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1.
用酶联免疫法(ELISA)检测了Zn2+对细菌铁蛋白[bacterioferritin (B.F.)]合成的影响。Zn2+抑制B. F合成,而在高Zn2+培养液中生长的菌体其B. F分子中Zn2+含量比低Zn2+条件下的高二倍。B. F分子中的Zn2+能转运出来激活碱性磷酸酶的活性。 相似文献
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PEG和盐对棕色固氮菌细菌铁蛋白和钼铁蛋白晶体生长的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
棕色固氮菌(OP)体内的固氮酶钼铁(MoFe)蛋白和细菌铁蛋白均为重要的生物功能蛋白。前者为生物固氮的关键酶[1],后者则可为生物代谢贮存丰富而又可溶的铁原子[2]。因而都得到了广泛而深入的研究。Kim[3]报道了MoFe蛋白衍射结果。赵宝光等[2]... 相似文献
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棕色固氮菌固氮酶钼铁蛋白经H2O2作用后,钼铁蛋白的Mo和Fe原子含量,乙炔还原少在性,摩尔消光系数和α-螺旋度地匀显著降低,蛋白质肽链也许发生部分断一。本和纱中存在过氧化物酶。可避免H2O2对钼铁蛋白的损伤作用,表明H2O2对钼欠蛋白的金属原子簇和蛋白质结构均有明显的损伤作用,而过氧化物酶可保护固氮酶不受H2O2的破坏。 相似文献
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棕色固氮菌细菌铁蛋白释放铁的动力学方程和性质 总被引:2,自引:1,他引:1
棕色固氮菌细胞铁蛋白铁核中的磷铁组成存在非均匀性。细菌铁蛋白释放铁的动力学特性表现出复杂性。通过动力学曲线分析,提出蛋白壳自身调节能力起着限制释放铁速率关键步骤的观点建立分析铁蛋白释放铁的动力学特性方程并用它较合理地阐明铁蛋白释放铁的动力不储存铁的途径。用分光光度法和动力学方程研究细胞铁蛋白释放铁的全过程。其表明该蛋白以一级反应方式释放铁核表层的铁和以零级反应方式释放铁核内层的铁。外加磷酸盐能强烈 相似文献
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钒铁蛋白的体外组装研究 总被引:1,自引:0,他引:1
棕色固氮菌固氮酶MoFe蛋白经邻菲罗啉在厌氧和有氧条件下处理后,成为部分缺失FeMoco和P-cluster的失活蛋白,用由钒酸钠,高柠檬酸铁、Na2S和二硫硫苏糖醇组成的溶液保温后,可使这失活蛋白变为重组蛋白。重组蛋白的CD谱除550-650nm与MoFe蛋白存在差异外,也能与其吸收光谱和对质子还原活性一样得到基本恢复,但对C2H2的还原活性却未得到明显恢复。表明,这种重组蛋白与MoFe蛋白有所 相似文献
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棕色固氮菌细菌铁蛋白释放铁的动力学方程和性质 总被引:2,自引:0,他引:2
棕色固氮菌细菌铁蛋白铁核中的磷铁组成存在非均匀性。细菌铁蛋白释放铁的动力学特性表现出复杂性。通过动力学曲线分析,提出蛋白壳自身调节能力起着限制释放铁速率关键步骤的观点,建立分析铁蛋白释放铁的动力学特性方程并用它较合理地阐明铁蛋白释放铁的动力学规律及储存铁的途径。用分光光度法和动力学方程研究细菌铁蛋白释放铁的全过程,其结果表明该蛋白以一级反应方式释放铁核表层的铁和以零级反应方式释放铁核内层的铁。外加磷酸盐能强烈地抑制释放铁的速率,引起释放铁的反应级数的转化,迫使铁蛋白以一级反应的方式释放铁核中的大多数铁。 相似文献
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棕色固氮菌突变种UW3部分提纯的固氮酶CrFe蛋白溶液中残存细菌铁蛋白的晶体生长及鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
从无钼、无氨而含铬的固氮培养基中生长的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种UW3中纯化得到了部分纯的CrFe蛋白。在试图培养CrFe蛋白大晶体时发现,棕色晶体和砖红色晶体可同时或单独出现。SDS-PAGE和厌氧天然PAGE皆表明,棕色晶体主要由与固氮酶钼铁蛋白(Av1)类似大小的亚基(~60kD)组成,而砖红色晶体则由~20kD亚基组成。免疫分析表明只有~60kD的亚基可与固氮酶钼铁蛋白的抗体反应,而~20kD亚基则无这种反应。在部分纯的CrFe蛋白溶液中,~20 kD的总蛋白含量远低于~60 kD蛋白的含量,表明由这种小亚基组成的蛋白只是CrFe蛋白溶液中的一种污染蛋白。用3,5-二氨基苯甲酸染色的天然电泳表明,形成砖红色和棕色晶体的蛋白是迁移率不同的两种含铁蛋白。质谱分析表明砖红色晶体蛋白为棕色固氮菌的细菌铁蛋白。分辨率为2.34的X射线衍射结果也表明,砖红色晶体属于H3空间群,晶胞参数为a=124.965,b=124.965和c=287.406。即将发表的三维结构解析表明,此砖红色晶体确为24聚体的细菌铁蛋白。 相似文献
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从无钼、无氨而含铬的固氮培养基中生长的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变种UW3中纯化得到了部分纯的CrFe蛋白.在试图培养CrFe蛋白大晶体时发现,棕色晶体和砖红色晶体可同时或单独出现.SDS-PAGE和厌氧天然PAGE皆表明,棕色晶体主要由与固氮酶钼铁蛋白(Av1)类似大小的亚基(~60 kD)组成,而砖红色晶体则由~20kD亚基组成.免疫分析表明只有~60kD的亚基可与固氮酶钼铁蛋白的抗体反应,而~20kD亚基则无这种反应.在部分纯的CrFe蛋白溶液中,~20 kD的总蛋白含量远低于~60 kD蛋白的含量,表明由这种小亚基组成的蛋白只是CrFe蛋白溶液中的一种污染蛋白.用3,5-二氨基苯甲酸染色的天然电泳表明,形成砖红色和棕色晶体的蛋白是迁移率不同的两种含铁蛋白.质谱分析表明砖红色晶体蛋白为棕色固氮菌的细菌铁蛋白.分辨率为2.34 A的X射线衍射结果也表明,砖红色晶体属于H3空间群,晶胞参数为a=124.965A,b=124.965A和c=287.406 A.即将发表的三维结构解析表明,此砖红色晶体确为24聚体的细菌铁蛋白. 相似文献
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棕色固氮菌固氮酶钼铁蛋白与邻菲罗啉厌氧保温时,尿素可使钼铁蛋白丢失的Fe原子数目显著增加,在有过量Na2S2O4存在时,每个蛋白分子失去的Fe原子数猛然增至26-28个,经Sephadex G-25柱层析得到的蛋白已失去85%的乙炔还原活性,而蛋白回收率仍可达60%。与含Mo重组液重组后,这种失活蛋白的紫外-可见圆二色谱、凝胶电泳图谱和乙炔还少在性均有所恢复,结果表明,尿素可使厌氧钼铁蛋白的FeM 相似文献
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Zn^2+对罗非鱼呼吸运动的影响和解毒的初探 总被引:4,自引:0,他引:4
将罗非鱼分别置于含有1、4、8、12ppm ZnSO_4的软、硬质水中,研究15d 中不同亚致死浓度 Zn~(2+)对鱼呼吸和咳嗽反应频率的影响;观测比较加入 EDTA 络合剂的变化,探索解除鱼Zn~(2+)中毒的方法。结果如下:1)呼吸频率的变化和咳嗽反应明显受 Zn~(2+)浓度影响,浓度越大,呼吸频率曲线越偏离对照曲线,咳嗽反应的频率亦越高,它们可作为鱼中毒和解毒的生理学监测指标。2)硬水组鱼受 Zn~(2+)毒害明显小于软水组。3)EDTA 可解除或减轻 Zn~(2+)对鱼的毒害,但其在软、硬水中的解毒效应无明显差异。 相似文献
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用对氯汞苯甲酸或二巯基双二硝基苯甲酸修饰巯基。用三硝基苯磺酸、重氮四唑和焦碳酸二乙酯分别修饰氨基、酚式羟基和眯唑基。在一定范围内,被修饰钼铁蛋白在特征波长吸收值的上升和重组活性的下降与修饰剂用量的增加和时间的延长相一致,超过该范围后则光吸收和活性都保持不变。由于无氧凝胶过滤去除多余的修饰剂时未加连二亚硫酸钠,甚至正常钼铁蛋白的重组活性下降了24.2%,修饰后的铝铁蛋白活性下降范围为23.4~41.4%不等。 相似文献
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棕色固氮菌细菌铁蛋白能直接快速地从金属铂电极上得到电子或提供电子给铂电极。经-600mV(相对于NHE)还原电位处理后,还原态细菌铁蛋白在可见光谱区中(380-580nm)所呈现的整体吸收光谱强度明显高于氧化态细菌铁蛋白的吸收光谱强度。经氯化钴处理后的细菌铁蛋白表现出较弱的电极活性及释放铁的速率明显下降。此外,细菌铁蛋白在体外模拟棕色固氮菌整体细胞内的微量氧环境体系中仍有氢还原现象,因而推测细菌铁蛋白在该菌体内也能进行吸氢反应。细菌铁蛋白是一种类似有吸氢氢酶功能的蛋白质 相似文献
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含铬重组液激活部分缺陷失金属原子族的钼铁蛋白的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
棕色固氮菌固氮酶相铁蛋白经邻菲罗啉和O2处理,变为部分缺失FeMoco和P-cluster的失活蛋白。与由K2CrO4、高柠檬酸铁、Na2S和二硫苏糖醇组成的重组液保温后,处理蛋白对乙炔和质子还原的活性都得以显恢复,然而,它的吸收光谱和圆二色谱虽有明显恢复,但仍与还原钼铁蛋白有所不同。这表明,激活蛋白中也话存在功能与钼铁蛋白相似,而结构则有所差异的含铬蛋白。 相似文献
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锰对部分缺失金属原子簇的固氮酶钼铁蛋白的重组作用 总被引:1,自引:0,他引:1
棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)固氮酶钼铁蛋白经邻菲口罗啉和O2 处理后,变为部分缺失P-cluster和FeMoco 的失活蛋白,经与由KMnO4、高柠檬酸铁、Na2S和二硫苏糖醇组成的重组液保温后,重组蛋白的吸收光谱和对C2H2、H+ 和N2 的还原活性都恢复至与还原钼铁蛋白相似的状态,而它的α-螺旋度和在380—550 nm 、620—670 nm 的CD谱虽有明显的恢复,但仍与还原钼铁蛋白有所不同。表明:(1)重组蛋白液既含有在缺失金属原子簇的MoFe蛋白与含Mn 重组液重组过程中可能组装的MnFe 蛋白,又含有在邻菲口罗啉和O2 处理后金属原子簇仍旧完整的MoFe蛋白;(2)MnFe蛋白和MoFe蛋白在固氮能力上可能是相似的,而在结构上却可能略有差异 相似文献