兔受精卵显微注射外源基因后体外培养的卵裂发育

从超数排卵的１４只母兔获得４３８枚受精卵,卵龄１６～２２小时．显微操作在带微分干涉和相差的Ｎｉｋｏｎ倒置显微镜下进行．注射针的尖端外也０．５μｍ,离尖端４０和８０μｍ处的外径分别为４．２和６．５μｍ．注射用外源基因是绵羊生长激素基因与ＭＴ－１启动基因藕连的线状ＤＮＡ溶液（１ｎｇ／μｌ）．１４０枚注射的受精卵和未注射的１４５枚受精卵（对照）,在Ｈａｍ’ｓＦ—１０培养液（补充生长因子）中培养（３８℃,５％的ＣＯ２）．结果,培养４８小时后,注射组卵裂发育率分别是：未卵裂７．９％（１１／１４０）、卵裂至２～４细胞期１１．０％（１６／１４０）、卵裂至８～１６细胞期８０．７％（１１３／１４０）．对照组相应的卵裂率分别是４．１％（６／１４５）、１２．４％（１８／１４５）和８３．４％（１２１／１４５）．两组卵裂发育率相近．本实验的显微操作对注射后卵的发育没有产生明显的伤害影响．     

昆明白小鼠1细胞胚胎体外培养系统的研究

研究发现在有或者没有磷酸盐的条件下,葡萄糖均抑制昆明白小鼠ｌ－４细胞期胚胎的体外发 育。在不含葡萄糖和磷酸盐的ＨＥＣＭ－ｌ中,桑椹率为４０．０５％（７４／１６８）,而对照Ｇ－ＨＥＣＭ－１仅为 ８．１４％（７／８６）;不含葡萄糖含有磷酸盐的ＣＺＢ中,桑椹率为６７．１１％（９３／１５２）,而对照ＴＡＬＰ仅 ６· ６７％（６／９０）。用不含葡萄糖而含有１． ０ｍｍｏ１／Ｌ谷氨酸肢和０． １１ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ的ＣＺＢ液,与兔输 卵管上皮单层培养细胞（ＲＯＥＣ）协同培养小鼠１细胞胚,７３．３３％（１１０／１５０）胚胎发育至桑椹胚, 但没有观察到囊胚形成、用上述ＣＺＨＲＯＥＣ系统培养小鼠１细胞胚４８小时（３－４细胞）,再移入 ＴＣＭ１９９＋１０％ＦＣＳ＋ＲＯＥＣ系统,有７６．７４％（６７／８６）胚胎发育至桑椹胚,９６／小时后,４０．７０％ （３５／８６）发育至囊胚。     

安徽虫瘟霉菌株的强毒杀蚜应与侵染速率

报道安徽虫瘟霉（Ｚｏｏｐｈｔｈｏｒａ ａｎｈｕｉｅｎｓｉｓ）菌株Ｆ９７０２８对桃蚜（Ｍｙｚｕｓ ｐｅｒｓｉｃａｅ）的强毒杀蚜活性。以７个孢子剂量（０．４￣１０．４个孢子／ｍｍ＾２）接种２￣３龄若蚜（５２￣８６头／剂量）,连续观察７ｄ,所获数据经时间－剂量－死亡率模型模拟分析,接种后第３￣７ｄ的ＬＤ５０分别为３４．８、８７、１．５、０．７和０．４个孢子／ｍｍ＾２;在所有剂量范围内ＬＴ５０为２．９￣６     

硫代反义寡核苷酸在细胞培养内抗甲型流感病毒活性

为了研究抗流感病毒特异性反义核酸药物,针对Ａ型流感病毒基因组３＇和５＇端保守序列,设计并合成了４条硫代寡核苷酸（ＯＤＮ）：３＇端反义ＯＤＮ（ＩＶ３＾＃）与３＇端正义ＯＤＮ（ＩＶ３Ｓ）,５＇端反义ＯＤＮ（ＩＶ４＾＃）与５＇端正交ＯＤＮ（ＩＶ４Ｓ）。以流感病毒血凝滴度和致细胞病变作用为指标,测定了ＯＤＮｓ在ＭＤＣＫ细胞中对Ａ型流感病毒Ａ／京防／８６－１（Ｈ１Ｎ１）复制的影响。结果表明,与流感病毒基因组     

两相分配法制备玉米根质膜及其纯度鉴定

用ＤｅｘｔｒａｎＴ５００,ＰＥＧ３３５０两相体系制备玉米根质膜．首先在高盐浓度（２２ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）下选用五种不同的聚合物浓度（５．８％、６．０％、６．２％、６．３％、６．４％,Ｗ／Ｗ）,研究了玉米根质膜在两相体系中的分配情况,在此基础上进一步研究了Ｎａ－Ｃｌ浓度（２、４、５、１１、２２ｍｍｏｌ／Ｌ）对玉米根质膜的纯度及得率的影响．结果表明,制备玉米根质膜选用６．２％（Ｗ／Ｗ）聚合物浓度,７．５ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的两相体系比较合适．标志酶鉴定及低ｐＨ值磷钨酸染色电镜检测均表明获得了高纯度密实的正向型的质膜囊泡,质膜标志酶ＶＯ３－４－ＡＴＰａｓｅ的活性潜势达８８．９％．     

11例重度内源性高甘油三酯血症患者脂蛋白脂酶基因的序列分析

对成都地区１１例重度内源性高甘油三酯血症（空腹１２～１４小时血浆ＴＧ＞７．６８ｍｍｏｌ／Ｌ）患者脂蛋白脂酶基因外显子１～９的序列进行了分析。结果发现,１１例患者中有４例其ＬＰＬ基因在外显子６,８及９具有３种杂合子变异。其中一种为Ｔｈｒ３６１－Ｔｈｒ（外显子８,Ｃ１３３８→Ａ）突变,为无义突变,尚未见报道,在７４例血脂正常的中国人中的发生频率为１１．４％。另外２种变异Ａｌａ２６１－Ｔｈｒ（外显子６,Ｇ１０３７→Ａ）及Ｓｅｒ４４７－Ｔｅｒ（外显子９,Ｃ１５９５→Ｇ）在７４例血脂正常中国人的频率分别为０％及１０．７％。未发现脂蛋白脂酶催化活性中心Ａｓｐ１５６－Ｈｉｓ２４１－Ｓｅｒ１３２（外显子４及５）的突变。     

PCR方法检测淋巴结组织中结核菌L型的研究

用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ），改良抗酸染色（ＩＫＳ）和结核菌抗体免疫组化染色（ＩＨＣ）三种方法检测６０例淋巴结组织中结核菌Ｌ型感染情况，以病理检查结果分为结核组（１３例），淋巴结非特异性炎症组（３０例）和淋巴结对照组（１７例）。各组三种方法检测阳性率分别为：ＰＣＲ８４．６％（１１／１３），６０％（１８／３０）．２３．５％（４／１７）．ｌＫＳ７６．３％（１０／１３），６６．７％（２０／３０）；１７．６％（３／１７）；ＩＨＣ８４．６％（１１／１３），６３．３％（１９／３０），１１．８％（２／１７）。三者均为阳性者为８０％。结果表明淋巴结非特异性炎症组感染率与结核组相似，与对照组间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。提示：结核菌Ｌ型可能是引起淋巴结非特异性炎症的致病因子之一，ＰＣＲ技术在淋巴结非特异性炎症的病原学诊断上具有重要价值。     

大鼠左室肌凝蛋白重链同功酶谱的增龄性变化

用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法分析了５—６０周龄的大鼠左心室肌凝蛋白重链同功酶（ｍｙｏｓｉｎｈｅａｖｙｃｈａｉｎｉｓｏｅｎｚｙｍｅｓ,ＭＩ）。结果表明：大鼠幼年期ＭＩ以高ＡＴＰ酶活性的Ｖ１形式存在（５周龄：Ｖ１＝９８．９２±１．４７％）,随着年龄增长,Ｖ２（１０周龄：３．５４±２．４２％）和Ｖ３（１５周龄６．３１±３．４８％）依次出现并逐步增加,到２８周时Ｖ１、Ｖ２、Ｖ３分别为６１．３６±１１．７１％、２０．１１±４．９８％和１３．５２±５．３２％,随后基本稳定于该水平;以Ｖ１／Ｖ３为指标分析各周龄组大鼠,可见Ｖ１／Ｖ３具有增龄性的下降趋势,但均以Ｖ１占优势（６０周：Ｖ１／Ｖ３＝３．８５±０．９５）;同功酶谱变化以及它与左室重量相关分析表明,同功酶谱增龄性变化主要发生在大鼠生命的早期,并且这种变化可能与左室重量的增长有关。     

葡萄叶绿体rbcL基因的结构分析

以玫瑰香葡萄（Ｖｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａ Ｌ．）为材料,克隆了含有叶绿体ｒｂｃ Ｌ基因的３．１ ｋｂ Ｂａｍ ＨⅠ片段,构建了该基因的限制性酶切图谱,测定了该基因的核苷酸序列。所测的核苷酸序列总长度为２００４ ｂｐ,其中基因的编码区为１４２８ ｂｐ,编码一个含４７５ 个氨基酸的蛋白质,其分子量约为５３ ｋＤ;测定基因的５上游含启动子的部分共３５８ ｂｐ,包括－ １０ 区（ＴＡＡＡＡＴ）、－ ３５区（ＴＴＧＣＧＣ）和ＳＤ 序列（ＧＧＡＧＧ）;基因的３下游区共２１８ ｂｐ,含有３ 个转录茎环终止结构。玫瑰香葡萄ｒｂｃ Ｌ基因编码区的核苷酸序列与烟草、矮牵牛、菠菜、苜蓿、水稻和玉米之间的同源性分别为９１．５％ 、９１．４％ 、９０．２％ 、８９．８％ 、８６．３％ 和８４．５％ ;推导出的氨基酸序列的同源性分别为９２．２％ 、９１．６％ 、９２．２％ 、９３．７％ 、９３．５％ 和９０．１％ 。     

性病后慢性前列腺炎病原微生物分析

本文对性病后慢性前列腺炎病原微生物进行了研究。９０例患者前列腺液支原体检出率为２４．４４％（２２／９０）,其中解脲支原体为２２．００％（１８／９０）,人型支原体为４．４４％（４／９０）。另一组２３２例患者进行前列腺液细菌培养鉴定,总检出率为４２．７％（９９／２３２）,以金黄色葡萄球菌为主２４．５％（５７／２３２）,其它菌依次为表皮葡萄球菌７．３％（１７／２３２）,肠球菌４．３％（１０／２３２）,非发酵菌２．６％（６／２３２）,肠杆菌科细菌２．２％（５／２３２）和Ａ群链球菌１．７％（４／２３２）。作者认为,性病后慢性前列腺炎可能为急性尿道炎期,由于治疗不彻底或忽略非特异性性病病原菌的治疗而使条件致病菌上行感染所致。     

广西龙虎山猕猴种群生态特征

１９８８～１９９５年,采用定点观察法和绝对计数与相对计数结合法对龙虎山猕猴种群生态作了调查研究。１９９０年核心区有猕猴１４群,５００只左右,猴群密度１．６群／ｋｍ２,种群密度５５．６只／ｋｍ２．猴群大小平均３３．８±２３．１（ｎ＝６）只。一般每隔４～５年分群一次,猴群群体年均增长率１４．８％,种群年均增长率为９．７％。猴群中成年猴性比为７．６±６．５（ｎ＝１２）,１～３岁组的性比为０．７４±０．６１（ｎ＝４）,群内未成年猴比例为６７．７±３．１％（ｎ＝１２）。发情交配期最早１１月１２日,最晚次年１月２０日,高峰期１２月上旬,持续３个月．产仔期最早４月１日,最晚８月１４日,高峰期５月上旬,持续时间４个半月．繁殖率４５．５％～１００％,平均７５．４±１３．２％（ｎ＝２１）。新生猴死亡率较低,新生猴性比（雌：雄）平均０．７４±０．３４（ｎ＝５）。     

化学修饰单克隆抗体模拟谷胱甘肽过氧化物酶

化学修饰具有底物谷胱甘肽（ＧＳＨ）结合部位的单克隆抗体（４Ａ４）使其结合部位上的丝氨酸（Ｓｅｒ）转变成谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）的催化基因硒代半胱氨酸（ＳｅＣｙｓ）因而产生高活力的含硒抗体酶（Ｓｅ－ａｂｚｙｍｅ）突变的４Ａ４（ｍ４Ａ４）的ＧＰＸ活力达到了天然酶活力的１９％并对ｍ４Ａ４的酶学性质和动力学性质进行了研究;硒代谷胱甘肽（ＧＳｅＨ）连到４Ａ４结合部位,其ＧＰＸ活力由３．８６Ｕ／μｍｏｌ提     

无花果蛋白酶在阴离子交换树脂上的固定化

无花果蛋白酶通过８％戊二醛活化载体,共价结合到聚苯乙烯阴离子交换树脂ＧＭ２０１上,固定化作用在ｐＨ７．７,酶浓度０．８ｍｇ／ｇ树脂,４℃下进行６ｈ。得到的固定化酶表观Ｋ_ｍ值（酪蛋白,１．１１×１０~（－４）ｍｏｌ／Ｌ）小于溶液酶Ｋ_ｍ值（１．９６×１０~（－４）ｍｏｌ／Ｌ）;固定化酶活性在ｐＨ６～８保持稳定,溶液酶最适ｐＨ为７．２;固定化酶最适温度由溶液酶的５０～６０℃移至３７℃;固定化酶２５℃保持７ｄ,重复水解酪蛋白７次后,保留８３．３％活性。固定化酶对酪蛋白水解度达４７．５％,对大豆球蛋白达１１．６％。     

山地麻晰繁殖生态的研究

１９９７年３月至１９９８年８月,在徐州市近郊的牛头山对山地麻晰的繁殖生态进行了研究。３～７月为繁殖期,其中４～５月为交配产卵盛期。雌雄性比为１１．６。从交配到产卵为２６天,卵白色、革质、椭圆形。长径平均为１．３７（１．２３～１．５３）ｃｍ,短径平均为０．８６（０．７～１．０６）ｃｍ,卵重平均为０．６（０．４～０．８５）ｇ,每窝平均产卵４．１（３～５）枚。孵化期为５０天。初孵出的小麻晰尾端为蓝绿色,     

海藻酸铝固定化酵母生产高浓度酒精的研究

以海藻酸铝凝胶代替海藻酸钙,可使固定化酵母使用寿命显著延长,其海藻酸铝凝胶耐磷酸盐能力比海藻酸钙凝胶提高六倍以上。用海藻酸铝固定化增殖酵母进行分批发酵酒精,成熟醪中酒精含量由３．５％－９．０％（Ｖ／Ｖ）提高到１１．０％（Ｖ／Ｖ）左右。在１．１Ｌ的两个多层生物反应器中,装入海藻酸铝固定化增殖酵母,采用逐步提高糖浓度方法,进行连续发酵,成熟醪接收器中酒精浓度平均为１０．３％（Ｖ／Ｖ）,总糖利用率为９２．４％。     

转人血清白蛋白基因试管牛的研究

构建了含人血清蛋白（ｈＡＬＢ）的基因的ｃＤＮＡ全,序列,内含子１以及山羊酷蛋白基因启动子和５＇端上游调控序列在内的的乳腺载体ｐｃＤＮＡ３．１－ＧＡＬＢｍ,并通过显微将导入经过体外受精（ＩＶＦ）的奶牛受精卵中,体外培养到桑棋胚后期,取出少许细胞,应用巢式ＰＣＲ对其进行目的基因整合及性别的预鉴定,将１０枚整合胚移植于８头受体母牛,结果有３头妊娠,受孕率为３７．５％（３／８）,其中２头于妊娠中期流产,另     

缢蛏碱性磷酸酶胍溶液中分子折叠与活力变化研究

报道了缢蛏碱性磷酸酶（简称ＡＬＰ）经不同浓度盐酸胍处理时酶的分子构象所发生的变化以及酶变化和失活的动力学过程。在胍中酶荧光发射峰强度下降,紫外差光谱在２４６ｎｍ和２８５ｎｍ处出现２个负峰,ＣＤ谱中酶的α螺旋度下降,且随浓度增大,变化程度也加大。动力学研究表明,酶在０．５ｍｏｌ／Ｌ、１．０ｍｏｌ／Ｌ、２．０ｍｏｌ／Ｌ３．０ｍｏｌ／Ｌ、４．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍中的变性速度常数分别为３．２１×１０~（－４）ｓ~（－１）、６．３８×１０~（－４）ｓ~（－１）、２．１７×１０~（－３）ｓ~（－１）、２．３３×１０~（－３）ｓ~９－１）、５．１７×１０~（－３）ｓ~（－１）;而酶在相应盐酸胍中的失活速度常数分别为２．３３×１０~（－４）ｓ~（－１）、３．５７×１０~（－４）ｓ~（－１）、５．８６×１０~（－４）ｓ~（－１）、１．１４×１０~（－３）ｓ~（－１）、３．４５×１０~（－３）ｓ~（－１）;表现为失活与构象伸展变化基本平行。     

5－羟色胺对大鼠下丘脑脑片弓状核神经元自发电活动的影响

在７４张大鼠下丘脑脑片上,用玻璃微电极记录到弓状核自发放电单位１７６个,其放电形式有三种：慢不规则型（１１９个,６７．６％）;快连续型（４６个,２６．１％）;位相型（１１个,６．３％）。５－ＨＴ（１０－６ｍｏｌ／Ｌ,３ｍｉｎ）对不同形式放电单位的作用均以抑制为主：对部分慢不规则单位（９／１１９）则表现为先抑制后兴奋的双相性反应,对少数神经元有兴奋作用。１２个被５－ＨＴ抑制的单位,其抑制作用不能被噻庚啶（ＣＨＤ,１０－５ｍｏｌ／Ｌ）阻断,４个被５－ＨＴ抑制的的单位中,其抑制作用可被二甲基麦角新碱（ＭＳＧ１０－６ｍｏｌ／Ｌ）部分或完全阻断。７个被５－ＨＴ抑制的单位,其中４个单位中,５－ＨＴ的抑制作用可被特异性５－ＨＴ１Ａ受体阻断剂Ｐｉｎｄｏｂｉｎｄ－５－ＨＴ１Ａ部分阻断;但另外３个单位的阻断效果不明显。上述结果表明：５－ＨＴ对弓状核不同形式放电单位的作用均以抑制为主,其作用可能是通过５－羟色胺（５－ＨＴ１）受体介导的,部分还可能是通过５－ＨＴ１Ａ受体介导的。     

高密度培养大肠杆菌YK537/pSBHL-11生产重组人细胞白介素

在 Ｂ． Ｂｒａｕｎ Ｅ Ｓ１０ 型１５ Ｌ 和 Ｎ Ｂ Ｓ Ｂｉｏ Ｆｌｏ ３０００ 型５ Ｌ 发酵罐中,利用补料分批培养技术高密度表达培养含重组质粒ｐ Ｓ Ｂ Ｈ Ｌ１１ 的大肠杆菌 Ｙ Ｋ５３７ ,生产重组人白细胞介素３（ Ｉ Ｌ３） ,发现在发酵过程中,限制性流加甘油,控制溶解氧在３０ ％ ～４０ ％ 左右、３０ ℃生长１１ｈ ,４２ ℃诱导培养４ｈ ,能将发酵液中最终菌体密度从 Ｏ Ｄ１６６００ 提高到 Ｏ Ｄ５３６００（ 相当于每升发酵液含１０６ 克湿菌体） ,并且保持了白细胞介素３ 的表达量,占菌体总蛋白的３０ ％ 左右,含量超过３３ ％ ｇ／ Ｌ,使 Ｉ Ｌ３ 包涵体产量从湿重２２ｇ／ Ｌ 提高到８５ ｇ／ Ｌ,纯化步骤比较简单,超声破菌后经两次洗涤纯度就达到７０ ％ 以上。     

5—HT对大鼠新鲜分离DRG神经元GABA激活电流的调制作用

本实验在新鲜分离的大鼠背根神经节（ＤＲＧ）细胞上应用全细胞膜片钳技术,观察５－ＨＴ对ＧＡＢＡ激活电流的调制作用。结果发现,绝大多数细胞（４９／５４）对ＧＡＢＡ（１０－８～１０－３ｍｏｌ／Ｌ）产生浓度依赖性的内向电流,并有明显的去敏感现象。在多数细胞预加５－ＨＴ（１０－７～１０－４ｍｏｌ／Ｌ）,ＧＡＢＡ激活电流受到明显抑制,抑制率分别为３．０％,１３．５％,１９．７％,２４．７％,５９．１％。５－ＨＴ（１０－７～１０－４ｍｏｌ／Ｌ）本身在部分细胞（２４／４０）可引起浓度依赖性的内向电流,部分细胞（１２／４０）未检测到膜电流,少数细胞（４／４０）可引起微弱的外向电流。此结果提示５－ＨＴ可能作用于初级传入终末,抑制ＧＡＢＡ引起的初级传入去极化从而调节ＧＡＢＡ的突触前抑制效应