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《生物技术通报》1992,(4)
/Perez一Mateos,M.…/J.Sei.Food.Ag-r ie一2991,55(2)一229~240〔译自DBA,1991,10(18),91一10559〕 研究了通风时间、缓冲类型、酶一土比率和酶浓度对固定于黑色石灰土胶体粒子上的碱性磷酸酶(AP)固定化的影响。典型的情况下,土壤(109干重)与Zoml AP溶液(225声g/ml)混合,40℃下振摇5小时。离心后洗涤固定酶小粒以除去未固定的AP。固定与溶解AP的Krn值分别为6.72和1.76mM。土壤和固定化AP的最适pH为10.2~11。灭菌或自然土壤样品固定的AP不如本地土壤酶稳定。于22℃下的土壤中贮存50夭后,65%的本地AP和25%的无菌土固定酶保持活性… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(3)
921165利用膜操作提纯赤霉酸〔英〕/Leonhardt,H.W.…了Aeta Bioteehnol一1991,11(2)一95~101〔译自DBA,1001,10(15),31一05776〕 提供了利用合成的纤维素一2,5一乙酸醋膜通过超滤工艺提纯赤霉素(GA)的方法。利用表面技术式浸没技术生产GA,依产GA手段的不同,培养液中GA的产量变化范围为40mg/1~19/l。初始原料含一厚层油性物质,可在ds。。rpm下离心分开。在0.3MPa压力下使用纤维素一2,5一乙酸醋膜UF60和UF40。经用PEG和在不同温度下进行的一系列实验得出用UF60提取GA的温度应选择85℃。首次离心提纯初始溶液后加人沉淀剂。共同使… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(12)
,石石泞‘汤.刁,,口.r..“924339杆状病毒至组体在受纳和非受纳昆虫细饱中的签娜表达〔会,英〕/Melntosh,A.H.…2 In vitro一1992,25(3),Pt .2一soA〔译自DBA,1992,11(11),92一06032〕 用携带在p10和多角体启动子控制下的声一半乳糖昔酶和荧光素酶基因的首蓓银纹夜蛾多核壳体核多角体病毒(Ac一Gal一Lu。)测定了报道基因在受纳和非受纳昆虫细胞中的表达。所用鳞翅目昆虫细胞系为粉纹夜蛾(Tn一CLI)、草地贪夜蛾(少-LB一Sf21)等6种,还用了鞘翅目棉铃象的细胞系(AGE)。将细胞与Ae一Gal一Lul以ioMOI的量一同在28℃下保温72小时,然后… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(10)
923505快速简便地从产阮假丝醉母制备ONA〔英〕/Krizk-ova,L.…/Folia Mierobiol一1092,36(4)。一406~407[译自DBA,1992,11(7),92-03633〕 从产阮假丝酵母(Ca介己云da”云玄“s)工业菌株IRBMCS分离DNA,步骤如下:将指数I期的细胞悬浮于原生质球形成液(1.2M硫酸镁、20mM柠檬酸、pHS.s)中,5分钟后,加人Zymolase一5。。。(50g/l,溶于10倍稀释的原生质球形成液加10%a一疏基乙醇溶液中)。37℃半小时后,离心收集原生质球,悬浮于盐酸肌溶液(4.5MGuHCI,o.iM EDTA、o.15M NaCI、soopPmSDS、pHs)中,在65℃下温育10分钟。室温冷却后,… 相似文献
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《生物技术通报》1989,(4)
891283用化学亲和柱层析法分离提纯含乙型肝炎表面抗原的pre一52〔英万Lin,J.Y.…了Appl,Bioehern.Biotechnol一19吕7,15(3)。一255一263〔译自DBA,2988,7(15),88一08895〕 需要快速而有效的分离纯化乙型肝炎表而抗原(HBsAg)的多肤p31和p68,可用重组DNA技术来生产这些多肤。从人血清蛋白制备多体人血清蛋自(P HSA),透析后在Sepharose4B往上纯化。交联pHSA和活化的Sep}iafose续B,制备pHSA一Sepha,,05。4B(pHSA一S一4B)亲和柱。HBsAg慢性携带者的血浆单独离心,以硫酸按分部。透析HBsAg沉淀物,过羚磷灰右柱,再使HJBsAg荆一!… 相似文献
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《生物技术通报》1993,(2)
930378质粒DNA的■促纯化[英]/Isfort,R.J./BioTechniques.一1992,12(6).一798---804[译自DBA,1992,11(15),92-08366] 本操作只需2小时,不用昂贵设备,花钱少。如此提纯的质粒DNA可用于限制性酶切,.克隆、亚克隆、定序、缺口平移分析和末端标记。用此法纯化的质粒为MSVcL,它含有野生型p53肿瘤抑制子基因。培养携该质粒的大肠杆菌,细胞用碱裂解处理后离心,再用酚·氯纺(1 t 1)和异丙醇处理细胞团。离心后将细胞困重悬于50raM Tris—HC。l’(pH8,含30mM MgCII、O.5raM ATP和10m。|yI磕基乙醇,总体积1 m1)。加20/,I酶液(含100U R… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(8)
922864降解的PCR引物的一个简单有效的纯化方法〔英〕//Fekete,A.…1 Bioteehnol.Teeh一1901,5 (6)一479~452〔译自DBA,2992,11(3),92一01226〕 引物是在一20~一9。℃下贮存过程中降解的。在8%的琼脂糖凝胶将引物电泳,通过对凝胶进行槽切使主带电析出来。电泳和电洗脱过程只需45分钟。用这种装置也可对PCR样品作这类分析。用异丁醇提取再用乙醇沉淀来回收引物。产率为20~40%,在26Onm的吸收值与在280nm波长上吸收值比率大于1.8。这样纯化后可得到好的扩增效果。使用本法可使流产布氏杆菌(B,”ee乙la abo,‘咎s)519 DNA的一个607bp的… 相似文献
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《生物技术通报》1985,(6):15
852214单克隆抗体用作探测鼠类透明带主要硫酸糖蛋白ZP一2分布的探针〔英〕/East,1 .J。1 J.Cell Biol一1984,98(3)一795~800〔译自DBA,1984,3(13),84一06309〕 ,自DBA/2小鼠卵巢分离出透明带,给雄性大鼠(Osborne一Mendel)腹腔内注入含100。个透明带的悬液,以14天的间隔再注射两次,6一8周后大鼠接受一次静脉注射,3天后用聚乙烯二醇1000使小鼠脾细胞与SPZ/0小鼠骨髓瘤融合。分泌抗小鼠透明带的特异单克隆抗体杂交瘤系则用放射免疫体鉴定。阳性瘤系用有限稀释法克隆化两次,然后像腹水瘤一样接种给异十八烷处理过的NIH裸鼠繁殖。对ZP… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(9)
923449重组体葡聚糖水解啤酒酵母菌株的构迷与分析〔英〕/Suihko,M.L.…了Appl.Mierobiol一B 1 oteehnol一1991,35(6)一751~757〔译自DBA,1992,11(5),92一02748〕 构建了4种不同类型的具纤维素酶活性底面发酵酿酒酵母(Saecha,o仍鲜ees ee:e‘s￡ae),方法为利用共转化和基因置换,使里氏木霉(T八-“hoder,a俨eese￡)vTT一D一50133的纤维素酶egll基因整合到酿酒酵母VTT一A一63015(A15)的PGKI或ADHI位点。用质粒pMA91和质粒pAAHS构建分别在PGKI和ADHI启动子和终止子之间携带egn基因的质粒pMN20和质粒pMN200。构建的单拷贝整合… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(1)
朴0130 T 4ONA连接酶〔英〕/未署名厂英 国Bi。一Rad Lab.的新闻稿一28.01.87〔译、自CBA,1987,(4),2550〕 英国Bio一Rad Laboratories公司生产 出了一种对具有粘性和钝末端的及NA有活性的纯化T注DN人连接酶。该酶是从之噬菌体NM989溶源的大肠杆菌(百.coIl’)的菌株中分离出来的。(郝慧斌)8801引新型耐热的支链淀粉酶及其生产方法〔专,英〕/Katkoein,D.M.…了US Pa-tent US、628028。P:lb.09.12.86.ApP-1.US 737309,filed 23.05.85仁译自CB-A,1987,(4),1553〕 在70℃和PH6的条件下没有底物存在时培养100分钟,Thermoanaerobi… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(5)
921792利用变铅,链.菌生物转化洋地黄毒试元【英〕/Dahiya,J.5.了Indian J.Mierobiol一1991,31(3)一251~256〔译自DBA,1991,20 (21),91一12157〕 将悬浮于Tween一80的洋地黄毒贰元(1g)加人到4日龄的变铅青链霉菌生长培养基中,于26~30℃下温育21天。温育后,离心和浓缩培养液,然后用氯仿一甲醇(3:1)抽提。对抽提液进行硅胶TLC,并经Nueleosil5Cis上的HPLC分离和纯化产物。收集到6种级分,对其进行MS、PMR和CMR光谱分析。经鉴定这些物质为洋地黄毒贰元、17一夕一H一洋地黄毒贰元、3一epi一17一声一洋地黄毒贰元、17一声一H一aeovenos… 相似文献
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《生物技术通报》1992,(6)
922127在有血清粗换因子的人二倍体细胞系中生产疫苗的可能性〔英〕/Candal,F.J.…了Biologieals一1991,19(3)。一213~218〔译自DBA,1991,10 (23),91一13467〕 美国食品和药物管理局批准了用MRC一5和W工一38细胞系生产抗巨细胞病毒(CMV)和痘带状疤疹病毒(VZV)的疫苗。研究了这两种细胞系和病毒在含血清置换子LPSR一1(低蛋白血清置换子)中的生长能力。在含10oU/ml青霉素,100林g/ml四环素,2 mM谷酞胺,20mM HEPES和1.6%LPSR一i加2%小牛血清(FCS)或10%FCS(对照)的Eagle产s基本培养基中细胞活力在90%以上。补充LPSR一i可加强Wl… 相似文献
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《生物技术通报》1988,(1)
8803了4在大肠杆菌中表达的重组体人刀-干扰素的纯化〔英〕/Lin,L.S.…了Metho-ds Enzymol一1956,229一183一192〔译自CBA,1987,(4),1676〕 重组体人户干扰素和结构类似物(在该结构类似物中丝氨酸取代了在第17位上的半胧氨酸)是疏水性的,只有在有离子型去垢剂如SDS的情况下是可溶性的。因此,在有SDS的情况下进行纯化,用2一丁醇酸的沉淀作用来萃取,并在SephaerylS一200和SephadexG一75上层析。(马亚敏)880375大规模生产人淋巴母细胞干扰案〔英〕/Phillips,八.W.…了Methods Enz-ymol一1986,119一35一35〔译自CBA-1987,(4),1749〕 … 相似文献
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《生物技术通报》1992,(9)
923250新的eDNA签因库构建法〔专,日〕/Toa一Fuel/Jo3254一652:05。02.90一JP一025844(13。11.91)05。02。90 as 025844。92一002455/01(21页)〔译自DBA,1992,11(6),92一03088〕 在构建cDNA基因库的方法中包括制备双链 (ds)。DNA、修饰及重新结合。已用此法有效地构建了相对微量。RNA的cDNA基因库。实例:用小鼠Friend细胞的胞质RNA和pol(A)十RNA合成ds eDNA。用NaOH/NaCI修饰此eDNA并通过用含ioXSSC、smM EDTA和50%甲酞胺的溶液处理使之重新结合。回收重新结合的cDNA、连接到噬菌体卜gtl。上并离体包装。测定了cDNA… 相似文献
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质粒DNA的提取是最基础的DNA重组技术。国内外已经发展了许多方法用于批量提取质粒DNA。这些方法都可以获得满意的效果。这里介绍两种小量快速提取质粒DNA的方法,可用于重组子筛选及酶切分析。 (一)碱裂解法 1.将过夜培养的菌液1.5ml转移到小离心管内,15.000r/min离心30sec,弃去上清,将离心管倒置尽量除去培养液。 2.将沉淀的菌体再悬于100ml冰冷的溶液A中(50mM葡萄糖,25mM Tris pH8.0,10mM EDTA),不必要加入溶菌酶。 3.向A液中加入新配制的溶液B200μl(0.2N NaOH,1％SDS),迅速倒置几次,混合两溶液,放在冰浴上3—5分钟。 4.再加入150μl溶液C(5M醋酸钠60ml,冰醋酸11.5ml,蒸馏水28.5ml)混均后冰浴3～5分钟。 相似文献
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《生物技术通报》1992,(7)
922474 酶反应工程:在有机助溶剂存在下利用稳定的PGA催化抗生素合成[英]/Fernandez-Lafuente,R.…∥Enzyme Microb.Technol.-1991,13(11).-898～905[译自DBA,1991,10(25),91-14636] 利用Kluyvera citrophila青霉素-G-酰基转移酶(PGA)的多点共价接触Sepharose CL-6B衍生物,可由苯乙酸(PAA)和6-氨基青霉烷酸(6-APA)合成青霉素G。反应是在含15ml PGA-琼脂糖衍生物的填充床式反应器中进行的,用100ml反应溶液(溶解于水-助溶剂混合物中的250mM 相似文献
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建立大熊猫的精子库,进行远距离圈养大熊猫种群间的人工授精和遗传物质的转运,维持遗传多样性,是目前大熊猫遗传管理的优先方法。要成为最有效的工具,精子库保存的精子解冻后的活力必须很好。本文对大熊猫冷冻精液的解冻速度和解冻液中添加化学激活剂Pentyoxyfilline(PF)后的精子活力进行了试验。试验用的精液采自11只成年大熊猫,精液冷冻速度为每分钟-40℃～-100℃。试验Ⅰ:将冷冻精液放入3种不同温度的水浴中解冻:(1)22℃(慢速解冻);(2)37℃(中速解冻)(3)50℃(快速解冻)。将冷冻前精子活力(78 1±2 9%)和解冻后的平均精子活力进行比较,快速解冻后的精子活力(57 5±5 4%)显著地降低(P<0 05),而中速解冻的精子活力(67 5±3 1%)和慢速解冻的精子活力(73 33±2 1%)与冷冻前的活力接近。试验Ⅱ:使用中速解冻方法解冻精液后,分别加入最终浓度为0mM、1mM、5mM和10mM的PF,然后分别保温15min和24h。在PF(0mM、1mM、5mM和10mM)中分别孵育15min的解冻精子活力,运动状态,活率和顶体正常率在试验期的90min内都很相似(P>0 05)。在1mMPF中孵育24h的精子活力没有变化(P>0 05)。在5mM和10mMPF中孵育过的精子活力(5mM:24 0±4 7%;10mM19 5±3 6%)比没有加PF的对照组的精子活力(38 3±5 2%)显著地低(P<0 05)。而且,在10mM 相似文献
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《生物技术通报》1994,(5)
942070用微板快速筛选降解多环芳香烃的微生物的新方法[英]/Stieber,M.…∥Appl.Microbi01.Bioteehn01.一1994,40(5).一。753～755E译自DBA,1994,13(4),94—02401] 开发了统计降解多环芳香烃(PA}Is)的微生物的新方法。水样本分离物培育在以PAHs为唯一碳源的液体矿物盐培养基中的96一孔微板里。PAHs溶解于非极性溶剂,然后用吸管将溶液滴到孔里,使之覆盖孔壁和孔底,接着真空下溶剂蒸发。微生物降解PAH期间形成有色产物导致培养基显色,由此可用最大概率计数法估测细胞滴度。利用电子多道吸管可加速这一步骤,并可同时培育用不同PAHs预… 相似文献