输卵管素(Oviductins)的研究进展

一类具有广泛结构多态性的输卵管特异的糖蛋白———输卵管素,可与卵子的透明带和着床前胚胎相联系。本文综述了这种糖蛋白的合成、分泌、进化上的保守性及其在受精和早期胚胎发育过程中的重要作用。     

沙眼衣原体感染后大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的变化

目的研究沙眼衣原体感染后输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的变化.方法取25只成熟Wistar雌性大鼠随机分为实验组和对照组,每组5只.对照组接种2SP代替沙眼衣原体,其余每组大鼠均在卵巢囊接种沙眼衣原体D型株.分别于感染后3,5,7,14d处死动物,取输卵管,观察大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白在感染后不同天数发生的改变,其变化可通过荧光显微镜观察与植物凝集素BS-1结合后的荧光强度来检测,并采用HPIAS-1000图文分析系统进行定量分析和SPSS11.0统计软件作统计分析.结果输卵管受损部位主要在粘膜层,富含N-乙酰-D-半乳糖胺的糖蛋白随感染的天数不同,其变化有所不同,尤其以输卵管峡部变化明显.图像分析结果显示:感染第7d时其分泌量最低,感染后第14d其分泌量逐渐恢复,且各组间差异有显著性意义(P<0.05).结论输卵管是精子与卵子结合的地方,也是胚胎早期发育的场所.富含N-乙酰-D-半乳糖胺的糖蛋白可通过参与精卵结合、受精卵卵裂和早期胚胎发育等方式,对受精卵及早期胚胎发挥保护作用.     

FSH促进牦牛输卵管上皮细胞分泌输卵管特异性糖蛋白的研究

为在胚胎共培养过程中添加相关激素提高哺乳动物胚胎发育的研究提供理论依据,本研究探讨了促卵泡生成素(FSH)对牦牛输卵管上皮细胞分泌特异性糖蛋白的影响。体外分离培养牦牛输卵管上皮细胞,并在细胞中添加不同浓度的FSH,作用6 h后运用荧光定量PCR分析输卵管特异性糖蛋白mRNA的表达水平,并用细胞免疫标记对其分泌输卵管蛋白的部位进行分析。结果显示,FSH的浓度为0.5-5.0μg/m L时,输卵管蛋白的表达量随着FSH浓度的上升而增加,在5.0μg/m L的FSH作用后,输卵管蛋白的mRNA表达量最高;浓度超过10.0μg/m L时,输卵管蛋白基因的表达量降低。结果表明,FSH具有促进输卵管上皮细胞分泌输卵管特异性糖蛋白的作用,且具有剂量依赖性,其最佳作用浓度为5.0μg/m L,输卵管蛋白主要由细胞质分泌。     

沙眼衣原体感染后大鼠输卵管糖蛋白的变化

目的：研究沙眼衣原体（chlamydial trachomatis,CT）感染后,输卵管粘膜的结构及糖蛋白的变化。方法：60只成年Wistar雌性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组单侧卵巢囊接种沙眼衣原体E型株,对照组接种2SP代替沙眼衣原体,分别于接种后第0.5、7、14天取材,在光镜下观察输卵管的结构变化,并采用PAS-Alcian blue染色显示输卵管内糖蛋白组分的变化。结果：对照组输卵管粘膜结构和糖蛋白组分无明显变化;实验组输卵管受损部位主要局限于粘膜层,PAS-Alcian blue染色显示沙眼衣原体感染可导致中性糖蛋白分泌减少。结论：沙眼衣原体的感染可使输卵管糖蛋白组分发生改变,这可能与反复感染的宫外孕、输卵管性不孕的发生有关。     

动情周期中大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的表达

目的初步鉴定大鼠输卵管中存在与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白,并研究其在输卵管中的定位和不同动情周期中糖蛋白的表达变化.方法根据阴道涂片检查将大鼠分为:间情期(DE)组、动情前期(PE)组、动情期(E)组和动情后期(ME)组.用冰冻切片法、荧光组化技术和共聚焦显微镜技术观察大鼠输卵管中与BS-1结合糖蛋白的分布及表达变化.结果大鼠输卵管中存在与BS-1结合的糖蛋白,并呈节段性分布,即峡部＞壶腹部.动情周期中大鼠输卵管糖蛋白的表达:动情期＞动情前期＞动情后期＞间情期.结论大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白在动情期(E)峡部上皮表达最明显,具有雌激素依赖性.     

增龄对大鼠输卵管粘膜上皮糖蛋白的影响

目的揭示增龄对大鼠输卵管粘膜上皮糖蛋白的影响.方法分别以5只1月龄、8月龄和18月龄健康雌性SD大鼠作为性成熟前期组(IMG)、性成熟期组(MG)和更年期组(CMG).取输卵管石蜡切片,然后进行PAS及PAS-阿尔新蓝染色.结果①PAS反应显示:峡部粘膜上皮阳性反应明显,三组阳性产物平均光密度值相比,MG与IMG、CMG间差异有高度显著性(P<0.01).②PAS-阿尔新蓝染色显示:峡部粘膜皱襞处上皮细胞游离面有少量淡蓝色阳性产物出现,三组间淡蓝色阳性产物未见明显差异.结论大鼠输卵管峡部粘膜上皮能合成和分泌两种蛋白质:中性糖蛋白和酸性糖蛋白.增龄对大鼠输卵管峡部粘膜上皮中性糖蛋白的合成和分泌有明显的影响,对酸性糖蛋白无明显影响.     

昆明小鼠原核胚在不同培养液中的体外发育

目的优化昆明小鼠原核胚胎体外培养系统,提高胚胎发育率.方法小鼠经超排获得原核期胚胎,制备小鼠输卵管上皮共培养系统,使用M16、CZB和KSOM培养液进行体外培养,并对体内和体外发育的囊胚细胞计数.结果在KSOM和CZB中添加胎牛血清能显著提高胚胎囊胚发育率(14.71%对85.71%;6.45%对10.81%);输卵管上皮共培养可以提高胚胎的卵裂率和囊胚发育率,同时提高胚胎质量和同步发育,小鼠胚胎在KSOMFBS中囊胚发育率达85.19%,显著高于CZB和M16.结论在小鼠输卵管上皮共培养条件下,KSOMFBS能够很好支持昆明小鼠原核期胚胎体外发育.     

用卵移植法研究18-甲基三烯炔诺酮对着床的影响

为了分析18-甲基三烯炔诺酮对着床的影响,我们进行了2-4细胞期受精卵的输卵管移植和胚泡的子宫移植的实验。移植于输卵管的结果表现,由于药物的影响,使卵在输卵管运行的速度加快,干扰了卵与子宫发育的同步性,因而卵不能着床。在移植于子宫的实验中,卵的着床率为61.5%,对照组为65.2%,两组无明显的差别。但胚胎着床以后,在妊娠期中,大部分胚胎的发育受到阻碍,正常的胚胎只有20.8%,而对照组为92.9%,两组有明显的差别。可能是药物影响受卵兔子宫蜕膜细胞,致使不能满足胚胎进一步发育所需要的条件。     

金黄仓鼠早卵裂期胚胎发育的研究

研究结果证明:(1)本研究制备和采用的金黄仓鼠(Mesocricetus aurilus)血清是体外培养金黄仓鼠胚胎的有效成分;(2)丙酮酸钠和乳酸钠加入TC-199液中可显著提高金黄仓鼠胚胎的发育率;(3)TC-199(Ⅱ)、台氏液和杜氏液加适量FCS或PHS都是培养金黄仓鼠胚胎的有效培养液;(4)本研究中已观察到4-细胞期胚胎在体外培养时的进一步发育;(5)金黄仓鼠2-细胞期胚胎移植至雌金黄仓鼠受体的输卵管中可继续发育,培养子兔输卵管中可存活44小时以上。     

共培养体系在牛核移植胚体外发育培养中的应用

采用电融合法构建牛体细胞核移植重构胚,分析共培养细胞类型、传代次数、细胞冻-融以及蛋白质添加物(BFF和FBS)对牛体细胞核移植胚体外发育的影响,探讨胚胎体外共培养的条件,以建立优化的共培养体系。结果表明与非共培养组相比,共培养组重构胚的囊胚发育率以及胚胎细胞数显著增加(P<0.05),而输卵管上皮细胞共培养组同颗粒细胞共培养组相比胚胎细胞数显著增加(P<0.05),更适合做共培养细胞;随着共培养细胞传代次数的增加重构胚囊胚发育率及胚胎细胞数显著下降(P<0.05),共培养细胞在冷冻处理后重构胚的囊胚率和胚胎细胞数都显著下降(P<0.05);BFF较FBS更能促进牛核移植胚的囊胚发育率(P<0.05)。表明应用新鲜原代输卵管上皮细胞进行牛核移植胚胎的共培养,并在SOFaa添加10?F能够有效促进核移植胚胎的体外发育。     

家禽的孵化

家禽的孵化,是养禽业中具有高度技术性的管理工作之一;特别在发展养禽业的今夭,成功的孵化,才能保证大量供应品质优良、体格强健、生产性能高的雏禽,为发展养禽业创造有利条件。现将有关孵化的几个主要问题介绍如下: 一、禽卵孵化的原理 (一)家禽胚胎的发育过程鸟类的胚胎和哺乳类动物的胚胎不同,不是完全在母体内发育完成的。家禽的卵细胞在母体内成熟以后,从卵黄囊排进输卵管中,遇到精子结合成受精卵。受精卵通过输卵管时包上蛋白、壳膜和蛋壳,从泄殖腔产出。在这一般时间内(约21小时),由于家禽的体温很高(各种家禽体     

输卵管特异糖蛋白研究进展

输卵管不仅为生殖细胞的转运、成熟、受精及胚胎的早期发育提供了一个合适的环境,其某些分泌成份可能在这些重要的发育事件中承担着不可替代的作用。为了弄清输卵管分泌成份的生物学功能,提高体外受精(IVF)和早胚发育的质量,研究人员进行了大量的工作。最初人们的注意力主要集中在输卵管中氨基酸、葡萄糖、丙酮酸及阳性离子等组份上,但随着研究的深入,研究的焦点逐渐转     

着床后嵌合鼠的制作法

过去记述的嵌合体,都是将卵裂期的胚细胞聚合在一起,或者将细胞注入胚泡的胚泡腔以后,返回到假妊养母的子宫里。因为着床前的胚胎,是悬浮在输卵管或子官腔内,能够取出在试管内进行各种操作。而着床以后,胚胎在     

羊输卵管液中发情相关糖蛋白的性质研究

哺乳动物输卵管卵管液为受精和早期受精卵的发育提供了一个理想的生理生化环境。人们对输卵管液的成分已进行了初步研究,其中发情相关糖蛋白（EGP）是被研究的成分之一。EGP仅存在在排卵核受精前后的输卵管液中。当受精卵进入子宫区,输卵管液中的EGP就消失了。显然,EGP是与哺乳动物的早期发育过程密切相关。尽管人们对EGP的确切生理功能尚不清楚,但作为第一步,首先弄清EGP的理化性质是十分重要的。本文目的在于研究羊输卵管液中EGP的理化性质。本文采用单向（ID）、双向（2D）SDS－聚丙烯胺凝胶电泳（PAGE）和等电聚胶电泳（IEF）,结合Western blot技术对EGP的性质进行了[研究。由于单克隆抗体及花生凝集素（Peanut Agglutinin)和EGP相结合的专一性很高,不必事先对EGP进行纯化就可直接进行分析。我们的结果证明羊EGP包括两种蛋白质,一种是酸性蛋白,它的等电点为数4．5;另一种是碱性蛋白,其等电点是8：0;这两种蛋白基的分子量相同,都是10kD。从不同物种间EGP这些理化数据上比较,羊和狒狒的非常接近,但和其他动物的有很多不同。我们认为来自不同动物的EGP可能是一类性质相同的蛋白质,具有相同的生理功能,但其分子受糖基化的程度是不同的。本研究使我们对生殖过程的了解使有所增加,也对寻求一种更有效的早期胚胎体外培养基有所帮助。     

腹腔镜下输卵管妊娠的保守性手术治疗

目的:分析腹腔镜下保守性手术治疗输卵管妊娠的疗效及临床应用价值。方法:对2009年1月～2011年12月就诊于本院妇产科的80例输卵管妊娠患者进行腹腔镜下输卵管开窗术及挤压法清除输卵管妊娠胚胎,患侧输卵管系膜下注射甲氨蝶呤(MTX)50mg及稀释垂体后叶素3IU。结果:80例输卵管妊娠患者腹腔镜下的保守手术均取得成功,均顺利保留了输卵管。无中转开腹的病例,术后未发现有并发症的患者,有2例发生持续性异位妊娠。手术所需时间为(52±14)min,手术过程中出血量(28±16)mL,术后住院天数平均5.5 d。术后输卵管通畅率达88.75%。结论:腹腔镜下行保守手术保留生育功能,手术所需时间短、术中出血量少,术后恢复快。     

小鼠早期胚胎移植技术的研究

哺乳动物胚胎移植技术是实验胚胎学、遗 传学、发育生物学研究中的一项重要技术。在 卵母细胞的体外培养、卵的体外受精及对早期 胚胎进行显微手术等研究中,往往是通过观察 卵在体外培养中的卵裂情况来鉴定实验效果。 但是更理想的方法就是将有发育能力的胚胎移 入受体子宫或输卵管内,以观察胚胎能否继续 发育直至胎儿出生。为此,我们对小鼠早期胚 胎进行了外科、非外科手术移植的研究。     

哺乳动物早期胚胎发育的体外研究

哺乳动物胚胎发育起始于受精卵,受精卵依次形成桑椹胚和囊胚.同时,早期胚胎从输卵管迁入子宫,植入母体子宫后通过原肠运动形成原肠胚并进一步发育为新生个体.哺乳动物体内生命孕育方式造成研究取材和观察等方面的困难,阻碍了人类对哺乳动物胚胎发育过程的认识.因此,必需开发哺乳动物体外胚胎技术,以克服体内发育方式所带来的研究困难.2...     

兔输卵管蛋白具有组织特异性而没有种属特异性

哺乳动物输卵管为配子的最终成熟、配子的运输、受精及早期胚胎发育提供了一个独特的、适宜的环境。可以推测：输卵管粘膜上皮细胞分泌的某些蛋白参与了这些过程。有证据表明：输卵管粘膜上皮细胞分泌因子与克服发育阻断作用的现象“相关”。而且,这些因子在功能上无种属专一性。我们则进一步发现：输卵管因子能克服早期胚胎发育阻断。通过纯化兔输卵管上皮细胞分泌蛋白,制备针对各种不同蛋白组份的多抗血清。进行抗体封闭实验。结果表明：抗６４ｋＤ输卵管蛋白（ＤＰＦ－１）多抗血清能完全阻断体外早期胚胎的正常发育,阻断率达１００％。另外,鼠ＤＰＦ－１抗血清的用量与小鼠早期胚胎体外发育阻断率呈一定的剂量效应关系。Ｉｎｖｉｖｏ抗生育实验,即通过主动免疫雌性小鼠,亦证实ＤＰＦ－１具有克服早期胚胎发育阻断的作用。凡经免疫的雌性小鼠,怀孕后检查发现,近半数的早期胚胎发育均遭阻断,这就进一步表明了ＤＰＦ－１在克服早期胚胎发育阻断并实现由母型向合子型调控过渡过程中的作用。为了深入研究ＤＰＦ－１的理化特性和生物学行为,本文对ＤＰＦ－１进行了初步纯化,并制备了ＤＰＦ－１单抗。选择健康、性成熟、雌性新西兰白兔经自然发情、交配后,１７小时处死。取出输卵管上皮细胞、     

羊精子体外获能

本文发展了一种羊精子体外获能培养基——mTs或RSCM。羊精子在该培养基中(39℃.pH7.8和5％ CO_2,95％空气)预先培养7小时,可使大部分精子获能。获能精子呈现超激活运动,并可穿透去透明带仓鼠卵,穿透率分别为78.5±14.3％和96.7±2.3％,这种作用可被同种精浆逆转。获能精子与同种卵的受精率为83.3％。16个受精卵等量移入2只假孕兔输卵管壶腹部中。72小时后回收到12个胚胎。其中6个胚胎已发育为4—8细胞阶段,将这些细胞等量移入2只受体母羊输卵管壶腹部。其中1只妊娠,并维持到2个月之久。     

用原位分子杂交技术检测F9-1EC细胞甲胎蛋白基因的表达

甲胎蛋白(AFP)是一种糖蛋白,在胚胎发育阶段先由卵黄囊合成,以后由胚胎肝合成,成年肝细胞不再合成或合成甚微,但是肝细胞癌变后又重新合成,并分泌到血液中,故属于癌胚性蛋白,是肝癌临床诊断和实验研究的重要标志物之一。