生长激素

19世纪末人们在临床工作中已发现生长发育与垂体有关。1912年Ashner发现单纯切除垂体前叶导致生长障碍。1921年Evans等证实牛垂体提取液对大鼠有促进生长作用。1943年Evans建立了生长激素GH的生物学测定方法即胫骨测定法。1944年李卓浩和伊万斯提纯了牛GH,确定了垂体GH的存在。1956年李卓浩等又提纯了人生长激素(hGH),发现GH有高度种属特异性,并使hGH应用于临床治疗有了可能。1962年Hunter等建立了hGH的放射免疫测定法,从而建立了各种hGH功能试验,使hGH功能紊乱疾病包括垂体侏儒的诊断水平显著提高。1971年已能     

小麦旗叶老化期间的内肽酶

小麦叶片中存在着内肽酶,其最适pH为4．8,最适反应温度为45℃。小麦旗叶全展以后,净光合速率和总可溶性蛋白质含量下降,而内肽酶比活上升。用蛋白质合成抑制剂处理的结果表明,有内肽酶的从头合成;用激活制和抑制剂处理的结果表明,小麦叶片中至少有3种类型的内肽酶（即巯基蛋白酶、丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶）,而在蛋白质降解中起主要作用的是巯基蛋白酶。另外,氨基酸对内肽酶有保护作用,激素对内肽酶具有调节作用,活性氧对内肽酶的活力上升也有促进作用。     

超嗜热古菌的ATP非依赖型蛋白酶和肽酶研究进展

蛋白酶和肽酶在超嗜热古菌的营养代谢、蛋白质转换与加工以及蛋白质质量控制等重要生物学过程中发挥关键作用。超嗜热古菌蛋白酶和肽酶具有优良的热稳定性和高温活性,是研究蛋白质耐热分子机制和酶行使功能上限温度等科学问题的理想材料,同时也具有重要的工业应用价值。本文对超嗜热古菌的ATP非依赖型蛋白酶和肽酶的种类、功能、催化特性、热稳定机制以及应用前景进行综述与分析。     

胱冬肽酶非依赖性的细胞程序性死亡

在多细胞有机体的组织内稳态维持和正常发育过程中,细胞程序性死亡发挥着重要的作用。细胞程序性死亡有多种形式(如细胞凋亡、类细胞凋亡和类坏死等),其中了解较清楚的是细胞凋亡。一直以来,胱冬肽酶(caspase)被认为是细胞凋亡发生中关键的一种蛋白酶。但是最近的研究表明,包括细胞凋亡在内的一些细胞程序性死亡可以以一种不依赖胱冬肽酶的方式发生。细胞程序性死亡与胱冬肽酶之间存在非依赖性关系。     

牛脾酶制剂催化从白氨酰胺生成聚白氨酸的作用

(1)牛脾酶制剂于pH 7.8及半胱氨酸存在下,具有明显的催化从白氨酰胺生成聚白氨酸的作用。聚合物約含13～15个白氨酸。(2)根据溴代乙酸的抑制,不同底物的共同作用,以及温度的影响,看来上述反应和组織蛋白酶A,B,C等无关,可能是由一个新的酶所催化。     

白色念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的纯化与性质

利用硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sephacel离子交换层析从白色念珠菌WD27培养液中提纯得到一种蛋白酶,纯化倍数为25.4,收率为5.2％。其活性可被抑胃肽特异抑制,初步鉴定该酶为天冬氨酸蛋白酶。该酶在酸性范围内有水解蛋白活性,最适作用pH为4.0,最适温度为37℃。酶在pH5.0～6.0、45℃以下较稳定,该酶具有较广的底物作用范围,对牛血红蛋白最敏感。酶作用于牛血红蛋白的米氏常数Km为0.814mmol/L。     

胰多肽

胰多肽(pancreatic polypeptide,简称PP)是一种主要从胰腺中提取出的具有36个氨基酸残基的激素。60年代末Kimmel等在提取鸡胰岛素时偶然发现了胰多肽,称它为鸟胰多肽(avian pancreatic polypeptide,简写APP)。与此同时,林从敏和Chance等在提纯牛胰高血糖素和胰岛素时也发现了PP,称之为牛胰多肽(bovine pancreatic polypeptide,     

组织蛋白酶及其抑制剂研究进展

组织蛋白酶是半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员,在生物界已发现20余种,人体中主要存在11种,它们与人类肿瘤、骨质疏松、关节炎等多种重大疾病密切相关,是近年来备受关注的一类靶标蛋白酶。自从20世纪90年代以来,多种组织蛋白酶的晶体结构陆续明确,有关其研究进展较快。本文以人类组织蛋白酶为重点,主要介绍近15年来组织蛋白酶结构、功能和抑制剂研究方面的一些重要进展。     

半胱氨酸组织蛋白酶与免疫调节

半胱氨酸组织蛋白酶(CC)属于蛋白酶clanCA中的木瓜蛋白酶家族(C1),由组织蛋白酶B、L、H、S、K、F、V、X、W、O和C等组成。这些蛋白酶参与了各种生理和病理过程。     

胰多肽:药理作用和生理功能浅释

从胰脏提取胰岛素和胰高糖素的过程中,偶然地发现了胰多肽(pancreatie polypeptide,PP)。先是Kansas大学Kimmel医师在1968年的联合生命科学年会简报上报道了鸡胰多肽(avian PP)的不完全的部分化学组成。与此同时,本研究室Chance博士等从牛、猪胰脏中发现类似的多肽,而且得到它们全部的化学组成和氨基酸序列。随着牛、猪胰多肽的发现,本研究室又从人、狗、羊的胰脏提纯同类的多肽。胰多肽含有36个直线排列的氨基酸,牛、羊、猪、人的胰多肽在36个氨基酸中,只有一、二个氨基酸的差别。猪和狗的胰多肽完全相同。牛和鸡的胰多肽,在36个氨基酸序列中,只有15个完全同位(表1,2)。从演化的观点看来,低级动物和人的胰多肽有密切的关系。     

马氏珠母贝Pm-CTSC基因的克隆与表达分析

组织蛋白酶C在无脊椎动物中具有重要的非特异性免疫防御功能。为了研究马氏珠母贝组织蛋白酶C(Pm-CTSC)的功能,本实验利用RACE技术克隆获得了Pm-CTSC,并对其结构和组织表达模式进行了分析。结果表明:Pm-CTSC基因cDNA序列全长为1 914 bp,其中开放式阅读框1 413 bp,5'UTR 25 bp,3'UTR 476 bp,共编码470个氨基酸,该蛋白理论分子量为53.41 k D,理论等电点为6.03。结构域分析发现Pm-CTSC具有组织蛋白酶C两个典型的结构域Cathepsin C exclusion和Peptidase_C1A_CathepsinC。多序列比对结果表明Pm-CTSC与太平洋牡蛎的同源性最高,为68.8%;系统进化分析发现,Pm-CTSC与无脊椎动物聚为一支。qRT-PCR表达分析发现,Pm-CTSC在肝胰腺中显著高表达(p0.05),表明Pm-CTSC可能参与马氏珠母贝的免疫应答。本研究为进一步探讨组织蛋白酶C在马氏珠母贝天然免疫应答中的作用提供了基础资料。     

食品上的应用

讨论了应用蛋白酶作为动物饲料和人类食品的添加剂.真菌蛋白酶通常由米曲霉(AsPergillus oryzae)获得.此酶是内肽酶和外肽酶的混合物,其最适pH范围为4.3     

家蚕卵半胱氨酸蛋白酶纯化及抗血清制备

据报道,家蚕卵中存在半胱氨酸蛋白酶(Cysteine proteinase,CP),其性质与哺乳类溶酶体半胱氨酸蛋白酶类的组织蛋白酶L相似,最佳作用pH为3.5,体外最适作用底物为牛血红蛋白,体内最适作用底物为卵黄磷蛋白。经SDS—PAGE分析,分子量47KD。其主要作用是在胚胎发育过程中降解卵黄蛋白质,供胚胎发育之需要。 在成熟卵中具很高含量的半胱氨酸蛋白酶,在胚胎发育开始前,并不发生卵黄蛋白质的水解,其作用机制尚待阐明。为了进一步研究半胱氨酸蛋白酶的组织分布、合成位点、及cDNA克隆等,作者从家蚕卵中纯化了半胱氨酸蛋白酶,并制备了抗血清。     

人脯氨肽酶活性中心结构的计算机模拟

氨酰基脯氨酸二肽酶 (脯氨肽酶 )为广泛分布于生物界的细胞内二肽水解酶 .它特异性地水解以脯氨酸或羟脯氨酸为羧基端的二肽 (X Pro) ,而且只对反式肽键有催化活性 .此酶与脯氨酸代谢、胶原蛋白合成及细胞生长有密切关系 .文献报道 ,从Alteromonas细菌中提取的脯氨肽酶有水解梭曼的活性 ,其有机磷酸酐水解酶也有脯氨肽酶活性 .用重组基因表达的人肝脯氨肽酶也同时具有脯氨肽酶活性和水解梭曼的活性 .研究脯氨肽酶活性中心的结构具有重要理论意义和潜在实用价值 .但目前尚无人脯氨肽酶晶体结构的报道 .本文采用蛋白质结构模式识别 (threading)方法对脯氨肽酶的高级结构进行模拟 ,以大肠杆菌甲硫氨酸氨肽酶 (1MAT)为模板 ,模建了人脯氨肽酶C端结构域的空间结构 .通过对模建结构的 3D评估及电荷分布分析 ,对人脯氨肽酶活力中心结构进行了预测 .模建的人脯氨肽酶活性中心位于C端结构域 ,为 6条β折叠围成的一个疏水性口袋 ,外面被 5条α螺旋及一些loop包围 ,活力中心位于疏水结构中央 ,其中有 5个保守氨基酸 ,形成 1个较强的负电荷区 ,周围有 3个较弱的正电荷区域 .实验还发现 ,虽然Mn2 + 或Co2 + 对酶的活性极其重要 ,但对酶蛋白结构的贡献很小 .提示它们可能是在催化反应的电荷转移过程中发挥着重要作用     

多酶系曲霉菌种选育通过鉴定

兰州大学生物系于1983年承担了甘肃省科委下达的“多酶系曲霉菌种选育”课题,于85年7月3日在兰州通过鉴定。甘—8412菌株的谷氨酰胺酶、肽酶,碱性蛋白酶、中性蛋白酶、脂肪酶、β—淀粉酶等主要酶活力,分别较亲本提高20—50％;低温菌种甘—8477的谷氨酰胺酶活力较亲本提高41.78％,它适宜于西北、东北等     

碳酸酐酶与临床医学

碳酸酐酶是一类含锌的蛋白酶,共发现了10种同工酶及三种碳酸酐酶相关蛋白,广布于人体各组织,能可逆性地催化C02的水合反应,参与调节pH、离子运输等多种生理过程,碳酸酐酶的缺乏和异常将可能会导致一系列的疾病。     

米黑毛霉(M.miehei)天冬氨酸蛋白酶的研究

用硫酸铵分部盐析及离子交换层析技术从米黑毛霉半固体培养物的浸提液中提纯了天冬氨酸蛋白酶,酶活力收率为19.5％,,比活力达3080SU/mg蛋白,提纯8.5倍。用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-凝胶电泳、等电聚焦、双向免疫扩散及免疫电泳等方法鉴定该酶均一。本文还报道了关于该酶生化性质、动力学性质及化学修饰的研究结果。该酶以天冬氨酸为其活性的必需基团,系一典型的天冬氨酸蛋白酶。     

胱抑素C与心血管疾病的关系

胱抑素C(Cystatin C)是一种低分子量的分泌性蛋白质,与肾小球滤过率(GFR)密切相关,是肾小球滤过功能的一个理想指标。作为一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,胱抑素C与同型半胱氨酸、组织蛋白酶等相互作用,而参与了动脉粥样硬化、动脉瘤及心肌梗塞等心血管疾病的病理过程。     

蛋白酶的研究进展

由于蛋白酶的来源丰富,很多胞外蛋白酶容易提纯,分子较小,功能较简单等特点,因而在酶学研究中蛋白酶的研究较早也最深入,对它的化学结构和高级结构以及它的动力学、作用机制等的研究一直处于领先地位,是一个比较成熟经典的研究领域。近20年来,由于新方法新观点的运用,从对个别蛋白酶的研究逐渐转为对某蛋白酶体系的研究,在体内的一些生理生化过程中,它们起着极为重要和广泛的生物调控作用,例如血液凝固,血纤维溶解,补体激活,激素释放,细胞融合等都有一整套蛋白酶参加,它们或激活某些非活性蛋白原,     

受染巨噬细胞释放的鼠伤寒沙门菌可灭活抗蛋白酶

鼠伤寒沙门菌经口进入消化道，穿过小肠上皮屏障侵入宿主。其重要特征是能在黏膜下层的巨噬细胞和树突细胞中繁殖，随之从胃肠道向肝、脾等网状内皮组织扩散。细菌迁移时，丝氨酸纤维蛋白酶在细胞外基质（ECM）降解过程中起重要作用。此酶由丝氨酸蛋白酶抑制剂α2AP负调控。沙门菌的表面蛋白酶PgtE可通过蛋白水解作用使α2AP失活，