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1.
神经钙粘着蛋白在P19神经元分化中的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
利用RT-PCR技术,我们检测P19细胞体外神经元分化过程中神经钙粘着蛋白(N-cadherin)的表达模式。结果显示,该基因在上述过程中存在上调和下调过程,与体内中枢神经系统发育过程的表达模式十分相近。在此基础上,我们将神经钙粘着蛋白基因cDNA全长转入P19细胞,通过药物筛选,得到稳定表达钙粘着蛋白的细胞株。 相似文献
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为了研究上皮钙粘着蛋白(E-cadherin)对人肺腺癌细胞间粘聚和细胞悬浮生长的影响。利用基因重组技术构建了含全长上皮钙粘着蛋白cDNA的真核表达载体。通过脂质体法转染到A549肺腺癌细胞株中,用RT-PCR和Western印迹鉴定并筛选上皮钙粘着蛋白高表达的细胞,株,并观察转染前后肿瘤细胞间粘聚能力的改变以及细胞悬浮培养下的生长状态,结果表明转染细胞间聚集力比对照细胞增强,上皮钙粘着蛋白能够促进细胞悬浮生长的速度。 相似文献
3.
介导细胞间相互作用的重要分子——钙粘着蛋白(Cadherins) 总被引:2,自引:0,他引:2
钙粘着蛋白(Cadherins)作为细胞粘着分子中的一个大家族,其成员多达几十种,它们在形态发生(包括细胞的聚集、迁移和分化等)过程中具有极其重要的作用。本文就钙粘着蛋白结构、分布及其功能的研究进展作了较为全面的概述,同时简要讨论了钙粘着蛋白的信号调节机制等。目前,有关钙粘着蛋白的研究趋势已从单纯强调新的分子的发现转变为更为深入、细致地研究它们的结构,它们与配体、受体和反受体的相互作用,信号传导及其调节机制,以及它们在复杂的生命活动中的生物学功能。对于它们的研究正方兴未艾。 相似文献
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用一株基因工程菌E.coli2426/pMN表达了麦芽糖结合蛋白-人神经生长因子融合蛋白,菌体超声破碎后,上清液经直链淀粉亲和柱一步即可获SDS-PAGE纯融合蛋白,为麦芽糖结合蛋白与人神经生长因子的络合物,产率约10%。产物用鸡胚背根神经节检测生物活性,1BU不大于10ng,与小鼠颌下腺β神经生长因子具有类似生物活性。 相似文献
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钙连蛋白──膜结合型监护蛋白许强,王克夷(中国科学院上海生物化学研究所,上海200031)关键词钙连蛋白,监护蛋白1.发现内质网(ER)是许多分泌蛋白、质膜蛋白和细胞器膜蛋白加工处理的场所,这些蛋白在ER经过折叠、装配和修饰(例如N-糖基化)以后,才... 相似文献
6.
本文报导了胰腺提取物中两种可被钙/钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化的热稳定蛋白。SDS-PAGE测定其表观分子量分别为17.7kD和6kD。经钙/钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化后,其最大磷酸参入量为8.8μmol/g蛋白。同时磷酸化作用导致17.7kD蛋白在SDS-PAGE中迁移率发生变化。本文还进一步分析了各种阳离子对磷酸化的影响,并对此两种蛋白可能具有的生理功能进行了初步探讨。 相似文献
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钙/钙调素依赖性蛋白激酶对17.7kD和6kD胰腺蛋白的磷酸化 总被引:3,自引:0,他引:3
本文报导了胰腺提取物中两种可被钙/钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化的热稳定蛋白。SDS-PAGE测定其表观分子量分别为17.7kD和6kD。经钙/钙调素依赖性蛋白激酶磷酸化后,其最大磷酸参入最为8.8μmol/g蛋白。同时磷酸化作用导致17.7kD蛋白在SDS-PAGE中迁移率发生变化。本文还进一步分析了各种阳离子对磷酸化的影响,并对此两种蛋白可能的生理功能进行了初步探讨。 相似文献
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兔阑尾中一种新的21kD的钙结合蛋白的纯化与鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
纯化与鉴定了B淋巴细胞中一种新的分子量为21kD的钙结合蛋白(CaBP21)。兔阑尾淋巴细胞匀浆经热变性,Phenyl-Sepharose与DEAE-Sepharose柱层析,自每1kg细胞沉积物中获得SDS-PAGE均一的CaBP215.3mg。HCl水解后的酸性氨基酸(Asp+Glu)含量为26%。如同大多数钙结合蛋白一样,N末端封闭阻止其进行Edman降解。CaBP21中疏水性氨基酸(计Gly,不计Trp)约占46%,碱性氨基酸10%,酸性氨基酸与极性氨基酸约44%。CaBP21有较高的Ser、Tyr含量。肽谱分析等确证CaBP21为2个相同或相似亚基二聚体。以ArsenazoⅢ作Ca2+结合分析表明每分子CaBP21可结合4分子Ca2+,对Ca2+的结合常数约为10-5mol/L。各种性质表明CaBP21是一种不同于其他已知钙结合蛋白的新钙结合蛋白。 相似文献
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利用受精卵原核显微注射的方法,产生了含有HGV结构蛋白C、E1、E2及部分非结构蛋白NS2、NS3的转基因小鼠。得到10只foumder小鼠,其中有3只founder小鼠与正常小鼠交配后得到了整合有外源基因的F1代阳性小鼠。RT-PCR的结果显示,外源基因可在founder小鼠及F1代小鼠的血液有核细胞及肝细胞内转录;组织病理学检查显示,某些转基因小鼠的肝细胞出现了水样变、脂肪变性及轻微炎性反应等 相似文献
10.
盘基网柄菌细胞的粘附分子 总被引:1,自引:0,他引:1
盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)依赖4种类型细胞粘附系统的表达使其多细胞发育顺利进行。在发育初期,由钙结合蛋白DdCAD-1调节EDTA/EGTA敏感的粘着位点。在发育的多细胞聚集阶段,出现EDTA抗性的粘着位点,由分子是80kD蛋白(gp80)通过同嗜性粘着的相互作用末调节细胞的粘着,它的细胞结合位点是一个八肽序列。由分子量150kD蛋白(gp150)通过异嗜性粘着的相互作用来调节多细胞后聚集的细胞粘着。本文详细讨论了gp80和gp150调节细胞粘着的机制。 相似文献
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用一株基因工程菌E.coli2426/pMN表达了麦芽糖结合蛋白-人神经生长因子融合蛋白.菌体超声破碎后,上清液经直链淀粉亲和柱一步即可获SDS-PAGE纯融合蛋白(55kD),为麦芽糖结合蛋白(42kD)与人神经生长因子(13kD)的络合物,产率约10%.产物用鸡胚背根神经节检测生物活性,1BU不大于10ng,与小鼠颌下腺β神经生长因子具有类似生物活性 相似文献
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用马来酸酐及环己二酮分别对天花粉蛋白上的Lys,Arg残基侧链进行修饰,并以竞争性酶免疫测定检查了化学修饰对TCS与小鼠抗TCS单抗TE-1(IgE)反应活性的影响。两种修饰均使TCS与单抗TE-1反活性下降,推测Lys残基可能直接参了与单抗TE-1的结合,热变性实验提示TCS上单抗TE-1识别部位需要一定的空间构象。 相似文献
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天花粉蛋白Lys和Arg残基的化学修饰对其与IgE反应活性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
用马来酸酐及环己二酮分别对天花粉蛋白上的Lys、Arg残基侧链进行修饰,并以竞争性酶免疫测定检查了化学修饰对TCS与小鼠抗TCS单抗TE-1(IgE型)反应活性的影响。两种修饰均使TCS与单抗TE-1反应活性下降。推测Lys残基可能直接参予了与单抗TE-1的结合。热变性实验提示TCS上单抗TE-1识别部位需要一定的空间构象。 相似文献
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表达流行性感冒病毒血凝素蛋白的重组腺病毒的构建 总被引:5,自引:0,他引:5
用RT-PCR方法扩增流感病毒血凝素基因,将其克隆到5型腺病毒载体质粒pAD5C中。用此质粒与EcoRI酶切回收的5型腺病毒基因组片段共转染293细胞,通过PCR初步筛选得到重组病毒。SDS-PAGE电泳、West-ern blot重组病毒能表达流感病毒的血凝素蛋白。此重组病毒经滴鼻免疫Balb/C小鼠,ELISA实验证明能诱导小鼠产生针对流感的循环抗体IgG和分泌型抗体IgA。本实验证明,利用E 相似文献
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提高外淋巴钙浓度对耳蜗电位的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本实验以人工外淋巴灌流方式,提高豚鼠耳蜗外淋巴液钙离子浓度([Ca2+]PL),观察蜗内直流电位(EP)和耳蜗电图(ECochG)的变化,ECochG包括听神经复合动作电位(CAP)、耳蜗微音电位(CM)。结果可见:高钙灌流明显抑制CAP幅值,延长同一声强下(90dBSPL)N1-峰潜伏期,但不改变CM的幅值及总和EP(G-EP)。高钙灌流降低了EP对噪声的给-撤声反应(EP-ON,EP-OFF)和缺氧所得到的最大负EP(N-EP)绝对值。本文分析了外淋巴高钙影响耳蜗电位的可能机制。 相似文献
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用含小鼠金属硫蛋白(MT-1)基因启动子与突变的人ApoE7基因的6.0KbDNA片段作为目的基因制备转基因小鼠,利用显微注射法将目的基因导入441枚受精卵,移植于20只假孕鼠,其中15只受孕,共产仔鼠80只,经a-32P斑点杂交与Southern杂交法鉴定出两只整合有人ApoE基因的转基因雌鼠,其拷贝数分别为2和5。将两只首建鼠(雌性Fo代)与正常雄鼠交配,建立F1代转基因鼠系TGE7-2和TGE7-3,为进一步从整体上研究ApoE在脂质代谢中的作用以及ApoE与动脉粥样硬化和Alzheimer’s病的关系创造条件。 相似文献
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大肠杆菌中克隆了编码百日咳杆菌粘着素(Pertactin,Prn)1.9kb的结构基因,获得了4株表达Prn的重组菌株,以融合蛋白的形式,对Prn进行了表达。Prn融合蛋白的表达量占细胞总蛋白量的46.4%。融合蛋白纯度达89.2%。免疫印迹证明,抗天然Prn的单克隆抗体BPE3能识别重组菌中及纯化的Prn融合蛋白。Prn融合蛋白能与抗百日咳杆菌Ⅰ相血清发生特异凝集反应。Prn融合蛋白及重组菌免疫小鼠后,对百日咳杆菌毒力株18323的脑内攻击,保护率达60~62.5%。 相似文献
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内皮细胞E—选择蛋白的表达及p53基因的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
为探讨血管内皮细胞E-选择蛋白的表达及野生型p53基因对其表达的影响,采用流式细胞术及RT-PCR法分别测定其E-选择蛋白及其mRNA水平。结果表明:静息状态的内皮细胞表面检测不到E-选择蛋白的表达,尽管此时细胞内存在E-选择蛋白的mRNA。肿瘤坏死因子α(TNFα)可浓度依赖性地诱导内皮细胞表达E-选择蛋白,内皮细胞表面E-选择蛋白表达的增加伴随着细胞内E-选择蛋白mRNA水平的升高。TNFα刺 相似文献