流感新型黏膜疫苗的研究

目的评价PorA、PorB和Class4对流感裂解疫苗的免疫增强作用,从中挑选出最有效的流感黏膜佐剂,为发展流感黏膜疫苗提供理论基础。方法流感三价裂解抗原按比例与PorA、PorB和Class4非共价结合,滴鼻免疫Balb／c小鼠3次,采取间接ELISA检测血清特异性IgG抗体及抗体亚型,检测鼻咽、肺、小肠和阴道冲洗液中IgA效价,采用血凝抑制试验检测血清中HAI效价。结果PorB重组蛋白佐剂组较无佐剂的流感裂解抗原组在提高小鼠早期免疫应答的同时诱导较强的系统免疫应答和黏膜免疫应答;PorA组也有黏膜佐剂的功能,但和无佐剂的流感裂解抗原组相比,差异无统计学意义。结论在蛋白体的三分子中,以PorB为佐剂的流感黏膜疫苗不仅提高了抗原的系统免疫应答,而且诱导了较强的小鼠呼吸道、生殖道的局部黏膜免疫应答,为流感黏膜疫苗的研制奠定了理论基础。     

HEVAg-PLGA纳米颗粒疫苗小鼠体内免疫学研究

研究重组戊型肝炎抗原(HEVAg)-乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA)纳米颗粒抗原能否在动物体内诱导产生免疫应答。制备HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原后,通过皮下、滴鼻、口服途径接种Balb/c小鼠,每隔4周加强免疫两次,HEVAg与铝盐佐剂(铝佐剂疫苗Al_2O_3-Ag)为对照组,一定时间内检测抗体及细胞因子的应答水平。结果HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原在小鼠体内诱导产生有效的体液免疫、细胞免疫。滴鼻、口服途径黏膜系统中诱导产生较高滴度的IgA抗体,ELISPOT结果显示鼻腔、唾液腺中IgA ASCs数量显著增加;皮下途径诱导产生较高滴度的IgG抗体;常规铝佐剂疫苗相比于HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原诱导较强的IgG抗体水平,未诱导产生黏膜免疫应答;HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原诱导产生较强细胞免疫应答,皮下接种途径IFN-γ、IL-4生成细胞数量显著高于其它免疫组。与铝佐剂疫苗相比,HEVAg-PLGA纳米颗粒抗原能有效诱导产生系统免疫及黏膜免疫应答,显示HEVAg-PLGA有潜力成为备选HEV黏膜疫苗抗原,同时展示PLGA颗粒作为黏膜系统抗原递送载体及黏膜佐剂的优越性。     

黏膜免疫佐剂的研究进展

佐剂对于增强疫苗的免疫效果以及改变免疫应答类型发挥着非常重要的作用。然而,在人用疫苗中可使用的佐剂数量有限,尤其是有效的黏膜免疫佐剂缺乏。黏膜免疫佐剂能有效提高抗原的免疫原性,减少抗原用量或免疫接种次数,促进抗原提呈细胞的提呈作用,从而增强特异性免疫应答;但黏膜免疫佐剂安全性、有效性、免疫效力仍未达到理想的效果,需进一步深入研究。就目前常用的几种黏膜免疫佐剂的研究进展作一综述。     

靶向M细胞的抗原递送¾¾增强黏膜免疫应答的关键策略

黏膜是阻止病原入侵的第一道防线,黏膜免疫系统在抵抗感染方面起着至关重要的作用。通过黏膜途径接种疫苗可以同时诱导黏膜和全身免疫反应,因此,理论上针对黏膜的免疫策略是最合理和有效的。但黏膜免疫系统的复杂性和屏障作用造成抗原诱导的免疫应答水平低下,制约了黏膜疫苗的发展。M细胞(Microfoldcells)是黏膜免疫系统所独有的,其具有捕获腔内抗原和启动抗原特异性免疫应答的功能。M细胞摄取抗原的多少直接关系到黏膜疫苗的免疫效力,而利用M细胞配体可将抗原靶向递呈给M细胞,从而实现高效的黏膜免疫应答。靶向M细胞的抗原递送策略及其应用可以提高黏膜免疫应答水平,促进黏膜疫苗的研制。尽管如此,要成功研制安全高效的黏膜疫苗,今后依然有漫长的路要走,这可能有赖于进一步探究M细胞的特性和功能及黏膜免疫机制。     

疫苗输送系统研究进展

随着疫苗学的发展,疫苗配方出现改进,疫苗内除含有抗原与佐剂成份外,还有输送系统.疫苗输送系统对于蛋白亚单位、核酸等疫苗的作用尤为重要,其除具有与其它佐剂一样能增强免疫应答外,可以较长时间内刺激动物免疫系统,减少免疫次数,从而降低费用.疫苗输送系统对开发防控人类和动物疫病的新型疫苗具有重要的理论与现实意义.笔者就近年来疫苗输送系统的研究进展做一综述.     

肝脏固有免疫系统对肠源性感染的免疫应答与免疫耐受机制

肝特殊的解剖结构及生理特征使其成为暴露肠源性抗原的主要器官。由于肝具有独特的固有免疫系统,在正常情况下,肝分布多种致耐受的抗原提呈细胞,对持续性表达或递呈于肝的肠源性抗原物质,诱发针对该抗原的系统性免疫耐受,避免肝受到不必要的免疫损伤。当炎症发生及肝脏固有免疫系统活化时,则通过免疫效应细胞及免疫效应因子对肠源性病原体发挥强烈地免疫应答以控制感染。该过程形成机制的研究对肝功能的理解及肝性疾病的预防与治疗至关重要。本文就肝固有免疫系统对肠源性感染的免疫应答与免疫耐受形成机制作一综述。     

树突状细胞与肠道免疫

肠道黏膜免疫系统是肠道防御细菌和病毒感染的第一道防线,在维持肠道黏膜自稳方面发挥着重要的作用。肠道黏膜免疫系统持续不断的与来自外界的食物抗原和病原微生物及自身长期共存的肠道菌群相互作用,刺激机体对有害抗原产生免疫应答反应,诱导机体对无害抗原产生免疫耐受。树突状细胞（Dendritic cells,DCs）是目前已知的最强有力的一种专职抗原递呈细胞（Professional antigen presenting cells,APC）,     

快速制备抗原／佐剂乳剂的涡旋振荡法

对于激发免疫系统并使之产生高滴度抗体而言，必须使抗原的释放持续一段时间，油包水乳剂中的佐剂的应用已经成为延长抗原暴露时间以期增强免疫应答的有效手段。制备这种乳剂的常规方法是在2个注射器中将材料反复混合，这种方法费力且不可靠。作采用了一种通用的涡旋振荡方法制备油包水抗原／佐剂乳剂，     

ISCOM的研究进展

ISCOM(免疫刺激复合物)是当今研究较多的一种抗原佐剂复合物。ISCOM不仅是疫苗抗原的呈递者,且由于含有佐剂成分,可呈递免疫刺激。所以,ISCOM可刺激产生较强烈而持久的免疫应答。 ISCOM除用于非经口免疫外,也可用于粘膜免疫。 现已广泛进行ISCOM作为预防各种细菌、病毒和寄生虫感染的疫苗的研究。经试验的所有抗原在ISCOM中的免疫原性均提高。     

负免疫应答

负免疫应答是指生物个体的免疫系统对抗原刺激不产生免疫应答或仅产生不易察见的免疫应答,包括免疫耐受、免疫麻痹、免疫缺陷、免疫抑制四种状况。有的学者把免疫麻痹列入免疫耐受,把免疫抑制列入继发性免疫缺陷。(一)免疫耐受是指机体免疫系统接触某一抗原后形成的特异性负免疫应答。机体对这一抗原不能产生     

CpG特征结构与树突状细胞

近年来的研究表明 :ＣｐＧ特征结构是脊椎动物免疫系统识别微生物ＤＮＡ并产生针对抗原的保护性免疫反应的主要机制 ,它在体内及体外均能诱导以Ｔｈ1细胞为主的高水平、高特异性的细胞免疫应答 ;是质粒ＤＮＡ疫苗及裸ＤＮＡ疫苗诱导机体免疫应答的原因之一 ,在临床实验中ＣｐＧ ＯＤＮ已被用作抗原疫苗、ＤＮＡ疫苗治疗肿瘤、变态反应性疾病的强有力佐剂。ＣｐＧ特征结构能够诱导机体产生以Ｔｈ1细胞为主的细胞免疫应答是因为它能够作用于Ｔ细胞、Ｂ细胞、ＮＫ细胞、巨噬细胞及树突状细胞等免疫细胞。树突状细胞是机体最主要的专职抗原呈递…     

可溶性和颗粒性抗原在中枢淋巴系统运输的动力学和铝佐剂对它的调节

<正>铝佐剂可以有效地增强免疫应答。尽管铝佐剂是大多数人或动物疫苗的一种成分,但它的作用机理至今仍然不清楚。我们运用绵羊淋巴套管插入模型对可溶性抗原和颗粒性抗原的运输情况从注射位点进行直接实时测量。铝佐剂不能改变注射位点抗原     

黏膜免疫与结核疫苗研发CSCD

结核病是全球重要的传染性疾病之一,在全球范围内保持着较高的发病率和死亡率。卡介苗是目前临床上唯一应用的结核疫苗,虽然对儿童有较好的保护作用,但对成人的免疫保护效果并不明显。研发新的结核疫苗对于结核病的防控具有重要的意义。由于结核病的致病菌结核分枝杆菌主要通过呼吸道传播,机体的黏膜成为抵御结核分枝杆菌的第一道防线。设计稳定高效的抗结核黏膜免疫疫苗是目前结核疫苗研究的新方向之一。选择合适的黏膜免疫途径、佐剂及抗原递送系统是黏膜疫苗研发成功的关键。本文对抗结核分枝杆菌的黏膜免疫应答作简短的概述,并重点阐明黏膜免疫在结核疫苗研发中的研究进展。     

黏膜免疫与结核疫苗研发

结核病是全球重要的传染性疾病之一,在全球范围内保持着较高的发病率和死亡率。卡介苗是目前临床上唯一应用的结核疫苗,虽然对儿童有较好的保护作用,但对成人的免疫保护效果并不明显。研发新的结核疫苗对于结核病的防控具有重要的意义。由于结核病的致病菌结核分枝杆菌主要通过呼吸道传播,机体的黏膜成为抵御结核分枝杆菌的第一道防线。设计稳定高效的抗结核黏膜免疫疫苗是目前结核疫苗研究的新方向之一。选择合适的黏膜免疫途径、佐剂及抗原递送系统是黏膜疫苗研发成功的关键。本文对抗结核分枝杆菌的黏膜免疫应答作简短的概述,并重点阐明黏膜免疫在结核疫苗研发中的研究进展。     

提高黏膜免疫的方法及研究进展

黏膜是很多病原体入侵机体的重要入口,黏膜疫苗能诱导产生黏膜保护性免疫应答和系统性免疫应答,阻止病原微生物黏附、入侵和繁殖。但多数候选黏膜疫苗的安全性、稳定性、免疫效力及保护作用还无法达到理想的效果,佐剂或载体的使用改善了黏膜疫苗存在的不足,使黏膜疫苗有了广阔的发展前景。文章综述了提高黏膜免疫的方法及研究进展。     

疫苗投递的新策略

近年旨在开发新的疫苗投递技术的研究越来越活跃,其目标是建立一种最适宜的方法,这种方法能将靶抗原以一定的方式呈递至免疫系统,使这种抗原能够刺激产生抵抗或治疗特定疾病的免疫应答。针对这种总的目标已经制定出一些不同的策略,某些方案仍是经验性的,对其原理还认识不足,而另外一些则比较合理,例如模拟体内自然感染或者是靶向免疫系统的特殊特性。本文对以下三类投递系统进行了综述：①佐剂及其组成配方;②抗原载体,包括活的弱毒微生物和合成的载体;③用于疫苗投递的器械。     

乳酸乳球菌作为黏膜免疫活载体疫苗传递抗原的研究进展

乳酸菌是人和动物肠道内的常见细菌,被公认为安全级(generally recognized as safe,GRAS)微生物。近年来,对于乳酸菌作为宿主菌表达外源蛋白或抗原的研究取得了一定进展。乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)是乳酸菌的代表菌种,以其生长迅速、易于操作等优点成为表达外源抗原,作为黏膜免疫活载体疫苗的理想菌株。随着对乳酸乳球菌基因工程的研究逐渐深入,已发展了一系列组成型和诱导型乳酸乳球菌表达系统以及蛋白定位系统。破伤风毒素片段C、布氏杆菌L7/L12蛋白等多种病原微生物抗原已成功在乳酸乳球菌中表达,并已证明部分重组乳酸乳球菌作为黏膜免疫疫苗可以同时刺激局部黏膜免疫应答和系统免疫应答。目前,如何使活载体乳酸乳球菌以最佳方式向黏膜免疫系统提呈抗原继而诱导有效免疫反应是该领域的研究热点,也是巨大挑战。实现外源抗原在乳酸乳球菌中的准确定位及与细胞因子的共表达是未来研究的重要方向之一。乳酸乳球菌作为黏膜免疫活载体疫苗传递外源抗原具有广阔的应用前景。     

不同黏膜佐剂对猪丁型冠状病毒诱导小鼠免疫应答的影响

【目的】旨在为猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)灭活疫苗黏膜免疫筛选理想佐剂,降低疫苗副作用。利用小鼠模型评价不同佐剂制备的PDCoV灭活疫苗对体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫应答的影响。【方法】将甘露聚糖肽(PA)、CpGODN2395、单磷酰脂质A(MPLA)佐剂分别与IMS 1313、GEL02佐剂联合制备PDCoV灭活疫苗,经鼻腔免疫BALB/c小鼠;将ISA201佐剂制备的PDCoV灭活疫苗经皮下免疫BALB/c小鼠,将PDCoV灭活抗原经鼻腔免疫BALB/c小鼠作为对照,间隔14 d加强免疫一次。用ELISA方法检测小鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的IgG、IgG1、IgG2a、IL-4、IFN-γ及粪便和BALF中sIgA表达水平;用MTT方法检测疫苗免疫后对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;观察并记录小鼠免疫后的临床表现,HE染色方法观察免疫小鼠主要器官组织的病理学变化,评价疫苗的安全性。【结果】ISA201组小鼠BALF和血清中的抗体(IgG、IgG1)及IL-4表达水平相对较高,但IgG2a、IFN-γ和粪便中sIgA表达水平...     

免疫佐剂在肿瘤免疫疗法中的应用进展

免疫疗法是预防和治疗疾病的有效手段之一。近年来,肿瘤免疫疗法已成为一种新型治疗方法,相关肿瘤疫苗已在多种肿瘤的治疗中被证明有效。然而,在肿瘤疫苗的设计中,肿瘤抗原免疫原性弱、应答率低等问题是目前面对的一大挑战,佐剂的加入为问题的解决提供了一种新的方法和思路。免疫佐剂在提高肿瘤抗原免疫原性、激活机体适应性免疫应答等方面起着十分重要的作用。为了解近几年免疫佐剂的发展及其研究现状,针对目前常用的抗肿瘤佐剂进行综述,并总结了其对免疫系统的作用机制,为后续的疫苗设计策略提供帮助。     

不同佐剂对含S+PreS1融合抗原的乙型肝炎病毒颗粒疫苗免疫原性的影响

本研究在前期工作基础上,用CHO细胞表达的含PreS1+S融合抗原的新型基因工程HBV颗粒疫苗(HBSS1)与Al(OH)3、CpG及CpG+Al(OH)3等佐剂配伍,在Balb/C小鼠模型上研究不同佐剂对HBV颗粒疫苗肌肉注射后免疫应答的影响,主要包括抗体滴度、抗体亚型分类及特异性细胞免疫(γ-IFNELISpot检测)。结果表明:CpG佐剂结合HBSS1颗粒疫苗可快速诱导(单针免疫)高水平的抗PreS1及S抗体,IgG2a/IgG1比率1,同时可诱导较高抗原特异的细胞免疫应答;Al(OH)3+CpG双佐剂组一次免疫后可诱导产生最高的抗S抗体滴度(1:105),其产生的抗体亚类包括IgG1、IgG2a与IgG2b;在S抗原N端(13~49aa)存在优势CTL表位。结论:CpG佐剂结合HBSS1颗粒疫苗应是发展新型治疗性乙肝疫苗的较佳选项。