中华真地鳖若虫分龄的研究

通过系统测定刚蜕皮中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker若虫腹宽、体长及体重值,得出若虫腹宽、体长及体重值变化有一定的规律,腹宽、体长及体重可以作为若虫分龄的标准。     

中华真地鳖若虫肠道细菌的研究

中华真地鳖是一种传统中药资源昆虫,从人工饲养种群的正常取食及蜕皮若虫肠道环境中分离、纯化,好氧和厌氧培养获得11个细菌菌株,对其形态、染色反应、培养性状和生理生化反应进行了系统研究。鉴定结果表明,上述11个细菌菌株依次分别属于:不动杆菌属(Acinetobacter)、柠檬酸杆菌属(Citobacter)、沙门菌属(Sal-monella)、芽胞乳酸杆菌属(Sporolacillus)、节杆菌属(Arthrobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)、地杆菌属(Terrabacter)、放线杆菌属(Actinobacillus)、克雷伯菌属(Klebsiella)、沙雷菌属(Serratia)、预研菌属(Yokenella)。中华真地鳖正常取食和蜕皮若虫肠道环境细菌种类不同。分离未获得真菌和放线菌。     

中华真地鳖生物学特性初步研究

中华真地鳖Eupolyphagesinensis系夜出性昆虫 ,其活动主要发生在夜间 ,1 9～ 2 4时活动最盛 ,且蜕皮高峰主要集中在后半夜。该文描述了初龄若虫的形态特征 ,对若虫的发育历期、蜕皮时间及卵鞘的孵化进行了研究 ,并比较了中华真地鳖若虫的消化道 ,提出了地鳖虫食品开发的流程 ;同时简要论述了地鳖虫基础研究及药用和食用开发过程中存在的问题     

中华真地鳖中肠主要消化酶的活性研究

以中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker为研究材料,测定人工饲养和野生地鳖虫在不同生长阶段消化酶的活性以及温度及pH对人工饲养地鳖虫中肠消化酶活性的影响。结果表明,在地鳖虫生长发育过程中,蛋白酶和脂肪酶活性随发育而逐渐增强,淀粉酶活性却随发育而逐渐减弱。在低龄若虫、高龄若虫和成虫阶段,人工饲养地鳖虫蛋白酶活力比野生地鳖虫低,人工饲养地鳖虫淀粉酶和脂肪酶活力比野生地鳖虫高;在30～60℃的范围内,人工饲养地鳖虫蛋白酶、淀粉酶的适宜温度范围为40～50℃,脂肪酶的适宜温度范围为35～45℃;蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的适宜pH范围分别为6.5～7.5,5.6～6.4和7.5～8.5。     

中华真地鳖六地理种群若虫生长发育研究

本文对中华真地鳖Eupolyphaga sinensis六个地理种群进行了研究,发现中华真地鳖体长与体宽呈显著一元线性回归关系,不同地理种群斜率（体形）存在差异。六个地理种群各龄若虫发育历期并不随龄期增长而延长。天津种群雌性若虫期发育历期显著大于其它种群,其它种群间除江苏种群外均无显著差异。雄性若虫期发育历期除天津种群外均无显著差异。同一地理种群,雌性若虫期发育历期大于雄性若虫期发育历期。以上结果表明,中华真地鳖不同地理种群间在形态和生物学上均有一定的差异。     

温度对越冬期中华真地鳖生长发育的影响

在恒温30℃、室温10℃和室外冬季变温条件下研究了越冬期中华真地鳖Eupolyphaga sinensisWalker的生长、蜕皮和存活情况。结果表明:在食料充足的条件下,适当加温可增加中、低龄若虫体重,减少死亡率,并可蜕皮,对其生长发育有促进作用;越冬温度对大龄若虫及成虫生长发育的影响不明显,但存活率影响较明显。恒温30℃的条件下可使越冬期雌成虫产卵。     

中华真地鳖断触角再生的研究

【目的】研究中华真地鳖Eupolyphaga sinensis(Walker)断触角再生特征及再生临界期。【方法】选取1~10龄健康的初龄若虫一条触角除基部3节外剪除,蜕皮后观察并统计触角的节数。选取生长一致健康的初龄4龄若虫,于第0~19日龄进行断触角处理,蜕皮后观察触角的再生情况和触角的节数。【结果】不同虫龄的初龄若虫断去触角蜕皮后,均能通过再生使触角的节数增加。1~10龄的若虫一条触角除基部3节外剪除,蜕皮后下一龄的触角节数分别为5、8、12、13~15、15~17、16~19、18~20、13~15、20~23、22~25、24~28节。4龄的初龄若虫一条触角分别除基部0~2、3、5、10、15、20节外剪除,蜕皮后触角的节数分别为11~12、13~15、18~21、19~25、24~27节,其中一条触角除基部20节外剪除蜕皮后基本恢复正常节数。不同日龄的4龄若虫一条触角除基部3节外剪除蜕皮后,0~8日龄的处理若虫蜕皮后触角节数为13~15节,而12日龄及以后的处理若虫蜕皮后触角节数为5~6节。4龄若虫的断触角再生临界期为9~11日龄。【结论】中华真地鳖在再生临界期内断触角后能够再生触角。     

中华真地鳖雌虫产卵习性及其卵的发育

在室内饲养条件下,通过对不同月龄的中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker雌成虫产卵量调查,并对卵块的质量品级和发育进度进行划分。结果表明1月龄至3月龄中华真地鳖的产卵能力较强;饱满、无破损、形状规则的卵块孵化较好;在卵的各发育阶段,卵块和卵粒的形态变化较明显,以此确立了卵发育的分级标准。     

中华真地鳖寄生螨的初步研究

在地鳖虫的饲养中发现 ,中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker被螨类寄生较严重 ,可造成巨大的损失。经鉴定该寄生螨为伯氏嗜木螨Caloglyphusberlesei,并对其进行了形态描述。通过饲养观察 ,总结了该寄生螨的发育历期、寄生部位、寄主带螨率和单头带螨量 ,并调查了该寄生螨在饲养土中的分布规律。根据该寄生螨的生物学特性 ,该文提出了几种防除该螨的措施和方法。     

中华真地鳖断足再生对发育的影响

研究中华真地鳖EupolyphagasinensisWalker的断足时间及数量对发育历期的影响,以及不同龄期断足处理后发育历期间的差异。以8龄若虫为研究对象,发现其再生临界期为20~26日龄。不同日龄的8龄若虫断去1条后足,蜕1次皮后能再生的若虫从断足至蜕皮的平均时间与8龄的正常历期相近,整个8龄若虫的发育历期均比正常历期长,并随断足处理日龄的增加而逐渐增加。蜕1次皮后断足没有再生的绝大部分个体,8龄若虫的历期均比正常历期短。以3日龄的4龄若虫为处理对象,发现断去不同数量的足后(蜕1次皮后均能再生),从断足至蜕皮的历期及4龄的历期,均随虫体断足数量的增加而增加,但断去1条或2条后足处理,从断足至蜕皮的历期间及断足处理后4龄历期与正常历期间的差异不显著。不同虫龄的若虫断去1条后足的腿节后1次蜕皮后能再生的大部分个体,从断足至蜕皮的时间比同龄若虫的正常历期稍长,所延长的时间相当于从龄初至断足处理的时间,而断足后1次蜕皮未再生的其余个体从断足到蜕皮的时间均很短。     

中华真地鳖空间格局及土壤性质对其存活的影响

为了明确中华真地鳖Eupolyphaga sinensis Walker在自然界的分布及土壤性质对其存活的影响, 运用森下氏分散指数(Morisita’s index of dispersion)研究了中华真地鳖种群空间格局; 测试了4种不同土壤含水量（16%~29%）条件下中华真地鳖的卵孵化率与若虫存活率, 还测试了以野外不同来源土壤（山脚栖息土、 堆肥、 菜园土、 蘑菇料发酵土和黄砂红壤土）饲养时中华真地鳖若虫的存活率。结果表明, 中华真地鳖若虫在室外为聚集分布, 成虫为均匀分布, 从地面到40 cm的土壤深度都分布有中华真地鳖。土壤初始含水量21%和24%的卵孵化率最高, 其他含水量的卵孵化率均显著较低(P<0.05), 土壤初始含水量29%时的若虫存活率最低。堆肥、 山脚栖息土更适合中华真地鳖生存。结果可为该虫的采集、 饲养和深入研究提供科学的依据。     

瓜蒂醇提物通过调控Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞Hep3B恶性生物学行为的影响

该文探讨了瓜蒂醇提物对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制。肝癌细胞Hep3B被分为NC组、不同浓度瓜蒂醇提物(1.0、5.0、10.0、20.0μg/mL)组、LiCl组、20.0μg/mL瓜蒂醇提物+LiCl组。采用CCK-8法检测细胞活性;克隆形成实验检测Hep3B细胞克隆形成数量;流式细胞术检测Hep3B细胞的凋亡情况;蛋白质印迹法检测蛋白表达情况; Transwell检测Hep3B细胞的迁移和侵袭数。不同浓度瓜蒂醇提物处理Hep3B细胞后, Hep3B细胞的活性降低,克隆数量以及迁移侵袭数减少, Hep3B细胞的凋亡率升高, Cleaved-caspase-3表达水平升高, procaspase-3、MMP2、MMP9表达水平降低, Wnt3a、cyclinD1、c-myc、核β-catenin蛋白表达水平降低,APC和质β-catenin蛋白表达水平升高(P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl可以逆转瓜蒂醇提物对Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。瓜蒂醇提物通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制Hep3B...     

土牛膝醇提物提取工艺优化及体外抗人肺腺癌A549细胞活性研究CSCD

土牛膝是应用广泛的药用植物,其功效众多,为研究其醇提物抗癌功效,采用Box-Behnken响应面法优化土牛膝的醇提工艺,并对醇提物进行体外人肺腺癌A549细胞毒性及细胞划痕试验。获得了最佳提取工艺为:提取温度90℃,液料比40∶1,提取时间2 h,在此条件下,土牛膝醇提物提取率为9.23%。细胞毒性试验结果显示,随着醇提物浓度的上升,A549细胞的存活率迅速下降,当醇提物浓度为256μg/mL时,对A549细胞的抑制率达94.65%,且细胞划痕结果显示醇提物对A549细胞迁移有一定抑制作用,可为研究土牛膝药用特性提供参考。     

鸦胆子苦醇抑制人前列腺癌DU145细胞生长及作用机制

中药鸦胆子是一种常用的抗肿瘤中草药,鸦胆子苦醇是来源于鸦胆子的主要成分。该研究探讨了鸦胆子苦醇(brusatol)对人前列腺癌DU145细胞的生长抑制及其作用机制。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测鸦胆子苦醇对不同细胞株的生长抑制情况,以及不同浓度的鸦胆子苦醇对DU145细胞的增殖抑制率;应用Hoechst 33258染色法观察鸦胆子苦醇处理DU145细胞后所发生的形态学变化;分别采用PI单染及AnnexinV-FITC双染法流式细胞术分析细胞周期分布个凋亡率的变化;以Western blot测定鸦胆子苦醇对MAPK信号通路相关蛋白表达的影响。结果表明:鸦胆子苦醇对人前列腺癌DU145细胞的抑制作用更为显著,并且可以时间和剂量依赖性地抑制人前列腺癌DU145细胞的生长,其半数有效抑制浓度IC50为(0.27±0.04)μmol·L-1;鸦胆子处理DU145细胞后,Hoechst 33258染色可见到明显的凋亡特征;细胞周期图中可见明显的亚二倍体峰,且随着作用时间的延长凋亡比例增加,FCM检测鸦胆子苦醇作用24 h后凋亡图中,可见凋亡的发生;Western blot检测表明鸦胆子苦醇处理后可使磷酸化的p38和JNK表达增加,使磷酸化的ERK表达降低。鸦胆子苦醇能显著抑制DU145细胞增殖,诱导DU145细胞凋亡。磷酸化的P38和JNK的表达增加,但磷酸化的ERK表达下降,这表明MAPK途径的活化可能是鸦胆子苦醇对DU145细胞生长抑制的作用机制之一。因此,鸦胆子苦醇是潜在的抗前列腺癌药物,有必要进一步在动物水平阐明其抗前列腺癌活性。     

前列腺癌干细胞拮抗剂盐霉素对人前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响

为了探讨前列腺癌干细胞拮抗剂盐霉素对人前列腺癌PC3细胞增值、凋亡和迁移的影响,本研究用前列腺癌干细胞拮抗剂盐霉素处理人前列腺癌PC3细胞,用CCK-8检测细胞的增殖能力,用流式细胞术检测细胞的凋亡状况,蛋白免疫印迹技术检测凋亡蛋白Bax和Bcl-2,划痕实验检测细胞迁移。用前列腺癌干细胞拮抗剂盐霉素处理人前列腺PC3细胞后,其细胞增殖能力显著下降,凋亡细胞显著增加,促凋亡蛋白Bax的表达明显增加,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著降低,且细胞划痕修复率显著降低。前列腺癌干细胞拮抗剂盐霉素可诱导人前列腺癌PC3细胞活力降低、凋亡增多和迁移抑制。     

miR-145靶向调控DAB2对前列腺癌PC3细胞迁移和侵袭能力的影响

已有研究表明, miR-145在多种肿瘤中低表达, 并与细胞增殖和转移相关。文章通过生物信息学分析并结合体外实验鉴定, 发现DAB2(Disabled homolog 2)为miR-145在肿瘤转移过程中累及的新靶点。DAB2一直被认为是一个重要的抑癌基因, 在多种肿瘤标本中表达低下。然而, 研究发现, 在具高侵袭能力的前列腺癌细胞株PC3中DAB2基因却呈较高水平表达。另外, 外源表达miR-145能显著下调 DAB2表达水平, 并抑制PC3细胞的迁移和侵袭能力, 且这种miR-145诱导的PC3细胞功能缺陷能被DAB2过表达修复。上述结果表明, miR-145能通过靶向调控DAB2而影响高侵袭前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力。     

miRNA-191对前列腺癌的增殖、迁移侵袭能力的影响及其机制

目的:观察miRNA-191对前列腺癌的增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其机制。方法:分别检测4种人前列癌细胞系(PC-3、DU-145、LNCa P、22RU1)及人正常前列腺细胞RWPE-2中miRNA-191的表达水平,并选择前列腺癌细胞系PC-3作为实验对象。将PC-3细胞分为3组:空白对照组(不转染)、miRNA-191 NC组(Inhibitor NC转染PC-3细胞)、miRNA-191 Inhibitor组(miRNA-191 Inhibitor转染PC-3细胞),每组设置3个复孔。采用RTq PCR法检测PC-3细胞miRNA-191和PLCD1的mRNA表达水平;采用CCK8法检测PC-3细胞增殖水平;采用划痕实验和侵袭实验分别检测PC-3细胞迁移能力和侵袭能力;通过Targetscan靶基因预测网站,筛选PLCD1作为miRNA-191的靶向蛋白,并用双荧光素酶靶标实验验证;采用Western blot法检测PC-3细胞PLCD1的蛋白表达。结果:与RWPE-2细胞相比,人前列癌细胞中mi NRA-191的表达水平显著升高(P<0.05),且miRNA-1...     

马尾松花粉醇提物降脂作用与预防肥胖的实验研究

本实验通过观察马尾松花粉醇提物对小鼠脂质代谢的影响来探讨其抑制肥胖的初步机制.实验采用随机分组对照方法,对不同组的小鼠进行不同的干预处理.实验结果显示与高脂组(FC)组相比3个醇提物组在终体重、体重净增加和体重增加率方面都有明显降低(P＜0.01);体脂含量也有不同程度降低但未出现显著性差异;血脂中总胆固醇(TC)水平有不同程度的降低,并且甘油三酯(TG)都有明显降低(P＜0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平都有显著性升高(P＜0.01);瘦素(LEP)和脂联素(ADP)水平都有不同程度升高;肝脏和脂肪组织中的肉碱棕榈酰转移酶(CPT-I)酶含量水平都得到显著升高(P＜0.01).上述结果证明马尾松花粉醇提物可以明显控制小鼠的体重增长以及改善体内脂质代谢水平,证明松花粉醇提物在抑制肥胖方面具有重要作用.     

有柄石韦醇提物抗氧化活性研究

通过DPPH自由基清除测定、还原能力、总抗氧化能力、羟自由基清除测定,评价有柄石韦Pyrrosia petiolosa醇提物的抗氧化活性。结果显示,有柄石韦醇提物清除DPPH·的IC50为75.82 μg·mL-1,清除·OH的IC50为46.30 μg·mL-1。有柄石韦醇提物清除DPPH· 的能力强于抗坏血酸,清除·OH的能力弱于抗坏血酸;同时,其还原能力和总抗氧化能力均强于抗坏血酸。该结果说明有柄石韦醇提物具有较强的抗氧化活性。     

酸枣叶醇提物对小鼠巨噬细胞M1和M2型极化的影响

为探究酸枣叶醇提物(jujube leaves alcohol extract,JLE)对RAW264.7细胞M1和M2型极化的影响。本研究分别采用LPS和IL-4将RAW264.7细胞诱导极化为M1和M2型巨噬细胞,CCK8方法检测细胞存活率,Griess法检测药物对M1型细胞释放NO的影响,RT-PCR法检测药物对M1和M2型细胞标志基因表达的影响,划痕实验和RT-PCR法检测经药物处理的M2型巨噬细胞上清对4T1细胞迁移的影响。结果显示,酸枣叶醇提物可抑制NO的释放,下调M1型IL-12p40、IL-1β、COX-2和M2型Arg1、CD206的表达。并通过M2型巨噬细胞降低4T1细胞中MMP-2、MMP-9和NF-κBp65的mRNA水平,抑制4T1细胞的迁移。综上说明酸枣叶醇提物可抑制巨噬细胞M1和M2型极化,并通过NF-κB通路抑制4T1细胞迁移。