9月在欧美销售诊断衣原体属用PCR药盒

瑞士Hoffmann-La Roche 公司从9月开始在欧洲、美国销售使用聚合酶链反应法(PCR 法)的检查衣原体属用的DNA 探针诊断药盒。使用PCR 法的DNA 诊断药盒的开发为世界首创。DNA 诊断药已到新阶段。估计在日本93年下半年以后销售。DNA 探针诊断药包括在日本销售的东雷、中外制药公司等的产品;即使不扩增也能检测出基因本身     

支原体DNA探针诊断药

中外制药公司5月10日获准引进以美国Gen-Probe公司制造的支原体为对象的放射性(~(125)I标记)DNA探针诊断药.肺炎支原体DNA探针".这是继东的人乳头瘤病毒(HPV)、的乙型肝炎病毒的检查药之后被批准引进的第三种诊断试剂.预计作为体外诊断药9月份开始销售.     

EPO的市场

中外制药公司1月21日开始在南朝鲜销售重组促红细胞生成素(EPO).同日由台湾批准在台湾销售.打算年内也在新加坡、香港等地销售,然后扩大到菲律宾、澳大利亚和新西兰.在美国与美国Upjhon公司联合设立的Chugai Upjhon公司正在申请生产此药.该公司比美国先行一步,在亚洲扩大了实用化.EPO已成为中外制药在世界战略的尖兵. 在南朝鲜销售重组EPO的是南朝鲜中外公司.该公司在战前就与中外制药有关系,但是现在没有资本关系.另外,在台湾,是由中外制药的销售事务所直接销售.EPO都是在日本     

日本宝酒造委托以色列Orgenics公司研制用于检测混入医药品中的核酸的 DNA探针

日本宝酒造(宝酿酒公司)委托以色列的 Orgenics 公司研制检测混入医药品中的 DNA的 DNA 探针。这种探针将用于检验药盒,以检测由基因重组所制造的医药品中是否混入了DNA。美国有规定,对由基因重组所制造的医药品须标明其中不含有多余的成分,他们利用DNA 探针检测混入的 DNA。但是,日本现在还没有这种规定,也还没有用干检测的制品。今后日本也将扩大研制基因重组的医药品,也将需要有检测 DNA 的检查。     

10月开始HCV检测用DNA探针诊断药的临床试验

第一化学药品公司从10月开始与美国 Chiron 公司共同开发的丙型肝炎病毒(HCV)检测用 DNA 探针诊断药的临床试验。HCV 检测 DNA 探针诊断药进入临床试验还是首次。进入临床的 DNA 探针诊断药采用 Chiron 公司和第一化学药品公司开发的分歧 DNA 技术。这种技术     

Hoechst公司改变兼并计划

西德Hoechst公司上个月撤回收买美国Gene-Tvak Systems公司(马萨诸塞州)的计划.中止收买的理由还不清楚.Gen-Trak公司是开发制造DNA探针诊断药的厂家.1988年销售额为2580万美元,纯利润70万美元.主要开发检查食品中沙门氏菌的DNA探针等.正在研究用Qβ复制酶的RNA扩增反应,目标是开发基因诊断系统.在     

检测HBV用的DNA探针诊断药

公司3月份获准引进美国Abbott Laboratories公司的乙型肝炎病毒诊断药(HBV).作为体外诊断药从7月初开始销售.商品名为"HBV-DNA,价格(药盒用25次)14万日元.保健药价没有收录.该诊断药已在欧洲的部分地区销售.在美国,食品与药物管理局还没有批准其销售.DNA探针的批准和销售是继东的人乳头     

探针合成:生物技术和化学技术竞争

同许多具有商业潜力的生物工学技术一样,DNA探针已被发展成为分子生物学基础研究的工具。科学家设计了简单的、可重现的、用纯化的生物酶合成探针的方法,起初用放射性标记,稍后改用非同位素示踪物。但用这些技术只能生产较少量的探针,几毫克/100毫升。Enzo公司的D.Engelhart指出,大多数DNA探针分析只用10~(-7)克;用100毫升反应所产的探针,足可作1万次分析。他说,公司计划用生物合成技术来生产第一代产品,该公司正在研究其它大规模生产用的技术。     

综合遗传学公司推出食品沙门氏菌快速诊断试验盒

综合遗传学(Integrated Genetics)公司最近推出它的第一个产品--检出食品沙门氏菌用的快速诊断试验盒。它被称为GENE-TRAK,是以DNA杂交技术为基础的。目前只能用于沙门氏菌的检出。该公司的科学家已分离出DNA探针,含有与沙门氏菌DNA互补的碱基序列模式。分离出可能存在于食品样品中的任何微生物的DNA链后,将沙门氏菌DNA探针加入样品中,若探针与存在于样品中的DNA单链杂交,则表明其中有沙门氏菌存在。     

G-CSF的新用途

中外制药公司用动物实验证明,用该公司研制的重组粒细胞集落刺激因子(G-CSF),能减轻在治疗艾滋病时服用AZT引起的白血球减少症,在札幌召开的日本癌学会上发表了这一结果.粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对白细胞数的恢复效果使开辟G-CSF的新用途更有希望.进一步的临床试验已在日本开始.7月18     

引进新骨形成标记PICP的检查药已获得批准

中外制药公司6月17日获得引进新的骨形成标记Ⅰ型骨胶原C末端肽(PICP)检查药的许可,PICP比其他骨代谢标记在检体中的稳定性好,可能是易使用的骨代谢诊断药。据中外制药公司说价格,销售日期未定。     

从小鼠胎儿基因文库中筛选分离免疫球蛋白重链C_ε基因

本文阐述了以缺口翻译制备的pIge DNA为探针(4.4×10~6cpm/μg DNA),用吸印法从小鼠胎儿基因文库中筛选分离出免疫球蛋白重链C_ε基因克隆。同时,从扩大培养的噬菌体中提取出DNA,并用EcoRI酶消化,0.7％琼脂糖凝胶平板电泳分离,分离的DNA片段转移至硝酸纤维素滤膜上,以pIgs DNA探针杂交,进而确证有两条阳性带,为免疫球蛋白重链C_s基因。电泳法测定其大小分别约为3.5 kb和3.0 kb。也显示出在小鼠胎儿中的未分化型免疫球蛋白重链C_g基因内有一个限制性内切酶Eco RI位点。     

体克变的可能原因:DNA甲基化变异

最近的一些文章提出了植物组织培养诱发变异(体细胞克隆变异)的可能机理。Minnesota大学的科学家S.M.Kaepplar和R.L.Phillips提出了DNA甲基化作用中的变异可能是体克变的主要原因的假说,他们描述了支持这一假说的实验。 Kaeppler和Phillips用DNA探针研究了从玉米纯系组培物产生的R0植株自交产生的R1种子长成的21个子系。其中8种探针可以检测DNA甲基化作用的增减。这些探针的检测结果显示,39%的家系DNA甲基化程度降低,没有检出甲基化增加的情况。另外12个只能检测甲基化增加的探针则显示甲基化作用没     

日本首次销售食品检验用的DNA探针

(氮)公司最近在日本正式销售食品检验用DNA探针检查药盒.产品是从美国Gene Track Systems公司引进的.三种药盒分别用于检查沙门氏菌、李斯特氏菌和大肠杆菌.还打算在年内销售金黄色葡萄球菌,其后销售??的检查药,检查药盒的销售价格还不明确,但据说比酶免疫测定法(ELISA)的价格高5倍.用集落培养确     

正在开发猪呼吸器官病诊断药盒

日本制粉公司与全农共同开发猪慢性呼吸器官病的DNA探针诊断药,打算今年进入治疗试验。如果产品化,使用DNA探针的动物用诊断药将是首创产品。利用邻近夹层杂交法(AHM)检测病原菌的核酶RNA(rRNA)的诊断药仅用碱中和处理菌液,不需要进行特别处理,在2～3小时就能检测出10~4～10~5菌。特异性高,容易识别。     

黄地老虎颗粒体病毒DNA片段在枯草芽孢杆菌中的克隆

EcoRI酶解的AsGV-XJ DNA和质粒pUB 110 DNA,经T4 DNA连接酶连接后,转化枯草芽孢杆菌BR 151感受态细胞,涂布在加有新霉素(5,ug／ml)的完全培养基上。用琼脂糖凝胶电泳快速法检测抗新霉素转化子中的重组质粒。在388个转化子中得到12个较PuB110 DNA分子量大的重组质粒。所有重组质粒均可与”PdcTP标记的Fco RI酶解AsGV—XJDNA片段的探针进行分子杂交。通过琼脂糖凝胶电泳对重组质粒中插入AsGV一XJ DNA 片段进行了测定。     

PCR 扩增人型结核杆菌 DNA 及结核杆菌属 DNA 探针的制备

用多聚酶链反应(PCR)方法扩增人型、牛型结核杆菌基因组 DNA,获得特异的158 bpDNA 片段,而从另外十三种分枝杆菌未见到特异的扩增产物.回收158 bpDNA 片段作探针,它除与人型、牛型结核杆菌有特异的杂交信号外,与金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌及一些分枝杆菌皆没有杂交反应.结果表明,PCR 可用于检测结核杆菌基因组 DNA,扩增产物158 bp DNA 片段可作为探针用于检测人型、牛型结核杆菌并鉴别结核杆菌与其它分枝杆菌.     

地高辛标记DNA探针杂交法检测Vero细胞DNA残留量的适用性验证及应用

目的对地高辛标记DNA探针杂交法检测人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留量进行适用性验证及应用。方法对地高辛标记DNA探针杂交法检测人用狂犬病疫苗(Vero细胞)DNA残留量进行特异性、灵敏度及稳定性验证,并应用该方法检测3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的DNA残留量。结果地高辛标记探针的标记效率为0.1 pg。验证结果显示探针与非同源DNA无杂交;最低检测限度为1 pg;探针在-20℃放置7个月后,检测灵敏度仍可达到1 pg;3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)中残留DNA含量均符合《中国药典》规定质量控制标准。结论地高辛标记DNA探针杂交法特异性、灵敏度好,结果稳定,适用于人用狂犬病疫苗(Vero细胞)中Vero细胞DNA残留量的检测及疫苗生产过程和其成品的质量控制,对其他以Vero细胞为基质的病毒性疫苗质量控制具有借鉴意义。     

~(125)Ⅱ标记病毒DNA探针制备方法的研究

本文报道以油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)DNA、单纯疤疹病毒(HSV)DNA、λDNA为材料,用国产~(125)I-碘化钠制备探针。探讨了离子强度,pH值、反应温度及时间诸因素对以三氯化铊为氧化剂核酸标记的影响。在pH值为4.8—4.9,离子强度(以Na~ 计)为0.1mol/L、反应温度为70℃、时间为30分钟条件下,可获得高比活性的产物。~(125)I的掺入率在10—30％之间,探针的比活性可超过10~6cpm/μgDNA。点杂交结果显示,探针最低可检测出1Pg同源DNA,探针的特异性强,存放于-20％冰箱的探针在两个月内最低检测量没有明显变化。     

化学发光法检测体外HBV复制

目的:建立化学发光法检测体外HBV复制水平的方法,研究其灵敏度和稳定性.方法:用HBV DNA重组质粒pCH9转染到人肝癌细胞株HepG2和Huh7中,5d后收集细胞并抽提其HBV复制中问体DNA,转印后以地高辛标记HBV DNA为探针进行杂交,用化学发光法检测杂交结果,同时进行探针灵敏度的检测.结果:转染后HepG2和Huh7细胞提取HBV DNA中检测出较强的复制中间体的信号,分别为松散环状DNA(rcDNA),双链线性DNA(dslDNA),单链DNA(ssDNA),探针检测的灵敏度可达到lpg,接近同位素法检测的灵敏度.整个实验重复3次获得同样结果.结论:成功建立了稳定的化学发光法检测体外HBV复制水平的方法.