一种获得分散良好的植物染色体压片技术

植物染色体压片技术在染色体数目统计,染色体组型、核型分析及原位杂交等实验中极为重要。植物细胞膜外因包被有由纤维素、果胶等组成的细胞壁,增加了染色体制片的难度。无论是利用酸解法还是酶解法,人们通常都是将实验材料经一定的预处理、酶解、后低渗、染色之后,盖上盖玻片,用解剖针或镊子轻敲盖玻片直至染色体分散良好。此方法对于具有丰富经验的操作者作可能轻而一举。但是对一些新手(尤其是初次做染色体压片实验的学生)。要获得一张染色体分散良好的片子绝非易事。如何在进行学生实验课时,让学生在实验中通过1～2次操作就能获得分散良好的染色体片子,笔者在实践中摸索出下列经验以供参考。     

利用染色体G显带技术鉴定人永生细胞实验条件初探

目的:探索利用染色体G显带技术鉴定人永生淋巴细胞的最佳实验条件。方法:在常规染色体制片技术的方法和手段的基础上,分别观察不同PHA浓度和培养时间对永生淋巴细胞分裂增殖的影响;然后,选择不同浓度秋水仙素处理细胞,观察染色体分散程度和中期分裂相的形态。结果:在永生淋巴细胞培养48h,PHA终浓度为0.1mg/mL,秋水仙素终浓度为0.04μg/mL,且其作用时间为1.5~2h的条件下,所获得的细胞染色体标本分裂相较多、染色体较长、分散较好、利于带型分析。结论:利用染色体G显带技术鉴定人永生淋巴细胞提供了技术保证,降低了实验成本,并且缩短了实验时间。     

染色体组型分析

一个二倍体动植物的配子中的全部染色体称为一个染色体组。染色体组型或称为核型是指染色体组在有丝分裂中期的表型,即这一组染色体的数目、大小、形态,着丝点位置,付缢痕,随体的有无等。染色体组型分析,就是对染色体组中的染色体作上述各种形态特征的描述。它是鉴定染色体组的一种基本方法。实验目的初步掌握染色体组型分析的基本方法。实验材料选择实验生物细胞分裂中期染色体分散良好的细胞,进行显微摄影,取清晰的底片放大出照片,本实验是用人的染色体照片。实验方法步骤     

淡水涡虫染色体的制备方法

以涡虫的再生组织为材料,用秋水仙素处理长有再生组织的涡虫片段,并通过改善各种实验条件,得到高清晰度的染色体图谱。结果表明,本方法简便易行,制成的染色体分散好,形态清晰,适用于对涡虫染色体的进一步研究。     

小鼠骨髓细胞染色体标本制备中的失误与对策

动物骨髓细胞具有数量多且分裂旺盛的特点 ,可以直接利用其进行染色体标本的制备 ,这种方法具有方便快捷、不需体外培养和无菌操作 ,并且可以真实地反映完整机体所受环境影响的优点 ,常用于环境中致畸、致突变因素的检测和小型动物染色体的研究 ,在临床上也常用于白血病、多发性骨髓瘤等恶性血液病的研究。小鼠骨髓细胞染色体制备实验也是遗传学及细胞生物学的重点实验之一。1　问题的提出一个优良的动物骨髓细胞染色体制片应该是 :全部染色体较集中 ,其中各染色体分散均匀且互不重叠 ,染色体长度适中 ,能清晰地显示出着丝点位置 ,染色体呈…     

水稻染色体标本制备的风油精法

水稻的染色体较小,不同的染色体在形态上较难区分。常规的压片技术由于很难使染色体分散,且也不能完全排除细胞质的干扰,因而很不适用于水稻染色体核型分析及显带。Kurata 等(1978)采用酶解与火焰干燥技术制备水稻染色体标本,获得清晰的染色体图象,从而成功地进行了水稻染色体的核型分析。陈瑞阳等(1982)参照人类染色体     

运用“知识点分散法”突破难点——谈“减数分裂”的教学

如果把难点的有关感性材料(知识点)适当分散,使学生对感性材料有一个认识、加工过程,从而使难点变得相对容易,使感性认识能比较容易完成飞跃而成为理性认识。这就是“知识点分散法”突破难点的最初设想。下面谈一谈在“减数分裂”的教学中运用此法的过程。学习减数分裂的关键是对减数的理解。而在对染色体减半的理解中,对同源染色体及其     

果蝇唾腺染色体制片技术的改进

观察果蝇唾腺细胞染色体,是高中生物学中的一个主要实验。通过实验使学生对遗传物质的载体——染色体有一个感性认识。虽然在许多书刊上较详细地介绍了果蝇唾腺染色体装片的制作方法,但许多中学教师仍感到困难。主要问题是染色体成团,染色体的臂伸展不开,影响实验效果。为此我们进行了多方面的实验探索,以三龄幼虫低温冷冻方法效果较好,现     

中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中期染色体悬浮液的制备及其流式核型分析

流式核型分析是用流式细胞光度术(FCM)定量分析染色体的 DNA 分布,以便得到某种染色体在物种或细胞群体中的频数。其原理是把染色体分散于悬浮液中,用荧光染料对DNA 进行染色后,染色体以百万分之一秒的速度逐个通过激光束的焦点,产生的闪光被接收,并转换为电脉冲后,以频率分布图表示。流式分类是上述方法的延伸,使带有特殊 DNA     

一串红染色体制片技术优化与计数

以一串红商品种‘展望红’萌发种子根尖、幼苗茎尖生长点以及嫩叶为实验材料,利用常规压片法比较不同材料、不同预处理液及预处理时间对一串红染色体制片的影响,探索实验预处理条件。然后利用去壁低渗法对一串红4个商品种和一串红株型突变体及其野生型进行染色体计数。实验结果显示:以一串红萌发种子的根尖为实验材料,用0.002 mol/L 8-羟基喹啉预处理3~4 h压片所得染色体效果最好;分别观察6个供试品种(系)分散良好、清晰的30个分裂相细胞,86.7%及以上的细胞染色体数目为2n=44。研究表明,一串红株型突变体与野生型及4个商品种在染色体数目上没有差异。     

麦类作物体细胞基因组原位杂交(GISH)效果影响因素的分析

以八倍体小滨麦、八倍体小黑麦、八倍体小偃麦、小麦-中间偃麦草双体异附加系为实验材料对影响麦类作物体细胞GISH技术实验效果的因素进行分析,研究结果表明:细胞分裂相多、染色体分散良好、无杂质影响的高质量的染色体制片是取得理想实验效果的基础;探针DNA浓度与封阻DNA浓度的比例及杂交后洗脱条件的控制是取得理想实验效果的关键。此外,还对麦类作物体细胞基因组原位杂交实验中出现的染色体丢失、外源染色体无杂交信号、杂交信号的强弱、杂交信号过多(杂交背景重)或过少、噪音信号及杂交污点产生的原因进行了分析,并提出了相应的解决方法或注意事项。     

玉米根尖细胞染色体G带诱导

本研究以玉米为材料,采用放线菌素 D(AMD)前处理,防止染色体过度收缩;利用气干片技术,洗脱染色质,使染色体分散良好;应用稍加改良的Seabright 法,Utakoji法及醋酸地衣红技术处理染色体,都诱导出染色体的横纹带。其图象与哺乳动物的染色体 G 带相似,每条染色体均显示带纹,带纹分布于整条染色体,并且从同一细胞取得玉米染色体 G 带核型照片。     

黄果龙葵和龙葵染色体制片优化及核型分析

该实验以黄果龙葵和龙葵的根尖为实验材料,进行不同的预处理、固定和解离,确定出各种材料适合于核型分析的制片方法。结果表明:龙葵于15℃条件下经0.05%秋水仙素预处理2.5h,固定后用1mol/L HCl酸解后,染色观察,得到的染色体分散,易于染色体计数和形态观察。用此方法对黄果龙葵和龙葵进行核型分析,结果发现:黄果龙葵和龙葵都属于小型染色体,黄果龙葵为四倍体,核型公式为K(4n)=48=4sm+44m,核型不对称系数为56.22%,属于2B核型。龙葵为六倍体,核型公式为K(6n)=72=72m,核型不对称系数为55.89%,属于1B核型。     

蟾蜍骨髓细胞染色体制备方法

蟾蜍骨髓细胞染色体制备方法檐除染色体数目少（２—２２）,个体大,核仁组成区具有多态性,是观察研究染色体的好材料。其染色体制片方法,最早使用切片法或压片法,效果不够理想。近年来发展为用血淋巴细胞培养制备法,很容易得到染色体分散良好的标本片,为闽练染色体...     

电子显微镜分离小鼠染色体的研究

本实验对小白鼠的骨髓细胞,制成电镜染色体样品,探索了利用电子显微镜所产生的高度聚焦的电子束,将目标染色体或梁色体处段与其他染色体或染色体片段分离,切割开的过程,检验了电子束分离,切割染色体的可行性和有效性,开发出了一套较为成熟的电子束分离,切割染色体的新技术或方法,使之成为染色体及基因研究的有效手段。     

麦类作物体细胞基因组原位杂交（GISH）效果影响因素的分析

以八倍体小滨麦、八倍体小黑麦、八倍体小偃麦、小麦一中间偃麦草双体异附加系为实验材料对影响麦类作物体细胞GISH技术实验效果的因素进行分析,研究结果表明：细胞分裂相多、染色体分散良好、无杂质影响的高质量的染色体制片是取得理想实验效果的基础;探针DNA浓度与封阻DNA浓度的比例及杂交后洗脱条件的控制是取得理想实验效果的关键。此外,还对麦类作物体细胞基因组原位杂交实验中出现的染色体丢失、外源染色体无杂交信号、杂交信号的强弱、杂交信号过多(杂交背景重)或过少、噪音信号及杂交污点产生的原因进行了分析,并提出了相应的解决方法或注意事项。     

微核与染色体畸变的相关性

由于染色体畸变的分析可以准确地反映外 界因素对生物体的作用。因此,这种技术被广 泛地用于遗传毒理学的研究以及诱变剂的筛选 等工作。但在检测方面,中期细胞染色体分析 存在着人所共知的缺点,例如实验周期长而程 序繁。另外,畸变反应过于敏感也给工作带来 某些局限性,如,药剂和实验条件造成染色体粘 连而分散不佳,或中期细胞太少,降低了分析的 可靠性。而利用微核技术来检测对生物的损伤 却简便、迅速,恰恰弥补了畸变分析的弱点。所 以自Matter 等介绍了微核率作为染色体损伤 检测的经典方法以来,目前这种技术在人和动 物染色体损伤分析中已得到广泛应用,而且植 物小抱子母细胞的微核也用于环境检测。     

家畜及实验动物高分辨染色体研究进展

高分辨染色体(High Resolution chromosome HRC)是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色体分裂相,早期染色体较中中期染色体长,显带后可以得到更多更细的带纹,从而提高人们对染色体的分辨力.Yuns, J. J(1976)首先以氨甲喋呤使细胞同步化法,建立了人类高分辨染色体技术.随之国内外许多学者对人类高分辨染色体进行了广泛而深入的研究.近几年,关于家畜和实验动物的高分辨染色体研究陆续亦有一些报道,但理论和应用方面的进展依然有限.本文试图就家畜和实验动物高分辨染色体研究的方法、进展以及意义进行阐述,同时提出值得探讨的几个问题.     

重组CHO-C_(28)细胞染色体鉴定方法的研究

分别采用五种不同条件鉴定重组CHO-C28细胞染色体。对其影响因素如用秋水仙素处理时间的长短、固定液的使用方法等进行了试验,选择出了细胞分散好、染色体形态正常、边缘清晰、便于鉴定的两种最佳条件。此方法操作简单、成功率高,适于CHO-C28细胞染色体鉴定。     

一种改进的两栖类胚胎染色体制备方法

本文提供了一种改进的两栖类胚胎染色体制备方法。和原来的方法比较有三方面改进：分散细胞采用了Versene液,第二次固定采用了甲醇：冰乙酸(1:3）的固定液以及Ba(OH)₂的后处理。结果表明,染色体形态比原方法好,而且在多疵狭口蛙第7号染色体上观察到胚胎时期才存在的次猛痕。