化学发光检测系统的改良型的开发

富士公司(以下称富士公司)在用于结合抗体的新的固相检测基础物质上使用新的化学发光物质,成功地开发出免疫测定系统。该系统比该公司现在销售的化学发光法的检测系统的抗原抗体反应时间减少一半,灵敏度也提高了28倍。另外使用开发的方法,测定低浓度的正常人血清中白细胞介素6(IL6)浓度获得成功。于9月7～10日在吹田市召开的日本生化学会上发表了此成果。 富士公司开发并销售化学发光免疫测定仪器和试剂,其中使用了美国Tropix公司开发的高灵敏度发光基质AMPPD。发表的方法是利用AMPPD的传统方法的改良型。在目前使用的Sandwich酶免疫测定     

ATP生物发光测定试剂研究进展

萤火虫荧光素酶是ATP生物发光试剂的关键组成部分,可通过萤火虫尾提取纯化或基因工程技术制备,酶的活力和纯度决定了ATP生物发光试剂的性能。迄今许多先进技术在ATP生物发光试剂的制备中均有应用,包括酶基因工程改造技术、ATP循环的酶法放大技术、荧光素酶蛋白的活力及发光稳定技术,特异的细胞ATP提取技术等。ATP生物发光试剂的研究焦点主要集中在提高发光试剂的检测灵敏度和性能、增加产品的适应性等方面。     

微生物学的发光仪器

生物发光和化学发光的仪器已有很多应用.这里,我们坚持使用“发光仪”这个词来命名这类仪器,虽然也有人偶尔用辐射仪或光度计等其他名称.这里“发光”一词仅包括生物发光和化学发光,不包括荧光、磷光等等.有好几家公司生产发光仪,本文结尾罗列了这些仪器.而所使用的非商品发光仪不在此列,因此论述将集中在适于工业化生产的发光仪的设计原则.当把生物和化学发光与微生物学联系在一起,人们习惯上会想到生物发光的ATP技术.可是近年来,免疫分析和DNA探针方法也在使用生物及化学发光标记.这些分析技     

人C-反应蛋白磁微粒化学发光酶免疫测定法的建立

人C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了5株稳定分泌抗体的单克隆抗体细胞株,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay, DAS-ELISA)初步鉴定筛选的抗人CRP单克隆抗体,并分别选择m Ab 9D6和m Ab 9G4作为捕获抗体与检测抗体,建立用于人CRP检测的化学发光酶免疫测定法(chemiluminescence enzyme immunoassay, CLEIA),最后通过测定分析临床血清CRP样本,评价CLEIA的性能。结果显示,基于9D6/9G4-AP单克隆抗体对的CLEIA测定范围为0.176 7～500μg/L (可扩展至100 mg/L);所建立的CLEIA与医院采用的免疫散射比浊法(R2:0.949 6, P<0.000 1)表现出良好的相关性,且Bland...     

生物发光分析及其应用

生物发光分析是利用生物体系在酶催化中所产生的发光来测定反应物质浓度的一种灵敏方法。近年来,由于将酶固定以及和免疫技术结合,灵敏度已提高到接近放射免疫技术的水平;而且由于它是一种非损伤性探测法,因而已开始广泛应用于生物学与医学实践中。     

生物发光和化学发光学术讨论会在苏州召开

1990年5月22—24日由中国生物物理学会光生物专业委员会和中国物理学会发光分科学会联合举办的生物发光和化学发光学术讨论会在苏州举行,参加会议的代表100多人,其中中青年科学工作者包括研究生过半数,代表来自全国16个省市,交流的论文达120篇(宣读了64篇),论文的内容覆盖面广,有生物发光、生物的超微弱发光、细胞化学发光、体表发光、化学发光和荧光标记、化学及荧光免疫分析法及测量发光的仪器仪表等。从人数、论文数来看,比1987年苏州光生物学会议增加了4倍,说明生物发光和化学发光这一新兴学科已在我国生根,并得到了迅速发展。     

我国禾谷类病毒病的病原问题 Ⅸ.应用酶联免疫测定法检测小麦丛矮病植株

酶联免疫测定法(简称ELISA)是一种具有高度特异性和敏感性的检测方法。它的基本原理是:利用双功能试剂制备抗体(或抗原)与酶的结合物,该结合物保留了免疫学和酶的活性,酶与底物溶液产生的颜色反应可以定量测定。此法能在极低浓度下定量检测特异的抗原(或抗体),适用于疾病的大规模普查和流行病的调查。自E.Engvall 和Van Weemen 在1971年分别建立酶联免疫测定法以来,目前已广泛地应用于各种传     

微弱发光分析技术原理及应用实例(一)

微弱发光分析技术近年得到迅速发展,在自由基、活性氧分析、化学发光分析、生物的超微弱发光分析、发光免疫分析、生物发光分析等领域得到广泛应用.简要介绍了微弱发光分析技术的测量原理,并以一些研究成果为实例讲解如何应用微弱发光分析技术进行研究和实践.     

化学发光和发光标记技术

化学发光免疫分析是继放射免疫分析和酶联免疫分析后建立起来的一种高灵敏、高特异性的免疫分析技术。化学发光标记是化学发光免疫分析的关键技术,不仅在小分子、大分子物质的标记分析中用于标记物的制备,而且在基因探针标记、肿瘤标记和诊断以及导向药物研究中广为采用。本简要介绍了化学发光和发光标记技术。     

单克隆抗体酶联免疫吸附测定数据的微机分析

单克隆抗体酶联免疫吸附测定法(McAb-ELISA)是一种具有高特异性、准确性和敏感性的酶免疫测定技术。随着单克隆抗体技术的发展,针对各种抗原,尤其是酶和激素等蛋白抗原的微量McAb-ELISA相继建立并获得越来越广泛的应用。但是,人工处理McAb-ELISA测定数据比较费时费力,还可能掺杂主观因素。所以欧美发达国家在生物研究中已普遍引入计算机技     

纤维素载体的酶免疫测定技术

纤维素载体的酶免疫测定技术黎皓（北京生化免疫制剂中心开发室）程伯鲲（中国预防医科院流研所微生物室）自１９６６年Ｎａｋａｎｅ建立酶标记抗体技术以来,酶免疫测定技术（ＥｎｚｙｍｅＩｍｍｕｎｏａｓ－ｓａｙｓ,ＥＩＡ）在很多领域得到广泛应用,被认为是继放射免疫测定技术（ＲＩＡ）和荧光免疫测定技术（ＩＦＡ）之后的一项重要的免疫测定技术。其原理是通过化学方法将酶与抗体（或抗原）结合起来,酶标记后的抗体（或抗原）仍然保持与相应抗原（或抗体）相结合的免疫学活性以及酶的催化活性, 酶标记抗体与抗原结合后, 形成酶标抗体一抗原复合物。     

HISCL-5000高敏发光全自动免疫分析仪检测感染性指标的临床性能评价研究进展

HISCL-5000高敏发光全自动免疫分析仪以化学发光酶免疫测定法为工作原理,用碱性磷酸酶标记检测化学发光,采用目前最快速、最灵敏的化学发光底物CDP-Star,曝光时间只需15~60 s。反应在液体中进行,实现了短时间内的高效率反应,反应时间可短至17 min。我们根据美国临床和实验室标准化协会颁布的EP系列文件,对HISCL-5000分析仪的分析性能进行评价,对相关研究进展做一综述。     

我国禾谷类病毒病的病原问题 Ⅸ.应用酶联免疫测定法检测小麦丛矮病植株

酶联免疫测定法(简称ELISA)是一种具有高度特异性和敏感性的检测方法。它的基本原理是:利用双功能试剂制备抗体(或抗原)与酶的结合物,该结合物保留了免疫学和酶的活性,酶与底物溶液产生的颜色反应可以定量测定。此法能在极低浓度下定量检测特异的抗原(或抗体),适用于疾病的大规模普查和流行病的调查。自E.Engvall和     

用ELISA定量测定破伤风毒素

<正>破伤风毒素的测定一般是按MLD(最小致死量)试验检定其毒力;或者按絮凝反应法用标准抗血清(ATS)检测其免疫反应性(Lf活性)。MLD测定法需要大量动物,经过很多时日,且受到实验动物的影响,测定依赖于毒素活性,而不是直接定量测定样品的毒素蛋白,尽管絮凝反应法操作简便,但它仅仅是毒素量的间接测定,是半定量的方法,不具备在酶免疫测定中可以获得的灵敏度。 本文介绍了破伤风毒素的夹心ELISA定量测定法,并与常规絮凝法进行了比较。     

昆虫的发光及其应用

<正> 生物发光现象(Bioluminescence)是众所周知的,早在1700年前我国就有“车胤聚萤夜读”等记载。除萤火虫外,其它动物、植物、微生物也有一些发光的类群。近来人们还发现越来越多的生物反应都能发射很弱的光,这种低水平的发光被称为生物的化学发光(Chemilumi-nescence)。本文仅就昆虫的发光加以简介。 一、发光昆虫的类群及其研究状况 昆虫的发光可分为两大类,一类是由于发     

生物发光及化学发光在生物医学领域中应用的进展

生物发光和化学发光在生物医学领域内的应用主要包括细胞学检测,分子生物学、卫生学检测,生物传感器、脂质过氧化检测和药物筛选等六个方面,其中细胞学检测主要是利用细胞内ＡＴＰ导致的虫荧光素酶发光进行活细胞计数,目前已实现快速、动态、单细胞分析;同时发现了一些新的与生物或化学发光有关的细胞学指标。分子生物学领域内的应用主要为报告基因和分子杂交,近年来又有人推出了生物发光实时ＤＮＡ测序技术。卫生学检测则主要     

固相化学发光免疫分析法在病毒性肝炎病原分型上的应用

化学发光免疫分析方法是近十年发展的新技术,国内正在建立这一技术。由于化学发光免疫分析的敏感性可与放射免疫分析相比,而且无放射免疫试剂的半衰期限制和辐照污染的弊病,是一项很有前途的实验技术。为此,我们研究了固相化学发光免疫分析(SPCLIA),并用此技术做了病毒性肝炎病原分型的应用。为了比较     

化学合成的萤火虫荧光素的理化性质

萤火虫荧光素酶(luciferase,简称荧光素酶)发光系统是各类生物发光中研究得最深入,最透彻的一类,也是生物发光分析中应用得最广泛的一种。在国外,有关生物发光分析试剂都已商品化,而国内则很少,只有粗荧光素酶。荧光素是有关生物发光分析中必不可少的有机试剂。为此,我们研制了荧光素,并与国外产品作了比较。     

吖啶酯发光免疫分析技术的研究与发展

目的:为了对吖啶酯发光免疫分析技术的研究与发展有更深入地了解,更加知晓吖啶酯发光免疫分析技术的发展前景。方法:通过对采用吖啶酯发光免疫分析技术治疗的疾病进行分析研究,以及参考最近几年几十篇有关吖啶酯发光免疫分析技术的文献,深入研究近期的20多篇文献。分析吖啶酯发光免疫分析技术在免疫学上的研究及重大突破,整理数据分析吖啶酯发光免疫分析技术在很多领域重大应用。结果:吖啶酯发光免疫分析技术在现今医学有着巨大的贡献,尤其在对测定血清中癌胚抗原(CEA)含量的检测方法和检测人体血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法中效果显著,值得大力推广。结论:现今社会高速发展,一般的医学检测技术已无法满足日益精进的免疫学技术,于是吖啶酯发光免疫分析技术应运而生,为现今免疫学贡献自己的一份力量,提高人类各个领域技术。     

微生物快速诊断中的免疫荧光技术进展

早在1941年由Coons创立的免疫荧光(Immunofiuorescence IF) 技术,在六十年代以后有较大发展,已广泛应用于生物医学研究和临床诊断工作中,建立了直接法、间接法、抗补体法和混合球蛋白法等。近年来,随着免疫标记技术的发展,又出现了同位素标记、酶标记和化学发光免疫测定等技术,并日益受到重视。但是,IF由于具有光学显微镜形态学和