壳聚糖固定化纤维素酶的研究

以蟹壳为原料提取壳聚糖,用戊二醛作交联剂,将纤维素酶固定于壳聚糖上．同时探讨了一定量干壳聚糖载体与交联剂浓度、给酶量等关系的最适固定化酶条件,并对固定化酶的热稳定性、操作稳定性、米氏常数、最适温度、离子强度的影响及使用半衰期等理化性质进行了探讨．     

绿色木霉粗纤维素酶液水解壳聚糖的研究

利用自制绿色木霉粗纤维素酶液降解壳聚糖制备低聚壳聚糖.采用粘度法、乙酰丙酮法和还原糖浓度分析,研究了温度、pH值及反应时间等因素对壳聚糖水解程度和产物相对分子质量的影响,并采用质谱法对水解产物进行定性分析.结果表明,粗纤维素酶液水解壳聚糖作用的最适pH为5.0、最适反应温度为50 ℃、最适反应时间为12 h.粗纤维素酶...     

培养液中纤维素酶的分离纯化

目的:为了研究纤维素酶的特性,使之利用纤维素从而促进纤维素资源化,减少环境污染,该文选用作者实验室筛选出的菌株K7-2培养产生纤维素酶,进行了纤维素酶的分离纯化。方法:将菌株K7-2在30℃、150r/min摇床培养3d,于5 000r/min离心30min,取上清液即为粗酶液,经硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤层析、DEAE-Sephadex A-25离子交换层析方法进行分离纯化。结果:分离纯化后的酶活是0.0904U/ml,比活力提高4.1120倍。结论:这为进一步研究此纤维素酶的组份、结构和理化特性奠定了基础。     

用黑曲霉发酵纤维素酶解液生产柠檬酸的研究

以麦草纤维素酶解液为原料,用黑曲霉发酵制备柠檬酸,研究了培养基组成、恒温发酵和周期变温发酵对柠檬酸发酵的影响,结果表明,适宜的培养基组成为NH4NO3 0.3%,KH2PO4 0.1%,Mg2+300×10-6,Fe2+10×10-6,此时,柠檬酸产量为10.52g/L,糖转化率为60.80%.研究还表明,添加低级醇如甲醇和乙醇有利于产酸,但添加甲醇的效果要好于添加乙醇的效果,适宜的甲醇量为2%.在恒温发酵过程中,0～8h为孢子萌发期,产酸较慢;8～24h为对数生长期,产酸增加;24h之后为菌体生长恒定期,但产酸继续增加;104h之后产酸降低.在周期变温发酵过程中,0～8h产酸较慢,8h之后产酸增加.通过对二者的比较可知,在0～16h,周期变温发酵的产酸量要高于恒温发酵的产酸量,但在16h之后,周期变温发酵的产酸量要低于恒温发酵的产酸量.     

高活性壳聚糖的制备及特性

壳聚糖经100kGy60Coγ-射线辐射处理后,在0.01g/L的浓度下,对金黄色葡萄球菌生长抑制作用增强100倍.辐照剂量增加或减少,壳聚糖的抑菌活性均随之大幅降低.经辐射处理后形成的壳聚糖片段分子量小于10万,对金黄色葡萄球菌无明显抑制作用.     

壳聚糖固定化半纤维素酶的研究

从青霉菌m8提取出半纤维素酶,将其固定在用戊二醛交联的壳聚糖载体上.0.5 g壳聚糖与4%的戊二醛结合固定2.5 mg蛋白质,酶活回收率为45.6%. 原酶的最适pH为4.6,固定化酶为pH 3.6.原酶的最适温度为55℃,固定化酶在60～75℃都具有较高活性.固定化酶的耐热性优于原酶. 以半纤维素为底物,固定化酶的表观K_m值略低于原酶,前者为5.0×10^－2 g/L,后者为3.58×10^－2 g/L.     

纤维素酶与木质纤维素生物降解转化的研究进展

利用纤维素酶将预处理后的秸秆降解成可发酵性单糖,然后发酵生产所需的液体燃料及化工产品的技术,对于我国解决能源、环境、人口就业等难题有着巨大的积极影响。在木质纤维素生物降解转化工艺中,减少纤维素酶用量及提高酶解效率是降低木质纤维素降解成本的关键。纤维素酶系和木质纤维素酶水解技术的改进需要深入了解纤维素酶系统的组成及其协同作用、纤维素酶的结构与功能以及纤维素酶的生产技术。将就以上几个方面的研究进展进行讨论,并深入探讨了纤维素酶糖化能力的评价方法。     

解糖热解纤维素菌F32降解未预处理秸秆及产纤维素酶特性分析

【目的】明确极端嗜热厌氧木质纤维素降解菌解糖热解纤维素菌F32代谢特征,并分析其产酶特性。【方法】使用细胞计数法绘制菌株的生长曲线,使用离子色谱及气相色谱进行产物和残糖量分析,以DNS法及对硝基苯酚法检测菌株胞外蛋白的酶活性。【结果】解糖热解纤维素菌F32在以葡萄糖、微晶纤维素和未经预处理小麦秸秆为碳源时生长状况优于解糖热解纤维素菌DSM 8903。在以葡萄糖为碳源进行培养时,与菌株DSM 8903相比,菌株F32具有产乳酸较多,而产氢气较少的特点。在以微晶纤维素和未经预处理小麦秸秆为碳源进行培养时,与菌株DSM 8903相比,菌株F32胞外蛋白具有较高的内切纤维素酶活性和木聚糖酶活性。【结论】解糖热解纤维素菌F32表现出较强的木质纤维素降解能力,其与DSM 8903的产物组成及胞外蛋白的酶活性具有明显差异。     

纤维素酶酶解稻壳的条件试验

本文报道康氏木霉Ｎ_２－７８（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｋｏｎｉｎｇｉ）纤维素酶产生和酶解稻壳的适宜条件。实验结果表明,在稻草粉麸皮固体培养基上,纤维素酶产生的适宜条件为稻草粉和麸皮的比例为７：３,培养基含水量为２５０％,ｐＨ为６．０—６．５,温度为３０℃,时间为３ｄ。酶解稻壳的最适条件为：ｐＨ为４．４,温度为４０℃,作用时间为３ｄ,酶曲量和底物量比例为１：３。     

高活性纤维素酶菌株的筛选及其产酶条件的研究

高活性纤维素酶菌株的筛选及其产酶条件的研究郑佐兴,段明星,徐文联,姚瑞林（清华大学生物科学与技术系北京１０００８４）纤维素酶在自然界碳素循环,尤其生物降解（７）过程中起着关键作用。纤维素在工业上也具有广阔的应用前景,如利用纤维素为基质生产葡萄糖、有机...     

正交设计法研究壳聚糖降解液的制备工艺

选择反应温度、反应时间、双氧水重量百分浓度3个影响因素,采用对真菌的抑制效果为评价指标,对壳聚糖降解液制备工艺进行了研究。试验结果表明,以60℃、4 h、双氧水重量百分浓度10%为最佳工艺条件。     

Cellulase production by Rhizobium

Summary The production of cellulase byRhizobium species was studied.Rhizobium trifolii cellulase was induced by a variety of polysaccharides, including celluloses and hemicelluloses. Cellobiose and myo-inositol also allowed enzyme expression but mannitol prevented it at concentrations higher than 0.25%. Both soluble and insoluble plant root substances moderately stimulated cellulase production byRhizobium trifolii.Most substances tested did not induce the production of cellulases by the slow-growing, cowpea type rhizobia strain CIAT 79. Effective inducers were carboxymethylcellulose, gluconate and myo-inositol.Cellulase production was very low under all conditions tested. In most cases the enzyme activity was loosely bound to the capsular material. The enzyme in fast-growers is an 1,4--D-glucan-4-glucanohydrolase (endo-glucanase EC 3.2.1.4) with specificity for high molecular weight polysaccharides.There was no correlation between infectiveness ofRhizobium trifolii strains and cellulase production. One strain, which lacks the nodulation plasmid, produced cellulase at the same rate as its parental infective strain.     

瘤胃微生物对纤维素的降解及其应用

瘤胃微生物主要包括细菌、真菌和原生动物。其中,瘤胃细菌和瘤胃真菌能分泌纤维素酶,对纤维素有较强的降解能力,主要介绍了瘤胃微生物对纤维素的降解作用及其广阔的应用前景。     

用玉米粉生产纤维素酶的发酵工艺探讨

本文报导了玉米粉为发酵原料，不用其他天然纤维素或改性纤维素生产纤维素酶的研究。30％的玉米粉以0．32－0．4％的HCl在125℃～128℃水解缩合反应2h后，稀释5倍作为纤维素酶发酵炭源，在三角烧瓶中进行二级发酵，取得滤纸酶活每毫升7个以上国际单位，配合其他因素，最高可达20个以上国际单位。     

高活力纤维素酶菌株康氏木霉B—7的选育与产酶条件的研究

野生型康氏木霉８５４－Ｂ＿２分别经物理化学诱变因子,ＴＤＰ辐射器和空间微重力辐射等因素的多级处理,得到１株形态发生明显改变的变异株Ｂ—７,其固体培养物的纤维素酶各组分酶活力,如滤纸糖酶活力（ＦＰＡ）为３４ｕ／ｇ,羧甲基纤维素酶活力（ＣＭＣ—ａｓｅ）为２９．０ｕ／ｇ,β－葡萄糖苷酶活力（β－Ｇｌａｓｅ）为２９．０ｕ／ｇ,与８５４－β２相比,分别提高５．９倍,７．６倍和４．２倍。其固体培养的最佳条件是：ｐＨ６．０,２８～３０℃,９６小时,最适培养基成分为：青草粉：麸皮＝７：３,１．５～２．０倍水和（ＮＨ４）２ＳＯ４１．５～２．０％（均以固体料计）。     

雷公根叶斑病菌SJTU59纤维素酶液的性质研究及纤维素酶基因保守区域的分析

将雷公根叶斑病菌SJTU59(Leptosphaerulina chartarum SJTU59)于玉米秸秆粉为唯一碳源的培养液中诱导培养,通过DNS(3,5-二硝基水杨酸)法检测,首次发现其可以产生纤维素酶。该纤维素酶液最佳反应温度为50℃,最佳反应pH为4.8,对低温,酸碱及部分金属离子具有一定的耐受能力。在50℃,pH 4.8条件下,其最大酶活力为6.383±0.196 U/ml。利用纤维素酶基因简并引物,通过PCR技术扩增得到了2个新的纤维素酶基因的保守区域,即glu-l1(1 512 bp)和glu-l2(429 bp)。通过氨基酸序列比对及系统进化分析发现,glu-l1编码的氨基酸序列GLU-L1与Thermoascus aurantiacus var.levisporus来源的β-1,4-葡聚糖酶(ABX79553)有62%的同源性,属于第3水解家族;glu-l2编码的氨基酸序列GLU-L2与Aspergillus fumigatus Af293来源的内切-β-1,3(4)-葡聚糖酶(XP_755769)有49%的同源性,属于第16水解家族。     

里氏木霉液体发酵产纤维素酶的研究

在摇瓶试验基础上,采用里氏木霉(Trichoderma reesei)HC-415菌株进行5L自控罐产纤维素酶深层发酵试验。在通气量为 0.2—0.6vvm、搅拌速度为 400r/min、发酵液pH控制在5.8—6.1的条件下,发酵液的羧甲基纤维素(CMC)酶酶活最高为325.0mg糖/ml,滤纸糖酶(FPA)酶活最高达17.9mg糖/ml。发酵周期为108h。所得冻干纤维素酶粉CMC酶活最高3111IU/g,FPA最高135IU/g ,对发酵液得率平均6.7g/L。酶活总收率CMC酶活平均78.2％,FPA酶活平均73.5％。     

黑曲霉纤维素酶高产固态培养基的快速优选研究

研究采用正交设计,对影响黑曲霉 Ｆ_２７产纤维素酶的 １０个营养因素在较少水平下进行初选,从中选出对产酶影响显著的４个因素．在此基础上采用均匀设计,在较多水平下进行较少次数的试验,将试验结果用微机逐步回归处理,得到最优回归方程,由回归方程计算出预测极值点和预测极值、优化出高产纤维素酶固态培养基配方．经试验验证,试验实测值和预测值基本相符, ＣＭＣａｓｅ活力平均达 ３７０５Ｕ／ｇ, ＦＰＡ活力平均达 ７．４Ｕ／ｇ．表明对于多因子试验,应用正交设计结合均匀设计的试验方法是快速、简便、可行的．     

Cellulase stimulation during biodegradation of lignocellulosic residues at increased biomass loading

Microbial degradation of lignocellulosic biomass is primarily affected by the composition and structure of biomass, as well as enzyme activities that are influenced by the presence of in-process degradation products. This study focuses on the latter, and demonstrates that cellulase activity of Neurospora discreta is stimulated in the presence of in-process soluble lignin degradation products. Two types of biomass - cocopeat and sugarcane bagasse, with contrasting lignin content and cellulose structure were tested at two biomass loadings each. At the higher biomass loading, cocopeat showed the highest amount of hydrolyzed cellulose and cellulase activity, despite its low cellulose content and recalcitrant cellulose structure. A strong positive correlation was revealed between the amount of in-process degraded lignin and cellulase activity, indicating a stimulatory effect on cellulase, which contradicts most previous literature. Furthermore, the causal relationship between the amount of degraded lignin and cellulase activity was established in a model system of commercial cellulase and standard soluble lignin. This work could pave the way for using biomass loading as a process lever to enhance cellulose hydrolysis in microbial conversion of lignocellulosic biomass.