染色体原位杂交技术与植物显微技术实验探索

染色体原位杂交技术作为植物分子细胞遗传学研究的重要手段被广泛地应用于基因定位、染色体结构变异、物种的起源、进化和亲缘关系分析,物理图谱的构建,转基因植物的鉴定等多个方面。在植物显微技术实验中,以研究生的科研选题与兴趣为主导选材进行石蜡切片、显微摄影直至获得照片;同时合理安排木材切片、压片技术、花粉在柱头上萌发和花粉管伸长、染色体原位杂交技术等多个其他实验,有的放矢、因人施教能够激发学生自主学习的兴趣,收到良好的教学效果。     

“酸解低渗敲打压片法”制备果蝇唾液腺染色体标本

对已报道的果蝇唾液腺染色体压片方法进行比较和综合,提出了一种可制备出效果良好染色体标本片的改进方法,技术要点包括酸解除脂肪组织,低渗使细胞胀大、染色体分散,敲打组织使其更易分散等。详细阐述实验流程及注意事项,旨在为教师和学生在相关课程教学中更好地开展本实验提供参考。     

用风油精预处理制备植物染色体标本的新方法

目前,在植物细胞染色体的研究工作中,常用的染色体预处理药物为秋水仙素、对二氯苯、α-溴萘和8-羟基喹啉等。我们经过多次对水稻、绿豆等小型染色体植物的摸索,发现风油精也可作为一种新的植物染色体预处理药物。水稻、绿豆的根尖经风油精预处理后,可以省去常规的酸解压片和酶解去壁低渗步骤而直接捣碎涂片,制得的标本可获得良好的染色体图象。我们将这一方法称为风油精法。何凤发等将此法加以改进应用于高梁、芝麻和荞麦等小型染色体植物中也得到了满意的结果。因而,风油精法比较适合于小型染色体植物的染色体标本制备。本文介绍这一新方法。     

水稻染色体标本制备的风油精法

水稻的染色体较小,不同的染色体在形态上较难区分。常规的压片技术由于很难使染色体分散,且也不能完全排除细胞质的干扰,因而很不适用于水稻染色体核型分析及显带。Kurata 等(1978)采用酶解与火焰干燥技术制备水稻染色体标本,获得清晰的染色体图象,从而成功地进行了水稻染色体的核型分析。陈瑞阳等(1982)参照人类染色体     

一串红染色体制片技术优化与计数

以一串红商品种‘展望红’萌发种子根尖、幼苗茎尖生长点以及嫩叶为实验材料,利用常规压片法比较不同材料、不同预处理液及预处理时间对一串红染色体制片的影响,探索实验预处理条件。然后利用去壁低渗法对一串红4个商品种和一串红株型突变体及其野生型进行染色体计数。实验结果显示:以一串红萌发种子的根尖为实验材料,用0.002 mol/L 8-羟基喹啉预处理3~4 h压片所得染色体效果最好;分别观察6个供试品种(系)分散良好、清晰的30个分裂相细胞,86.7%及以上的细胞染色体数目为2n=44。研究表明,一串红株型突变体与野生型及4个商品种在染色体数目上没有差异。     

植物材料减数分裂染色体标本的快速制作

探索一种简便快速的植物材料减数分裂染色体标本制作技术,获得良好的减数分裂染色体标本以供原位杂交研究、遗传学实验教学等方面研究使用。以植物材料小麦、黑麦花药为材料,卡宝品红染色,冰冻揭片法制得减数分裂染色体标本,结果表明,这些用快速简便的方法获得的标本效果良好,染色体图像清晰,可较好的用于本科生实验教学、染色体分带、原位杂交等方面的研究。     

芙蓉葵（Hibiscus moscheutos L．）有丝分裂核型分析及减数分裂观察

芙蓉葵是棉属的近缘植物,具有棉花需要的早熟、强结实、耐寒、抗黄萎病等优良性状.本文对芙蓉葵的细胞学特征进行了研究,为其优良性状在棉花遗传改良中的应用提供细胞遗传学资料和理论依据.利用压片法获得了分散良好、形态清晰的有丝分裂中期染色体,核型分析结果表明:芙蓉葵染色体的平均长度为5.96±0.83μm,在1号染色体上发现随体;臂比>2的染色体占10.5%,最长染色体与最短染色体的比值为1.68,核型类型为2A型,核型公式为2n=2x=38=32m+6sm(2SAT).芙蓉葵花粉母细胞的减数分裂正常,中期Ⅰ有19个二价体(19Ⅱ).     

植物染色体制片方法的改进

染色体是生物细胞核中最重要而稳定的成分，它具有特定的形态结构和一定的数目，具有自我复制能力，并积极参与细胞的代谢活动，能出现连续而有规律的变化，是决定物种繁衍的遗传物质的载体。人们一直在不断地探索和改进染色体的观察和鉴定方法。从早期的涂片法．到经典的常规压片法，直至20世纪60年代末建立起来的显带技术，以及90年代迅速发展的染色体原位杂交技术。作者长期从事植物染色体的研究，并给本科生和研究生讲授细胞遗传学理论和实验课，结合科研对染色体的制片技术进行了改进．供参考．[第一段]     

植物染色体G带研究概况

本文对植物染色体G带的历史、认识发展、技术探索、现状、问题及前景等进行了全面综述。显带技术建立后的多年,植物染色体一直不显G带,不少研究者提出了不同假说予以解释或进行实验验证。最近几年,该技术有了迅速发展,尤其是我国学者在这方面做了大量开创性工作,用多种方法在十几种植物上进行了探索,并初获成功。虽然目前还存在一些有待解决的困难和问题,但植物染色体G带技术有着广阔的发展前景。     

关于苔藓植物染色体研究方法的探讨

目前我国在苔藓植物染色体方面的研究工作尚属空白,其难度也较种子植物要大。作者通过参阅闰外文献,并对数十种不同类型的苔藓植物进行了实验摸索。本文较全面地介绍了包括取材(即孢蒴、茎尖、生长点等)、固定、染色和压片等成功的方法技术问题,以期更多的学者开展该领域的研究工作,促进我国在苔藓植物染色体方面的研究工作。     

蚤类染色体的制片方法及分带技术

本文首次介绍了蚤类染色体的空气干燥制片方法和分带技术。以蚤成熟三龄幼虫和成蚤生殖腺为材料,采用体外短期培养、空气干燥、Giemsa染色技术制片,具取材容易、操作简便、中期分裂相多且染色佳、标本不需封片即可长期保存等优点,克服了以往醋酸地农红压片法染色体分散不佳、杂质多、染色易褪色及标本需封片才能保存等缺点。在印鼠客蚤等四种蚤的染色体研究中均获得满意效果,成功率高,重复性好,尤以生殖腺染色体制片成功率为100％。在此基础上还摸索建立了蚤类染色体的C-分带、G-分带和银染技术。     

一种显示植物染色体C带的有效易行的实验方法

在植物染色体分带技术中 C 带技术应用最广,它是显示染色体上结构异染色质区的一种方法,至今已在许多植物中获得了 C 带,并已应用于染色体的研究。现介绍一种有效易行的染色体显带方法,此法以蚕豆子叶为材料,用 NaHCO_3进行分带处理,具体做法如下。材料和方法(一)材料以蚕豆品种为材料     

蚤类染色体的制片方法及分带技术

本文首次介绍了蚤类染色体的空气干燥制片方法和分带技术。以蚤成熟三龄幼虫和成蚤生殖腺为材料,采用体外短期培养、空气干燥、Giemsa染色技术制片,具取材容易、操作简便、中期分裂相多且染色佳、标本不需封片即可长期保存等优点,克服了以往醋酸地衣红压片法染色体分散不佳、杂质多、染色易褪色及标本需封片才能保存等缺点。在印鼠客蚤等四种蚤的染色体研究中均获得满意效果,成功率高,重复性好,尤以生殖腺染色体制片成功率为100%。在此基础上还摸索建立了蚤类染色体的C一分带、G一分带和银染技术。     

蟀蜻染色体改良制片法— 玻璃纸压片法

有关蟀瞒染色体的研究,国内尚未见报道。 我们通过两年多来的反复实践,改用玻璃纸与 盖玻片取代原法的盖玻片与载玻片压片,直接 制备了硬蟀和革蜗的染色体永久标本（见图 r),方法简便,效果可靠,克服了上述传统压片法存在的一些缺点。     

植物染色体G—带的研究进展

染色体 G-带技术在动物和人类遗传学中已得到了广泛应用,可是在植物方面由于它仅能显示带纹很少的 C-带、N-带或 Q-节,这就大大限制了染色体显带技术在植物细胞遗传学研究和植物育种上的进一步应用。近十年来,植物染色体 G-带的研究越来越受到人们的重视,世界上,尤其是我国有不少学者进行了详细研究,并取得了不少进展,本文仅就这方面的研究现状做一简述。     

慈姑根尖细胞染色体的激光共聚焦扫描显微镜观察结果

利用荧光标记和激光共聚焦扫描显微技术,观察了慈姑根尖细胞有丝分裂各个时期染色体的主要特征,获得十分理想的效果.与传统压片观察法比较,本实验方法成像更清晰,能方便地从不同角度观察整个细胞核中染色体的分布形态,更好地揭示细胞分裂中的染色体行为.     

果蝇唾腺染色体观察材料的制备

选择夜间气候为南风、多云、20～28℃的条件下,用香蕉培养基引诱、采集果蝇.室内或恒温箱中培养12 d,取野外果蝇三龄幼虫替代实验室长期饲养的果蝇幼虫,制作果蝇唾腺染色体.经剥离、解离、染色、压片,观察到比实验室饲养的果蝇染色体较大、个体更清楚的片子.     

北方几种小浆果植物的核型研究

对悬钩子属、醋栗属、越桔属、沙棘属、接骨木属和五味子属等６属１２种小浆果植物的染色体数目和核型进行了研究。其中绿叶悬钩子、牛迭肚和刺果茶Ｂｉａｏ的染色体数目为首次报道。截止目前,关于小浆果植物的核型资料报道甚少。     

浅析植物多倍体现象

浅析植物多倍体现象沈显生（安徽教育学院生物系,２３００６１）生物体内染色体数目的变化是以染色体组为单位进行增减。当生物体内的染色体组数达到３组或３组以上者,称为多倍体。多倍体是高等植物染色体进化中的一个显著特征。在蕨类植物中多倍体可能高达５０％,被子...     

中国姜花属十九个分类群的细胞学研究

采用压片法对中国姜花属十八个分类群进行了体细胞染色体计数,对白姜花减数分裂终变期I的染色体数目和形态进行了观察。结果显示:包括白姜花在内的十九个分类群中有六个二倍体,一个三倍体,十二个四倍体,其中十二个分类群的体染色体数目为首次报道,显示中国姜花属植物具有较高比例的多倍体类型;姜花属的染色体基数为n=17,染色体组可能是多倍体起源的。