐渐变为淡黄色,复眼颜色变为浅红褐色,后期复眼变为红褐色,口器变黑,羽化前蛹的复眼、口器和体表全部变黑;羽化过程中,成虫体表的膨胀导致蛹表皮脱裂,前翅变黑和腹部背面变成碧蓝色后羽化成完整的成虫。本结果进一步支持将柑桔爆皮虫幼虫期分为5龄。     

我国结膜吸吮线虫在中间宿主——变色纵眼果蝇体内发育过程的研究

以结膜吸吮线虫产在家兔眼分泌物内的初产蚴和解剖雌虫子宫内的幼虫,喂饲实验室繁殖的变色纵眼果蝇进行感染,证明了变色纵眼果蝇可作为我国结膜吸吮线虫的中间宿主。以终宿主眼分泌物中的初产蚴喂饲感染果蝇,结果在感染后第16天,于存活的11只果蝇中,在2只雄蝇的口器和头部检出感染期幼虫9条。用取自雌虫体内的幼虫,平均每蝇5条幼虫的比例喂饲感染608只果蝇,结果检出阳性蝇106只,其感染率为17.4％。并发现幼虫在果蝇体内发育主要侵入雄蝇睾丸外层组织和雌蝇的血腔壁形成“虫泡囊”,幼虫在囊内发育至腊肠蚴蜕1次皮,进入感染前期发育阶段,再行第2次蜕皮,而发育成感染期幼虫。发育速度与外界温度密切相关,当外界温度为26.1—31.8℃,发育到感染期幼虫最早天数需要17天。     

鳞翅目幼虫的体皮标本制作法

本文介绍一种简而易行的鳞翅目幼虫体皮标本制作法,其优点是不需要特殊设备和药液,供大家参考: 一、工具准备缝被针(或解剖针)1枚、尖头小剪刀1把、解剖刀(可用其他小刀代替)1把、旧牙刷1把、脸盆(可用大碗代替)2个(盛清水用)、白图画纸若干张、黑照相纸(或图画纸涂墨)若干张、镜框若干或照相薄一册。二、制作方法步骤 1.将采集来的幼虫标本,投     

桉蝙蛾3龄幼虫嗅觉结合蛋白的高表达量与其寄主选择时期的一致性

为分析桉蝙蛾Endoclita signifer幼虫嗅觉蛋白中结合蛋白（OBPs+CSPs）在不同龄期和体段的表达,揭示桉蝙蛾幼虫结合蛋白的时空表达谱,基于表达谱阐明其与幼虫寄主选择行为的关系,本研究利用qRT-PCR分析桉蝙蛾幼虫结合蛋白在4个龄期和3个体段中的表达。在各龄期幼虫的头部中,EsigOBP2、EsigOBP5、EsigOBP8、EsigGOBP2、EsigGOBP3、EsigGOBP6、EsigCSP1和EsigCSP2 均在3龄幼虫头部显著地高量表达,同时82.4%的结合蛋白在幼龄幼虫（3龄和5龄）的某个体段表达量最高。此外,47.1%和35.3%的结合蛋白在桉蝙蛾幼虫腹部和胸部的表达量最高。以上筛选出的8个结合蛋白是桉蝙蛾3龄幼虫在地栖转树栖过程中,参与寄主识别最主要的蛋白;且结合蛋白在3龄幼虫头部的显著高量表达与3龄幼虫转移栖息地和选择寄主相一致,同时结合蛋白在幼龄幼虫中的高量表达可能与选择寄主后幼龄幼虫对寄主挥发物的适应相一致;本研究支持了桉蝙蛾幼龄幼虫寄主选择的推测。与其他昆虫一致,结合蛋白在桉蝙蛾幼虫的腹部和胸部（非嗅觉部位）高量表达,其功能有待解读。     

家鸽睾丸精子超微结构的观察

家鸽(Columbadomestica)精子分为头部、颈部及尾部。尾部又区分为中段、主段及末段。头部呈圆柱形,主要被精细胞核占据,核的前面包绕顶体,后端连接颈部。颈部有两个中心粒,与头部相邻接的是与精子纵轴垂直的近侧中心粒,远侧中心粒形成基底体向后发出尾部的轴丝。轴丝的结构为9+2型。中段在轴丝之外有线粒体鞘包绕,最外面为质膜。主段和末段无线粒体鞘,轴丝之外直接被以质膜。     

豺针毛的扫描电镜观察分析

应用扫描电镜技术对豺Cuon alpinus Pallas头部、背部、前肢、后肢、腹部和尾部针毛的表面超微结构进行了观察和比较研究.结果表明:豺的6种针毛均近似为梭形;6种针毛的3个典型部位之间在鳞片类型、鳞片排列方式、高度和密度差异及游离缘平滑度上均具有较高的相似性和一致性.6种针毛的近根部鳞片为瓣状型;主体部分鳞片为杂波型;近梢部鳞片为冠状型.这将为豺的形态学研究及物种鉴定提供一定的生物学基础资料.     

中国叶甲亚科三种幼虫形态学研究(鞘翅目,叶甲科)

对叶甲亚科3种幼虫进行了形态学研究,这3种幼虫为：菜无缘叶甲Colaphellus bowringii Baly、小猿叶甲Phaedon brassicae Baly和印度柱胸叶甲Agrosteomela indica Gistle,同时给出了各个种的背面整体图、头部和足的形态图。另外,对叶甲亚科的幼虫形态进行了描述,总结出了叶甲亚科的3种幼虫类型,并对该亚科的演化进行了初步探讨。     

北京地区六种叶甲幼虫形态比较研究

通过检索表把北京地区常见的6种叶甲：榆绿毛萤叶甲、褐背小萤叶甲、榆黄萤叶甲、柳圆叶甲、菜无缘萤叶甲、十星瓢萤叶甲的幼虫区分开来。然而利用幼虫侧面图、头部正面图、足的侧面图和幼虫背面图等形态比较,进一步深入体现出它们之间的异同。为农林植保工作者提供参考。     

生精细胞及精子赖氨酸含量的研究

本实验取１０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠的睾丸和附睾,睾丸石蜡切片,附睾精子涂片后用苯胺蓝染色显示赖氨酸含量。结果是睾丸生精小管中精原细胞和精母细胞染色较深即赖氨酸含量较高,精子细胞和精子染色渐淡即赖氨酸含量降低,而附睾精子显示,在附睾头部的精子染色较深,附睾尾部的精子几乎不着色,应用显微分光光度计测定附睾精子,计算出头部的精子赖氨酸含量在１左右,尾部的精子赖氨酸含量接近于零。本实验还检测了１０例正常人及１０例不育者精子的赖氨酸,结果为正常人精子的赖氨酸含量较低,不育者精子赖氨酸含量高且畸形率也高。提示精子赖氨酸含量高是核蛋白转型异常的征象,可能是男性不育的一个重要原因。     

臭椿沟眶象幼虫消化道解剖方法

臭椿沟眶象幼虫消化道柔软脆弱,尤其是1龄与2龄幼虫的消化道纤细易断,解剖难度较大。本文介绍了臭椿沟眶象幼虫消化道的具体解剖方法,根据不同龄期幼虫脂肪含量与消化道韧性差异,对1-2龄和3-7龄幼虫,分别使用纵切法和剥离法解剖。结果表明:臭椿沟眶象幼虫消化道分为前肠、中肠和后肠。前肠为窄而细的管状,没有明显的嗉囊和前胃。中肠分为2部分,前部膨大,后部为光滑的管状。后肠由回肠和直肠组成。马氏管6根。这两个方法提高了此幼虫消化道解剖的效率与成功率,希望能为具有体壁柔软、消化道脆弱易损等特点昆虫幼虫的消化道解剖提供借鉴与参考。