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1.
将人类淀粉样前体蛋白瑞典型突变基因（APPSW）与血小板衍生的生长因子α链（PDGFα）的顺式调控因子结合,构建成PDGF－APPSW转基因;并通过原核显微注射法将之导入C57小鼠受精卵内,成功地获得PDAPSW转基因小鼠模型,共出生22只仔鼠,其中5只基因组内有PDAPSW整合。 相似文献
2.
目的:为了更好地评价基因编辑效率,满足高通量筛选应用中快速、高效的检测要求,在细胞上建立一个原位检测方法具有重要的意义。通过检测荧光蛋白信号强度的变化可以评价CRISPR系统在细胞中的基因编辑情况,然而这一方法的效率受限于荧光蛋白较长的半衰期。方法:将鸟氨酸脱羧酶降解结构域(含PEST序列)与EGFP融合,通过慢病毒系统感染HEK-293T细胞,获得了表达单拷贝、EGFP-PEST报告基因的稳转细胞系。结果:与EGFP相比,EGFP-PEST在细胞内的降解速度明显加快,荧光水平在4 h内显著降低。利用该模型比较了3种商品化脂质体介导的CRISPR/Cas9基因编辑效率,能够在2~4 d实现定性和定量评价。结论:这一模型能够快速、灵敏地指示基因编辑效果,可以用于不同CRISPR系统或新递送工具的高通量筛选和评价。 相似文献
3.
探讨丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase,MAPK)相关蛋白丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶(Mitogen activated protein kinase phoshatase-1,MKP-1)和磷酸化细胞外信号调节激酶(Extracellular sigIlal-regulated kinases,ERK)在大鼠脊髓损伤后表达的变化及其意义.20只SD大鼠随,机分为实验组及假手术对照组.实验组采用改良Allen'S打击法制作脊髓损伤动文为实验组及假手术对照组同法暴露脊髓,但不损伤脊髓.2组大鼠术后12h取手术段脊髓,用苏木精--伊红染色观察损伤脊髓组织病理变化和检测脊髓标本损伤段的MKP-1和磷酸化ERK蛋白表达的差异.实验组脊髓HE染色显示存在大量出血坏死后形成的囊腔,组织和神经细胞水肿以及神经纤维溶解消失.免疫组化和Western Blot结果发现.术后第12h实验组MKP-1蛋白的表达减少,同时磷酸化ERK-1蛋白的表达量却明显增加,差别有显著性意义(P<0.01).脊髓组织受重物打击后可下调MKP-1蛋白的表达,同时显著增加磷酸化ERK蛋白,而这可能是脊髓损伤的机制之一. 相似文献