烟草脆散型愈伤组织获取及其细胞悬浮培养(简报)

以烟草叶片为外植体,以2/3MS BA 0.5mg/L NAA 0.1mg/L 为愈伤组织诱导培养基,继代培养3次后,转入添加3332.48mg/L Ca(NO3)2的该培养基上继代,可获得脆散型愈伤组织,并由此建立细胞悬浮培养系统。     

亚麻胚性细胞悬浮培养体系的建立和影响因素

亚麻品种‘双亚五号’的胚性愈伤组织诱导最佳培养基为MB（MS无机盐加B5维生素）＋1.0mg·L^-12,4-D;细胞初始悬浮培养的最佳培养基为MB＋0.2mg·L-16-BA;细胞继代悬浮培养的最佳培养基为改良的MB（NH4NO3减半,KNO3加倍）＋0.02mg·L^-12,4-D＋0.2mg·L^-16-BA;适宜的蔗糖量为50g·L^-1;适宜的继代接种量为1.0～1.5g·（25mL）^-1;继代间隔为5～7d。     

葡萄细胞悬浮培养体系的建立和优化

为了利用葡萄愈伤组织建立快速稳定的葡萄细胞悬浮体系,以无核白和黑比诺葡萄无菌幼苗的茎段、叶片以及叶柄为外植体,通过基本培养基、不同植物生长调节剂配比及其浓度、PVP等优化疏松型愈伤组织的诱导方法并建立稳定的细胞悬浮培养体系。结果表明,以无核白和黑比诺葡萄茎段为外植体,在添加2.0 mg/L NAA和0.3 mg/L 6-BA的MS培养基上适合疏松型愈伤组织的诱导。以B5为基本培养基添加1.0 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L 6-BA以及0.2%PVP的优化培养条件下,建立了快速稳定的无核白葡萄悬浮培养体系。葡萄悬浮培养细胞生长曲线呈S形,接种后6-18 d处于对数生长期,第21天细胞增长量达到最大值。细胞活力测定与TTC染色结果一致表明,接种后培养9 d细胞活力最强。建立了快速稳定的无核白葡萄悬浮培养体系,选择细胞活力最强且细胞快速增值的对数期7-9 d的细胞进行葡萄悬浮细胞遗传转化,效率较高。     

草木樨状黄芪单细胞培养再生植株及其影响因素的研究

从草木樨状黄芪的子叶和胚轴诱导的愈伤组织中选取结构松脆的颗粒状愈伤组织,用液体培养基Ｓ１２进行悬浮培养建立了悬浮细胞。取换液３天左右生长旺盛的悬浮系材料分离单细胞,用基本培养基Ｓ１２与不同浓度的植物血球凝集素组成的系列培养基ＭＣ１－ＭＣ６进行液体浅层静置暗培养;形成小愈伤组织后,经Ｍ３（ＭＳ＋２,４－Ｄ ２ｍｇ／Ｌ,ＮＡＡ ０．２ｍｇ／Ｌ,ＫＴ １ｍｇ／Ｌ）培养基增殖,ＭＲ２培养基诱导分化出苗,再     

黄槐叶片培养过程中器官发生的研究

以黄槐（ＣａｓｓｉａｓｕｒａｔｔｅｎｓｉｓＢｕｒｍ．ｆ．）幼嫩叶片为材料,接种于ＭＳ＋ＮＡＡ１ｐｐｍ＋２,４－Ｄ１ｐｐｍ＋６－ＢＡ２ｐｐｍ的培养基上,诱导形成两种形态的愈伤组织,即致密愈伤组织与雪花状愈伤组织．将愈伤组织转移到ＭＳ＋ＮＡＡ：１ｐｐｍ＋６－ＢＡ２ｐｐｍ的分化培养基上．仅致密型愈伤组织经过球状体至不定芽途径形成大量再生植株。扫描电镜及组织细胞学观察表明,致密愈伤组织表层细胞排列紧密,有许多分生细胞团,而雪花状愈伤组织表层细胞薄壁化,分裂能力很低。球状体起源于致密愈伤组织表层的分生细胞团,其细胞有极强的分生能力,顶端可以分化发育成不定芽原基,最后形成不定芽并发育成小植株。球状体可以看成是具有形成不定芽能力的繁殖单位．     

濒危植物珙桐愈伤组织的诱导及悬浮细胞培养初探

以珙桐（Davidia involucrate）无菌苗的下胚轴为外植体,以LSD分析和正交设计与分析为主要研究方法。诱导和筛选愈伤组织,进行悬浮培养,初步建立了珙桐悬浮培养体系,并对珙桐悬浮培养中生物量和pH值的变化进行了初步研究。结果表明：KT和2,4-D的组合诱导出的愈伤组织更适合进行细胞悬浮培养,最佳愈伤组织诱导培养基为WPM＋KT 1.0 mg/L＋2,4-D 0.5 mg/L＋Vc 1.0 mg/L;悬浮细胞培养中,接种量和Ca2＋浓度是影响生物量的主要因素,最佳接种量为25 g/L,最佳Ca2＋浓度为标准WPM培养基中Ca2＋浓度的2倍;黑暗条件下,珙桐悬浮培养生物量变化曲线呈＂S＂型,在21 d时可获得最大生物量;pH值的变化与生物量的变化有一定的相关性。     

油樟悬浮培养及次生代谢产物的诱导

以油樟（Cinnamomum longepaniculatum）叶片为外植体在附加6-BA和NAA不同激素浓度组合的MS培养基上筛选质地疏松、生长旺盛的愈伤组织,分别接种在MS、B5、WPM三种液体培养基中进行细胞悬浮培养,并检测诱导产生的次生代谢产物。结果表明：2mg·L^-16-BA＋0.5mg·L^-1NAA能诱导质地疏松、生长旺盛的愈伤组织,B5基本培养基中细胞长势最好;愈伤组织在B5＋2mg·L^-16-BA＋0.5mg·L^-1NAA中悬浮培养,继代2次后形成均一的单细胞;从油樟悬浮培养物中检测出50%以上的成分是苯甲醇。     

镧对烟草愈伤组织和油菜幼根钙含量的影响

ＭＳ培养基中添加镧（Ｌａ）（０ ．０１ ～０ ．１０ｍ ｍｏｌ·Ｌ－ １） 培养烟草愈伤组织,其总Ｃａ２ ＋ 及原生质体Ｃａ２ ＋ 含量明显比对照（ 不加Ｌａ） 低;长时间（ 继代培养３０ｄ） 较短时间培养（ 悬浮培养２４ｈ） 低．低浓度（０ ．０１ ～０ ．０５１ｍｏｌ·Ｌ－ １）Ｌａ３ ＋ 使细胞壁中Ｃａ２ ＋ 含量高于对照并随浓度提高而增加,高浓度（０ ．１０１ｍｏｌ·Ｌ－ １） 则减少．与Ｃｅ２ ＋ 相比较,Ｌａ３ ＋ 的排Ｃａ２ ＋ 作用稍弱于Ｃｅ３ ＋ ．以不同浓度Ｌａ（ＮＯ３）３ 溶液浸种,油菜幼根总Ｃａ２ ＋ 及原生质体中Ｃａ２ ＋ 含量变化与上述类似．Ｌａ３ ＋ 使烟草愈伤组织褐化明显,生长量比对照低．     

柑桔裂皮病类病毒一爪哇三七悬浮细胞的生长特性

爪哇三七(Gvnura aurantlaca Dc)是柑桔裂皮病类病毒(Citrus Exocortis Viroid简称CEV)敏惑的指示植物。用CEV感染的柑桔叶研磨汁液机械接种健康爪哇三七植株,以此作为CEV感染的外植体采源。在MS和B,琼脂培养基上诱导和继代培养健康、CEV感染的爪哇三七叶片的愈伤组织,在MS、B,液体培养基中建立健康、CEX’感染的爪哇三七悬浮细胞系统。从愈伤组织和悬浮细胞培养物中抽提核酸,经5％双向聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染分析：在健康爪哇三七愈伤组织和悬浮细晦中不出现特异的CEV电泳带,而CEV感染的爪哇三七的所有培养物中都含有类病毒。cEV可在有丝分裂征盛的爪哇三七悬浮细胞中复制。散伤组织和悬浮细胞很容易继代培养和保存。     

籼稻体细胞胚胎发生及器官发生的比较研究

在以幼穗为外植体的诱导培养及其以后的继代培养与悬浮培养中,从以下几个方面对３个籼稻品种的体细胞胚胎发生（Ｅ）与器官发生（Ｏ）的特点作了比较研究．在形态上,（Ｅ）型愈伤由胚状体组成,具有层次分明的结构．胚状体由胚芽、胚根及盾片组成．而（Ｏ）型的愈伤没有上述组织的分化．没有层次结构。植株再生能力方面．与器官发生途径相比较,体细胞胚胎发生途径之分化频率高．保持再生能力持续的时间长．从每个愈伤上发生的再生植株数多．（Ｏ）型愈伤结构较疏松．建立结构良好的、细胞团较小的悬浮细胞系容易．但这种细胞系在液体条件下几乎丧失再生能力．而（Ｅ）型愈伤则相反．建立好的悬浮细胞系．需要时间较长．但在悬浮条件下仍然具有再生植株的能力。在诱导条件方面．２,４－Ｄ及激动素分别作用时可诱导器官发生,共同作用时则诱导体细胞胚胎发生．再生植株途径方面,由于水稻同时具有器官发生及体细胞胚胎发生的特点．无论在诱导条件上还是在（Ｅ）与（Ｏ）本身的特点上均不似萝卜或烟草那样专一．并且有（Ｅ）与（Ｏ）相互转化和混合发生的复杂情况．     

F.t.-i.r. and laser-Raman spectra of thymine and thymidine

F.t.-i.r. and laser-Raman spectra of thymine and thymidine in the solid state were recorded. Assignments were proposed for the frequencies observed. The influence of the deoxy sugar on the vibrations of the nucleoside are discussed as a function of its particular puckering. The aim of this work is to elucidate the differences between the molecules constituting the nucleic acids, in order the better to comprehend their biological functions.     

F.t.-i.r. and laser-Raman spectra of cytosine and cytidine

Fourier-transform infrared (F.t.-i.r.) and laser-Raman spectra of cytosine and cytidine in the solid state have been recorded and assignments of the frequencies made. Comparison of the observed frequencies for cytosine with those for cytidine permits identification of the bands characteristic of the sugar on the one hand, and of the pyrimidine base on the other.     

R.b.e. and o.e.r. of extended-Bragg-peak helium ions: survival and development of rat embryos.

Rats were exposed under aerobic or hypoxic conditions to 200-1200 rads of 60Co gamma-rays or extended-Bragg-peak helium ions on the eighth day of gestation. Uterine contents were examined on the twentieth day of gestation. At the 50 per cent embryonic survival level, helium ion r.b.e. was 1(.0) (aerobic) and 1(.2) (hypoxic). Maximum attainable gamma-ray and helium-ion o.e.r.s. were 2(.2) and 1(.7) respectively, indicating an oxygen-effect gain (o.e.g.) of 1(.2). At the 10 per cent survival level helium ion r.b.e. was 1(.1) (aerobic) and 1(.4) (hypoxic). Gamma-ray and helium-ion 0.e.r.s. were 2(.0) and 1(.5) respectively, indicating a helium ion o.e.g. of 1(.3). These data demonstrate that the small fraction of high-LET radiation present in this helium ion beam has a neglible effect on the aerobic r.b.e., but lowers the effective o.e.r. of the beam approximately 25 per cent relative to that of gamma-rays. Helium ions were significantly more effective than gamma-rays in killing embryos under hypoxic conditions, in producing congenital abnormalities under aerobic conditions, and in stunting foetal growth under both conditions.     

F.t.-i.r. and laser-Raman spectra of guanine and guanosine

Fourier-transform infrared (F.t.-i.r.) and laser-Raman spectra have been obtained for solid guanine. The F.t.-i.r. spectrum of guanosine in the solid state was also recorded. Assignments are proposed for the i.r. bands. The molecular basis of the spectral differences between guanine and guanosine are discussed.