miR-214通过调控Notch1信号对口咽鳞状细胞癌细胞株增殖、侵袭及凋亡的作用机制研究

目的研究miR-214通过调控Notch1信号对口咽鳞状细胞癌（OSCC）细胞株增殖、侵袭及凋亡的作用机制。 方法在ATCC细胞库购买OSCC细胞株,分为3组：抑制组（IN组）、模拟组（SI组）及对照组（CO组）。通过Western blot法、qRT-PCR法、TUNEL法、侵袭实验及CCK-8法分析3组癌细胞中Notch1的蛋白、mRNA表达水平、细胞凋亡、迁移及增殖能力的差异性,三组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。 结果IN、SI、CO组细胞内miR-214mRNA表达量分别为1.15±0.26,3.34±0.89,2.08±0.67,SI组分别与IN组、CO组比较,差异具有统计学意义（t = 5.281,P = 0.002;t = 2.529,P = 0.045）;SI组、IN组的Notch1-UTR表达分别为0.42±0.11、0.86±0.09,差异具有统计学意义（t = 5.362,P = 0.006）;IN、SI、CO组的OSCC细胞凋亡率分别为（0.78±0.10）﹪、（0.32±0.06）﹪、（0.56±0.12）﹪,IN组分别与CO组、SI组比较,差异具有统计学意义（t = 3.149,P = 0.020;t = 8.823,P < 0.001）;IN、SI、CO组癌细胞的增殖率分别为（0.65±0.05）﹪、（1.26±0.06）﹪、（1.89±0.04）﹪,IN组与SI组、IN组与CO组比较,差异具有统计学意义（t = 11.056,P < 0.001;t = 27.394,P < 0.001）,CO组与SI组比较,差异具有统计学意义（t = 12.365,P < 0.001）;IN、SI、CO组癌细胞侵袭率分别为（0.13±0.02）﹪、（0.89±0.13）﹪、（0.48±0.11）﹪,SI组与CO组、SI组与IN组比较,差异具有统计学意义（t = 4.176,P = 0.006;t = 10.147,P < 0.001）;IN、SI、CO组的Notch1蛋白含量分别为：2.38±1.34、0.94±0.23、1.76±0.67,SI组与CO组、SI组与IN组比较,差异具有统计学意义（t = 2.588,P = 0.041;t = 2.368,P = 0.056）;IN、SI、CO组的Notch1 mRNA表达量分别为4.26±1.06、1.45±0.38、2.46±0.87,IN组与CO组、IN组与SI组比较,差异具有统计学意义（t = 2.935,P = 0.026;t = 5.583,P = 0.001）。 结论miR-214可能与OSCC细胞株增殖呈负相关,在细胞中miR-214含量升高,可能抑制Notch1信号通路表达,从而促进癌细胞增长、侵袭,抑制癌细胞凋亡。     

Visfatin mRNA在PCOS患者网膜脂肪组织中的表达

目的：探讨visfatin基因在多囊卵巢综合征（PCOS）网膜脂肪组织中的表达及相关影响因素。方法：采用半定量RT-PCR方法检测PCOS组（30例）和对照组（25例）网膜脂肪组织visfatin mRNA表达,并测量体重指数、腰臀比、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数和血清性激素水平。结果：①PCOS组网膜脂肪组织visfatin mRNA表达量高于对照组（P=0.000）。②网膜脂肪组织visfatin mRNA的表达量与BMI、WHR、FINS、HOMA-IR呈正相关（P〈0.05）。③多元逐步回归分析显示,HOMA-IR（P=0.000）和WHR（P=0.005）是影响网膜脂肪组织visfatin mRNA表达的相关因素。结论：网膜脂肪组织visfatin mRNA表达可能与PCOS胰岛素抵抗的发生和肥胖相关。     

抗体几何平均滴度计算中如何处理抗体阴性者？

不同作者在计算抗体几何平均滴度（ＧＭＴ）时，对抗体阴性者的处理方法不完全一致，共有三种：①将抗体阴性者的抗体滴度作为零纳入抗体ＧＭＴ计算；②将抗体阴性者不纳入计算；③用阳性界值的１／２作为阴性者的抗体滴度纳入计算。统计分析国内１１种医学杂志９２篇文献发现，科研机构和医学院校多用第三种方法（５７．１４％），省级和地市县级单位多用第一种方法（４４．８７％）。作者比较分析了三种方法的计算结果及优劣，认为第一种方法较适宜。     

胍丁胺对大鼠应激性体温升高的抑制作用

目的：观察胍丁胺（AGM）是否能降低或反转应激性体温过高反应。方法：61只雄性SD大鼠随机分为3部分,每部分再分为对照组和AGM组。在实验过程中,人工气候箱和开放实验箱内的温度均保持在22℃。①用无线遥测技术连续测量大鼠的体温和活动,观察腹腔注射AGM对安静状态下大鼠正常体温和活动的影响（n=8）;②将大鼠放置在开放实验箱中60 min复制应激性体温过高的模型,用无线遥测技术连续测量开放实验箱内大鼠体温和活动的变化（n=7~8）;③用美国哥伦布公司动物代谢分析系统测量AGM对大鼠能量代谢的影响（n=7）。结果：①腹腔注射AGM 80 mg/kg能引起正常大鼠出现明显低温反应（-0.46±0.11）℃,而注射AGM 40 mg/kg则对正常体温无明显影响。②对照组大鼠腹腔注射生理盐水后,置于开放实验箱内体温升高达（0.78±0.16）℃;给大鼠注射AGM 40或80 mg/kg后,置于开放实验箱内60 min时,体温则分别降低（0.34±0.11）℃和（0.81±0.14）℃。③AGM 80 mg/kg能明显降低大鼠的耗氧量和产热量。结论：AGM能引起正常大鼠出现低温反应和明显翻转应激性体温升高反应,其作用可能与AGM能降低能量代谢有关。     

《中国真菌学杂志》统计学符号著录规范

按GB3358—82《统计学名词及符号》的有关规定书写，常用如下：①样本的算术平均数用英文小写x（中位数仍用M）。②标准差用英文小写s。③标准误用英文小写sx。     

HCN2在大鼠外周神经病理性疼痛发生中的作用

目的：初步探讨超极化激活的环核苷酸门控通道2型（HCN2）在外周神经病理性疼痛发生中的作用。方法：将24只健康成年大鼠进行随机分组（n=12）：假手术组（Sham）大鼠仅分离左侧L4、L5脊神经,模型组（SNL）分离脊神经后进行相应的结扎处理,手术7 d后用行为学方法进行模型评价;将造模成功的大鼠进行随机分组（n=6）：①阴性对照组（Saline）,左侧足底注射生理盐水;②阳性对照组（GBPT）,腹腔注射加巴喷丁;③实验组（ZD7288）,左侧足底注射HCN非特异性阻断剂ZD7288。在给药前以及给药后1 h、4 h、24 h、48 h用疼痛行为学实验检测其对神经病理性疼痛的作用;分别取手术前对照组（Control）、假手术组（Sham）和模型组（SNL）大鼠的背根神经节（DRG）（n=6）,利用qPCR和Western blot的方法研究造模前后大鼠DRG内HCN2的表达的变化情况。结果：①成功建立大鼠神经痛模型;②与Saline组比较,GBPT组和ZD7288组在注射1 h后,均能明显的减轻大鼠神经病理性疼痛的症状（P<0.01）,而GBPT组和ZD7288组之间比较则无差异;③与Control组和Sham组相比较,SNL组大鼠DRG内的HCN2 mRNA表达量明显增加（P<0.01）;与Control组和Sham组相比较,SNL组大鼠DRG内的HCN2通道蛋白表达量显著增加（P<0.05）。结论：HCN2参与外周神经病理性疼痛的发生,并有可能成为治疗神经病理性疼痛一个潜在的新靶点。     

不同频率的电针对大鼠神经源性痛的治疗作用

目的：探讨不同频率的电针能否减轻大鼠神经源性痛。方法：将大鼠右侧L5／L6脊神经结扎,用引起50％抬足的机械刺激阈值评价机械性痛觉超敏,用大鼠5min内从5℃冷权上的抬足次数反映冷诱发的持续性疼痛。用韩氏穴位神经刺激仪给与2Hz或100Hz电刺激。结果：①2Hz和100Hz电针均一轻痛觉超敏,2Hz起效较早。②两种频率电针均能减轻冷诱发的持续性疼痛,但2Hz持续的时间长,多次电针后2Hz的镇痛效果可持续长达48h。③针刺而不通电也能显著减轻冷诱发的持续性痛。结论：电针能减轻神经源性痛,且低频（2Hz）电针的镇痛效果优于高频（100Hz）电针。     

3，4苯并芘对内皮祖细胞生物学功能的影响

目的研究3,4苯并芘（BaP）对人脐血来源的内皮祖细胞（EPC）生物学功能的影响。方法密度梯度离心法分离获取人脐血单个核细胞,采用贴壁培养法培养MNC中的EPC,通过Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-ac-LDL）摄取实验和FITC标记的植物凝集素（FITC-UEA-I lectin）结合实验鉴定细胞。消化收集第3代细胞,分别采用细胞计数试剂盒（CCK-8）、黏附能力测定实验、Transwell小室法及Matrigel体外成血管试验观察BaP对EPC增殖能力、粘附能力、迁移能力及成血管能力的影响,并检测各组细胞培养上清液SOD含量。采用单因素方差分析及LSD-t检验进行统计学分析。结果采用贴壁培养法能成功培养出EPC;与正常对照组相比,BaP呈浓度依赖性降低EPC的增殖能力{正常对照组OD（1.02±0.04）显著高于BaP各组[BaP①组OD（0.66±0.04）,BaP②组OD（0.55±0.04）,BaP③组OD（0.35±0.05）,均P〈0.01],BaP染毒组间增殖能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）};与正常对照组比较,BaP呈浓度依赖性降低EPC的黏附能力{正常对照组[（117.50±17.16）个/200倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（80.00±14.46）个/200倍镜,BaP②组（66.00±9.06）个/200倍镜,BaP③组（49.80±10.72）个/200倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间黏附能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.05）};与正常对照组相比,EPC的迁移能力亦呈BaP浓度依赖性降低{正常对照组[（46.10±4.51）个/400倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（35.50±4.95）个/400倍镜,BaP②组（26.80±4.08）个/400倍镜,BaP③组（19.50±2.84）个/400倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间迁移能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）};与正常对照组比较,EPC的成血管能力亦呈BaP浓度依赖性降低{正常对照组[（33.20±3.70）个/100倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（22.00±3.39）个/100倍镜,BaP②组（16.20±2.59）个/100倍镜,BaP③组（10.80±2.39）个/100倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间成血管能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.05）}。同时细胞培养上清液中SOD的活力也呈BaP浓度依赖性地降低{正常对照组[（22.6±2.19）U/ml]高于BaP各组[BaP①组（15.94±1.68）U/ml,BaP②组（12.5±1.58）U/ml,BaP③组（6.9±1.55）U/ml,均P〈0.01],BaP染毒组间SOD活力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）}。结论 BaP体外诱导显著影响EPC的多种生物学功能,其机制可能与氧化损伤有关。     

代谢综合征发病机制研究进展

代谢综合征（MS）是一组复杂的代谢紊乱,其病理生理学机制尚不完全清楚,美国AHA、心肺及血液研究所和ADA联合召开的顶级专家会议讨论后认为主要有三种可能：①肥胖和脂肪组织功能异常;②胰岛素抵抗（IR）;③一些独立危险因素的共聚,遗传和环境因素都在其中发挥作用。     

《中国真菌学杂志》统计学符号著录规范

按GB3358-82《统计学名词及符号》的有关规定书写,常用如下：①样本的算术平均数用英文小写x（中位数仍用M）。②标准差用英文小写s。③标准误用英文小写s^-x。④t检验用英文小写t。⑤F检验用英文大写F。⑥卡方检验用希文小写x^2。     

医学及生物医学工程发明发现的若干规律探讨

用实例总结探讨了医学及生物医学工程发明发现的若干规律,并且概括为以下4大类型：①先现象后本质的发明发现：包括机遇型、偶然型、教训型、意外型、启发型、怀疑型等;②先设想后本质的发明发现：包括假设型（假说型）、改进型、挖掘型、调查型、攻关型等;③＂瓜熟蒂落＂式的自然型发明发现;④不能恰当归类的综合性发明发现。     

不同数目骨髓间充质干细胞移植对大鼠肺损伤的抑制作用

目的研究不同数目的骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）静脉移植对野百合碱（monocrotaline,MCT）诱导大鼠肺损伤的抑制作用。方法全骨髓贴壁法培养Wistar大鼠MSCs,取第3～5代细胞进行移植。健康雄性Wistar大鼠20只由颈外静脉移植MSCs,按移植细胞个数分为5×105组、1×106组、5×106组和对照（生理盐水）组（n=5）,测定移植前、移植后5 min,30 min及24 h的RVSP。另40只随机分组（n=10）：①MCT/MSCs 5×105组;②MCT/MSCs 1×106组;③MCT组;④对照组,腹腔注射60 mg/kgM CT（对照组注射等量生理盐水）,同时分别移植MSCs 5×105个、1×106个或等量PBS液体。4周后检测大鼠右心室收缩压（right ventricularsystolic pressure,RVSP）、RV/（LV＋S）重量比值;肺组织苏木素-伊红染色、地衣红染色和平滑肌Actin免疫组织化学染色。统计数据采用SPSS 11.0软件,对各组数据进行单因素方差分析检验。结果少于1×106个MSCs颈外静脉移植是安全的。MSCs颈外静脉移植4周后,MCT/MSCs 1×106组RVSP（35.6±8.4）mmHg与MCT组（47.2±10.5）mmHg相比明显下降（P〈0.05）,心室比0.3572±0.0923明显低于MCT组0.4454±0.0935（P〈0.05）,而MCT/MSCs 5×105组RVSP为（42.5±11.3）mmHg,心室比0.4003±0.0725,与MCT组相比无明显下降（两者P〉0.05）;病理染色可见肺组织肺小动脉中,MCT/MSCs 1×106组中膜厚度分布为（19.2±3.8）%,较MCT组（26.4±4.9）%明显变薄（P〈0.05）;而MCT/MSCs 5×105组（23.3±3.6）%较MCT组相比无显著差异（P〉0.05）。结论 MSCs颈外静脉移植对MCT诱导的肺损伤具有抑制作用,1×106个细胞较5×105个细胞移植抑制作用显著。     

鸟氨酸脱羧酶基因反义RNA对肝癌细胞HepG2的影响

目的：探讨鸟氨酸脱羧酶（ornithine decarboxylase,ODC）基因反义RNA对肝癌细胞HepG2的影响。方法：构建ODC反义RNA的真核表达质粒,将此质粒转染HepG2细胞后,RT-PCR和Western印迹法筛选ODC表达抑制的细胞株。以此细胞株为模型,分析ODC反义RNA对细胞生长、细胞周期和对抗癌药物米托蒽醌敏感性的影响。结果：成功构建ODC反义RNA真核表达载体并获得稳定低表达ODC的肝癌细胞株Hr1。与对照细胞相比,ODC低表达引起HepG2细胞生长抑制,72h生长抑制率为31%;流式细胞术检测细胞周期发现,Hr1G1期细胞数（56.2%）显著性高于对照（48.2%）,而S期细胞（25.5%）则显著性低于对照（34.9%）,提示ODC低表达导致G1期阻滞;用米托蒽醌（100μg/L）处理两种细胞后发现,Hr1对药物的敏感性显著性高于对照细胞,处理48h后药物对HepG2和Hr1的抑制率分别是33.4%和60.6%,72h后的抑制率分别是60.8%和83.8%。结论：ODC反义RNA能抑制肝癌HepG2细胞生长,在抗肿瘤治疗中具有潜在的临应用价值。     

静脉毒瘾者金黄色葡萄球菌性感染性右心内膜炎(附2例报告及文献复习)

本文在国内首次报道２例静脉毒瘾者金黄色葡萄球菌性感染性右心内膜炎（ＳＩＲＥＤ）,其临床特点：①常合并有肝炎病毒感染;②确诊有赖于心脏超声检查发现三尖瓣赘生物、细菌的毒血症状及血培养的结果;③治疗应根据药敏结果选择２至３种敏感的抗生素联用,其剂量应比常规量大２至３倍,疗程６至８周或更长;④有效治疗后,该病预后良好     

小麦耐盐变异体的筛选Ⅱ．小麦耐盐细胞系的筛选及生理生化特性的分析

将诱导出的胚性愈伤组织采用：①逐级提高盐浓度进行胁迫筛选;②直接转入高浓度胁迫筛选;③先用羟脯氨酸（Ｈｙｐ）筛选后再转入高浓度盐中进行胁迫筛选,结果表明三种筛选方法其效果为③＞②＞①,即先用Ｈｙｐ筛选再进一步盐胁迫筛选效果最好。并对选出的耐盐细胞进行了生长量测定和生理生化特性的研究,表明耐盐细胞系脯氨酸含量不仅稳定,而且远高于对照,Ｋ￣＋／Ｎａ￣＋也大于对照,ＳＯＤ活性增加,小分子ＳＯＤ含量增加,本文并对有关问题进行了讨论。     

链脲佐菌素诱导SD和Wistar大鼠糖尿病模型的影响因素

目的通过注射链脲佐菌素（STZ）制作SD和Wistar大鼠糖尿病模型,观察大鼠品系、给药剂量、给药次数对大鼠成模率、死亡率的影响,同时研究利用口服葡萄糖耐量试验（OGTT）判断大鼠糖尿病成模率的意义。方法设置共同的正常对照组,①Wistar大鼠随机分为中剂量组（55 mg/kg）和高剂量组（65 mg/kg）;②SD大鼠一次性腹腔注射STZ（55 mg/kg）,与①中的Wistar大鼠作对比;③SD大鼠随机分为一次给药组和两次给药组,注射剂量均为55 mg/kg,观察期间进行OGTT。结果①Wistar大鼠成模率和死亡率均高于SD大鼠;②采用SD大鼠、中剂量给药和两次给药的方式可提高成模率,并降低死亡率;③在有明确胰岛病理改变的模型组大鼠,其OGTT异常阳性率显著高于空腹血糖异常阳性率。结论用STZ诱导糖尿病模型是一种稳定可靠的方法。Wistar大鼠成模率和死亡率均高于SD大鼠;选用中剂量给药及两次给药的方式可提高SD大鼠成模率,并降低死亡率,维持时间较长。在动物实验中OGTT比空腹血糖监测更有诊断意义,不易造成漏诊。     

鼠疫耶尔森菌抗原检测试剂用国家参考品的研制

目的研制鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)抗原检测试剂用国家参考品。方法通过对5株鼠疫耶尔森菌和10株非鼠疫耶尔森菌的菌种检定、培养及灭活、抗原检测,组建鼠疫耶尔森菌抗原检测试剂用国家参考品。对参考品进行样品均匀性以及稳定性评估,组织5家实验室协作标定。结果参考品由5份阳性、10份阴性、1份最低检出量以及1份重复性样品组成,均匀性和稳定性良好。协作标定结果显示:①5份阳性参考品阳性率100%;②10份阴性参考品阴性率100%;③最低检出量参考品的检出量不高于1.0×10~6个菌/mL;④重复性参考品检测反应结果应一致(酶联免疫法、上转发光免疫层析法等CV<5%)。结论建立的鼠疫耶尔森菌抗原检测试剂用国家参考品填补了相关领域的空白,可用于相关试剂的质量控制。     

蟾蜍卵培养及胚胎标本连续制作方法

蟾蜍卵（主要指受精卵）是动物胚胎学研究的重要材料,胚胎学标本的制作也是生物学领域教学、研究的必要环节。本文粗略介绍医学院校实验室培养蟾蜍卵及其胚胎标本连续制作的过程。１　材料和方法１－１　材料：①饲养槽：取一较大水盆,里面盛１／５自然水（自来水经数天日晒）,水温要求在１９℃左右。②喂养食料：将蛋黄和菠菜煮熟与面粉混在一起。③试剂：５％甲醛固定液,Ｓｍｉｔｈ’ＦｌｕｉｄＨＥ、蕃红、亮绿染液及做切片用各种常规液体。１－２　方法：①采集与饲养：五月中旬（北方地区采集时间）,到野外河沟或洼地捕捉雄性（趾…     

五味牵牛胶囊主要药效学研究

目的：观察和验证五味牵牛胶囊对治疗前列腺增生、镇痛和抗炎的药理作用;方法：采用前列腺增生、致痛、致炎动物模型（小鼠、大鼠）等方法进行实验观察。结果：①五味牵牛胶囊对小鼠、大鼠的前列腺增生有明显的治疗作用（P〈0.01）,可显著减低增生的前列腺重量,使前列腺腺体缩小,腺腔扩张降低;②五味牵牛胶囊对醋酸诱发的疼痛具有明显的镇痛作用;③五味牵牛胶囊对角叉菜胶诱发的炎症具有显著的抗炎作用;④结果表明五味牵牛胶囊对前列腺增生的治疗具有明显的量效和时效关系。结论：①拟推荐临床用药采用口服法;②根据文献相关剂量换算的方法,五味牵牛胶囊临床成人拟日用量为1519 mg/日;③拟推荐临床用药疗程为6周。     

飞虱虫疠霉分生孢子在不同温湿度组合条件下的存活率

用荧光染色法研究了不同温度（10－30℃）和湿度（51－100％RH）组合条件下飞虱虫疠霉Pandora delphacis分生孢子的存活率。在无放回抽样观察中,孢子弹射后第24h的存活率在51％、74％、85％、90％、95％和100％RH与不同温度的组合中分别为42－81％、69－89％、70－95％、67－100％、76－100％和56－100％。存放4个月后,不同温度下的孢子存活率在51％、74％、85％和90％RH下分别为55－74％、52％－87％、38－73％和1－65％。而在≥95％RH下孢子存活率24h后锐减,至第7d几乎全部失活。以上结果表明,弹射后的飞虱虫疠霉孢子在头24h的存活易受低湿影响,但存活下来的孢子能继续在低湿下存活较久;饱和或接近饱和的高湿度最不利孢子长久存活。