麻疹减毒活疫苗检定用Vero细胞代次对病毒滴度稳定性试验的影响

目的了解麻疹减毒活疫苗检定用Vero细胞代次的稳定性范围。方法用DMEM培养液将Vero细胞137代连续传至173代,检测其细胞活力,并观察Vero细胞的形态,接种麻疹减毒活疫苗参考品进行病毒滴定及热稳定性试验。结果 170代以下Vero细胞形态良好,细胞活力在85%以上,麻疹减毒活疫苗病毒滴度热稳定性试验的结果:137~169代Vero细胞活力及原麻疹减毒活疫苗病毒滴度热稳定性试验无统计学差异(P>0.05),170代以上代次的Vero细胞活力及原麻疹减毒活疫苗热稳定性试验有明显统计学差异(P<0.01)。结论 169代以下Vero细胞为检定用麻疹减毒活疫苗最佳细胞代次。     

研究新一代麻疹疫苗的必要性

麻疹是由麻疹病毒引起的严重危害儿童健康和生命的传染病。预防接种是控制麻疹最有效的措施。麻疹减毒活疫苗在全世界广泛使用３０多年来,麻疹的发病率和死亡率大幅度下降,对控制全球麻疹流行发挥了重大的作用。由于母传抗体的干扰作用,该疫苗不适合早龄接种。疫苗不耐热,需要完整的冷链系统。麻疹病毒疫苗株和野毒株免疫原性的变化也有可能使麻疹减毒活疫苗的有效率降低。发展适合早龄婴儿接种的、耐热的、免疫原性更强的新一代麻疹疫苗、配合最佳的免疫策略,将会加速实现消灭麻疹的目标。     

麻疹减毒活疫苗气雾免疫效果观察

麻疹减毒活疫苗是控制麻疹发病与流行的一种有效生物制品。近年来,关于采用气溶胶免疫途径及其剂量等问题,各地进行了广泛的探讨与研究,积累了大量的资料。为了进一步了解麻疹减毒活疫苗气雾免疫效果以及合适的免疫剂量,我们于1973年12月选择银川市277名易感儿童,采用不同剂量进行了气雾免疫,观察接种反应与免疫效果,现将初步结果报告如下。     

麻疹活疫苗稳定性及免疫效果观察

为了提高制品质量,摸清兰州所生产麻疹活疫苗的质量现况,74年以长47毒种生产的同批疫苗在包装出厂后,即存放2—10℃不定期抽样作人体接种,并自接种现场以冰壶保存运回实验室,用传代人羊膜细胞测定疫苗的滴度,免疫前及免疫后一个月耳垂采血,用微量法测定其血球凝集抑制抗体,以观察其在一定保存条件下的稳定性及近期免疫效果。结果证明:本批疫苗存放在2—10℃,到失效期时滴度已下降至2.50TCID_(50)/0.1毫升左右,但免     

麻疹活疫苗两剂免疫程序述评

概述了全球采用麻疹活疫苗两剂免疫程序的现状,对其效果、效益进行了初步分析。笔者参照国内外资料,结合我国现阶段麻疹流行病学特征（特别是年龄分布）及现行麻苗接种程序进行了讨论。认为把我国现行程序中７岁时的麻苗复种,提前至１２～１５月龄,将对降低学龄前儿童和学龄人口的麻疹发病率及死亡率起到重大作用。笔者提出的麻苗接种程序为：在我国大多数地区,实行８月龄初种,１２～１５月龄复种;至７岁时,查验麻苗接种记录（或证明）,对未接种或接种史不明（且未患麻疹）者进行补种。在麻疹高发或高危地区,初种年龄可降至６月龄,长大至８～９月龄及时进行复种。     

冻干麻疹减毒活疫苗残余水分影响因素的探讨

影响冻干制品残余水分的因素很多,但西林瓶胶塞的含水量是其关键因素。使用经干烤工艺处理和未干烤处理的药用溴丁基胶塞进行麻疹减毒活疫苗冻干试验,结果显示,用未经干烤工艺处理及处理的药用溴丁基胶塞冻干的麻疹减毒活疫苗,存储18个月后,水分上升的平均值分别为2.03%和0.08%,经单一因素的方差分析,两者有统计学意义(P0.01)。证明经处理的药用溴丁基胶塞,对保持麻疹减毒活疫苗在存储期内的残余水分稳定作用效果明显。     

冻干甲型肝炎减毒活疫苗的研制

研制冻干甲肝减毒活疫苗,提高疫苗的稳定性,便于保存及运输,保证疫苗的接种效果.采用CA-9冻干保护剂,按13.5的比例加入疫苗,制备冻干疫苗.冻干甲肝减毒活疫苗具有与液体疫苗相同的安全性及免疫原性.在2～8℃保存的有效期较液体疫苗的3～5个月提高到18个月.在室温和37℃保存的稳定性也明显提高.冻干甲肝减毒活疫苗的稳定性良好,无需低温保存、冷链运输,便于甲肝疫苗的大规模推广应用.     

适用于评定水痘活疫苗免疫反应的抗体检测法

<正>所有活疫苗的免疫性和保护性都取决于病毒复制(无症状感染),活疫苗既诱导体液免疫又引起细胞免疫;虽然接种后抗体通常低于野生病毒自然感染的抗体水平,但可提供长期的有效免疫;无论其抗体水平如何,其滴度可维持许多年;这种方法是麻疹、流行性腮腺炎和风疹活疫苗的特征。以上几种活疫苗和水痘活疫苗( Oka/Merck)是高度有效的。     

减毒麻疹活疫苗对小鼠的细胞遗传学效应

本文以C57BL/6J小鼠为材料,以骨髓细胞微核、染色体畸变和生殖细胞微核、染色体畸变为指标,对国产减毒麻疹活疫苗的遗传安全性进行评价。结果表明,麻疹疫苗可引起小鼠骨髓微核细胞率、染色体畸变率以及精细胞微核细胞率明显升高,与接种剂量和接种后的时间有关;生殖细胞染色体畸变和对照比无显著性差异。     

一种新的麻疹(AIK-C株)、腮腺炎(Hoshino株)和风疹(Takahashi株)三价联合活疫苗

<正>在实际应用中,接种麻疹—腮腺炎—风疹三联疫苗有明显的简化儿童免疫程序、降低费用和减少医生病人间接触等优点,并经证实安全有效。美国实际使用三联疫苗已有十多年,受试者的抗体应答并未提示一种疫苗与另一种疫苗间有相互干扰,接种联合疫苗也未增加副反应发生率和严重程度。但也有研究者报告,将腮腺炎活疫苗与其它活疫苗同时接种与单独接种单价疫苗相比,前者导致较低的腮腺炎血清阳转率。     

第十八章 对某些问题的答复

<正>1.几种疫苗(麻—腮—风三联,注射用小儿麻痹疫苗,口服小儿麻痹疫苗,白—百—破)能否同时接种? 答:麻—腮—风三联疫苗和口服小儿麻痹疫苗可以同时接种,其后果(指血清阳转和副作用)和这两种疫苗分别注射时相仿。 当白—百—破—小儿麻痹灭活疫苗或白—百—破以及麻疹活疫苗同时接种时效果满意。未曾发现严重的接种后反应。     

有关麻疹免疫接种的几个问题

目前,世界各地已普遍采用麻疹免疫接种的方法,并收到了显著的效果。美国从1963年批准使用麻疹疫苗以来,现在麻疹病例数已减少90%以上,麻疹后脑炎病例也相应减少。然而也还存在着一些问题,主要表现在局部地区还有麻疹暴发。引起暴发的原因何在?是否与接种后历时较久、抗体下降有关?接种麻疹     

用病毒体、分子团和其它蛋白复合物制备抗包膜病毒亚单位疫苗

<正>抗病毒的活疫苗和减毒疫苗在预防医学中取得了巨大成就。天花已全球性消灭,麻疹、风疹和腮腺炎在发达国家中已处于收敛状态,脊髓灰质炎的发病率已降得非常低。大规模地使用灰髓炎活疫苗常出现疫苗病毒接种健康者的危险性。因此,必须改变活疫苗的制备的方法,使疫苗含有诱导免疫力的必要抗原和去除诱导副反应的其它病毒成分。自从DNA重组技术问世以来,已有可能在细菌、酵母或动物细胞中大量合成所需的蛋白,为亚单位疫苗提供了有利条件。     

2020年广州市荔湾区健康人群麻疹、风疹和水痘的IgG抗体水平监测分析

目的了解广州市荔湾区2020年健康人群的麻疹、风疹和水痘IgG抗体水平,为本地制定免疫规划策略提供科学依据。方法采用分层随机抽样方法确定被调查对象,采集血液标本共238份,进行麻疹、风疹和水痘的IgG抗体水平监测并进行分析。结果 ELISA检测血清样本共238份,麻疹、风疹和水痘IgG抗体阳性率分别为97.06%、92.02%和79.41%,抗体几何平均浓度(geometric mean concentration, GMC)分别为1 204.65、43.38和290.38 mIU/mL。男女性别比为1.02∶1,麻疹、风疹和水痘IgG抗体阳性率差异无统计学意义(P0.05)。2～4岁组麻疹IgG阳性率最低,不同年龄组阳性率差异有统计学意义(χ~2=48.158,P0.05);0～1岁组的风疹IgG抗体阳性率最低,不同年龄组抗体阳性率差异有统计学意义(χ~2=36.980,P0.05);0～1岁组水痘IgG抗体阳性率非常低,不同年龄组抗体阳性率差异有统计学意义(χ~2=30.832,P0.05)。接种麻疹疫苗≥2剂次的人群IgG抗体阳性率为95.10%,不同免疫史差异无统计学意义(P=0.448,P0.05);接种风疹疫苗0剂次的人群IgG抗体阳性率最低,不同免疫史差异无统计学意义(P=0.020,P0.05);接种水痘减毒活疫苗0剂次的人群IgG抗体阳性率最低,接种2剂次的阳性率最高,不同免疫史差异有统计学意义(P=0.010,P0.05)。结论本区麻疹、风疹IgG抗体均维持在较高水平并有所提高;水痘IgG抗体水平较低,存在暴发、流行的可能。应加强麻疹、风疹免疫接种和查漏补种工作;有针对性地宣传水痘减毒活疫苗并推广接种;还须积极开展麻疹、风疹和水痘IgG抗体水平监测。     

利用广西杉木良种未成熟胚诱导胚性愈伤组织发生

以杉木不同基因型的未成熟胚为起始外植体,研究不同冷藏时间、不同接种方式、不同基因型和不同激素浓度组合对胚性愈伤组织诱导率的影响。结果表明,冷藏显著影响种子的质量,随着冷藏时间延长,坏死种子比例显著增加,冷藏20 d时坏死种子比例达54.5%;冷藏对胚性愈伤组织诱导率无显著影响。接种方式对胚性愈伤组织诱导具有显著影响,接种方式二(剥去种皮,切开小口)的诱导效果最好,方式一(种子切开小口)和方式三(剥出合子胚)不利于胚性愈伤组织诱导。不同基因型在同一激素组合条件下的胚性愈伤组织诱导率存在显著差异,同一基因型在不同激素组合下的胚性愈伤组织诱导率也存在显著差异。总体看来,6-BA对胚性愈伤组织诱导率的影响最大,其最优浓度为1.0 mg/L;其次为2,4-D和ABA,其较优浓度均为2.0 mg/L;KT较优浓度为1.0 mg/L。     

麻疹减毒活疫苗国家参考品长期稳定性评价

目的 评价麻疹减毒活疫苗国家参考品的长期稳定性。方法 对保存于-20℃的冻干麻疹减毒活疫苗国家参考品进行外观、水分含量、病毒滴度检测,并对2011—2021年的麻疹参考品滴度进行趋势分析。对2家企业的使用结果进行分析,与参考品的协作标定结果进行对比。结果 经检测,参考品的外观检查符合规定,参考品中水分含量为1.48%;使用10余年的滴定结果显示,麻疹疫苗国家参考品的滴度在4.70～5.20 lgCCID₅₀/mL之间,均在质控范围内。年度均值在4.95～5.10 lgCCID₅₀/mL之间,年度检测的标准差在0.09～0.15 lgCCID₅₀/mL。趋势分析显示,参考品滴度稳定,以标示值为中心上、下波动,未出现明显下降趋势。2家疫苗企业的检测结果显示出相同趋势。结论 麻疹减毒活疫苗国家参考品具有良好的长期稳定性,能够为国内相应疫苗的质控、签发提供保障。     

用蚀斑法进行麻疹疫苗的病毒滴定

按世界银行中国疫苗项目对麻疹疫苗检定的要求,建立了麻疹疫苗病毒滴定的蚀斑方法。以蚀斑法对Ｈｕ１９１株生产的冻干麻疹活疫苗样品进行了测定。结果发现,Ｈｕ１９１株生产的麻疹疫苗在琼脂和甲基纤维素覆盖下所形成的蚀斑大小及形状不同,但滴度无显著性差异;在室温和３７℃吸附的滴度无显著性差异,但细胞在３７℃生长较好;在本实验条件下,蚀斑滴定和ＣＣＩＤ５０测定的滴度呈正相关,蚀斑滴定相对较敏感;采用国产６孔聚苯乙稀培养板,Ｖｅｒｏ细胞单层,在３７℃吸附,用甲基纤维素覆盖,经结晶紫及甲醛固定染色后计数空斑,操作简便易行,结果特异敏感,重复性好,可用于麻疹疫苗病毒滴定     

联合固氮菌叶面接种剂的优化及其在玉米叶际的定殖

【背景】联合固氮菌由于不具有宿主专一性,在土壤、叶际中广泛存在,对生态系统氮素供应有着重要贡献,它还可以通过分泌生长激素等间接作用促进植物生长,可作为重要的农业生产菌剂。土壤接种剂由于受土著微生物的竞争和土壤抑菌物质等的影响,接种效果不稳定,难以推广使用。相比于土壤环境,叶际生境相对简单且表面积巨大,进行叶际接种是固氮菌剂推广应用的一个新思路。【目的】优化联合固氮菌菌株W12接种添加剂,制备液体接种剂并研究其在玉米叶际的定殖效果。【方法】对菌株W12进行菌落PCR测序,构建系统发育树并确定分类地位。分别在培养液中添加不同浓度梯度的羧甲基纤维素(Carboxymethyl cellulose,CMC)和甘油(Glycerol,Gly),测量菌株W12生长曲线和固氮酶活性,优化添加剂浓度并制备液体接种剂,对接种剂的有效保存时间进行检测。将接种剂喷洒到玉米叶际,测量其对玉米产量和植株含氮量的影响,并通过低氮培养基进行回收计数。【结果】固氮菌菌株W12的16S r RNA基因序列与变栖克雷伯氏菌(Klebsiella variicola)的相似性高达99%,在培养液中添加CMC和甘油对菌株W12的生长无明显促进和抑制效果,但均提高了固氮酶活性。添加甘油制备的接种剂在盆栽和大田玉米叶面喷施后,在玉米生长末期叶际回收到的W12类似菌分别为4.3×105 CFU/g叶片和1.7×105 CFU/g叶片,显著高于未接种的处理;而且大田玉米籽粒、茎部和叶片的含氮量高于不接种的对照处理。经过90 d贮藏后,4°C保存的接种剂剩余活菌数均高于1.0×108 CFU/m L。【结论】羧甲基纤维素和甘油的添加不仅有利于固氮菌液体接种剂在叶片的附着,并能显著提高联合固氮菌菌株W12的固氮酶活性,低温冷藏可保证液体接种剂的有效活菌数;液体接种剂在玉米叶际喷施后,菌株W12能够成功定殖,并显著提高玉米植株和籽粒含氮量。研究结果为固氮菌叶面接种剂的制备和应用,以及实现农业氮肥减施保产的目标提供了借鉴意义。     

麻疹减毒活疫苗不同剂量初免及复种后的免疫效果研究

目的评价麻疹减毒活疫苗（Measles Attenuated Live Vaccine,MV）不同接种剂量在初免及复种后的免疫效果及差异性。方法在同一观察区域、不同时段对适龄儿童分成两组采用MV0.2 ml与0.5 ml接种剂量分别在初免和复种后进行麻疹IgG抗体滴度测定。结果初免后,0.5 ml组较0.2 ml组IgG抗体阳性率、保护率分别提高5.28%与9.79%,抗体几何平均滴度（GMT）由1：543.03提高至1：813.51;初免加复种后,0.5 ml组较0.2 ml组阳性率、保护率分别提高5.32%与3.98%,GMT由1：740.49提高至1：1098.30;初免加复种较单一初免的阳性率、GMT差异有统计学意义。结论初免接种剂量0.5 ml可提高IgG抗体阳转率;复种0.5 ml与0.2 ml组的保护率差异无统计学意义,但0.5 ml组抗体阳性率、GMT较高。     

提高麻疹减毒活疫苗病毒滴度的研究

病毒滴度是麻疹减毒活疫苗的主要质量指标之一。本文结合生产实际,就有关提高麻疹疫苗病毒滴度的影响因素进行了探讨。试验说明,生产用毒种的质量十分重要,要保证麻疹疫苗的高滴度和生产的稳定,需要建立适合麻疹毒种的培养条件并保持培养条件一致,从而必须加强生产过程的全面质量管理。