用染料修饰吐温80液—固萃取体系从猪心肌匀浆液中分离纯化心肌黄酶

用三嗪类染料 Ｃｉｂａｃｒｏｎ Ｂｌｕｅ Ｆ３Ｇ－Ａ修饰的吐温８０,与吐温８０、硫酸被构成液－固萃取体系,从猪心肌匀浆液中分离纯化心肌黄酶。研究了吐温８０染料修饰物在吐温８０相中所占的比例、分相盐浓度、溶液的酸度、匀浆液的加入量等对匀浆液中酶及杂蛋白在两相中分配的影响。在室温条件下,酶选择性地进入吐温８０固相,杂蛋白主要留在盐水相。匀浆液中心肌黄酶的酶活力平均收得率为８１．４％,一步纯化倍数为６．６。降低盐浓度,提高盐水相酸度,能使酶从吐温８０固相反萃到盐水相。     

应用液—液双水相抽提技术分离纯化甘油激酶、a-甘油磷酸脱氢酶及心肌黄酶

用液-液双水相抽提技术分别从嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus)菌体、兔肌及猪心肌匀浆液中分离甘油激酶、a-甘油磷酸脱氢酶及心肌黄酶,研究了pH,匀浆液的量、氯化钠浓度及丙酮等因素对分配系数、上下相体积之比,酶活性回收率及分离效果等参数的影响,并确定了抽提上述三种酶的最佳相组成系统。用本文的工艺抽提甘油激酶、a-甘油磷酸脱氢酶及心肌黄酶有下列优点： 1．酶活回收率较高,分别为90％、95％及70％2：分离效果较好,通常提纯三、四倍以上3．各酶均存留在下相,即磷酸钾盐富相中,故可省去聚乙二醇(PEG)的分离工序而直接与后继精制工艺衔接,简化了工艺,在实验室及工业生产中均有实用价值。     

提高布氏白僵菌产孢量的培养基及培养条件研究

采用液固两相培养法,筛选出了适用于培养布氏白僵菌Bbr84菌株的培养基,并测定了培养基、培养时间和光照条件对产孢量的影响.结果表明:用液固双相培养法培养布氏白僵菌获取高孢粉,在液相培养阶段,SDAY+2%麦芽糖是较好的培养基;固相培养阶段,以大米+稻壳+黄粉虫粪组合产孢量较高,且在培养的第五天白僵菌产孢量即达到高峰,这比已报道的其他培养料配方的产孢高峰时间缩短2-3天.培养前期,应以黑暗环境为主,以增强菌丝生长,但后期应适当供给光照,以促进菌丝大量产孢.     

绿色木霉发酵玉米秸秆产糖条件的研究

对经稀酸预处理的玉米秸秆发酵产糖条件进行研究,通过单因素和正交试验考察绿色木霉培养时间、接种量、培养基液固质量比、装料量对产糖的影响,结果表明：最佳产糖条件为培养时间3d,接种量1.5片,培养基液固质量比为3.5,装料量为8g,在此条件下水解还原糖得率最高为8.01%,从而为玉米秸秆的进一步综合利用提供了参考依据。     

谷氨酸钠流化床吸附脱色的柱过程研究

以颗粒活性炭(GAC)为吸附剂,采用多柱串联流化床进行味精中和液脱色,对柱过程进行了模拟研究。测定了平衡数据、传质动力学及流体流动参数,建立了具有广泛适应性的,包括颗粒分级、粒度分布、内外扩散及两相返混的宽粒度液固流化床吸附过程模型。对所研究体系的模拟计算与实验结果符合较好。     

循环自由流等电聚焦方法的建立及应用研究

等电聚焦是利用蛋白质分子或其它两性电解质分子的等电点不同,在一个连续、稳定、线性的pH梯度中进行蛋白质分析分离的技术。薄层凝胶等电聚焦具有高分辨率,但上样量小,聚焦后样品分析处理不便,仅局限于分析。循环自由流液相等电聚焦以液体循环流动代替固相载体,上样量大,聚焦后样品分析处理方便,有较大的制造潜力。Bier等已开展这项技术的研究。该技术应用到遗传工程上可对干扰素等进行精制纯化^[3]。本实验应用循环自由流等电聚焦仪(Recycling free-flow isoelectric fo-cusing,RIEF)进行了pH梯度的建立、模型化合物的分离、相关参数的比较,并被步应用于生物活性蛋白的精制和活性回收,旨在为遗传工程产品下游工艺提供一种新型而行之有效的方法。     

酶在非水相介质中的生物催化

本文主要综述了酶在非水相介质中实现生物催化反应的各种反应体系如液－液两相、反胶团、液－固两相、气相等的特点,性质及应用。     

高速逆流色谱技术在生物大分子分离纯化中的应用

高速逆流色谱是一种连续液-液色谱技术,具有无固相载体、样品无需严格预处理等优点。近10年来,在设备结构和溶剂体系等方面进行了大量的研究开发,已推广应用于生物技术、医药、天然产物、环境监测、食品等领域。为适应生物大分子和活性细胞的分离,采用条件温和的双水相体系,研究开发相应的高速逆流色谱设备已成为热点。针对双水相体系的特点,已经开发出了多种具有较高固定相保留率的新型高速逆流色谱设备,通过优化实验条件,成功地进行了多种蛋白质的分离纯化。本对该领域的最新进展进行了综述与评价。     

白花蛇舌草中熊果酸的提取工艺研究

本研究通过单因素实验,以提取的选择性和提取率为指标,考察了白花蛇舌草中熊果酸的提取过程的几个影响因素;并通过正交实验,对过程参数进行了优化。结果表明,各因素对熊果酸提取效果的影响程度从高到低分别是:提取时间>提取次数>乙醇体积分数>液固比;确定的最适提取条件为:95%乙醇溶液在回流温度下提取两次,每次1.5h,液固比为8:1。     

怀地黄多糖双酶法提取工艺研究

本文对怀地黄多糖（polysaccharide of Rehmannia glutinosa f.hueichingensis（Chan et Schih）Hsiao,简称为RGP）双酶法提取工艺（Extracting technology by dienzyme,简称DEET）的条件进行了研究和探讨。双酶提取法即在第一次浸提时分别加入纤维素酶和中性蛋白酶两种生物酶进行多糖的辅助提取。本实验选取提取温度、纤维素酶加量、提取液pH、固液比四个因素,以多糖含量作为指标,通过L9（3^4）正交实验确定此工艺的最佳工艺参数。结果表明：RGP双酶法提取的最佳工艺参数为：浸提温度65℃、浸提液pH5．5、纤维素酶加量7．5％、固液比为1：30;浸提液浓缩比为4：1、沉降剂乙醇添加量5倍于浸提液体积;脱蛋白采用浸提过程中中性蛋白酶脱蛋白法与浸提后Sevag脱蛋白法联合应用方法（简称“S＋N”法）,提取得到的RGP含量及得率可分别为60．26％和8．97％。较传统的水浸醇沉提取工艺RGP含量及得率分别提高了1．5倍和1．4倍。     

固相萃取材料在蛋白质组学研究中的应用进展

随着蛋白质组学的发展,蛋白质的分离将发挥越来越重要的作用。固相萃取是近年发展起来的一种样品预处理技术,在对某些目标蛋白质的分离纯化中作用明显。与传统的液液萃取法相比,固相萃取可以提高分析物的回收率,操作简便、省时省力。萃取材料的选择对固相萃取效果有着极为重要的影响,硅胶和磁性纳米材料是常用的萃取材料。石墨烯的出现为萃取技术的发展提供了新思路。我们简要综述了近年来固相萃取材料在蛋白质组学研究中的应用进展。     

固相闪烁晶体用于液闪测量的评价

本文介绍两种固相闪烁晶体制样及测量方法并与乳化剂闪烁液相比较。 ³H, ¹⁴C, ¹²⁵I及 ³⁵S其计数效率(E％)分别达34.1％,89.9％,60.3％及77.4％。液相及两种固相闪烁体间的变异系数(CV％)范围为5.1％—10.3％,同系列样品对不同厂家型号的液闪谱仪,测量效率趋一致。其测量效率、精确度、平行度等近于或优于液相测量。对数波谱分析表明无需淬灭校正并可用于双标记测量。用固相闪烁体制样不需闪烁液,故无毒、无污染、污物体积小且使用方便,克服了液体闪烁测量的不足。因此是较理想的可推广的新型样品制备与测量技术。     

气/液界面及固体表面硬脂酸LB膜结构性质研究

对气液/和固/液界面上硬脂酸LB膜的结构性质的研究表明,二价离子能够使气/液界面上LB膜表面压力降低,并出现一个固-固转变的过程.对此可以解释为是由二价离子富集在亚相表面,减弱了膜分子之间的库仑作用,使表面电势降低引起的.同时由于二价离子与硬脂酸分子形成复合物,单层膜的结构发生改变,导致固-固转变点的产生.对固体基质上多层LB膜的椭圆偏振研究表明,有序排列的硬脂酸LB膜具有明显的双折射性质.电镜观察发现两个固相垂直提位获得的多层膜在形貌上存在差异,低压固相膜较之高压固相膜存在明显的不均匀性.分析认为这是在膜从气/液界面向固体表面转移过程中发生重结晶引起的.     

气/液界面及固体表面硬脂酸LB膜结构性质研究

对气液/和固/液界面上硬脂酸LB膜的结构性质的研究表明,二价离子能够使气/液界面上LB膜表面压力降低,并出现一个固-固转变的过程.对此可以解释为是由二价离子富集在亚相表面,减弱了膜分子之间的库仑作用,使表面电势降低引起的.同时由于二价离子与硬脂酸分子形成复合物,单层膜的结构发生改变,导致固-固转变点的产生.对固体基质上多层LB膜的椭圆偏振研究表明,有序排列的硬脂酸LB膜具有明显的双折射性质.电镜观察发现两个固相垂直提位获得的多层膜在形貌上存在差异,低压固相膜较之高压固相膜存在明显的不均匀性.分析认为这是在膜从气/液界面向固体表面转移过程中发生重结晶引起的.     

中枢神经蛋白质组分析中双向电泳技术的建立

建立和优化了中枢神经组织蛋白质组分析所需的双向电泳及相关技术.由于中枢神经组织结构的特殊性,样品处理非常困难.对样品液组成、样品处理、上样方式、上样量、IPG胶条和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法和保存等相关技术进行了比较研究和条件优化后,以固相pH梯度等电聚焦为第一向和SDS均一胶（T=12.5%）的水平电泳为第二向,成功地得到了神经组织双向电泳图谱.     

超声波协同复合酶法提取姬松茸多糖

研究了超声波协同复合酶法提取姬松茸多糖的最佳工艺条件。采用均匀设计法分别考察不同时间、pH值、温度、酶浓度、固液比对纤维素酶、果胶酶以及木瓜蛋白酶酶解反应的影响,并研究三种酶联合使用时的加酶方式以及超声波协同提取时的最佳条件。结果表明,超声波协同复合酶法可显著提高姬松茸多糖的提取率,其最佳提取条件为：超声波作用20min,分步加酶法（先加果胶酶：pH值3．8、温度50℃、时间90min、加酶量7000U／g、固液比1：45;然后加纤维素酶：pH值3．6、温度75℃、时间120min、加酶量150U／g、固液比1：45;最后加木瓜蛋白酶：pH值3．6、温度75℃、时间120min、加酶量20000U／g、固液比1：45）,多糖提取率达到14．51％。     

糖化酶酶解米渣纯化米蛋白的工艺

研究了糖化酶酶解米渣纯化米蛋白的实验条件:液固比、酶解时间、pH、温度和酶量。通过正交实验优化了酶解主要条件,得到糖化酶水解米渣最佳条件:液固比5:1,时间3 h,pH 4.0,温度65℃和酶量30 U.g-1。在最佳条件下实验,米蛋白的提取率为81.3%,纯度为76.8%。     

金龟子绿僵菌固态培养生物变量优化研究

金龟子绿僵菌属于真菌类生物杀虫剂,本文研究了接种量、种龄、菌种代数等生物因素对金龟子绿缰菌生长及产孢量的影响,并对液-固两步发酵工艺进行了研究.经过优化,得到金龟子绿僵菌产孢的最佳生物参数是:接种量为2.5g/100g、种龄为5～6天;采用固体二代种,培养6天,孢子产量可达1.531×1010孢子/g干培养基.     

响应面法优化葡萄叶中白藜芦醇的提取条件

采用响应面分析法优化葡萄叶中白藜芦醇的提取条件,在单因素实验基础上,采用Box-Behnken中心组合设计原理研究乙醇体积分数、液固比和浸提温度3个因素对白藜芦醇提取量的影响,得出白藜芦醇的最佳提取条件为:乙醇体积分数为46%,液固比为23 m L/g,提取温度为62℃。在此条件下白藜芦醇提取量的预测值为47.55μg/g,实测值为47.96μg/g。     

响应面法优化葡萄叶中白藜芦醇的提取条件北大核心CSCD

采用响应面分析法优化葡萄叶中白藜芦醇的提取条件,在单因素实验基础上,采用Box-Behnken中心组合设计原理研究乙醇体积分数、液固比和浸提温度3个因素对白藜芦醇提取量的影响,得出白藜芦醇的最佳提取条件为:乙醇体积分数为46%,液固比为23 m L/g,提取温度为62℃。在此条件下白藜芦醇提取量的预测值为47.55μg/g,实测值为47.96μg/g。