农用植物活性成分提取技术研究进展

从农用植物中提取活性成分作为植物源农药有效成分已成为当前农药化学和农药毒理学研究的热点。系统综述了溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、升华法等农用植物活性成分常规提取技术和近年兴起的超声波提取法、微波提取法、生物酶法、超临界流体提取法、超高压提取法、亚临界提取法以及包括超声-微波协同萃取等在内的联合提取法、微切助互提取法、快速溶剂提取法、高压脉冲提取法、超滤法提取法等新兴提取技术,并对其特性、应用实例及发展前景和趋势进行了展望,旨在为农用植物活性成分的提取、开发、应用提供参考和依据。     

梨不同DNA提取方法的效果研究

以7个梨品种为实验材料,比较分析了SDS法、CTAB法、SDSCTAB法、改良的CTAB法、高盐低pH值法、分步离心法对梨总DNA提取的效果。结果表明:利用以上6种方法提取的梨总DNA在纯度和量上有很大的差别。所得到的平均DNA量从大到小依次为:分步离心法、SDS法、SDSCTAB法、改良的CTAB法、CTAB法、高盐低pH值法。DNA提取纯度依次为分步离心法、SDSCTAB法、改良的CTAB法、高盐低pH值法、CTAB法、SDS法。RAPD和自交不亲和基因(S基因)特异性引物扩增实验结果都比较理想,但分步离心法和SDSCTAB法提取的DNA双酶切效果较好。分步离心法提取的梨总DNA更适用于后续的分子生物学实验操作。     

幽门螺旋杆菌的培养研究

本文比较了连二亚硫酸钠法、硼氢化钾法、烛缸法和绿脓杆菌法、枯草杆菌法对幽门螺旋杆菌(Helicobacter prlori)的培养效果。结果发现绿脓杆菌法最佳,枯草杆菌法和连二亚硫酸钠法次之,硼氢化钾法和烛缸法较差。本试验用废血袋制作徽需氧袋培养幽门螺旋杆菌,也取得了满意的效果。     

白假丝酵母菌体外生物膜药敏性不同检测方法的比较

目的比较不同的方法对白假丝酵母菌体外生物膜药敏性检测的差异。方法分别采用菌落计数法(CFU)、AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法对白假丝酵母菌体外48h成熟生物膜的药敏性进行检测,并将AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法与CFU法进行比较,观察其相关性及差异性。结果 AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法与CFU法都有较高的相关性,相关系数分别为r=0.969、r=0.971、r=0.982(P0.01);与CFU法的差异分别为(0.093±0.127)、(0.054±0.113)、(0.013±0.066),其差异无统计学意义(P0.05)。结论 AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法均可替代CFU法对白假丝酵母菌生物膜进行药敏检测。MTT法与CFU法的相关性最大,差异性最小;AlamarBlue试剂作为一种新的试剂,操作简单,对细胞及人类无毒害,更加适合高通量检测。     

四种营养评价法对肝硬化患者营养不良评价的一致性探讨

目的:探讨主观全面营养评价法(subjective global assessment,SGA)、简易营养评价法(mini-nutritional assessment,MNA)、简易营养评价精法(short form mini-nutrition assessment,MNA-SF)及欧洲NRS2002(Nutritional risk screening)营养风险筛检法四种营养评估法对肝硬化患者营养不良评价的一致性。方法:采用SGA、MNA、MNA-SF、NRS2002四种营养评估法对本院收治的肝硬化患者49例进行营养评估,应用诊断一致性检验评价四种营养评估法之间的一致性。结果:四种方法评估肝硬化营养不良发生率分别为:SGA法为32.7%,MNA法为67.3%,MNA-SF法为51.0%,NRS2002法为40.8%;四种营养评估法吻合程度从强到弱依次为:MNA法与MNA-SF法,k=0.671;SGA法与MNA-SF法,k=0.554;MNA-SF法与NRS2002法,k=0.553;MNA法与NRS2002,k=0.501;SGA法与NRS2002法,k=0.477;SGA法与MNA法,k=0.381...     

美花石斛基因组DNA提取方法的比较

采用CTAB法、尿素法、高盐低pH法、SDS法和陈大明法等5种方法提取美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)基因组总DNA,通过电泳、紫外光谱分析和RAPD-PCR扩增等检测手段,比较分析了DNA质量。DNA条带显示改良CTAB法和改良尿素法较好。     

基于16S rRNA基因检测双歧杆菌的方法

本文综述了基于16S rRNA序列(16S rDNA)检测、鉴定双歧杆菌的方法。包括基因探针法、荧光原位杂交法、PCR扩特异性片段法、多重PCR法、荧光定量PCR法和PCR-DGGE/TGGE法等。     

刺五加多糖提取过程中不同脱蛋白方法的比较研究

研究比较了Sevag法、三氯乙酸法(TCA)-Sevag法、壳聚糖絮凝法和酶法四种方法对刺五加多糖的脱蛋白效果.结果表明:Sevag法、三氯乙酸法(TCA)-Sevag法、壳聚糖絮凝法和酶法的蛋白脱除率分别为28%、83%、93.1%、93.1%;多糖损失率分别为18%、43%、47%、7%.比较这四种脱蛋白方法,酶法具有良好的脱蛋白效果.     

基于Fisher-Pry模型的纤维素预处理技术成熟度分析

为了研究纤维素预处理技术成熟度情况,基于多源文献数据利用Fisher-Pry模型对蒸汽爆破法、酸处理法、碱处理法和生物法等主要预处理技术成熟度进行了研究。结果表明,蒸汽爆破法、酸预处理法及碱预处理法从2005年之后快速发展,目前基本处于成熟阶段,但由于这些方法本身存在水解产生抑制性产物、腐蚀性、成本高等缺陷,很难取得进一步的突破。生物法目前还正处于快速成长阶段,具有很大的前景,经过Fisher-Pry曲线拟合,预计生物法到2043年左右达到成熟。     

多菌种酸奶中活性乳酸菌的计数方法研究

利用4种选择性培养基MRS、MRS-山梨醇、MRS-5．2、Elliker,采用平板涂布法和倾注接种法。在蜡烛缸法（缺氧）、封口膜法（微氧）和供氧条件下对4种市售多菌种酸奶中保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌进行选择性计数方法研究。结果表明：蜡烛缸法较能反映乳酸菌活菌数量的实际情况,封口膜法次之;在不同培养条件下4种选择性培养基对于乳酸菌活菌的计数都是灵敏的;而涂布法和倾注法接种活菌数有显著差异,倾注法要优于涂布法。     

二斑叶螨对阿维菌素敏感性的快速检测方法筛选

为了寻找一种快速检测二斑叶螨Tetranychus urticae Koch对阿维菌素敏感性的试验方法,本试验分别采用酶标板法、玻璃管法、离心管法、玻片浸渍法和培养皿封膜法,测定了阿维菌素处理后1、2、3和4 h时二斑叶螨的死亡率。结果发现,酶标板法和玻璃管法操作不方便;离心管法无法准确判断死亡与否;玻片浸渍法作用速度慢;培养皿封膜法方便快捷。据此得出,采用培养皿封膜法于处理后3 h观察结果,可以省时省力的测定二斑叶螨对阿维菌素的敏感性。     

湿地生态系统服务、功能和价值评价研究进展

随着对湿地重要性认识的加深,湿地生态系统的服务价值越来越受到人们的重视.湿地生态系统服务价值评价的成果可为制定惩处破坏者及补偿损失者政策提供科学依据.本文在界定湿地生态系统服务、功能和价值之间关系的基础上,总结了当前湿地生态系统服务功能价值评价的方法和应用特点,主要包括市场价格法、生产函数法、机会成本法、影子工程法、生产力变化法、人力资本法、旅行费用法、享乐价值法、权变价值评估和生态价值法.讨论了影响评价结果的因素及相关研究中存在的问题,并对今后的发展前景进行展望.     

四种提取芸芥基因组DNA方法的比较

以芸芥为材料 ,分别用CTAB法、SDS法、尿素法、NaOH法四种方法对芸芥基因组DNA进行了提取 ;并用紫外光分光光度计法、琼脂糖电泳法和RAPD分析法对所提取的DNA进行检测 ,将它们在DNA的产量、质量和耗时、耗费等方面的优缺点进行比较 ,以便在实际工作中根据不同的试验条件选取最合适的提取方法。通过四种方法的比较 ,研究认为尿素法是芸芥基因组DNA的最佳提取方法。     

三种提取冬虫夏草菌丝体基因组DNA方法的比较

采用改良氯化苄法、CTAB法、蛋白酶K裂解法这三种方法,对冬虫夏草菌丝体基因组DNA进行提取,将提取的基因组DNA经过紫外分光光度计检测纯度和计算浓度、琼脂糖凝胶电泳分析及PCR扩增,结果表明,3种方法均能提取到符合分子生物学的DNA,其中蛋白酶K裂解法纯度最高,含蛋白质少,改良氯化苄法、CTAB法次之。而浓度则是改良氯化苄法最高,CTAB法、蛋白酶K裂解法次之。3种方法所提取的DNA均能扩增出理想条带。     

叶蛋白提取方法的比较及发酵酸法的应用前景

概述了叶蛋白提取的几种方法,其中有水溶液提取法、加热法(60℃加热、90℃加热)、酸碱法、纯蛋白质沉淀法、盐析法、凝聚剂沉淀法、超滤法、电浓缩法、反胶团相转移法、有机溶剂沉淀法、发酵酸法等。将发酵酸法和其他的提取方法进行了比较,重点讲述了发酵法提取叶蛋白的优点,并指出叶蛋白在今后开发利用中的良好前景。     

测定冠心病患者血清HDL-C和LDL-C水平的方法学比较

目的:比较超速离心法、电泳法、匀相法、沉淀法在干扰因素存在时检测冠心病(CHD)患者血清胆固醇水平的特异性。方法:采用超速离心法、电泳法、匀相法及沉淀法对150例CHD患者和102例健康体检者分别进行血清胆固醇水平的测定,比较各方法之间的相关性,同时分析导致结果差异的因素。结果:四种方法检测健康人群HDL-C、LDL-C水平,结果间无统计学差异(P>0.05);CHD组,当TG≤2.26mmol/L时,采用沉淀法和匀相法检测CHD患者血清LDL-C,结果差异较小(P>0.05),电泳法检测结果偏高,与沉淀法、电泳法间有统计学差异(P<0.05)。超速离心法与电泳法间的相关性良好,但匀相法及沉淀法易受高胆红素、高血红蛋白等因素的影响。结论:超速离心法虽耗时、价格贵,但仍为检测HDL-C、LDL-C的经典方法,电泳法受高胆红素、血红蛋白、高三酰甘油等干扰因素的影响相对较小,适用于冠心病HE合并高血脂血清HDL-C、LDL-C水平检测。     

流感病毒的检测和分型技术研究进展

近年来,病毒性流感的不断流行和暴发已引起世界范围的广泛关注。为了更好地对流感病毒进行检测和分型,我们对目前流感病毒常用的血清学检测和分型方法、免疫荧光法、PCR方法、多重RT-PCR法、实时RT-PCR法、依赖核酸序列的扩增法、环介导等温扩增法、焦磷酸测序法、基因芯片技术分别进行了描述,并阐述了其优缺点。     

农田节肢动物不同取样方法的综合比较

农田节肢动物多样性具有病虫害控制、传粉等价值, 选择一种或多种适宜、准确且高效的取样方法和指示类群来衡量农田节肢动物多样性是一项基础性工作。本文通过地表陷阱法、挂盆陷阱法、扫网法、目测计数法和吸虫器法在有机管理和常规管理农田区的不同农业生境类型中取样, 比较不同方法对不同生物类群的捕获效率、经济成本、响应敏感性等。研究发现在捕获效率方面, 地陷法和挂盆法最高, 其次是扫网法, 而吸虫器法和目测计数法较差。挂盆法对步甲、蜘蛛、蜂类和瓢虫类群的捕获效率较佳。陷阱法主要适用于蜘蛛和步甲的取样, 扫网法也可用于蜘蛛和瓢虫的取样。在经济成本方面, 地陷法的成本最低, 扫网法的总成本最高。每种取样方法下仅有个别类群个体数量具有较好的响应敏感性, 如地陷法的蜘蛛目个体数和步甲科个体数、挂盆法的总个体数、蜂类个体数和瓢虫科个体数、扫网法的直翅目个体数和半翅目个体数等。在此基础上, 综合类群经济价值, 操作难易, 类群鉴定难度, 被动取样程度, 是否受取样人影响等比较发现: 地陷法对步甲和蜘蛛的取样的综合效果最佳, 而不同取样方法下多种类群的组合能更好地监测和评价农田节肢动物多样性的整体情况。地陷法捕获步甲或/和蜘蛛以及挂盆法调查蜂类的组合是基于本研究得出的调查农田节肢动物多样性的最佳组合。     

大青杨基因组DNA提取方法的比较

本研究采用改良SDS法、常规CTAB法和改良CTAB法(1.5×CTAB,2×CTAB,3×CTAB)提取大青杨基因组DNA,并用紫外光普分析、凝胶电泳、限制性内切酶消化和RAPD方法进行鉴定.结果表明:5种方法中,改良SDS法DNA提取率最高,但CTAB法比改良SDS法提取获得的DNA纯度高,OD260/OD280为1.73～1.81.与常规CTAB法比较,改良SDS法和改良CTAB法能有效去除蛋白、多糖、酚类及次生代谢物质.综合分析确定改良2×CTAB法为大青杨基因组DNA的最佳提取方法.     

白桦核心种质构建的聚类方法研究

以白桦240个家系的胸径、树高、材积和纤维素含量数据为依据,采用马氏距离计算家系间距离、10%的取样比例和优先取样法,研究了最短距离法、最长距离法、中间距离法、重心法、类平均法、加权配对算术平均法、可变法和离差平方和聚类法建构的核心种质与原种质的遗传参数、性状相关性及分布格局.结果表明,最短距离法构建白桦初级核心种质均值差异百分率、极差符合率、方差差异百分率和极差符合率分别为0、100%、75%和143%,4个性状相关性显著、相关系数均超过0.5,保持了原种质资源的空间分布格局,是构建白桦核心种质最佳方法.