不同数量的2kDa富苯丙氨酸的碱性短肽（BOP）和乙醇酸氧化酶结合

乙醇酸氧化酶（GO）只含40 kD亚基却具有多个等电点（pI）.我们曾报告GO含40 kD酸性亚基和68 kD碱性亚基,组成3种GO同工酶［1~6］.后来证实,68 kD亚基由14个2 kD富苯丙氨酸的碱性短肽（BOP）和40 kD亚基组成［7］.现在进一步证实,不同数量的BOP和乙醇酸氧化酶结合,组成多种GO-BOP复合体GC.这些复合体具有不同的pI、乙醇酸氧化酶活性和吸收曲线,但SDS-PAGE和免疫反应相同.在低电压和短时间的醋酸薄膜电泳中,GO和BOP不会解离,GC呈现强碱性（pI>10.0）;在高电压的毛细管等电聚焦电泳(cIEF)中,GO和BOP发生不同程度解离,导致GC不聚焦,或聚焦为不同带,pI为7.4/6.8/6.2/5.3.BOP存在于各种动植物和微生物以及血纤维蛋白原中.     

菜心叶片中乙醇酸氧化酶的多种组分

乙醇酸氧化酶（EC．1．1．3．1,GO）是光呼吸中的关键酶,过去对其电泳行为和等电点的报告互不一致。Grodzinski和Col－man（1972）将菠菜、烟草等植物部分纯化的GO酶液在pH8．3的聚丙烯酰胺凝胶中电泳,活性染色后出现两条活性带,两者对FMN的依赖性有一定差异。Kerr和Groves（1975）对豌豆叶片部分纯化的GO酶液进行等电聚焦电泳,表明其pI值大于9．6.Behrends等（1982）将绿色黄瓜子叶的酶液经聚焦层析,发现GO活性分布在pH8．7附近。但Nishimura等（1983）发现在pH8．9的凝胶中南瓜子叶GO不迁移,而在pH4．5的凝胶中则出现一…     

玉米赤霉烯酮的固相放射免疫分析

SOlid－phaseRadioimmunoassay（RIA）forZearalenoneCHENXin－Jian（DepartmentofAgronomy,HenanAgriculturalUniversit,Zenzhou450002）MENGFan－Jing(CollegeofBiologicalScience,BeijingAgriculturalUniversity,beijing100094）玉米赤霉烯酮（zearalenone）是玉米赤霉菌（gibbrerellazeae）的一种次生代谢产物，它不但具有动物雌性激素的作用［”j，还是某些真菌的性激素［‘’］。孟繁静等［’－’，“’‘’］发现它普遍存在于植物体内，与植物的许多生理生化过程有密切关系，是一种活跃的植物内源活性物质，参与并直接…     

乙醇酸氧化酶纯化方法的改进

乙醇酸氧化酶（GO）是光呼吸的关键酶。但目前报道的GO的Mr和等电点等基本参数相差很大,重复性也不好[2,3,5～11]。本实验拟改进其纯化方法以期提高其重复性。材料与方法菠菜（Spinaciaoleracea）和菜心（Brassicacampestris）均购自市场。GO的提纯基本按文献2、3、6,只作添加FMN一项改进。具体操作如下：绿叶用100mmol·L－－‘的磷酸缓冲液（pH8．0）提取粗蛋白,过滤,4000Xg离心取上清液,加10％HAC调到PH53;然后以4000Xg离心取上清液,经15％～30％（NH;）iS04分步沉淀;高GO活性的沉淀蛋白用5mmol·L‘Tris－HCI（pH…     

奈氏试剂测定脲酶活性方法的改进

TheImprovingonMethodforMeasuringUreaseActiVityFUHul－Hua,LIXiao－Fang,TIANTing－Liang（Denytl）wnlofBbo,CedndCboA．ffe＊＊＊＊＊＊－［’un,sdy,if,J－to－－rr430070）脲酶（urease）活性的测定方法有多种,主要有电化法［‘””‘、放化法和分光光度法。分光光度法测定服酶活性的具体方法又有多种,如豚酶分解豚产生NH／,NHt与次氯酸钠和苯酚钠溶液反应生成蓝色靛酚,再进行比色测定［’j等。Kaltwasser等［’j采用与谷氨酸脱氢酶（GIDH）相偶联的反应来进行测定,即于340urn处测定NADH的光密度减少量。…     

水势单位的换算

水势是相同温度下物系中每偏摩尔体积的水与纯自由水之间的化学势之差［‘j。即：式中：——水势；—水的化学势；。——纯自由水的化学势；——水与纯自由水的化学势差；——水的偏摩尔体积。物质B的化学势的单位是焦［耳」每摩［尔〕（J／mol）．摩尔体积的单位是立方米每摩「尔」（m‘／mol），则水势的单位为：能量／体积单位，与目前所采用的水势单位帕［斯卡」（Pa）的关系为：IPa—IN／m’一IJ’／m””如按VaultHoff公式计算实验温度为25．OC，KCI的浓度c为0．lmol／L溶液的水势：gb—一c。。RT，式中：。、＿物质B的浓度，…     

甘薯杂交胚发育过程中的一些生理变化

杂交育种仍是目前甘薯（Ipomoeabatatas）育种的主要手段，而品种间不亲和性的大小和杂交结实率低是制约甘薯杂交育种效果的两个主要因素［”］。迄今已知甘薯存在着15个不同的杂交不亲和群，同群品种间杂交不结实或结实率极低（0％～5％），而异群品种间杂交给实率较高（20％～50％）［‘j。对于杂交结实率低的原因和解决途径，只有少量基干解剖学的观察［”‘’1和利用嫁接、植物生长调节剂提高结实率的报道＊－”。在生理基础方面的研究则未见报道。为此我们选择甘薯高自1号X88－3这一杂交组合（结实率为13．3士l．8％），在8月份的每天…     

菠菜叶片乙醇酸氧化酶的氧化甘油酸活性

首先从菠菜叶片中纯化了乙醇酸氧化酶（GO）。通过鉴定反应中氧的消耗以及反应产物H2O2的生成,证实菠菜GO具有氧化光呼吸途径中间代谢物甘油酸的活性。该氧化活性依赖于辅因子FMN和FAD,而不依赖核黄素和光黄素;其最适反应pH值为8．0,Km（甘油酸）值为7．14mmol／L,kcat值为1．04s^-1,活化能为17．29kJ／mol;草酸和丙酮酸对该氧化活性有明显的抑制作用,其中前者为典型的竞争性抑制。进一步通过两底物竞争作图表明：菠菜叶片GO氧化甘油酸反应和氧化乙醇酸反应为同一活性中心所催化。     

产乙醇酸氧化酶的重组毕赤酵母的构建及催化合成乙醛酸的研究

乙醇酸氧化酶（Go）是植物光呼吸途径中的一种关键酶,可以催化乙醇酸生产乙醛酸。从新鲜菠菜叶中提取总RNA,利用RT-PCR技术获得编码GO基因的cDNA片断。通过基因重组将GO基因克隆到载体pA0815中,构建了胞内表达载体pA0815／GO,重组质粒经电转整合至甲醇营养酵母GS115染色体。在混合碳源为10g/L山梨醇和0．5g/L甲醇的培养条件下,细胞的GO酶活达到474IU／g（DCW）。利用该重组毕赤酵母作为催化剂生产乙醛酸,结果表明：在乙醇酸浓度为0．25mol／L,重组酵母湿菌体为10dL,黄素单核苷酸（FMN）浓度为0．01mmol／L,pH8．0,20℃,反应18h后乙醛酸的产率达到51．8％。     

大花蕙兰鲜花香气成分的研究

利用气相色谱-质谱（GC/MS）分析技术对浙江栽培的大花蕙兰品种‘绿翡翠’（Cymbidium Hybrids）和‘台北小姐’（C.Miss Taipei）的鲜花进行了香气成分和含量的测定。结果表明：两种大花蕙兰香气成分的组成和含量存在明显差异,‘绿翡翠’的香气组成成分有43种,相对含量为97.13%,而‘台北小姐’有74种,相对含量为73.76%。两种大花蕙兰含有极少相同的化合物成分,相同成分4-甲基苯酚均为2个品种香气组分中含量最高的化合物,它与丙基环丙烷的总相对含量为53.97%,构成‘绿翡翠’的主要香气成分;与2-乙基丁醛和正己烷等23种化合物的总相对含量为55.15%,共同构成‘台北小姐’的主要香气成分。     

远诱1号与遗传工程水稻1号叶片碳同化产物中的稳定性碳同位素比值δ~(13)C的比较

1，5．M磷酸核酮糖核化酶与烯醇式磷酸雨酮酸核化酶对大气中质量较重的‘’C的亲和力不同，造成其叶片有机同化物中‘’C所占的份额出现显著差异。同一光合类型的不同植物种间或同一植物种的各种生态型间同化‘’C能力的差异是不大的，迄今尚未有具有中间型的8‘3C值的报告。除CAM型植物的8‘’C值因温度而有较大变化外，C3、Q类型植物的8‘’C值均比较稳定，C3植物的8”C值一般在一28．l【2．sffe，而Q植物的8‘’C值则一般在．13．5ti．5％c。所以，植物叶片有机碳化合物中稳定性碳同位素比率被认为是一个判定高等植物碳同化途径的…     

薄层层析和高效液相层析技术结合测定植物叶片水杨酸含量

水杨酸（SA）是植物的一种次生代谢产物,具有多种生理调节作用［‘j。它属于酚类化合物,有一个苯环,在一定波长的紫外光激发下有一个特定的荧光发射峰。所以,利用荧光分光光度计或者高效液相层析（HPte）可以定量分析。由于植物组织中具有许多发荧光的物质,会干扰SA的测定,因此,直接利用荧光分光光度计测定植物组织中3A含量会有误差。目前,大多数实验室都用HPth测定植物组织中SA,其中除Palva等［’‘在制备样品时用C18柱纯化了样品之外,多半对样品均未预先纯化p,‘－”。从经济角度考虑,用C18往纯化样品的价格较贵,而国…     

植物组织中丙二醛测定方法的改进

ImnrovementsofMethodforMeasurementofMalondialdehydeinvlant11－ssues丙二醇（MDA）是最常用的膜脂过氧化指标．但测定植物组织中MDA含量的经典方法《多种物质的干扰）·’,其中最主要的是。引害性糖、’。本丈在前人工作的基础L．讨如间排除可溶性糖对植物作品中M＊A测定的尸扰问题作7初步探讨。材料与方法！MDA的制备［hMDA前体1．1．3．3一四乙氧基丙烷水解而成‘－2＄类物质的比色测定·取2ml糖溶液,加入0．1m1210Lll。lLFeCI;·再加1．9mlo．6／硫代巴比妥酸（TBA）．置沸水浴中显色15min并经2000。s离心10min）占．…     

花粉萌发实验的好材料──大翼豆

花粉的萌发,是植物学实验的一项基本内容。教科书一般介绍以黄瓜、豌豆为材料进行实验,但往往由于实验材料较难找而影响实验的顺利进行。我校根据本地区的实际情况,以往均以野生猪屎豆（Crotalariamu．cronataDesv．）的花粉粒作为实验材料,在室温20～25C的条件下,用10／～15％的蔗糖溶液培养30min,然后镜检。但是这种材料的花粉萌发率偏低,有些学生培养的材料甚至见不到萌发的花粉粒。后来,我们经过大量的实验筛选,发现校园里引种的豆科牧草大翼豆［Macroptll。urnatropurpur。urn（D．C．）urb．j的花粉粒极容易萌发。不同浓…     

STABLE POSITIVE SOLUTION OF THE NONAUTONOMOUS LOTKA-VOLTERRA MUTUALISTIC SYSTEM

l！ntroductionAutonomousLotka－VolterramutuallstlcsystemhasbeenstudiedInmanypaperE3】,E4］．［5】,ourpurposehereIstoconsiderthenonautonomouStwo－SPPCllsLOtkt－Volterramutuallstlcsystem．WeareconcernedwiththedifferentialequationsbelongtoC‘andC‘isthesetOfsllCOlltlnuouSfunCtionSg：［0,＋。）、RbOUnded。hove。ndbelOWbyCOnst。ms,moreover,notallofa：。（t）（l＜l,j＜n,。／j）arezero．Theper。odlccasehasbeenconsideredIn［1】．Insection3ofthlspaper,westudiedthegeneralcaseoftlmede…     

猪瘟病毒的分子生物学研究进展

猪瘟病毒（Oassicalswinefevervirus,CSFV;或称Hogcholeravirus,HCV）,属黄病毒科（Flaviviridae）瘟病毒属（Peshvirus）［’1。CSFV与同属的牛病毒性腹泻病毒（Bovineviraldiavims,BVDV）及羊边界病病毒（Botherdiseasevirus,BDV）在结构上有很高的相似性,在血清学上有交叉反应l‘］。感染猪可引起高热、皮肤变色、大量内出血等及神经系统症状［’］,死亡率很高。猪瘟病毒是世界上损害养猪业的重要病原之一l‘］。猪瘟病毒是有囊膜,直径40～60urn的正链RNA病毒［‘·’］．在蔗糖中浮力密度为l．12g／ml,沉降系数S…     

嗜酸菌及其应用

自然界大多数环境的pH值为5～9,它适合多数微生物生长。嗜酸菌是一种能在低pH条件下生长和繁殖的极端环境微生物［‘－’］,通常在pHZ～5生长很好,pHS．5以上生长不好。有些嗜酸菌在中性pH条件下根本不生长,如氧化硫硫杆菌（Thiobacillusthiootidans）,酸热硫化叶菌（deghlobusacidocaldarius）,酸热芽抱杆菌O沏ciousacidoca儿brius）等,最佳生长pH是2．0～3．0,这些都是专性嗜酸菌。一些真菌也能在pHS．0或更低条件下生长,实际上是耐酸菌。l嗜酸菌生态分布及其对环境适应机制嗜酸菌生长在酸性环境,这主要与硫或硫化物的存在…     

菠菜乙醇酸氧化酶基因的克隆及表达

采用RT-PCR技术从菠菜总RNA中分离扩增了乙醇酸氧化酶（GO）基因的cDNA序列,首先克隆到质粒pMD18T,进行了测序。然后将乙醇酸氧化酶的cDNA分别亚克隆至质粒pThioHisC、 pTIGTrx、pBV220和pET-2b(+),分别转化大肠杆菌DH5α和BL21（DE3）,并对重组乙醇酸氧化酶在大肠杆菌中的表达进行了研究。SDSPAGE和酶活分析表明,菠菜乙醇酸氧化酶在E.coli BL21 (DE3) （pTIGTrxGO）和E.coli BL21(DE3) （pET-22b(+)GO）里得到了高水平的表达,其中E.coli BL21(DE3) （pET-22b(+)GO）的乙醇酸氧化酶活性较高。     

悬钩子属植物的RAPD分析

用RAPD标记技术对13个黑莓（blackberry）、树莓（raspberry）品种和5个野生悬钩子种类（Rubus spp．）的26个居群的遗传多样性进行了分析。用15个寡聚核苷酸随机引物共扩增出条带131条,其中多态性条带118条,占扩增条带总数的90％,表明悬钩子属植物种间和品种间存在丰富的遗传多样性。通过聚类分析可将供试的26个居群分为4组,其中A组有粗叶悬钩子（R．alceaefolius Poir．）、山莓（R．corchorifolius L．）、插田泡（R．coreanus Miq．）、掌叶覆盆子（R．chingii Hu）、‘威廉姆特’、‘托拉咪’、‘泰勒’、‘金克维’、‘布里斯托’、‘宝森’7号、‘布莱兹’及其实生苗、‘基奥瓦’、‘萨尼’、‘黑布特’等15个居群;B组包括‘宝森’1号～‘宝森’6号和‘马林’、‘乔克多’等8个居群;C组包括‘赫尔’和‘切斯特’的2个居群;D组仅有蓬藁（R．hirsutus Thunb．）1种。这一聚类结果与传统形态学分类结果基本吻合。     

海水胁迫对菠菜叶绿素代谢的影响

以耐海水品种‘荷兰3号’和海水敏感品种‘圆叶菠菜’为试验材料,采用营养液栽培,研究海水胁迫对菠菜叶绿素代谢的影响。结果表明,海水胁迫下,2个菠菜品种叶片的叶绿素a(Chl a)、叶绿素b(Chl b)和总叶绿素含量以及叶绿素合成前体———原叶绿素酸(Pchl)、镁原卟啉IX(Mg-proto IX)、原卟啉IX(Proto IX)和尿卟啉原III(UroIII)含量均明显降低,而胆色素原(PBG)和δ-氨基酮戊酸(ALA)积累,‘圆叶菠菜’的变化幅度大于‘荷兰3号’。海水胁迫下,‘荷兰3号’叶片的叶绿素酶(Chlase)活性无显著变化,胆色素原脱氨酶(PBGD)和尿卟啉原III合酶(UROS)活性在胁迫第3天显著下降,而‘圆叶菠菜’Chlase活性显著上升,PBGD和UROS活性显著下降。研究发现,在海水胁迫条件下,菠菜叶片的叶绿素合成代谢受阻,受阻位点位于PBG→UroIII的转化过程,其中‘圆叶菠菜’的受阻程度大于‘荷兰3号’;耐海水品种‘荷兰3号’叶片叶绿素含量降低主要由叶绿素合成代谢受阻引起,而海水敏感品种‘圆叶菠菜’叶绿素含量的降低则是由叶绿素合成受阻和叶绿素降解共同作用的结果。