产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的检测及药敏分析

目的对3年间分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌进行鉴定和药敏试验分析。方法采用1999年NCCLS建议的纸片扩散确证法,从76株肺炎克雷伯菌中分离出14抹产超广谱β-内酰胺酶细菌,检出率为18．4％。结果产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌对7种常用抗生素的药敏结果可以看出,亚胺培南对肺炎克雷伯菌作用最强,可作为治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌感染的首选药物,敏感率高达86％,是控制感染的最有效的药物。其次为头孢哌酮／舒巴坦,敏感率达59．7％,也有一定的抗菌活性。结论产超广谱β-内酰胺酶检测对指导临床合理使用抗生素具有重要意义。     

217株铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶状况及血清学分型的调查研究

目的了解广州地区铜绿假单胞菌（PA）3种主要β-内酰胺酶（金属β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶）的产生情况和血清型分布,观察这些铜绿假单胞菌的耐药差别.方法用法国生物梅里埃公司的VITEK-2细菌鉴定与药敏系统进行217株铜绿假单胞菌的鉴定与药敏,对可疑产金属β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶的菌株,用双纸片协同试验和头孢西丁三维试验进行3种酶的表型确证,同时采用玻片凝集试验对这些菌进行血清分型.结果217株铜绿假单胞菌的β-内酰胺酶产酶率为20.7%（45/217）,其中产金属β-内酰胺酶的有26株,占12.0%（26/217）,产AmpC酶的有11株,占5.1%（11/217）,产超广谱β-内酰胺酶的有8株,占3.7%（8/217）;对氨曲南、头孢吡肟、头孢他啶、环丙沙星、亚胺培南、左旋氧氟沙星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/棒酸和美洛培南这些临床常用抗生素,产酶菌较不产酶菌敏感性明显降低（P均小于0.05）;217株铜绿假单胞菌的血清分型以G型为主,占39.6%（86/217）,其次为L型,占19.8%（43/217）;产酶菌株的血清型以B和L型为主.结论广州地区引起临床感染的铜绿假单胞菌产生的β-内酰胺酶以金属酶最常见,其次为AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶;产酶株对临床常用抗生素敏感性降低;广州地区铜绿假单胞菌的血清型以G型为主,产酶菌株以L和B型为主,临床上治疗铜绿假单胞菌引起的感染应根据实验室的药敏结果选择抗生素.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌在泌尿系统感染中的流行情况及对12种常用抗菌药物的耐药性,为临床合理使用抗生素提供必要依据.方法:采用K-B纸片扩散法,测定128株大肠埃希菌对12种抗菌药物的耐药性,同时使用E-test方法筛选超广谱β-内酰胺酶阳性菌株.结果:从128株大肠埃希菌中共检出ESBL 26株,产ESBL细菌阳性率为20.3%.在12种抗菌药物中,亚胺培南的体外抗菌活性最好,敏感率为100%,其次为阿米卡星(90.5%).结论:产ESBL细菌多重耐药现象严重,只有正确使用抗生素才能降低ESBL的发生,而对于产ESBL菌株感染的治疗,亚胺培南应作为首选药物.     

不动杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶调查

目的了解不动杆菌属产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药分析。方法用K-B琼脂扩散法进行药敏试验,三维试验检测不动杆菌属产生的AmpC酶和ESBLs。结果169株不动杆菌,产ESBLs 43株(25.6%),产AmpC酶41株(24.4%),同时产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶10株(5.8%);产AmpC酶的菌株耐药情况比产ESBLs的菌株严重。结论不动杆菌属产AmpC酶和ESBLs的比例较高,应合理使用抗生素,才能有效控制感染。     

粪标本大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的检测分析

通过对粪标本中大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测,调查头孢菌素使用较多临床科室ESBLs大肠埃希菌菌株阳性率,分析ESBLs可能感染或产生的相关因素,为改变抗生素临床用药方法和采取必要控制感染的措施提供实验依据,减少院内ESBLs产生率.     

产超广谱β-内酰胺酶阳性菌检测及其耐药性分析

目的 了解新乡市中心医院近年来产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性菌的种类、分布及对11种常用抗菌药物的耐药情况,为控制其扩散、暴发流行和指导临床治疗提供科学依据。方法 对该院2003年1月～2004年1月从临床各类标本中分离的革兰阴性菌用双纸片协同法筛选产超广谱β-内酰胺酶阳性菌株,采用K-B纸片扩散法比较亚胺培南等11常用抗菌药物对产ESBLs耐药菌体外抗菌作用。结果 产ESBLs耐药株占全部革兰阴性菌的22.82%,克雷伯菌属、肠杆菌属、埃希菌属、假单胞菌属和沙雷菌属ESBLs的流行较严重,检出率分别为31.22%、29.02%、27.23%、25.19%和23.08%,在11种常用抗菌药物中,亚胺堵南的体外抗菌活性最好,敏感率为100%。结论 革兰阴性菌中,ESBLs阳性菌的发生率较高,同时ESBLs阳性菌有较高的耐药性。实验室应注重ES-BLs的检测和报告,指导临床合理应用抗生索,有效地控制ESBLs菌株在医院内的传播和流行。     

产超广谱β-内酰胺酶菌株的分布及药敏试验结果分析

目的：了解我院产超广谱β-内酰胺酶菌株的分布和耐药情况。方法：用Kirby—Bauer法检测了136株产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对10种抗生素耐药性并对其标本来源和病区分布进行了分析。结果：检出ESBLs最多的标本是呼吸道分泌物(43．4％),检出ESBLs最多的科室是普外科(22．8％)。136株产ESBLs菌株对亚胺培南和美洛培南的敏感率高达100％,对多数抗生素的敏感率低于50％。结论：呼吸道分泌物和普外科是ESBLs的主要来源。治疗产ESBLs菌株引起的感染的首选药物为亚胺培南和美洛培南。产ESBLs肺炎克雷伯菌对药物的敏感性普遍低于产ESBLs大肠埃希菌。     

超广谱β-内酰胺酶SHV-18的表达纯化及活性验证

目的：产超广谱β-内酰胺酶是肠杆菌科细菌和肺炎克雷伯菌对β-内酰胺酶类抗生素耐药的重要机制,该类酶主要水解青霉素类、头孢菌素类以及单环酰胺类抗生素。自从1983年第-次有关p内酰胺酶的报道开始,至今已经发现超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的种类超过400种,其中SHV型是最常见的ESBLs类型之一。本研究主要探讨了超广谱β-内酰胺酶SHV－18的原核表达载体的构建、酶的纯化和活性验证。方法：利用肺炎克雷伯菌ATCC700603全基因组为模板,应用分子生物学技术钓取SHV-18基因,构建pET22b（＋）-SHV－18表达质粒,经测序鉴定后,转化大肠杆菌Transetta（DE3）,IPTG诱导表达并亲和纯化,进-步通过抗生素水解实验,检测其水解活性,测定其酶动力学参数。结果：成功构建了可以以裂解上清形式高效表达SHV-18的工程菌。通过亲和纯化最终获得纯度达到90％以上的β-内酰胺酶SI-IV-18。获得的SHV-18蛋白能够水解青霉素G、头孢拉定、头孢唑肟、头孢他啶、头孢吡肟等多个抗生素。结论：获得了对青霉素和头孢菌素类具有水解活性的超广谱β-内酰胺酶SHV-18,并对其酶动力学参数进行了检测。在实验室研究了β－内酰胺酶SHV－18对不同抗生素的水解特性,更加有利与指导临床抗生素的合理使用。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌感染及耐药性分析

大肠埃希菌是临床最常见的病原菌之一,近年来产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌感染不断增加,给临床治疗带来了很大的难度。因此,了解其感染与耐药状况,对指导临床合理应用抗生素显得至关重要。笔者对2002年1月～2003年6月临床分离的产ESBLs大肠埃希菌感染情况及耐药性进行了分析,并与不产ESBLs大肠埃希菌进行了比较,现报告如下。     

细菌超广谱β-内酰胺酶提取方法研究进展

超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)可水解β-内酰胺类抗生素,使产ESBLs细菌对目前常用的头孢菌素和青霉素类等抗生素产生多耐药性和高耐药性,由此使得产ESBLs细菌感染的诊断和治疗成为临床抗感染诊疗工作的重点。目前细菌的ESBLs提取主要包括超声波破碎法、溶菌酶法和反复冻融法等。本文对现有文献中此三种方法的提取原理、提取步骤和影响因素进行了综述,同时对各种提取方法的优缺点进行了分析比较,并对采用反复冻融法联合超声法和溶菌酶法联合超声法等联合提取法提高酶提取效率的展望予以了简要分析,以期为产酶多重耐药菌的控制提供参考。     

产超广谱β- 内酰胺酶肺炎克雷伯菌感染调查及耐药性分析

目的:探讨我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌阳性率及耐药性的变化,以指导临床合理应用抗生素。方法:对我院自2009年1月至2011年8月住院患儿送检的各类标本中分离得到的肺炎克雷伯菌413株进行ESBLs筛选和确证。结果:共分离得到413株肺炎克雷伯菌,其中产ESBLs的菌株共204株,占49.39%,且有逐年上升趋势。ESBLs阳性菌株对头孢他啶、头孢噻吩、头孢噻肟、阿莫西林耐药程度最为严重,耐药率为100%;对美洛培南、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、环丙沙星高度敏感,敏感率为90.2%～100%。结论:产ESBLs的肺炎克雷伯菌已成为主要耐药菌,应加强耐药监测,重点监管并指导临床合理应用抗生素。     

中药抗耐药大肠埃希菌研究进展

近年来,耐药大肠埃希菌感染日趋严重,产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌株不断增加,由于细菌的多重耐药性,西药抗生素治疗效果差.医药工作者将新药物研究的方向投向中药.本研究就近年来中药抗耐药大肠埃希菌研究进展进行综述.     

不同时期肠杆菌科细菌产ESBLS及耐药性的监测

目的对不同时期肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLS）及耐药性进行监测。方法采用生物梅里埃ATB药敏试验板测定肠杆菌科细菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗生素的敏感性,同时用表型确证法检测ESBLS。结果肠杆菌科细菌2006-2008年与2009-2011年两个时期相比,ESBLS的检出率增长近50%。对亚胺配南、头孢吡肟、头孢西丁耐药率较低,对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星的耐药率次之,对其他β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类及磺胺类抗生素的耐药率较高,且两个时期相比耐药率增加明显,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论临床产ESBLS菌株不断增多,多重耐药现象越来越严重,临床实验室应当把ESBLS的检测作为常规监测工作,有效指导临床选用抗菌药物。     

革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测及耐药分析

目的检测引起医院感染的革兰阴性杆菌携带产ESBLs和去阻遏AmpC酶状况,探讨各菌对临床常用抗生素的主要耐药机制及耐药性,为临床制定合理使用抗生素策略提供依据。方法采用全自动微生物分析仪（VITEK-32）做细菌鉴定和药敏试验,用纸片扩散确证法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,用三维法检测高水平表达染色体编码的AmpC酶。结果158株革兰阴性杆菌ESBLs检出率为26．6％,主要菌为大肠埃希菌（45．2％）、肺炎克雷伯菌（42．9％）、阴沟肠杆菌（11．9％）。AmpC酶检出率为10．1％,主要为鲍曼不动杆菌（43．8％）、阴沟肠杆菌（25％）;上述产酶细菌均对青霉素和一、二、三代头孢菌素、磺胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类耐药,对亚胺培南敏感。结论革兰阴性杆菌耐药机制主要是产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶,这些产酶菌株均出现多重耐药。     

福氏志贺菌CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性

目的 产超广谱β-内酰胺酶( extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)福氏志贺菌的耐药性及其基因型.方法 K-B法检测福氏志贺菌对抗菌药物的敏感性,改良三维试验检测菌株是否产生ESBLs,ESBLs的基因型通过PCR扩增、DNA测序的方法进行.结果 148株福氏志贺菌检测出6株产ESBLs,其基因型为CTX-M-3和CTX-M-14;产ESBLs福氏志贺菌对氨苄西林、头孢噻肟、复方新诺明、四环素均耐药,对头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星敏感.结论 应加强对福氏志贺菌的耐药性监测,合理使用抗生素,防止产ESBLs福氏志贺菌的流行和传播.     

深圳地区产超广谱β-内酰胺酶菌株的TEM基因分析

目的了解本地区临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株携带TEM基因的情况.方法应用表型确证试验筛选产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌.碱裂解法提取产酶株的质粒,应用PCR方法分析TEM基因.结果215株产ESBLs菌株中TEM基因阳性87株,阳性率为40.5%,其中产酶大肠埃希菌TEM阳性率为49.7%,肺炎克雷伯菌阳性率为18.8%.TEM型产酶株主要来源于痰和尿标本(37.9%和22.0%),在肝胆外科、重症监护室和老年病科分布较多.结论TEM型为本地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌常见的基因型,广泛分布于各临床科室,需引起重视.     

摩氏摩根菌耐药性和超广谱β-内酰胺酶检测

目的了解摩根摩根菌临床分离株对抗菌药物的体外敏感性和临床分布,研究摩氏摩根菌超广谱β-内酰胺酶基因类型分布。方法用K—B法对67株摩氏摩根菌进行药物敏感性检测;PCR法检测超广谱β-内酰胺酶基因,并对PCR结果进行测序分析。结果摩氏摩根菌株对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、氨苄西林／舒巴坦、庆大霉素、呋喃妥因均已产生较高的耐药率;而对环丙沙星、左旋氧氟沙星和第三代头孢菌素的耐药率保持在较低水平;对亚胺培南、美洛培南、头孢西丁100％敏感。基因型分析显示有5株携带CTX-M基因,其中3株摩根摩根菌基因型为CTX—M-14型,2株为CTX—M-15型。结论摩氏摩根菌ESBLs检出率仍较低;5株产超广谱β-内酰胺酶摩氏摩根菌对多种抗菌药物耐药,其基因型为CTX—M-15或者CTX—M-14;需加强对不常见肠杆菌科细菌的耐药监测。     

蓝莓提取物对产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的抑菌活性

【背景】随着细菌耐药性的增强,产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的出现严重危害食品安全和人体健康。蓝莓中含有丰富的多酚和花青素,是天然抗菌材料的优选。【目的】分析蓝莓提取物对3株产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的抑制活性及作用机制,并以牛乳为样品检测食品基质对蓝莓提取物抑菌活性的影响。【方法】利用甲醇制备巴尔德温和黑珍珠蓝莓提取物并检测提取物中总酚和花青素含量,利用纸片扩散法检测肺炎克雷伯菌的耐药性,利用最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)和生长曲线研究蓝莓提取物的抗菌活性,通过共聚焦激光扫描显微镜观察蓝莓提取物对细胞膜完整性的影响,并检测其在牛乳中的抑菌活性。【结果】巴尔德温和黑珍珠蓝莓提取物中的总酚含量分别为2.3 mg/g和3.5 mg/g,花青素含量分别为67.5 mg/100 g和92.5 mg/100 g。两种蓝莓提取物对肺炎克雷伯菌KP106、KP305和KP408的MIC均为25mg/mL,MBC均为50mg/mL。生长曲线表明...     

大肠杆菌中一种新类型的超广谱β—内酰胺酶

出现于北京协和医院的一耐头孢噻甲羧肟的临床分离菌株大肠杆菌(E.coli 5518),含有一约7.5kb的耐药质粒,编码产生一种新类型的超广谱β-内酰胺酶(ESbla).除了头霉甲氧噻吩和亚胺硫霉素外,产酶菌株对所测定的多种β-内酰胺类药物都耐药.该菌株耐β-内酰胺类药物的特性可接合传递给E.coli JP559菌株,与之一起转移的还有耐氨基糖甙类和磺胺类药物的特性.β-内酰胺酶抑制剂棒酸能抑制此酶的活性.此ESbla基因既不与SHV-1也不与TEM-1的结构基因片段杂交.     

临床分离奇异变形杆菌耐药性及产ESBLs菌株的流行现状

【摘 要】 目的 了解临床分离奇异变形杆菌的耐药性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行情况,为临床治疗提供实验室依据。方法 收集临床分离的奇异变形杆菌共33株, 用琼脂稀释法检测其对14种抗菌药物的耐药性,并用超广谱β-内酰胺酶确证试验筛选出产ESBLs细菌。结果 33株奇异变形杆菌对亚胺培南耐药率为0、对头孢唑啉耐药率为100%,对哌拉西林、头孢呋辛、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星、庆大霉素和氯霉素耐药率分别为12.1%、30.3%、24.2%、27.3%、18.2%、21.2%、12.1%、18.2%和48.5%,氟喹诺酮类抗菌药物耐药率较高,加替沙星、环丙沙星和左氧氟沙星耐药率分别为45.5％、39.4％和39.4％;产ESBLs菌株检出率为18.2%(6/33),除了头孢唑啉、哌拉西林、亚胺培南外,产ESBLs菌株的耐药率比非产ESBLs菌株都有不同程度地增加（P<0.01）。结论 临床分离奇异变形杆菌对亚胺培南均敏感,对头孢唑啉均耐药,对其他抗菌药物均有不同程度耐药,产ESBLs菌株的检出率高,且对抗菌药物的耐药程度比非产ESBLs菌株高。