转人工合成GFM CryIA基因烟草表现明显杀虫活性

为了使来自原核生物的苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋白（ＩＣＰ）基因能够在高等植物中得到很好的表达,对编码这种杀虫晶体蛋白基因的核苷酸顺序进行了必要而又合理的修饰和改造：不改变杀虫晶体蛋白基因的氨基酸编码顺序,将杀虫晶体蛋白基因的密码子更换成植物基因组中常用的优化密码子,同时更换掉Ｂｔ杀虫晶体蛋白结构基因中的不稳定元件,人工全合成了长度为１８２４ｂｐ的杀虫晶体蛋白基因－ＧＦＭ ＣｒｙＩＡ基因。为了检测合     

发光杆菌碳端截短的Mcf毒素杀虫活性研究

发光杆菌能产生很多毒素杀死昆虫宿主.这些毒素中有一种叫Mcf致软因子.可以在大肠杆菌中表达并毒杀毛虫.通过同源性比对分析.在Mcf氨基酸序列中N端有一个BH3的区域,拥有BH3结构域的蛋白具有细胞凋亡的功能,推测保留N端BH3结构域的碳端截短Mcf毒素具有杀虫毒力.从发光杆菌属(Photorhabdus luminescens subsp.laumondii)中克隆了杀虫毒素基因mcf的5'端3 960 bp的核酸序列(包含BH3结构域).将该基因连接到E.coli表达载体pET28a上,并转入BL21(DE3).经IPTG诱导后,在SDS-PAGE上发现145 kD的目的蛋白条带.利用亲和层析纯化得到纯毒素,分别对甜菜夜蛾一龄幼虫喂食生测和对甜菜夜蛾四龄幼虫(Spodoptera exigua)注射生测,显示该毒素具有喂食毒力和血腔毒力,证明含有BH3区域的碳端截短Mcf毒素有杀虫的生物活性.     

日本生物技术简讯五则

一、用于植物的穿梭载体 农林水产省农业生物资源研究所与美国Rutger大学Waksman研究所的Joachim Messing研究组合作开发出用于植物的穿梭载体。这种载体来自小麦病毒WDV。在分离到病毒复制的基因后,使之与标记基因和在大肠杆菌中复制所需的基因相连。这是可在大肠杆菌中插入外源基因,然后转到植物的第一种穿梭载体。它在植物细胞中增殖,产生高于常规法的外源基因表达。     

基因治疗保持动脉畅通

为了使阻塞的动脉保持畅通 ,美国心脏病学家用一个微小的、有筛孔的钢管 (以下简称为微钢管 )在血管成形术后永久地插入动脉 ,此术已获成功。但有些病人的动脉壁细胞生长过多 ,会越过筛孔而重新阻塞动脉。科学家已知某些基因可阻止动脉细胞过度生长。现在 ,费城的宾夕法尼亚大学的ＲｏｂｅｒｔＪ .Ｌｅｖｙ研究组创建了一种含ＤＮＡ的聚合物 ,用来包住微钢管 ,使其成为一种基因释放工具。这种含ＤＮＡ的聚合物包被的微钢管一旦插入动脉 ,该聚合物便开始降解而释放ＤＮＡ ,ＤＮＡ穿入动脉壁细胞 ,阻止了动脉壁细胞过度生长。Ｌｅｖｙ研究组在…     

黄蜂幼虫分泌物，可以控制毛虫的大脑

一种称为Glyptapantele的寄生性黄蜂采用了同样残忍的策略,只不过它将幼虫植入毛虫而非蟑螂的体内。但是,在这种情况下,黄蜂幼虫会使毛虫成为它们的保镖。幼虫从毛虫体内出现,粘在附近植物的身上,毛虫则在一边为它站岗放哨,对试图接近它们的任何物体展开攻击。研究这种奇特现象的科学家发现,一两只幼虫会躲在毛虫身后。黄蜂幼虫可能会分泌某种化学物质,用以控制可怜的毛虫的大脑,此时毛虫充其量只是行尸走肉,幼虫已将毛虫吃得只剩下一半。     

遗传工程师准备对人进行试验

学者们不久将第一次被正式批准把新的基因移植到病人身上以作治愈遗传病的尝试。全世界几个研究中心正在做遗传工程实验,这将促使我们对它的了解。美国有两个研究组,一个在德克萨斯州的休斯敦,另一个在加利福尼亚州的圣地亚哥。他们把生长在实验室培养皿里的一些新的基因传输到人的细胞中已获成功。这些细胞具有纠正     

Monsanto为获得基因枪技术以1.5亿美元收买了Agracetus公司

美国孟山都（Ｍｏｎｓａｎｔｏ）公司１９９６年４月８日宣布,以１．５亿美元从美国Ｗ．Ｉ．Ｇｒａｃｅ公司收买了拥有粒子枪法“Ａｃｃｅｌｌ”专利的美国Ａｇｒａｃｅｔｕｓ公司。Ａｇｒａｃｅｔｕｓ公司是首先确立植物基因导入技术,开发基因枪的企业。Ａｇｒａｃｅｔｕｓ公司于１９９２年把利用Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ向棉花导入基因的技术和向棉花、玉米、番茄导入ＢＴ杀虫基因等技术转让给Ｍｏｎｓａｎｔｏ公司。Ａｇｒａｃｅｔｕｓ公司拥有大豆基因重组技术的美国、加拿大、欧洲专利。Ｍｏｎｓａｎｔｏ公司１９９５年１月向欧洲…     

苏云金杆菌营养期杀虫蛋白的研究

营养期杀虫蛋白 (vegetativeinsecticidalproteins ,VIPs)是苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis,Bt)在对数生长中期分泌的一类新型杀虫毒蛋白。VIPs主要分为VIP1、VIP2和VIP3三种。VIP1和VIP2构成二元毒素 ,对鞘翅目叶甲科的昆虫具有杀虫特异性 ;而VIP3对鳞翅目昆虫具有较广谱的杀虫活性。VIP1和VIP2的杀虫作用机理还不清楚 ;VIP3通过诱发细胞凋亡 ,最终导致昆虫死亡 ,这种作用机理与Bt杀虫晶体蛋白的作用机理完全不同 ,这为筛选新的杀虫活性物质提供了新的思路。vip基因现已被应用于转基因杀虫植物的构建 ,得到高效抗虫的多价转基因玉米。此外 ,VIPs嵌合蛋白的构建、vip及其融合基因导入其它许多宿主微生物等方面的研究也具有诱人的潜在应用前景。     

一种新的Bt杀虫基因HJC原核表达蛋白活性的鉴定

HJC基因是由2个Bt基因(cry1Ab和vip3)经过人工融合而成,具有更广谱的杀虫活性,可延缓害虫产生交互抗性的时间。将已构建好的携带HJC基因的重组质粒pET28a-HJC转化到大肠杆菌BL21中诱导表达。该HJC融合蛋白主要以包涵体形式存在,变性条件下使用镍亲和层析柱对其进行纯化,并经尿素梯度透析复性后,进行免疫反应活性及美国白蛾杀虫活性测定。Western blot结果显示,该原核表达蛋白与转HJC基因水稻中的HJC蛋白有相同的免疫反应性,对美国白蛾也有一定的杀虫活性,可以替代植物外源蛋白进行转HJC基因产品的食用安全性评价。     

加科学家发现“死亡熏除＂法可驱赶所有昆虫

日前,科学家发现不管是蟑螂还是毛虫,它们在死亡之后,都会散发出具有恶臭的酸性脂肪类混合物,而这种气味能够驱赶室内所有昆虫。加拿大麦克马斯特大学（McMaster University）生物学家大卫.罗洛（David Rollo）在研究蟑螂的社会行为时发现了这种奇怪现象。     

在水稻表达了外来基因因此水稻基因操作的手段已齐备

日本筑波大学生物科学系讲师内宫博文等和东京大学教养学部教授庄野邦彦等的研究组在世界上首次成功地向水稻细胞导入、表达外来基因。由于美国斯丹福大学生物科学部的Virginia Walbot 对玉米进行基因操作也已成功(参阅 Nature 杂志1986年2月27日号),因此,被认为是很难的单子叶植物的基因操作手段的准备工作大致已经齐备。今后有效地利用这种技术,单子叶植物的水稻、玉米、小麦等主要谷类作物将成为植物生物技术的研究对象。关于水稻方面的成果已在4月份于神奈川县召开的日本育种学会上初次发表。     

开发导入基因的猪

美国Virginia Polytechnic Institute和美国Virginia州立大学小组将人的抗凝固蛋白C基因导入猪,使其产物在乳汁中大量分泌获得成功。要在工场使用动物,廉价制造复杂的天然药剂,乳汁分泌是否恰当和其数量是很关键的问题。担任两设施的化学工程教授William Velander在4月召开的美国化学学会上讲述了培育转基因猪的情况。该研究组向猪受精卵导入2个基因,将这种基因移植给受卵猪。导入的是来自肝脏的人抗凝固蛋白C基因和连接了合成乳汁蛋白的开关的小鼠基因。小鼠基因在乳汁分泌时由乳腺组织使抗凝固蛋白C基因打     

科学家克隆“漂浮基因”

一个法国人和美国人组成的研究小组鉴定和克隆了“漂浮基因”(flotation gene),他们认为这种基因能够给予一般情况下在液体培养基中下沉的微生物或细胞浮力。研究小组相信,将这种基因插入工业上有用的微生物或细胞,通过增加通气、减少搅拌和改善微生物的存活就可以提高产品产量。发现和克隆漂浮基因的小组包括宾夕法尼亚州立大学分子生物学和细胞生物学副教授Donald bryant 博士和巴黎巴斯德研究所的三位分子生物学家。     

Agratcetus公司研制抗毛虫棉花

Agracetus公司已把苏云金芽孢杆菌(BT)中的杀虫剂毒素基因插入到棉花染色体中。温室试验表明,产生的植物抗毛虫,特性稳定。种子遗传,将抗性传给下一代。公司希望得到美国农业部批准,明年在美国南部大田试验遗传工程的棉花植物。如果试验成功,抗虫棉花品种可能早在1992年就可进入市场。棉花防虫占世界杀虫剂市场的四分之一。虽然毛虫仅是为害棉花的虫害之一,但美国农民每年要花1.5亿～2亿美元来防治这些害虫。抗虫植物可以削减农民的生产消费,通过降     

生物钟与血糖调节密切相关

美国科学家通过将人类基因组分成数百万个片段并重新排列组合,成功描绘出清晰度和分辨率最高的基因组三维图像。这种技术能帮助科学家探索基因组的形状,研究基因结构与基因活力的关系,并探索细胞内部结构的变化。     

埃博拉病毒糖蛋白致命之谜

美国马里兰州的国立卫生研究院的ＧａｒｙＪ .Ｎａｂｅｌ研究组提示出埃博拉病毒破坏血细胞从而导致大量出血症状的关键性机制。他们在 2 0 0 0年 8月份的ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ上描述了他们的发现。两年前Ｎａｂｅｌ及其同事曾报道了埃博拉病毒以秘密的形式产生糖蛋白 ,这种糖蛋白成为该病毒新拷贝的表面部分 ,它抑制免疫细胞并且同组成血管衬里的内皮细胞相结合。目前他们报道了进一步的研究 ,他们将编码这种糖蛋白的基因加入到实验室生长的人体细胞中去 ,观察到在加入后的 2 4小时期间细胞呈现更圆的形态 ,并一个个地分离出来 ,2…     

遗传工程为白杨树开辟了前景

美国依阿华州研究人员采用抗昆虫基因转化白杨树,这对于发展美国重要的商品化森林树——白杨是非常重要的。在这点上,依阿华州研究小组用抗昆虫基因转化了白杨树叶细胞,并把该细胞再生成仔苗。但目前要告诉遗传工程树抗虫效果如何还为时过早。几乎每个研究人员都企图用遗传工程法研制抗虫植物,而依阿华州研究人员却不这样,他们并不采用苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白的基因,而是利用一种编码酶(阻止胰蛋白酶)的马     

我国双价抗虫棉的研究取得突破性进展

中国农业科学院生物技术研究中心郭三堆领导的研究组与国内有关单位密切合作,继成功培育出已在生产上发挥作用的国抗１号、国抗１２号、晋棉２６号单价抗虫棉品种后,在双价抗虫棉的研究中也取得了重要进展。转Ｂｔ抗虫基因的单价抗虫棉只能产生一种杀虫蛋白,主要对棉铃虫等鳞翅目害虫有抗性。据有关研究,在长期的选择压力下,转单一Ｂｔ杀虫基因抗虫棉应用若干年后,棉铃虫有可能产生抗性。而双价抗虫棉能够同时表达出两种杀虫蛋白。其中,ＣｐＴＩ是一种广谱杀虫蛋白,在杀虫机理上与Ｂｔ蛋白不同。因此,双价抗虫棉不仅增强了抗虫棉的…     

苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白Vip与Cry蛋白的协同作用

将构建的营养期杀虫蛋白基因vip3表达质粒pBMB2328和含杀虫晶体蛋白基因(crylAc10或crylCa)质粒同时电转化无质粒突变株BMB171并双抗筛选。经PCR特异引物扩增验证,分别得到含crylAc10和vip83、crylCa和vip83的双基因重组菌BMB2830-171和BMB2882-171。用单基因重组菌作对照,分别测定了营养期杀虫蛋白Vip83与杀虫晶体蛋白CrylAc10和Cry1Ca两组蛋白对3种重要鳞翅目害虫毒力。经统计分析,结果表明两组杀虫蛋白Vip83与CrylAc10和Vip83与CrylCa之间对棉铃虫均存在拮抗作用,对甜菜夜蛾协同作用不明显;但对小菜蛾前协同作用不明显,而后则有增效作用,其共毒系数为32．6。双基因的遗传稳定性检测表明这种正负协同关系具有一定的分子遗传稳定性,可为高效广谱工程菌的构建提供依据。     

昆虫细胞表达功能性HLA-DR4

瑞士 Hoffmam-la Roche 公司用昆虫细胞表达人二级主要组织适合基因复合体(MHC)抗原的HLA-DR_4分子,使昆虫细胞发挥人的抗原提示细胞机能。美国 Roche 公司副经理兼生物技术研究组组长 Michael Steinmetz 在9月19日东京召开的第二届罗希讨论会上发表了其概要。研究详情近期在 Journ-