小鼠抗天花粉蛋白IgE单克隆抗体的制备、分离和鉴定(英文)

天花粉蛋白是中药天花粉的有效引产成份,在应用中它偶尔也引起过敏反应。我们用杂交瘤技术建立了一株分泌抗天花粉蛋白特异性IgE单克隆抗体的杂交瘤细胞系。在实验中,二次免疫的C57 BL/6 J小鼠的肠系膜淋巴结细胞和脾细胞分别被用来同NSI骨髓瘤细胞进行融合。虽然在融合前动物血清IgE抗体效价仅为40～160 PCA滴度,但用肠系膜淋巴结细胞进行的4次融合都产生了IgE杂交瘤。阳性率为1.0-6.7%。对比之下,用脾细胞进行的另外两次融合却没有观察到IgE杂交瘤产生,统计结果说明差异显著(P<0.05)。该IgE单克隆抗体可以在体内和体外诱发大鼠肥大细胞脱颗粒。56℃热处理2小时能使该抗体诱导PCA反应的能力完全丧失,然而却不影响其结合抗原的能力。对该单克隆抗体的特异性的鉴定表明,它可以特异性地识别精制天花粉蛋白和结晶天花粉蛋白上的抗原决定簇。     

基于深度最大输出网络的抗体种型特异性B细胞表位预测

B细胞表位研究有助于肽段疫苗研制,抗体研制以及疾病诊断和治疗研究.不同的B细胞表位诱导免疫系统产生不同的抗体种型,探索研究能够诱导特异性抗体产生的B细胞表位具有重要意义.基于二肽组成特征,利用深度最大输出网络算法训练构建三个二类分类器,分别对应诱导三种不同特异性抗体的B细胞表位,即IgA表位,IgE表位以及IgG表位.通过五折交叉验证训练和测试这三个分类器,获得AUC的值分别为0.78,0.93以及0.78.IgA表位和IgE表位分类器的预测能力优于其它IgA表位和IgE表位分类器,IgG表位分类器和其它IgG表位分类器的预测能力相当.     

应用体内外实验筛选可降低牛乳β-乳球蛋白过敏的乳杆菌

【目的】通过体内外实验评估5种乳杆菌缓解牛乳β-乳球蛋白(BLG)过敏的作用,为今后筛选具有抗过敏活性的乳杆菌提供参考。【方法】首先体外分析5种活的/热致死的乳杆菌促进小鼠原代淋巴细胞分泌细胞因子(CK)IFN-γ和IL-4的水平,随后应用小鼠BLG过敏模型评估这5种乳杆菌抑制过敏的能力。将实验动物随机分为空白组、BLG致敏组和5种活的/热致死乳杆菌组。采用ELISA法检测各组小鼠淋巴细胞分泌Thl/Th2型CK的水平,并测定小鼠血清中总IgE和BLG特异性IgE的含量。【结果】在体外可促进淋巴细胞分泌IFN-γ、抑制IL-4,使其IFN-γ/IL-4比值(代表Thl/Th2细胞平衡)显著高于正常对照组(P<0.05)的乳杆菌,在体内实验中也能有效提高致敏小鼠淋巴细胞的IFN-γ/IL-4分泌率,并显著降低致敏小鼠血清中总IgE和BLG特异性IgE的水平(P<0.05)。相反,在体外的IFN-γ/IL-4比值较低的乳杆菌,不能缓解特异性IgE抗体介导的食物过敏反应。【结论】基于乳杆菌体外刺激小鼠原代淋巴细胞分泌Th1/Th2型CK的结果,可以预测菌株在体内具有可通过纠正Th2占优势的Th1/Th2细胞失衡,下调抗体分泌量,缓解小鼠BLG过敏症状的能力。     

年轻恒牙作为基牙制备后脱敏处理临床效果评价

目的：观察年轻活髓牙牙体制备后脱敏处理的临床效果;材料与方法：随机选择23例双端固定桥义齿以两侧活髓牙为基牙中的23颗活髓牙作实验牙,临床虎体制备后给以脱敏处理,于制备后24小时、一周及二周进行随访统计,并与另外23颗牙作对比;结果：经脱敏剂脱敏处理的年轻活髓牙牙本质过敏症状明显低于不做脱敏处理的活髓牙。     

与人IgE调节有关的一对新的表面分子

在寻找治疗变态反应性疾病新方法的尝试中,控制IgE产生的分子是热门的研究主题。一种候补者,CD23分子,即低亲合力IgE受体,最近签定出能与另一种称为CD21的分子相互作用,参入调节IgE的产生。     

心脏对乙酰胆碱脱敏现象的特征及机理

本文介绍了心脏对乙酰胆碱的脱敏现象，ＡＣｈ对心脏膜电流的脱敏作用的主要特征，脱敏现象的可能机制及其发生的部位和脱敏的生理意义。     

梧桐花粉致敏大鼠动物模型的建立及特异性抗体检测

用梧桐花粉浸液作为过敏原,经皮下多点注射对实验动物进行免疫,用雾化的梧桐花粉浸液进行激发,建立了变态反应性疾病的实验动物模型。随后通过ELISA、Western印迹等方法对其血清中的梧桐抗原特异性IgG、IgE进行检测。结果显示有特异性IgG、IgE抗体的存在。     

花粉症的中国历程

花粉症是由花粉变应原引起的IgE介导的累及呼吸道、皮肤等系统的过敏性疾病,近年来发病率有逐渐升高的趋势.通过花粉监测绘制花粉地图和花粉日历有助于进行花粉症的防护.花粉症还受气象因素影响,可出现雷暴哮喘.花粉症与食物过敏具有相关性,可引起口腔过敏综合征甚至严重过敏反应,患者可能表现为由过敏性鼻炎发展至哮喘的自然进程.花粉症的检测方法分为体内试验和体外试验,避免花粉、药物治疗和脱敏治疗为主要的治疗手段,生物制剂奥马珠单抗用于花粉症的治疗具有良好的有效性和安全性.     

钙离子对乙酰胆碱受体通道脱敏的影响

Ｎ型乙酰胆碱受体通道的脱敏表现为通道开放概率的衰减,而通道开放时间和开放电流的变化水大,提示脱敏是全或无的,当「Ｃａ＾２＋」０＝１２．０ｍｍｏｌ／Ｌ时,脱敏５０％约用时１１．５分钟;「Ｃａ＾２＋」０＝０ｍｍｏｌ／Ｌ时,脱敏５０％药用时１．８分钟。证明在钙离子浓度较低的情况下,Ｎ型乙酰胆碱受体通道的脱敏较快,而下离子浓度较高时,通道脱敏慢,提示钙离子对通道从脱敏态到静息态的恢复有促进作用,并且对钙离     

新生儿如何从母体获得免疫力?

人体能产生5种抗体IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。在个体发育过程中,IgM合成最早,在胚胎发育后期就能够合成了。IgG是在出生后3个月开始合成的,IgA是在出生后4～6个月开始合成的,IgD、IgE开始合成的时间更晚,并且IgD、IgE在Ig中所占比例很小。所以,新生儿出生后3个月内主要依靠从母体得到IgG、IgA以获得免疫力。     

香栓菌的平喘及抗氧化活性研究

本文对香栓菌子实体提取物的平喘作用和抗氧化活性进行研究。平喘药理实验采用鸡卵清蛋白（OVA）致敏法建立小鼠过敏性哮喘模型,灌胃给药香栓菌水提物（高240mg/kg、中120mg/kg、低60mg/kg剂量）和石油醚提取物（高24mg/kg、中12mg/kg、低6mg/kg剂量）。比较各组小鼠行为变化,检测IgE、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-4和IFN-γ等指标,分类计数血液及支气管肺泡灌洗液（BALF）中的嗜酸性粒细胞数量,分析肺组织病理变化;抗氧化实验采用香栓菌水提取物、乙酸乙酯提取物、氯仿提取物、石油醚提取物比较清除DPPH和ABTS自由基能力。平喘试验结果表明,香栓菌水提物中剂量（120mg/kg）能降低血中嗜酸性粒细胞（Eos）及血清中IgE含量,减少BALF中Eos,降低血清及肺组织匀浆中IL-4含量,提高IFN-γ/IL-4,减轻模型的病理改变;石油醚提取物高剂量（24mg/kg）能降低血中Eos和血清中IgE、TNF-α、IL-1、IL-6含量,减少肺组织炎症细胞浸润;抗氧化结果显示,香栓菌各层提取物均有不同程度的抗氧化能力,并呈现一定的量效关系,同时水提取物的抗氧化效果最显著。本文为深入研究香栓菌子实体对呼吸系统疾病的治疗提供了重要试验依据。     

三种脱敏药物封闭牙本质小管的扫描电镜观察

观察3M Singlebond~(TM) Universal自酸蚀粘结剂堵塞牙本质小管的效果,为治疗牙本质过敏提供理论依据。收集新鲜的离体第三磨牙42颗,制备成牙本质敏感症模型后随机分为空白对照组(n=6)、3M SinglebondTMUniversal组(n=12)、极固宁组(n=12)、高露洁专效抗敏牙膏组(n=12)。从涂布脱敏剂的3组中各随机抽取6个样本进行刷牙实验。分析所有分组牙本质小管的堵塞效果,并采用SPSS17.0数据分析系统对结果进行分析。从结果可以看出空白对照组牙本质小管完全开放,3M Singlebond~(TM) Universal、极固宁、高露洁抗敏牙膏均能有效封闭牙本质小管,3M Singlebond~(TM) Universal的封闭效果最佳。经过刷牙实验3M SinglebondTMUniversal仍具有较好的牙本质小管封闭效果,而脱敏牙膏组有大量牙本质小管再次开放。这说明3种脱敏剂都具有良好的牙本质小管封闭效果,3M Singlebond~(TM) Universal的封闭性和抗磨耗性最佳。     

血清IgE水平与冠心病的相关性分析

目的:探讨血清IgE水平与冠心病的相关性。方法:将我院收治的135例患者根据冠脉造影结果分为冠心病组(CHD)和非冠心病组(non-CHD),冠心病组根据临床症状分为稳定型心绞痛组(SAP)、不稳定型心绞痛组(UAP)和急性心肌梗死组(AMI),动脉堵塞程度用Gensini评分量化,采用SIMENS BNII全自动免疫散射比浊仪测定总IgE水平。比较CHD和non-CHD组患者及SAP、UAP和AMI组患者血清IgE水平的差异,并进一步分析血清IgE等级与冠心病Gensini积分的相关性。结果:non-CHD患者血清IgE水平(32.3(13.5,61)KU/L)明显低于CHD患者(69(26.4,169)KU/L)(P=0.001),UAP和AMI患者血清IgE水平(78.6(37.0,191.0)KU/L、118.5(75.3,148.1)KU/L)均显著高于SAP组(36.7(20.7,96.7)KU/L)(P=0.034和P=0.001),且多支血病变组患者血清IgE水平(67.2(30.9,249.0)KU/L)显著高于单支血管病变患者(34.6(18.1,59.0)KU/L)(P=0.039)。IgE水平根据四分位间距分为四个等级,随着IgE分级水平增加冠心病Gensini积分增加。结论:冠心病患者血清IgE水平升高,且与冠心病类型和血管堵塞程度都存在显著相关性,可能辅助冠心病的诊断及病情监测。     

河蟹眼柄神经内分泌细胞Glu受体研究

作者采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)神经内分泌细胞对 0 0 1— 10mmol/L谷氨基酸 (Glu)的反应 ,并结合药理学方法进行了Glu受体研究。结果表明 ,Glu激活A型和B型细胞离子型Cl-通道蛋白受体 ,诱导快速激活、快速失活的配体门控Cl-通道电流 (IGlu)。依据内外液的Cl-浓度比例引发去极化或超极化反应 ,继续施加Glu ,细胞快速出现脱敏反应 ;去除Glu后 ,细胞约需 2 0s恢复对Glu的敏感状态。IGlu幅值呈浓度依赖性 ,量 效关系曲线呈线形 ,激活阈值为 0 0 1mmol/L ,约 5mmol/L达到饱和。河蟹眼柄神经内分泌细胞IGlu明显受到Cl-通道阻断剂picrotoxin(0 5mmol/L)抑制 ;对离子型Glu受体激动剂Quisqualate、Kainate、NMDA、AMPA不敏感。Ibotenicacid(IA)可模拟Glu诱导快速激活、快速脱敏的Cl-电流 ,并与Glu产生交互脱敏作用。Glu和GABA对河蟹眼柄神经内分泌细胞无交叉脱敏和交叉激活作用 ,甘氨酸 (Gly)没有诱导细胞产生任何反应 ,提示中枢神经系统通过Glu和GABA两套系统实现对眼柄神经内分泌系统的精确调控。     

支气管哮喘患者IgE水平与家族史相关

本文通过59例外源性支气管哮喘患者（以下简称哮喘）与36例健康对照者的家系调查及血清总IgE、特异性IgE阳性率的测定,发现哮喘组的血清总IgE平均值(714.0u/ml) 明显高于对照组(275.1u/ml),血清总IgE超常例数百分率（61.0%）也明显高于对照组（8.3%）,证明IgE参与了哮喘的发病。哮喘组阳性家族史患者与鹰性家族史患者比较,发现前者血清总IgE平均值（921.9u/ml）明显高于后者(410.6u/ml),血清总IgE超常例数百分率也是前者(80.0%)高于后者(33.3%);特异性IgE阳性率（前者为62.9%,后者为29.2%）也具有同样特点。数据表明血清总IgE及特异性IgE与哮喘的遗传与发病相关。血清总IgE升高与特异性IgE阳性呈不一致分布提示两者可能有不同的遗传调节方式。     

天花粉蛋白分子的抗原决定簇研究(英文)

为了研究抗原结构和功能之间的关系,我们用天花粉蛋白作抗原,制备了16株分泌抗天花粉蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,其中包括5株IgE杂交瘤细胞系。用这些单克隆抗体同天花粉蛋白进行抗体竞争结合试验,结果表明:16种单抗之间可产生不同程度的竞争,竞争率从0—100%不等。按照竞争的情况,16种单抗可以分成4个不同的组,即TE 1,1B 1,3A 12,4B 5组,分别识别4个可区分开的抗原决定簇区。值得注意的是TE1组包括了所有5种IgE单克隆抗体(以及另外两种IgG 1单克隆抗体),这一结果提示TE1组单克隆抗体识别的抗原决定簇区可能以某种方式介入了小鼠IgE抗体应答的过程。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠抗天花粉蛋白的IgE类抗体的研究

检测小鼠IgE类抗体的经典方法是被动皮肤过敏试验(PCA),这是一种生物测定,因而在应用上受到一定限制,并且也受动物本身变化的影响。1973年Hoffman首次报道了用ELISA检测血清IgE。此后有不少工作者相继报道了应用ELISA检测IgE或抗原特异的IgE类抗体。为研究对天花粉蛋白的免疫     

IL-10对哮喘小鼠血清IL-5和IgE的影响

目的:探讨IL-10治疗对哮喘鼠血清IL-5及IgE水平的影响.方法:制备20只小鼠哮喘模型,随机分为治疗组、哮喘组,前者使用IL-10治疗,后者未予治疗,用ELISA双抗体夹心法测定治疗组和哮喘组血清IL-5和IgE的水平.以10只健康小鼠为对照组.结果:与对照组比较,哮喘组IL-5和IgE水平较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);经IL-10治疗后,治疗组的血清IL-5、IgE的水平明显低于哮喘组水平,其差异有统计学意义(P＜0.05);治疗组治疗后IL-5和和IgE检测值与正常组水平差异无统计学意义(p＞0.05).结论:IL-10能够降低哮喘小鼠血清的IL-5和IgE水平.     

6株抗人IgE重链McAbs杂交瘤细胞株的建立和鉴定

IgE对过敏性疾病的重要性已被公认。临床上应用抗人IgE多克隆抗体对Ⅰ型过敏性疾病总IgE进行检测,以助诊断和研究过敏性疾病的机制。本文应用杂交瘤技术建立6株抗人IgE重链单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,并应用McAb对IgE抗原决定簇进行初步分析。一、材料及方法细胞融合的基本材料及方法同常规方法。1.抗原、动物和免疫方法抗原人-IgE(骨髓瘤蛋白,由Ishizaka赠送。经过纯化后应用。基础免疫用0.55mgIgE加福氏完全佐剂,腹腔注入BALB/c小鼠(6-8周龄)。16天后腹腔注入0.5mgIgE(生理盐水配制),41     

IgE免疫应答的调节

自从发现IgE抗体就是速发型过敏反应性疾病的介导物质以后,对这种抗体的生理、生化性质进行了大量的研究。特别是最近几年来有关IgE抗体应答调节的研究进展迅速,从而为最终解决由IgE抗体介导的过敏性疾病的治疗问题提供了必不可少的知识。本文拟就变应原的性质,IgE抗体应答中独特型网络的调节,T-B细胞的相互作用,以及可溶性因子参