放线菌Snea253代谢产物及寡糖对南方根结线虫活性的影响

本文针对前期筛选获得的高效放线菌Snea253菌株代谢产物中杀线虫活性成分进行试管法和薄层层析法预试,结果显示活性物质含糖和氨基酸。贝氏皿浸没法研究了Snea253代谢产物中杀线虫活性物质和已知寡糖对南方根结线虫卵孵化和二龄幼虫J2的影响,结果表明:Snea253活性物质对南方根结线虫卵孵化的相对抑制率为84.95%,供试寡糖中除麦芽糖和蔗糖有不显著的抑制作用外,半乳糖、果糖和木糖显著促进了南方根结线虫卵孵化;乳糖、葡萄糖和山梨糖均具有促进作用,但与对照相比不显著。Snea253活性物质对J2的校正死亡率为98.21%,与各寡糖处理和对照相比差异显著;葡萄糖、乳糖和蔗糖处理J2无死亡现象,反而利于南方根结线虫J2的存活。研究结果显示普通寡糖对南方根结线虫基本无毒性,而放线菌Snea253代谢产物中氨基糖类物质则对线虫有毒性。     

基于GIS的南方根结线虫在陕西省越冬区划分析

土壤温度是影响南方根结线虫(Meloidogyne incognita)越冬的重要因子。通过自动温度记录仪,从2009—2012年的每年冬季(11月至次年3月),对陕西省延安、商洛、杨凌和大荔4个生态区的气温和不同种植模式下的土壤温度进行数据采集和模拟统计,建立土温与气温关系的数学模型,根据模型将陕西省96个气象站点的气温数据转换为土温数据。利用GIS的克里金(Kriging)空间插值功能,结合实验室测得的南方根结线虫存活的最低温度,生成南方根结线虫在拱棚、地膜覆盖和露地3种种植条件下的越冬区划图并进行分析。研究表明,(1)0℃以下低温对南方根结线虫有明显抑制作用,南方根结线虫在低于-1℃低温持续32 d以上时无法越冬。(2)土壤温度和气温呈线性相关关系,4种种植条件下土壤温度(Y)与气温(X)的关系方程分别为露地:Y=0.8125X+1.9325,R=0.934;地膜覆盖:Y=0.7943X+1.8563,R=0.918;拱棚:Y=0.7046X+6.2685,R=0.907;温室:Y=0.302X+14.519,R=0.597。(3)最冷月土壤均温低于-1℃的概率在70%—80%的区域可以认为是南方根结线虫的越冬界线,越冬界线在露地、地膜覆盖和拱棚条件下依次北移,在温室条件下可在全省范围内越冬。     

太阳能消毒对温室土壤环境效应及防治黄瓜根结线虫病效果

采用室内测定与大田试验相结合的方法,研究了太阳能不同消毒方式对温室土壤环境的效应及对温室黄瓜根结线虫病的控制效果.结果表明,垄沟式覆盖地膜处理对温室土壤温度、土壤酶的活性、微生物数量的影响最明显,处理16d,棚室10、20、30、40、50cm深土壤的最高温度依次是59.1、57.7、56.6、48.9、47.6℃,平均每天超过55、50、45℃持续时间分别为7.5、8.5h和16h;土壤温度的升高,有利于提高对根结线虫的杀灭效果.0～20cm土壤脲酶、蔗糖酶、碱性磷酸酶、过氧化氢酶分别降低43.3%、18.7%、20.1%和13.1%;土壤真菌、细菌、放线菌数量分别降低96.0%、84.8%、53.9%.垄沟式未覆膜处理对土壤环境的影响次之,平面式未覆膜的影响最小,酶活性降低及土壤微生物数量下降对土壤的活性有一定的负效应.垄沟式覆膜太阳能消毒对温室黄瓜根结线虫控制效果最显著,持效期最长,能有效杀灭温室0～50cm土壤内根结线虫;处理后第1年和第2年对温室黄瓜根结线虫控制效果均达到100%,第3年防效96.7%,第5年仍达72.8%.垄沟式未覆膜控制效果次之;平面式未覆膜控制效果最差,持效期最短.     

蓖麻提取物和淡紫拟青霉对南方根结线虫的防治作用

通过杀线活性测定及盆栽试验,研究了蓖麻提取物和淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)的杀线活性及防治效果.结果表明:蓖麻碱不影响淡紫拟青霉孢子的萌发.蓖麻碱和淡紫拟青霉均具有较强杀线活性,蓖麻碱处理对南方根结线虫的卵孵化抑制率和二龄幼虫死亡率分别达61.7%和59.2%,显著高于对照处理;蓖麻碱和孢子液复合处理接种南方根结线虫的番茄苗后,植株平均根结数为15±3,显著低于对照的平均根结数37±2,株高、鲜重和根长增长率分别比对照提高38.5%、44.0%和57.0%.说明蓖麻提取物和淡紫拟青霉能减轻线虫危害,对番茄南方根结线虫病控制效果明显.     

线虫诱导番茄抗性对烟粉虱发育及存活的影响

有害生物为害植物后可以诱导后者产生防御抗性,进而对同株植物上其它生物产生一定的负面影响。本文以蔬菜生产中的两大重要有害生物——南方根结线Meloidogyne incognita和烟粉虱Bemisia tabaci为研究对象,在实验室内, 利用不同浓度（200头/株、500头/株、1000头/株）的南方根结线虫侵染番茄,分别在侵染后的第3、7、11 d接种烟粉虱,研究南方根结线虫为害番茄后诱导的植物抗性对叶部害虫烟粉虱生长发育及存活等特性的影响。结果表明,受三种浓度的南方根结线虫危害3 d、7 d和11 d后的番茄植株上,与对照植株上相比烟粉虱卵至成虫的发育明显延长;当500头/株和1000头/株浓度南方根结线虫危害3 d 和7 d 后,该番茄植株上烟粉虱的发育历期与对照相比差异达到显著水平,而在南方根结线虫危害11 d的番茄上,尽管烟粉虱发育历期也随接种南方根结线虫浓度的增加而延长,但处理组与对照组之间的发育历期均无显著差异。在南方根结线虫危害3 d、7 d后的番茄上接种烟粉虱,后者卵-成虫的存活率较对照组番茄上明显下降,且差异达到显著水平,而南方根结线虫不同为害时间、不同为害浓度的处理之间对烟粉虱存活率的影响差异并不显著。研究表明,当南方根结线虫与烟粉虱分别在根部和叶部为害同一株植物时,前者通过植物对后者的影响是负面的,二者之间的互作关系应属于拮抗类型。     

多粘类芽胞杆菌KM2501-1杀南方根结线虫活性产物研究

【目的】南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是一种危害严重的土传性植物病原线虫,给农业生产造成了巨大的经济损失,前期研究发现多粘类芽胞杆菌(Panebacillus polymyxa) KM2501-1具有很好的温室防治南方根结线虫效果,且可产生多种挥发性杀线虫活性物质,但对其非挥发性产物是否有杀线虫活性没有研究。本研究拟进一步分离鉴定其产生的杀线虫活性代谢产物,发掘新的杀线虫药物。【方法】对菌株KM2501-1进行液体发酵并离心收集发酵上清液,通过硅胶柱层析、高效液相色谱分离等方法得到高纯度的杀线虫活性物质,并通过液相色谱质谱联用分析、核磁共振等技术鉴定杀线虫活性物质的结构。【结果】生物活性检测显示,多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵上清液具有较强的南方根结线虫触杀活性,并能有效抑制南方根结线虫卵孵化,体外杀线虫效率高达87.66%,抑制卵孵化效率达92.26%。结构鉴定结果显示多粘类芽胞杆菌产生的杀线虫活性物质为环二肽类物质cyclo (Pro-Phe),800 mg/L的cyclo(Pro-Phe)杀线虫效率达84.75%。进一步的显微观测结果表明,与对照组相比,活性物质cyclo(Pro-Phe)处理后的根结线虫肠道组织紊乱、结构发生破坏。【结论】多粘类芽胞杆菌KM2501-1产生的cyclo (Pro-Phe)是一个具有杀线虫新功能的活性物质,其可能通过破坏线虫肠道杀死线虫。     

B型烟粉虱和温室白粉虱在温度逆境下的生存特性比较

为了明确B型烟粉虱和温室白粉虱在温度逆境下的生存特性对其种群发展的影响,通过进行高温和低温暴露试验,研究了B型烟粉虱和温室白粉虱卵、伪蛹、成虫在37℃,39℃,41℃,43℃,45℃下暴露1～2 h后的存活率,以及这两种粉虱卵、2～3龄若虫、伪蛹和成虫在2℃下暴露1～12 d后的存活率。结果表明：两种粉虱的卵、伪蛹和成虫在37℃～45℃下暴露1～2 h,其存活率均随着温度的上升而降低;但在相同处理条件下B型烟粉虱3种供试虫态的存活率要高于温室白粉虱。B型烟粉虱在2℃下暴露2～12 d,各供试虫态的存活率迅速下降,卵、2～3龄若虫、伪蛹在2℃下暴露12 d后均不能存活,成虫在2℃下暴露4 d后也全部死亡;而温室白粉虱卵、伪蛹在2℃下暴露12 d后其存活率还能超过45%,成虫在2℃下暴露7 d后仍有80.9%能够存活。结果说明,B型烟粉虱和温室白粉虱对温度逆境的适应性存在差异,B型烟粉虱对高温的适应性要高于温室白粉虱;温室白粉虱对高温敏感,但对低温的适应性要显著高于B型烟粉虱。据此推测,两种粉虱对温度逆境适应性的差异是导致其种群发生存在差异的一个重要原因。     

高温对油松毛虫卵发育的影响

将油松毛虫Dendrolimustabulaeformis卵在不同高温下处理80min后的试验结果表明,短时(80min)高温(4 0℃)对卵的孵化没有显著影响,但40℃高温的短时(80min)处理,却能显著缩短其发育历期,降低孵化率。将卵置于3 4℃下处理不同时间(0～4h)后移至40℃下80min ,再放回到2 8℃下的试验结果表明,卵历期有随着处理时间的增加而延长的趋势。在40℃下处理不同时间对卵的发育和孵化有显著影响,延长处理时间对卵孵化不利,连续处理8h后卵不能孵化。油松毛虫初产卵持续放置在≥3 4℃高温下不能孵化。     

甜菜夜蛾卵的超低温冷冻保存(英文)

通过对甜菜夜蛾卵超低温冷冻过程中一系列影响因子的研究 ,建立了甜菜夜蛾卵在液氮中冷冻保存的方法。结果表明 ,利用 1 5%次氯酸钠处理卵壳 6min ,再用异丙醇处理 1 5sec和N 己烷处理 30sec可有效去除甜菜夜蛾卵的外卵壳和蜡质层 ,获得 95%以上的渗透化率和 60 %左右的存活率 ;渗透化卵经 2mol L乙二醇初步抗冻 30min和含 1 0 %BSA的 8 5mol L乙二醇脱水 5min ,约有 55%～ 60 %的卵存活和2 4 %的卵孵化 ;将抗冻处理后的卵投入液氮 ( - 1 96℃ )中 2 4h ,在 37℃下解冻 ,结果有 ( 1 6 3± 7 6) %的卵发育至黑头期 ,( 1 6± 1 1 ) %的卵孵化。     

根结线虫的人工培养和繁殖研究

以感染根结线虫的栝楼和番茄根为材料,用简化改良的贝尔曼漏斗法分离、纯化获得实验所需要的线虫;对根结线虫的体外培养进行研究,比较了灰霉菌(Botrytis cinerea)和腐皮镰孢菌(Fusarium solani)ZZG-1制备二重培养基对根结线虫生长影响,确定灰霉菌适宜作二重培养基培养根结线虫;通过接种根结线虫悬液,在室内15~25℃环境下培养3~4周,可获得大量生长一致的幼龄期(J2)线虫,解决了根结线虫培养时寄主依赖性的问题。     

不同AMF组合提高黄瓜抗根结线虫效果的比较

本研究旨在评价不同组合丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)抑制根结线虫和降低根结线虫病害的效应,以获得抗病作用较大的AMF组合。将由AMF光壁无梗囊霉Acaulospora laevis(Al)、摩西管柄囊霉Funneliformis mosseae(Fm)、幼套近明球囊霉Claroideoglomus etunicatum(Ce)、根内根孢囊霉Rhizophagus intraradices(Ri)、变形球囊霉Glomus versiforme(Gv)、珠状巨孢囊霉Gigaspora margarita(GIm)和全球盾巨孢囊霉Scutellospora aurigloba(SCa)组成的12个组合分别接种"津优35号"黄瓜,接种南方根结线虫Meloidogyne incognita并设置不接种对照。盆栽试验结果表明,接种AMF组合均能显著降低线虫卵囊数和每个卵囊的含卵数量,但Fm+Ri+GIm+SCa组合则增加根内二龄幼虫数、根内雌虫数和根内线虫总数;其他大多数组合能够抑制线虫的繁殖数量,其中,以Al+Fm+GIm及Fm+Ce+Gv组合抑制线虫生长发育的作用最大;除GIm+SCa组合外,其他AMF组合均能不同程度地降低线虫为害,防效达31%–83%,以Al+Fm+GIm组合处理的根结指数最低,防效最大。设施田间试验结果表明,以Al+Fm+GIm组合抗病作用最强。本研究表明,不同组合AMF防病效应差异显著,Al+Fm+Ce+Gv组合及Al+Fm+GIm是本试验条件下防治根结线虫病害效应最好的AMF组合,具有较大的应用潜力。     

温湿度对山地麻蜥孵化卵、孵化成功率及孵出幼体特征的影响

用 6种温湿度条件孵化安徽宿州乾山山地麻蜥 (Eremiasbrenchleyi)卵 ,观测孵化卵质量变化、胚胎利用卵内物质和能量以及孵出幼体特征。卵在产出后 1h内收集 ,共设置 3× 2种温湿度处理 (温度分别为2 7、 30和 33℃ ;湿度分别为 - 2 2 0、 0kPa)。每隔 5d称卵重 ,直至幼体孵出。幼体经测量、称重后 ,解剖、分离为躯干、剩余卵黄和脂肪体三组分 ,用于成分测试。卵从环境中吸水导致质量增加 ,孵化温、湿度及其相互作用显著影响孵化卵的质量变化 :同一温度下 ,高湿度 (0kPa)孵化卵的终末质量大于低湿度 (- 2 2 0kPa)孵化卵 ;同一湿度下 ,低温 (2 7和 30℃ )孵化卵的终末质量大于高温 (33℃ )孵化卵。温度显著影响孵化期 ,随温度的升高孵化期缩短 ;湿度及其与温度的相互作用对孵化期无显著影响。孵化温湿度对孵化成功率无显著影响。温度显著影响胚胎对卵内物质的动用、幼体大小、质量以及剩余卵黄质量 ;除剩余卵黄外 ,湿度及其与温度的相互作用不影响山地麻蜥孵出幼体几乎所有的被检测特征。 33℃孵出幼体的大小和质量均显著小于 2 7和 30℃ ,并特征性地具有较大的剩余卵黄。因此 ,33℃不适宜孵化山地麻蜥卵。 2 7℃和 30℃中孵出幼体躯干发育良好 ,各项被测定的特征指标极其相似。     

植物罹病组织中南方、爪哇、花生根结线虫的LAMP快速检测

【目的】建立一种基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,从植物罹病组织中直接检测3种常见的根结线虫,为根结线虫的监测和防治提供技术支持。【方法】分别采用3种根结线虫的种类特异性引物对所选择的根结线虫的DNA片段进行PCR扩增,扩增产物纯化、回收并测序。根据3种根结线虫的测序结果,针对种类特异区段,采用PrimerExplorerV4软件,分别设计3种根结线虫的LAMP引物。设计的引物组人工合成后,以提取的纯化种群线虫DNA为模板,分别进行引物组的特异性测试,筛选出分别针对3种根结线虫的最佳引物组。【结果】研究设计的3种根结线虫的LAMP特异性引物能够直接从植物根结中检测出南方、花生、爪哇3种常见根结线虫,LAMP快速检测体系为:dNTPS浓度为1 mmol·L~(-1),Mg~(2+)的浓度为5 mmol·L~(-1),不添加甜菜碱,反应时间为45 min。【结论】本实验建立的南方、花生、爪哇根结线虫LAMP快速分子检测方法,具有特异性强、灵敏度高、简单、快速、经济等特征,能够从罹病植物组织中快速准确地检测出南方、花生和爪哇根结线虫,具有极高的实践应用价值。     

低温处理对金银花尺蠖卵和蛹的影响

将金银花尺蠖Heterolocha jinyinhuaphaga Chu的卵、蛹分别在5℃和8℃下处理1 d、3 d、5 d、7 d后,放在25℃下培养,研究低温处理对金银花尺蠖卵和蛹的影响。结果表明,低温处理对金银花尺蠖卵的发育历期和孵化率、蛹的发育历期和羽化率均有显著的影响。低温处理后,卵、蛹的发育历期比对照显著缩短,并且随着低温处理天数的增加,发育历期逐渐缩短,差异达显著水平;卵的孵化率和蛹的羽化率比对照也显著下降。经过5℃低温处理1 d、3 d卵的发育历期分别比对照缩短286 d、473 d;孵化率分别比对照下降了4234%和4967%;处理5 d、7 d的卵均不能孵化。经过8℃低温处理1 d、3 d卵的发育历期分别比对照缩短125 d、300 d;卵的孵化率分别比对照下降了3035%和4500%,处理5 d、7 d的卵也均不能孵化。经过5℃低温处理1 d、3 d、5 d的金银花尺蠖蛹的发育历期分别比对照缩短了249 d、454 d和701 d;羽化率分别比对照下降了5777%、6784%和7810%;处理7 d的蛹均不能羽化。经过8℃低温处理1 d、3 d、5 d的金银花尺蠖蛹的发育历期分别比对照缩短了133 d、354 d和549 d;羽化率分别比对照下降了3945%、5873%和7441%;处理7 d的蛹均不能羽化。     

长枝木霉T6菌株对黄瓜南方根结线虫的防治及其根际定殖作用

采用温室盆栽试验测定了不同浓度长枝木霉T6菌株孢子悬浮液对南方根结线虫的防治及在黄瓜根际的定殖作用.结果表明:根际定殖处理10周后黄瓜根际土壤和根系中长枝木霉T6菌株菌落数量显著增加,且处理土壤和根系中菌落数量变化显著,浓度为1.5×10~7CFU·m L~(-1)处理的根际土壤和根系中菌落数量达到7.8×10~7和6.3×10~5CFU·m L~(-1).温室防治试验中,不同浓度长枝木霉T6菌株孢子悬浮液对南方根结线虫不同虫态具有较强的防治效果,且防治效果随着孢子悬浮液浓度的增加而增加.长枝木霉T6菌株孢子悬浮液对被南方根结线虫侵染的黄瓜株高、根系长度和鲜质量具有显著的促生作用.表明长枝木霉T6菌株在黄瓜根际具有较强的定殖作用,对南方根结线虫具有较好的防治作用,并对黄瓜植株生长具有显著的促生作用.     

温度对甜菜夜蛾生殖行为及生殖力的影响

温度不仅是甜菜夜蛾生长发育最关键的生态因子 ,而且对其生殖行为、交配节律和生殖力等也有显著影响。室内通过 15、2 0、2 5、30、35、4 0℃共 6个温度处理 ,结果表明 ,甜菜夜蛾成虫交配高峰期随温度的升高而逐渐延迟 ,交配持续时间也逐渐缩短 ;在 4 0℃下交配行为明显受到抑制 ,在 2 5～ 30℃下 ,可以获得最大的生殖力 ;15℃处理主要抑制了卵的形成 ,而 4 0℃处理在抑制卵的形成的同时也降低了卵的产出率 ;较高温度下的产卵前期、产卵期和雌雄虫寿命都明显缩短。 15℃低温对卵的孵化率影响不显著 (89% ) ,而 4 0℃处理卵的孵化率只有 37%。不同温度对甜菜夜蛾的每日产卵量也有很大的影响。在 15～ 4 0℃范围内 ,温度越高 ,产卵高峰期出现越早。     

植物内生真菌防治根结线虫研究进展

根结线虫病是对农作物危害严重且难以防治的病害，并随着我国设施农业的发展日趋严重。常规的化学防治方法因毒性大、破坏生态环境而不适应农业的可持续发展。作为一种能稳定寄生在作物体内的生物防治真菌，内生真菌通过抑制卵的孵化、降低J2期线虫幼虫活力、抑制线虫的入侵、延缓雌虫发育、减少产卵数目、降低作物根中根结和卵块数量，来实现稳定、高效、安全地防治根结线虫病害。近年来，内生真菌的作用机制得到广泛关注和研究，取得了显著进展。本文综述近年来内生真菌生物防治根结线虫机制的研究进展，总结了内生真菌直接攻击、资源竞争、代谢物胁迫、防御激活等4种主要机制，探讨其存在的问题，以期为进一步开发、应用植物内生真菌进行生物防治提供帮助。     

蔬菜根结线虫生防芽胞杆菌的筛选及作用机理研究

芽胞杆菌是一类重要的植物病害生防因子.为挖掘防治蔬菜根结线虫的芽胞杆菌优良菌株,从根结线虫病抑制性土壤中分离到62株芽胞杆菌,测定不同菌株发酵滤液对二龄幼虫的致死作用和卵孵化的抑制作用初筛生防菌,然后利用室内盆栽试验测定生防菌株的防治效果,结果发现NB-04菌液灌根处理根结指数最低,防治效果达61.6％.进一步通过形态...     

不同环境和介质对三叶虫萤卵孵化的影响

本文对照研究了3种环境和4种介质对三叶虫萤卵孵化的影响。环境设置包括模拟野外环境、常温黑暗及低温处理3种,室内恒温25℃条件下不同的介质分为灭菌土、苔藓和灭菌土、湿纱布和灭菌土、野外介质4种。研究发现,附着有厚实灭菌土的苔藓和有一定的遮蔽物是三叶虫萤卵孵化的有利环境因素,孵化率最高,达到100%;将卵置于15℃的低温环境中时,卵的孵化时间大约延迟一个月,但并不影响其孵化率;黑暗的环境对卵的孵化基本没影响。实验表明,厚实的土壤是虫卵抵抗外界不利天气的基础,对稳定虫卵也起着重要作用,同时遮蔽物环境避免了自然强光、恶劣天气、人为践踏、重物冲击等外界不利因素造成的卵孵化失败;光照对卵的孵化基本没影响,但低温会延缓卵的发育。     

南方根结线虫初始接种密度对生姜生长的影响

在盆栽条件下,研究了南方根结线虫不同初始接种密度对生姜生长的影响.结果表明,南方根结线虫的侵染,降低生姜株高、茎粗、分枝数、茎叶鲜重和根系鲜重,最终降低生姜的产量,且随着接种密度的增加,生姜生长所受到的危害也随之增加.每100 g干土接种0、100和200个卵,可使生姜分别减产27.91%、37.73%和42.14%.初始接种密度对南方根结线虫繁殖速率也有很大影响.一般初始接种密度低时繁殖速率高,接种密度高时繁殖速率低,其在生姜上的平衡密度为每100 g干土746.20个.