鲎试剂在抗淋巴细胞免疫球蛋白热原检测中的应用

报道了鲎试剂在抗淋巴细胞免疫球蛋白内毒素检查中的应用。在用鲎试剂检测细菌内毒素时 ,按中国药典的要求对鲎试剂灵敏度进行标定 ,并作干扰实验 (增强或抑制实验 ) ,然后用鲎试法与家兔法同时测定 15批抗淋巴细胞免疫球蛋白。结果发现三批鲎试剂的灵敏度标示值均正确 ,五批抗淋巴细胞免疫球蛋白半成品在最大有效稀释度 (MVD)时对试验无干扰 ,这两种方法测定结果的符合率达到 91.7%。从而表明鲎试法很有可能代替家兔法     

蛇毒纤溶酶Fibrolase的凝胶过滤色谱复性研究

目的：研究蛇毒纤溶酶Fibrolase的最佳复性方法。方法：使用透析和凝胶色谱法对Fibrolase复性进行研究,比较2种复性方法的相对复性率及蛋白质回收率。结果：2种复性方法的复性率分别为20％、25％,蛋白质回收率分别为16％、5％。结论：凝胶过滤色谱复性优于透析法复性,凝胶过滤色谱复性使蛋白质的复性与纯化同步进行,简化了操作程序,提高了产品回收率。     

显色基质鲎试剂法在人血白蛋白热原检测中的应用

为了对显色基质法测定人血白蛋白中的内毒素含量方法进行探讨。以内毒素,鲎试剂及显色基质,在一定的条件下反应释放出对硝基苯胺(PNA),溶液呈现黄色,于波长545nm处比色读数,其产色深浅与内毒素浓度呈线性关系,从而定量测定出检品中内毒素含量。结果表明标准曲线的线性相关系数r≥0.98,人血白蛋白经3.3倍稀释后无干扰作用。显色基质法与家兔法比较,有灵敏、快速、能定量、重复性好的特点,可用于人血白蛋白内毒素含量的测定。     

青龙蛇药抗蛇毒中毒的实验研究

本文总结对青龙蛇药抗蛇毒中毒作用进行研究的买验结果,经动物实验证明,青龙蛇药口服对眼镜蛇毒、眼镜王蛇毒、五毒蛇毒及蝮蛇毒中毒的小白鼠有明显的保护作用,而对银环蛇毒中毒的保护率很低;还证明该药有对抗蛇毒的出血毒性、溶血毒性、毛细血管损伤及组织坏死的作用。     

蛇伤药酒体外抗5种蛇毒的实验研究

目的探讨蛇伤药酒抗五步蛇、竹叶青蛇、眼镜蛇、蝰蛇、蝮蛇蛇毒的效果。方法采用鲎试剂试管凝集反应法。结果蛇伤药酒浓度为1.0 ml/ml时,对5种蛇毒均有破坏产生凝胶反应的作用;浓度为0.5ml/ml时,对五步蛇、竹叶青蛇、眼镜蛇蛇毒有破坏产生凝胶反应的作用;浓度为0.3 ml/ml时,仅对五步蛇毒有破坏产生凝胶反应的作用;浓度降至0.1 ml/ml时,对5种蛇毒均无破坏产生凝胶反应的作用。结论蛇伤药酒有较好的抗蛇毒作用,且对五步蛇毒作用最强。     

10种广东本地清热解毒中草药体外抗蛇毒作用的实验研究

目的 研究10种广东本地清热解毒中草药的抗蛇毒作用.方法 采用鲎试剂试管凝集反应法.结果 10种广东本地清热解毒中草药的药液浓度在0.5 g/ml以上时均有抗五步蛇、眼镜蛇、竹叶青蛇、蝰蛇、蝮蛇蛇毒的作用;降低药液浓度后,不同的药物对不同蛇毒抗毒作用有所不同.结论 广东土牛膝等10种本地清热解毒中草药对5种蛇毒有直接的...     

黑皮蛇、山白菜抗五种蛇毒的实验研究

目的研究黑皮蛇、山白菜抗五种蛇毒的药理作用。方法采用鲎试剂凝胶法对黑皮蛇、山白菜抗五种蛇毒的作用进行实验研究。结果黑皮蛇药液浓度在0.4g/ml以上、山白菜药液浓度在0.2g/ml以上,均能抗五种蛇毒与鲎试剂的凝集反应。结论黑皮蛇、山白菜有较强的抗眼镜蛇毒、竹叶青蛇毒、蝰蛇毒、蝮蛇毒和五步蛇毒作用。     

中国鲎和圆尾鲎血淋巴细胞分类和特征的比较研究

为了更好地了解中国鲎(Tachpleus tridentatus)和圆尾鲎(Carcinoscorpius rotundicauda)血淋巴细胞的种类组成和特征差异,综合运用光学显微镜、扫描电镜和粒度仪,较为系统地对两种鲎的血淋巴细胞进行了分类和特征研究,从而为两种鲎的血淋巴细胞和分子生物学研究提供基础资料。根据血淋巴细胞大小、核质比、细胞着色特点、细胞中颗粒存在与否、颗粒的密集程度等,中国鲎和圆尾鲎的血淋巴细胞均可分为大颗粒细胞、小颗粒细胞和透明细胞三种主要类型,且两种鲎的血淋巴细胞均以颗粒细胞为主,透明细胞在血淋巴细胞中所占比例最小,但具有高核质比。两种鲎的同类血淋巴细胞在染色和形态上无显著性差异,但在同一种鲎中,血淋巴细胞密度存在显著的雌雄差异。     

蛇毒与急性肺损伤的研究进展

据有关部门统计,全世界蛇类有2700多种,其中毒蛇有600多种。我国的蛇类有200多种,其中毒蛇类有50多种,包括10多种剧毒蛇如眼镜王蛇、金环蛇、眼镜蛇、五步蛇、银环蛇、蝰蛇、蝮蛇、竹叶青、烙铁头、海蛇等,咬伤人后能致人于死亡。在我国,蛇伤病人较常见,     

Saline and buffers minimize the action of interfering factors in the bacterial endotoxins test

The bacterial endotoxins test (BET) is the most sensitive assay for measuring endotoxin levels in solution. However, it is difficult to quantify endotoxin levels in some solutions because unknown interfering factors may inhibit or enhance the Limulus amebocyte lysate (LAL) coagulation reaction. We investigated the mechanisms of this interference and found that interference can be reduced or totally suppressed by preparing sample solutions in saline, Dulbecco’s phosphate-buffered saline (D-PBS), N,N-bis-(2-hydroxyethyl)-2-aminoethanesulfonic acid (BES), or 2-amino-2-hydroxymethyl-1,3-propanediol (Tris) buffers. We examined the inhibitory effect on the interfering action of various reagents. The reagents examined were classified into two groups: a weak interference and a strong interference group. The interference of the strong interference group was suppressed by adding endotoxin and the test factors to LAL individually. Endotoxin peaks analyzed by gel-filtration HPLC disappeared in the presence of interfering factors. When buffers were used to prepare sample solutions instead of water, endotoxin peaks were maintained and interference with LAL reaction was suppressed. These results indicate that for the strong interference group, interference of the LAL reaction was a direct consequence of interfering factors binding to endotoxin. This alters endotoxin complexation, but this effect may be suppressed by preparing solutions in saline or other buffers instead of in water.     

短尾蝮蛇毒磷脂酶A2的分离纯化及抗血小板聚集作用

目的研究短尾蝮蛇毒磷脂酶A2的分离纯化及其抗血小板聚集作用。方法磷脂酶A2的分离纯化采用CM-SephadexC-25、DEAE-SepharoseCL-6B、SephacrylS-200、SephadexG-75柱层析法,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其蛋白分子质量,以磷脂酶Az测定方法测定其酶活性,用比浊法测定其对二磷酸腺苷（ADP）引起的血小板聚集的影响。结果从短尾蝮蛇毒中纯化所得磷脂酶A2的相对分子质量为16．0×10^3（非还原）、17．6×10^3（还原）,它具有磷脂酶A2活性,能明显抑制ADP引起的血小板聚集并呈剂量-效应关系。结论此方法成功地从短尾蝮蛇毒中分离纯化出磷脂酶A2,并能抑制血小板聚集。     

蕲蛇蛇毒中一个新的类凝血酶的分离纯化与表征

使用DEAE－Sephadex A-50、POROS 50HS及POROS 20PI等色谱分离技术,从蕲蛇粗毒中分离提纯得到1个具有凝血活力的组分,经SDS－PAGE和PAGE检测均为一条带,非还原条件下相对分子质量24.3kDa,还原条件下相对分子质量33.0kDa;其凝血活力为91.0NIH u/mg。该组分不具有激活因子ⅩⅢ的活性,肝素不影响该组分的凝血活性,EDTA部分抑制其活性,苯甲基磺酰氟（PMSF）则会产生不可逆抑制作用,该酶N－末端氨基酸序列为VIGGNGXDINEHRFLVAFF,经分析表明该酶是一种新的类凝血酶。     

Incidence and pathophysiological relevance of postoperative endotoxemia

Abstract Patients who underwent surgical procedures usually develop elevated body temperature, changes of plasma levels of some proteins, and leucocytosis. These alterations are summarized as the postoperative acute-phase reaction. Also endotoxin can induce the described phenomena suggesting that endotoxin may play a role concerning the induction of the acute phase reaction. In order to test that hypothesis we determined endotoxin plasma levels preoperatively and daily postoperatively in patients who were operated on because of goiter ( n = 20), colonic, pancreatic and gastric diseases ( n = 58). A significant increase of endotoxin plasma levels was found at the first and third day after abdominal surgery whereas after goiter surgery the increase revealed to be only very slight. However, the decrease between the first and second postoperative day in the latter group was again statistically significant suggesting postoperative endotoxemia even after minor operations. Furthermore a correlation between the amount of circulating endotoxin and pulmonary or infectious complications could be established in patients after major operations even at the first postoperative day suggesting a pathogenetic relevance of postoperative endotoxemia.     

金溶胶基底的 SERS 增强效果的实验研究

本文以结晶紫作为探针分子,研究了以金溶胶膜、pH ＝6以及 pH ＝13的金溶胶溶液为活性基底的表面增强拉曼光谱的增强效果。采用化学还原法制备金溶胶,加入氢氧化钠改变其 pH 值,并以自组装法制备金溶胶膜。通过比较金溶胶膜、pH ＝6及 pH ＝13时金溶胶溶液的增强因子以及在这三种金溶胶基底上结晶紫的检测限,分析不同活性基底增强效果的差异。三种活性基底的增强因子分别可达到5．9×103、1．5×105、2．3×107,pH ＝13的金溶胶溶液有最佳的增强效果。以这三种金溶胶为基底对结晶紫进行表面增强拉曼光谱探测,可得到检测限为70．7 nmol／L、9．6 nmol／L、1．8 nmol／L。结果表明,金溶胶溶液的增强效果明显优于金溶胶膜,而通过改变金溶胶体系的 pH 值可以改变金纳米颗粒的聚合程度及对探测物的吸附特性从而获得更高灵敏度的活性基底。     

蛇毒心脏毒素对动物细胞的遗传损伤和生殖毒性研究

目的 应用眼镜蛇毒心脏毒素（ＣＴＸ）作用于小鼠的骨髓细胞和生殖细胞,以探讨ＣＴＸ对动物体的生殖毒性和遗传毒性。方法 对小鼠腹腔注射不同剂量ＣＴＸ,通过生殖毒性实验和致突变实验,分析孕鼠的胚胎存活率,骨髓细胞和精母细胞的染色体畸变率。结果：ＣＴＸ能影响胎鼠的生长发育,使孕鼠的增重和活胎率均明显地降低（Ｐ〈０．００１）,染色体畸变实验显示ＣＴＸ０．４ｍｇ／ｋｇ剂量上精母细胞多倍体和非整倍体细胞数目增高     

广西产眼镜蛇毒酸性磷脂酶A2的分离纯化及性质研究

目的　从广西产中华眼镜蛇毒 ( N aja naja atra)中分离了一种新的磷脂酶 A2 ( PLA2 ) ,并研究其性质。　方法　磷脂酶 A2 ( PLA2 )的分离纯化采用 CM5 2、CM-Sepharose CL-6 B离子交换柱和 SepharoseCL-6 B凝胶柱 ,磷脂酶 A2 ( PLA2 )的性质采用经典方法进行。　结果　分离后的磷脂酶 A2 经过聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和 HPLC检测 ,其为单一组分。SDS-PAGE测定它的分子量为1 5 0 0 0± 1 0 0 0。等电聚焦测得它的等电点为 6 .3。它的最适温度为 5 5℃ ,最适 p H值为 8.5。氨基酸成分分析表明该酶由 1 2 6个氨基酸组成 ,以 Asp、Ala、Gly、Cys居多。Fe3 、Zn2 、EDTA对其酶活力起抑制作用 ;K 、Ca2 、去垢剂对其活力起促进作用。荧光光谱分析表明该酶的色氨酸残基、组氨酸残基可能位于分子表面。药理实验表明 :该酶具有抗胰蛋白酶作用、抗凝血作用、间接溶血作用以及对青蛙具有心脏毒性。　结论　广西产中华眼镜蛇毒磷脂酶 A2 与其它来源的 PLA2 同源性高 ,但性质不尽相同。     

兔循环血中黄绿烙铁头蛇毒浓度与DIC出现关系研究

目的观察兔循环血中黄绿烙铁头蛇毒浓度与ＤＩＣ出现的关系。方法用抗烙铁头蛇毒的鼠多克隆抗体ＩｇＧ测定兔血中蛇毒浓度,以α２－ＰＩ、ＡＴ－Ⅲ活性和纤维蛋白原水平参数为ＤＩＣ指标。结果上述指标水平随血中蛇毒浓度的增加而降低,ＤＩＣ的发生与血中蛇毒浓度呈负相关系,高剂量的蛇毒可诱发ＤＩＣ。结论ＤＩＣ的发生取决于兔循环血中蛇毒的浓度。