静水压诱导翘嘴鳜雌核发育的研究

为通过建立雌核发育纯系以实现快速优化种质资源, 文章以翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)为研究对象, 探索出了一套静水压诱导雌核发育的方法: 将装有翘嘴鳜精子的培养皿置于摇床缓慢摇动, 在两只15 w的紫外灯管(培养皿与紫外灯管的垂直距离约17 cm)下照射18min, 然后与雌鱼卵子受精5min, 63 MPa静水压处理2min, 最后常规孵化。HRM分型技术检测其雌核发育群体的雌性率为100%。该方法简单快捷, 诱导孵化率(受精后72h的存活率)为7.56%, 比已有的冷休克诱导翘嘴鳜雌核发育的方法约提高3个百分点。研究结果可用于翘嘴鳜雌核发育品系的快速扩群, 也可用于翘嘴鳜抗逆相关品系的种质资源创制。     

γ射线辐射诱导水稻突变体的基因组变异分析

辐射诱变技术广泛应用于水稻种质资源创新.为了明确辐射诱导突变的分子机制,采用二代高通量测序技术对水稻品种黄华占经辐射诱导获得的一个突变体湘辐1821进行全基因组变异分析.与参考序列蜀恢R498相比,在黄华占和湘辐1821中分别检测到758215和799434个单核苷酸多态性位点(SNPs),142313和147686个...     

高静水压对小球藻的生理生化效应

对小球藻(Chlorella Vulgaris)进行高静水压处理,分别通过80MPa,300MPa静水压处理,观察高静水压处理时小球藻生理生化效应。实验结果表明,300MPa压力处理1h能够导致小球藻的大量死亡,少量存活的藻细胞经过5d的“停滞期”后开始正常生长。80MPa的压力下处理2h、6h、12h后小球藻的初期的生长速度明显加快,而到生长末期小球藻生长开始趋于平缓。小球藻干质量为12h实验组最大,而单位蛋白含量随着干质量的增加而下降,几种抗氧化酶活性为6h实验组具有最大活性。经过300MPa压力预处理1h后的小球藻再在80MPa压力下进行处理,发现小球藻干质量为2h再处理实验组最大,蛋白含量为6h再处理实验组最高,抗氧化酶的活性随着压力处理时间的增加而下降。     

一种水稻分蘖突变体的初步分析（简报）

通过EMS（甲基磺酸乙酯,ethyl methane sulfonate）诱变处理灿稻丰矮占5号的种子,在M2代中分离到一株少分蘖突变体,命名为ret5-5(reduced tiller mutant）。植株表现为不分蘖,自交所得M3、M4和M5代植株表现为0－2个分蘖,而原正常品种FAZ－5同期平均分蘖数为8.2。突变体与FAZ－5的杂交结果显示该突变表型为隐性突变。在F1代自交所得F2和F3代植株出现性状分离,突变可能涉及2个或2个以上的基因。     

鱼类染色体组操作的研究 Ⅱ.静水压处理和静水压与冷休克结合处理诱导水晶彩鲫四倍体

采用静水压处理和静水压与冷休克结合处理两种方法进行了抑制第一次卵裂诱导水晶彩鲫四倍体的研究。水晶彩鯽受精卵在受精后(发育水温14—15℃)50、54、55和60min时的静水压(650kg/cm~2)处理(3min)组中都出现了四倍化胚胎,而在受精后48和48min以前的相同处理组中都没有观察到四倍化胚胎。在受精后(发育水温16-18℃)48、50、52、55、56和60min时的静水压与冷休克结合处理组中,也都出现了四倍化胚胎,且四倍化率比仅用静水压处理高,但存活率更低。在经过处理而发育形成的胚胎中,既有四倍体、次四倍体和4n/2n嵌合体,也有二倍体和次二倍体,并在一些次二倍体和次四倍体中期相中还观察到休克处理致使染色体断裂的痕迹——染色体片段。在抑制卵裂诱发加倍的效应期内,可能存在瞬间对休克耐受性较强的时期,而在此前后,对休克更为敏感。在少数处理组中,已筛选出了数尾四倍体鱼。文中还对鱼类四倍体的诱导技术、抑制卵裂诱发染色体组加倍的效应期以及四倍化胚胎的存活率和生命力等有关问题进行了分析和讨论。     

雄性核不育水稻矮秆突变体突变分子机制的初步研究

以株-1S、SV1S、SV14S为研究材料,分析这3种材料的胚乳α-淀粉酶活性、第二叶鞘及节间长度对赤霉素(GA3)反应,结果表明来源于株-IS的SVIS、SV14S突变体的矮化变异与赤霉素信号传导途径无明显关系．此外,通过3种材料的基因组DNA和线粒体DNA的RAPD分析,发现矮秆突变体株系的基因组DNA和线粒体DNA都存在一定的变化,从而在DNA分子水平上进一步证实了SV1S和SV14S突变体的遗传突变．其突变的生理机制与赤霉素信号传导途径无明显关系,很可能与赤霉素生物合成途径有关．     

高静水压培养对内皮酯酶表达的影响

探讨高静水压培养对内皮脂酶表达的影响及其机制．分大气压(0 mmHg)和高于1个标准大气压的递增压力(120、150、180 mmHg)培养人脐静脉内皮细胞,用蛋白酶体抑制剂MG132进行干预．RT-PCR检测内皮脂酶 mRNA的表达,间接免疫荧光技术和流式细胞术检测内皮脂酶蛋白的表达．结果显示,高静水压培养明显促进内皮脂酶mRNA和蛋白质的表达,180 mmHg培养24 h内皮脂酶mRNA的表达较对照组上调2.2倍(P < 0.001),内皮脂酶蛋白表达较对照组上调2.54倍(P < 0.001)．蛋白酶体抑制剂MG132干预明显抑制180 mmHg培养诱导的内皮脂酶 mRNA的表达,MG132干预组内皮脂酶mRNA表达约为180 mmHg培养组的50% (P < 0.05)．结果说明,高静水压上调内皮脂酶 mRNA和蛋白质的表达,其机制可能与核因子-κB活化有关．     

水稻生殖突变体的外观形态特征研究

通过对3种水稻生殖突变体材料的外观形态进行观察后发现,FM1突变体植株不能由营养生长转入生殖生长,一直保持营养生长状态;FM2突变体植株不能分化发育出小穗,只能在进入生殖生长后分化出穗枝梗;FM3突变体植株在生殖生长过程中不能分化出正常小穗,其疑花内部的雌蕊和雄蕊明显退化。已经证实这3种生殖突变性体植株都不能产生有性生殖后代,只能通过群体内的显性杂合体分离出隐性突变体植株。     

静水压休克诱导水晶彩鲫三倍体和四倍体的细胞学机理初探

本文分析了静水压休克诱导水晶彩鲫三倍体和四倍体的细胞学机理,促使第二极体保留的压力敏感期较短,在卵子第二次成熟分裂中后期的某段时间,也就是受精后４－５ｍｉｎ时;而在这之前,为卵子启动期,施加压力会破坏卵子的激动和修整过程,造成发育受阻;其后,为压力不应期,此时第二次成熟分裂态势也趋明朗,压力对保留第二极体失去作用。本文还对促使第二极体保留生产鱼类三倍体和抑制第一次卵裂诱导鱼类四倍体的条件等问题进行     

Evaluation of Structural Changes Induced by High Hydrostatic Pressure in Leuconostoc mesenteroides

Scanning electron microcopy (SEM), transmission electron microscopy (TEM), and differential scanning calorimetry (DSC) were used to evaluate structural changes in Leuconostoc mesenteroides cells as a function of high-hydrostatic-pressure treatment. This bacterium usually grows in chains of cells, which were increasingly dechained at elevated pressures. High-pressure treatments at 250 and 500 MPa also caused changes in the external surface and internal structure of cells. Dechaining and blister formation on the surface of cells increased with pressure, as observed in SEM micrographs. TEM studies showed that cytoplasmic components of the cells were affected by high-pressure treatment. DSC studies of whole cells showed increasing denaturation of ribosomes with pressure, in keeping with dense compacted regions in the cytoplasm of pressure-treated cells observed in TEM micrographs. Apparent reduction of intact ribosomes observed in DSC thermograms was related to the reduction in number of viable cells. The results indicate that inactivation of L. mesenteroides cells is mainly due to ribosomal denaturation observed as a reduction of the corresponding peak in DSC thermograms and condensed interior regions of cytoplasm in TEM micrographs.     

生物科学中一个崭露头角的领域：高静压力研究

通过介绍高静压力作用于生物大分子的机制,提出一些有关高压力生物学的基本概念。此外,还介绍了高静压力在研究蛋白质构象,蛋白质－蛋白质、蛋白质－核酸、蛋白质－配基等相互作用,酶活性的调制以及在生物技术中的应用,表明高压力是一很好的研究手段。     

高压力对限制性内切酶活性的影响

以质粒ｐＳＰＯＲＴ１为底物研究了高压力对Ⅱ型限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ和ＸｂａⅠ反应的影响。高压力未引起两酶底物碱基特异性的改变,但二者反应活力均随压力升高而逐渐下降,ＸｂａⅠ对高压力更敏感。引起ＨｉｎｄⅢ和ＸｂａⅠ限制性内切酶活性完全丧失的压力分别为２００和１８０ＭＰａ,半失活压力分别为１３０和７５ＭＰａ。     

籼型稻V20B 高效遗传转化体系研究初报

目的:建立籼型杂交稻亲本V20B成熟胚愈伤组织培养的高效遗传转化体系。方法:以V20B的成熟胚作为外植体,研究比较不同培养基、不同生长物质类型及浓度、不同培养条件对愈伤组织诱导、继代、分化的影响。结果:诱导培养基以N6为基本培养基,添加2.5 mg.L-12,4-D和0.2 mg.L-16-BA,光照条件下诱导,成熟胚愈伤组织诱导率达到93.44%;继代培养基以MS为基本培养基,添加2.0 mg.L-12,4-D,黑暗条件下培养;分化培养基以DL为基本培养基,激素配比为2.0 mg.L-1KT、2.0 mg.L-16-BA、0.2mg.L-1NAA、0.2 mg.L-1IAA;采用农杆菌介导法对该体系获得的愈伤组织侵染后能获得的抗性愈伤组织,经PCR检测潮霉素基因转化率为53.89%。结论:建立了适宜于籼型稻V20B的高效组织培养体系。     

突变体在植物光破坏防御研究中的应用

用突变体研究植物的光破坏防御机制是一种有效的方法，与传统方法相比，具有专一性强、副效应少、直接在基因水平上起作用、可信度高等优点。本文简要介绍了突变体的获得、筛选、鉴定，并总结了几类与光破坏防御有关的突变体。     

超高静压协同中温对凝结芽孢杆菌芽孢灭活动力学规律的研究

研究了超高静压协同中温对凝结芽孢杆菌芽孢在磷酸缓冲液和牛奶(经超高温灭菌)中灭活的动力学规律,并对超高静压的升压过程及相应的灭活效果进行了研究.结果表明,升压过程对凝结芽孢杆菌芽孢灭活的影响不能忽略,且随压力增加这种效果越强,最高使其下降1.77个数量级;凝结芽孢杆菌芽孢在牛奶中比在磷酸缓冲液中有更高的抗性;在3种拟合模型(线性、Weibull和Log-logistic模型)中,线性模型不适合模拟这些存活曲线,而Log-logistic模型能更好地模拟这些存活曲线,其次是Weibull模型.     

超高静压协同中温对凝结芽孢杆菌芽孢灭活动力学规律的研究

研究了超高静压协同中温对凝结芽孢杆菌芽孢在磷酸缓冲液和牛奶(经超高温灭菌)中灭活的动力学规律, 并对超高静压的升压过程及相应的灭活效果进行了研究。结果表明, 升压过程对凝结芽孢杆菌芽孢灭活的影响不能忽略, 且随压力增加这种效果越强, 最高使其下降1.77个数量级; 凝结芽孢杆菌芽孢在牛奶中比在磷酸缓冲液中有更高的抗性; 在3种拟合模型(线性、Weibull和Log-logistic模型)中, 线性模型不适合模拟这些存活曲线, 而Log-logistic模型能更好地模拟这些存活曲线, 其次是Weibull模型。     

慢性高眼压下兔视网膜组织蛋白质组变化的初步研究

应用蛋白质组学技术对兔青光眼慢性高眼压视网膜组织的蛋白进行初步分析。左眼前房注入0.2mL复方卡波姆溶液制作成慢性高眼压模型,右眼为对照眼。28d后分离各组视网膜组织,用双向电泳分离试验组和对照组的蛋白,然后分析电泳图谱,对比、分析其表达蛋白质点的差异,寻找兔视网膜中与慢性高眼压相关的蛋白质。结果表明,慢性高眼压诱导视网膜组织3种蛋白质出现明显差异表达。质谱鉴定出3个蛋白质,分别为热休克蛋白70(heat shock 70 kD protein,HSP70),丙酮酸激酶(Pyruvate kinase)和烯醇酶(enolase)。通过双向电泳,发现兔视网膜蛋白质表达与对照眼相比有质和量的变化,这些变化涉及与神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)糖酵解及应激反应有关的几组蛋白质,提示上述蛋白质组改变可能参与了慢性青光眼神经节细胞凋亡的过程。