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α-半乳糖苷酶 总被引:3,自引:0,他引:3
最近各种媒体不断报道红血球类型可以通过酶处理进行转换 ,这对于输血和开拓血源有十分重要的意义 ,所用的酶是α 半乳糖苷酶。α 半乳糖苷酶 (α galactosidase ,α D galactosidegalactohydrolase ,EC 3.2 .1 .2 2 )能专一地催化α 半乳糖苷键的水解。它广泛存在于各种植物和动物体内 ,许多微生物如双歧杆菌 (Bifidobacterium)、黑曲霉菌 (Aspergillusniger) [1] 、大肠杆菌 (Escherichiacoli)K 1 2 1 [2 ]的抽提液中也发现有α 半乳糖苷酶的… 相似文献
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《生物技术》2018,(5)
[目的]明确粘质沙雷氏菌中两个FBPases是否同时具有催化果糖-1,6-二磷酸(F-1,6-BP)与景天庚酮糖-1,7-二磷酸(S-1,7-BP)的功能。[方法]PCR构建p ET28a-Sm-FBPase和p ET28a-Sm-Glp X,IPTG诱导表达于大肠杆菌并应用镍柱纯化靶蛋白。应用体外酶学分析Sm-FBPase与Sm-Glp X酶学特性。[结果]SDS-PAGE结果表明Sm-FBPase、Sm-Glp X的分子量是45 k Da、38 k Da。体外酶学分析表明两个酶均可催化F-1,6-BP和S-1,7-BP。Sm-Glp X是Mn2+或Mg2+依赖型酶,而Sm-FBPase的激活需要Mn2+。根据被测试的底物,Sm-FBPase最适p H 7. 0~7. 5、最适温度40℃; Sm-Glp X最适p H 8. 0、最适温度40~45℃。当F-1,6-BP作底物时,Sm-FBPase与Sm-Glp X的Kcat/Km分别为6. 88、7. 55 S-1mmol-1L。然而,当S-1,7-BP作底物时,Sm-FBPase与Sm-Glp X的Kcat/Km分别是3. 17、8. 54 S-1mmol-1L。[结论]Sm-FBPase和Sm-Glp X均可催化F-1,6-BP与S-1,7-BP,Sm-Glp X催化S-1,7-BP的效率是Sm-FBPase的2. 69倍。 相似文献
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家蚕抗菌肽-死亡素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与表达 总被引:4,自引:0,他引:4
近年来的研究发现 ,抗菌蛋白在生物体非专一性防御系统有着重要的作用 ,已有数十种具有抗菌活性的多肽被分离 ,这些多肽可大致分为 3类 ,即含分子内二硫桥的抗菌肽 ;具有双亲α 螺旋结构的抗菌肽 ;以及富含某种氨基酸残基的抗菌肽[1 ] ,一般来说 ,这些抗菌肽具有分子量小 ,稳定性好 ,无细胞毒性 ,抗菌谱广等特点。多种抗菌肽的一级结构和二级结构已经确定[2 ] ,但作用机理仍不明了。一般认为可能存在两种作用模式 ,即 1)通过肽 脂膜相关作用杀菌 ;2 )通过受体介导的识别过程起作用[1 ] 。CecropinB是一种较早从家蚕中分离得到 ,由 … 相似文献
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DNA生物催化功能研究进展 总被引:9,自引:2,他引:7
近年来发现 ,不少结构特殊的DNA分子分别具有剪切RNA分子或DNA分子、T4聚核苷酸激酶样活性、DNA连接酶样活性以及催化卟啉金属离子化等多种生物催化功能 ,这些DNA分子被称为脱氧核酶或酶性DNA .它们在用作RNA和DNA工具酶、基因分析和诊断手段以及基因治疗药物等方面的潜力引人注目 .综述这些DNA分子的种类、结构特征、催化活性及应用现状和前景等方面的最新研究进展 相似文献
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《生物技术》2015,(4)
[目的]分析芹菜素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型,并探讨其抑制的分子作用机制。[方法]采用Lineweaver-Burk双倒数方程,分析芹菜素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型;荧光光谱和分子对接阐述芹菜素抑制α-葡萄糖苷酶的分子作用机制。[结果]芹菜素对α-葡萄糖苷酶的抑制类型为竞争型抑制,抑制常数Ki=12.08μg/m L。芹菜素和α-葡萄糖苷酶的结合导致酶分子的内在荧光静态猝灭,不同温度(298 K、304 K、310 K)条件下荧光猝灭常数KA分别为0.859 4×104、0.617 7×104、0.486 5×104L/mol。酶分子中Tyr158、Ser240、Pro312、Phe314和Asn415等氨基酸残基为芹菜素与其结合的重要活性位点,芹菜素的A环5-OH和7-OH、B环4'-OH结构对其抑制活性起到关键作用。[结论]芹菜素是α-葡萄糖苷酶的竞争性抑制剂,疏水作用力和氢键是其与酶分子间的主要作用力。 相似文献
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启动子和细胞全局转录机制的定向进化在微生物代谢工程中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
通过随机突变和定向选择而进行的定向进化(又称分子进化或人工进化)在改造酶的催化特性和稳定性、扩展酶的底物范围等方面具有广泛的应用。近年来,定向进化也开始应用在对结构基因的启动子区域和具有调节功能的蛋白如转录因子等进行代谢工程改造,并成功选育了对环境胁迫因素具有较强耐受性,以及发酵效率提高的微生物菌种。以下着重介绍近年来启动子的定向进化,包括启动子的强度和调节功能的分子进化,以及细胞全局转录工程等技术在微生物代谢工程中的应用,这些定向进化技术使人们可以更精细地调节基因表达水平,并可同时改变细胞内多个基因的转录水平,是代谢工程研究新的有力工具。 相似文献
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朱尚权 《生物化学与生物物理进展》1979,6(2):7-18
蛋白质是生命活动的重要物质之一。蛋白质种类繁多,各具有自己的特殊的生物功能,如催化、传递系统,调节代谢过程和参与结构成分等等。蛋白质功能的多样性是与其化学结构以及由化学结构所决定的空间结构的多样性分不开的。从分子水平上来说,许多蛋白质作用的对象是小分子,如酶与底物或抑制剂间的作用,抗体与抗原尤其是半抗原间的作用。这些底物或 相似文献