高脂饮食性非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂代谢相关基因的改变

目的:分析非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝脏中脂代谢相关基因的表达变化。方法:12周龄成年雄性C57BL/J6小鼠,随机分为对照组及NAFLD组。对照组予以普通饲料,NAFLD组予以高脂饮食喂养8周。分别测定两组小鼠肝功能、血脂及肝脂的变化,苏木精-伊红(HE)及油红O染色后光学显微镜下观察肝脏的形态结构和脂肪变性情况,并用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测肝脏脂代谢重要基因的变化。结果:与对照组比较,NAFLD组小鼠的血清总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝脏TG、肝脏TC水平均显著升高(P0.05)。HE和油红O染色显示NAFLD组小鼠发生了显著的肝脏脂质沉积。此外,NAFLD组小鼠肝脏中脂肪酸转位酶(CD36)表达水平显著高于对照组,而硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、固醇调控元件结合蛋白(SREBP1c)表达水平在两组小鼠中无统计学差异。结论:高脂饮食诱导的脂肪肝中CD36表达上调,可能参与了NAFLD的发病机制。     

论硷性磷酸酶在组织化学上的专属性问题

一、绪言硷性磷酸酶是一种酶或是包括好几种性质相似的酶的问题,至今还没有完全被了解。1937年Bodansky用胆盐作用于肾脏和小肠的硷性磷酸酶,发现胆盐对肾脏硷性磷酸酶的抑制极强,但对小肠硷性磷酸酶的作用微弱。Emmel(1946 a,b)以小鼠的肾和小肠作为材料,在作用液中加入不同浓度的KCN(0.0001—0.01M),在37℃下作用3小时,发现小肠的硷性磷酸酶,在0.001M KCN的作用下,已完全被抑     

银灵通胶囊调节实验性高脂饮食大鼠血脂的研究

目的:探究银灵通胶囊对脂质代谢的影响及其机制。方法:建立大鼠高脂模型,用药后检测其血脂、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,检测肝脏组织的高密度脂蛋白受体SR-BI、低密度脂蛋白受体(LDLR)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDH)受体CD36蛋白表达的mRNA表达水平,检测血管组织学变化。结果:高脂饮食明显升高大鼠血清中总胆固醇(CH)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和动脉硬化指数(AI值),银灵通胶囊组可降低上述指标,且呈一定的浓度依赖;高脂饮食可增加肝脏中SR-BI及CD36表达,降低LDLR表达,银灵通胶囊引起SR-BI的过度表达,使LDLR表达增加,CD36表达下降。高脂饮食使血清中MDA的含量增加,给予银灵通胶囊后,明显降低血清MDA的含量。结论:银灵通胶囊具有调节脂质代谢,抗动脉粥样硬化(AS)及抗脂质过氧化作用。其机制与银灵通胶囊能引起肝脏中SR-BI的过度表达及LDLR表达增加,降低肝脏中CD36表达和血清MDA含量有关。     

毛菊苣醇提物对高脂血症性脂肪肝大鼠作用机制初探

目的:目前,国内外研究集中在毛菊苣降糖降脂方面的作用,并已有相关药物上市,但实验表明毛菊苣在保肝降脂作用方面也具有很好的效果,本文旨在探讨毛菊苣醇提物治疗高脂血症性脂肪肝的作用机制。方法:采用高脂饮食喂饲大鼠复制高脂血症性脂肪肝大鼠模型,实验分组为模型组、毛菊苣醇提物治疗高剂量组和低剂量组、苯扎贝特对照组和正常对照组;以高、低剂量毛菊苣醇提物进行干预,然后测定各组大鼠血清及肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)等指标的含量。结果:模型组大鼠血清及肝组织中LDH、TG、TC、LDL、MDA等活性均较正常组明显升高(P0.05),说明高脂饲料造模成功;与模型组比较,测得各治疗组大鼠血清、肝组织中相应指标均明显降低(P0.05;或P0.1);毛菊苣醇提物高剂量组与阳性对照组相比无显著差异。结论:实验结果表明:通过高脂饮食饲喂SD大鼠建立高脂血症动物模型的实验是成功的;同时,毛菊苣醇提物能够使脂肪肝大鼠的体重降低,降低肝脏脂肪性病变,降低脂肪肝大鼠血清ALT、AST含量,降低大鼠血清TC、TG、LDL-c,升高HDL-c;对模型SD大鼠肝脏中异常升高的MDA、LDH、LD均有明显的降低作用;形态学检查显示,醇提物高剂组肝脏脂变程度明显减轻,脂滴数量减少,提示该药物具有保肝降脂的药理作用。     

肝过表达hNPC1L1转基因巴马小型猪的初步研究

研究利用体细胞核移植技术构建了肝过表达h NPC1L1转基因巴马小型猪,由PCR和RT-PCR鉴定表明h NPC1L1在肝组织中特异性地表达。我们对转基因巴马小型猪进行了初步研究,对血清和肝匀浆中的TC、TG、LDL-C、HDL-C、AST、ALT和FFA进行了检测,结果表明转基因猪血清FFA(637.7±9.53)μmol/L显著高于非转基因猪血清FFA(540.4±25.46)μmol/L(p0.01),转基因猪血清AST(200.8±22.31)U/L显著高于非转基因猪血清AST(92.4±15.55)U/L(p0.01)。另外,我们对肝中与脂代谢密切相关的基因表达情况进行Real-time PCR检测的结果表明,转基因猪SREBP-1c(3.31±0.18,p0.05)、FAS(4.49±4.21,p0.01)显著高于非转基因猪。本研究发现NPC1L1在与脂代谢紊乱密切相关的肝脏疾病中发挥着主导作用,它能通过对脂合成相关基因转录的调控,引发脂代谢紊乱以及肝脏疾病。这说明对NPC1L1的研究有望成为治疗肝脏疾病的新靶标。     

中药脂肝宁预防酒精性脂肪肝的实验研究

目的探讨中药脂肝宁预防酒精性脂肪肝的作用机理。方法应用酒精灌胃方法建立大鼠酒精性脂肪肝模型,造模同时给予中药脂肝宁(ZGN)药物干预,以硫普罗宁(TPN)为对照,检测血清肝功能和肝匀浆甘油三酯(TG)、氧自由基(ORF)、抗超氧阴离子(ASOA)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量,并对大鼠肝脏行病理学检查。结果酒精灌胃12周后大鼠形成酒精性脂肪肝,中药脂肝宁高浓度组血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝匀浆TG、ORF及MDA含量显著降低,而ASOA和SOD含量升高(P<0.05),肝脏脂肪变明显改善。结论中药脂肝宁通过抑制氧化应激、稳定肝细胞膜、抑制脂质过氧化来改善酒精所致肝细胞脂肪变性。     

茶多酚对营养性肥胖大鼠肝脏自由基代谢的影响

目的:探讨茶多酚对营养性肥胖大鼠肝脏自由基代谢的影响。方法:采用高脂饲料喂养,体重(200±20)g的雄性SD大鼠32只,随机分为4组(n=8),测定各组大鼠肝脏细胞O自由基和N自由基。结果:高脂饲料组大鼠肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性显著提高,茶多酚补充组丙二醛(MDA)含量比对照组及高脂饲料组显著下降;高脂饲料组大鼠肝脏TNOS、iNOS活性及NO含量显著升高,茶多酚降低了总-氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性及NO含量。结论:高脂饲料诱导了大鼠肝脏细胞的氧化应激状态,茶多酚提高了营养性肥胖大鼠肝脏的抗氧化能力,对营养性肥胖大鼠肝脏有一定的保护作用。     

新加越鞠丸对非酒精性脂肪肝大鼠血清脂联素及瘦素水平的影响

目的:观察新加越鞠丸对非酒精性脂肪肝大鼠血清脂联素及瘦素的影响.方法:3只健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组9只.高脂高糖饲料喂养制备大鼠非酒精性脂肪肝模型.8W病理显示造模成功后,每组给予相应药物干预,连续4W.酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组大鼠血清中脂联素(ADP)浓度及瘦素(LP)浓度,HE染色观察肝脏病理变化.结果:与正常对照组大鼠比较,模型对照组血清中ADP浓度明显降低(P＜0.05),LP明显升高(P＜0.05);与模型对照组大鼠比较,新加越鞠丸组血清中ADP浓度明显升高(P＜0.05),LP明显降低(P＜0.05);新加越鞠丸组大鼠较水林佳组,血清中ADP浓度显著升高(P＜0.05),LP有显著性差异(P＜0.05).结论:新加越鞠丸可通过升高血清脂联素水平,降低血清瘦素水平,减轻非酒精性脂肪肝的损伤.     

基于抗炎及抗氧化作用探讨微生态制剂在非酒精性脂肪肝模型大鼠中的应用价值

目的研究基于抗炎及抗氧化作用探讨微生态制剂在非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠中的应用价值。方法选择成年雄性SD大鼠并随机分为对照组、NAFLD组、蓝莓益生菌(BP)组。后2组采用复合高脂饲料建立NAFLD模型,BP组给予蓝莓联合益生菌干预。比较3组间血清肝功能指标、炎症指标、氧化应激指标含量及肝脏组织中炎症及氧化应激信号分子表达的差异。结果 NAFLD组大鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-18、MDA的含量及肝脏中p-p38MAPK、NF-κB的表达量明显高于对照组,血清中SOD、GPX的含量及肝脏中p-AMPK、Nrf-2的表达量明显低于对照组;BP组大鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-18、MDA的含量及肝脏中p-p38MAPK、NF-κB的表达量明显低于NALFD组,血清中SOD、GPX的含量及肝脏中p-AMPK、Nrf-2的表达量明显高于NALFD组。结论蓝莓益生菌用于NALFD模型大鼠的干预能够改善肝功能并抑制炎症反应、氧化应激反应。     

两种不同植物甾醇酯降血脂效果的比较研究

目的：研究两种不同植物甾醇酯对高脂血症大鼠的降血脂作用,并比较其差异。方法：通过饲喂高脂饲料,建立高脂血症大鼠模型,将建模成功的大鼠,按照TC水平随机分成8组,即模型对照组,溶剂对照组,Vegapure 95FF低、中、高剂量组,Vegapure 95E低、中、高剂量组,同时设立空白对照组。干预4周后,记录体重、进食量,并检测血清TC、LDL-C、TG、HDL-C、脂肪重量及体脂率、肝脏重量及肝脏指数等指标。结果：在实验剂量下,两种植物甾醇酯均明显降低血清TC、LDL-C,但均未发现有剂量效应关系;两种植物甾醇酯对血清TG、HDL-C无明显影响。两种植物甾醇酯对高脂血症SD大鼠体重增长、进食量、脂肪重量、体脂率、肝脏重量和肝脏指数均无明显影响。结论：两种植物甾醇酯在降低血脂、大鼠生长发育、体质和肝脏方面均无明显差异。     

婴儿肝炎综合征甲状腺素与Child-Pugh分级的关系

目的:肝脏是甲状腺激素降解、排泄及转化的场所,参与甲状腺结合球蛋白的合成.肝脏及肝脏疾病与甲状腺激素关系方面的文献很多,但有关婴儿肝炎综合征(infantile hepatitis syndrome,IHS)甲状腺素水平的报道很少.本文研究IHS患儿血清甲状腺素水平与Child-Pugh肝功能分级的关系,探讨甲状腺素水平对于指导肝功能的分级、评价肝脏储备功能及其预后的临床意义.方法:收集住院的IHS患儿38例,选择20例健康儿作为正常对照组.应用放射免疫法检测各组血清促甲状腺素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平.检测IHS患儿血清白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、凝血酶原时间(PT),并记录腹水、肝性脑病等临床情况,按成人Child-Pugh分级标准,将患儿分为A、B、C三级,并将Child-Pugh积分与其甲状腺功能各指标做相关性分析.结果:1、IHS组患儿血清FT3、FT4水平显著低于正常对照组(P＜0.05),TSH水平高于正常对照组水平(P＜0.05);FT3、FT4水平随Child-Pugh积分增加而下降,A、B、C三级组间比较有显著性差异(P＜0.05);TSH水平在三级组间无统计学差异(P＞0.05).2、HIS患儿的血清FT3、FT4水平与Child-Pugh积分呈负相关(r=-0.619～-0.80,P＜0.01),与TSH无相关性(P＞0.05).结论:本研究结果显示婴儿肝炎综合征患儿的血清FT3、FT4水平降低,且与其肝脏受损程度有明显的相关性,因此检测血清FT3、FT4水平,对正确评估婴儿肝炎综合征病情严重程度及其预后具有重要的参考价值.     

吊竹梅叶表皮胞核趋伤性的组织化学观察

1.应用细胞学及组织化学的方法,研究了吊竹梅叶表皮在胞核趋伤过程中细胞核、白色体、线粒体、核酸、硷性磷酸酶、硷性ATP酶的变化。2.趋伤胞核较一般胞核的平均直径增长7.7%。在Feulgen反应的制片中。趋伤胞核的染色比正常的核为深,说明DNA含量有所提高。同时,趋伤胞核核仁的哌咯宁染色较正常为深,表明RNA含量也有所增高。3.胞核趋伤现象发生后,白色体和线粒体也随核转移。4.硷性磷酸酶主要分布在白色体中;硷性ATP酶主要分布在线粒体中。胞核趋伤后,这两种酶也随着白色体和线粒体转移,同时,它们的活性也有所增加。5.以上各种变化,加强了物质和能量的供应,对伤口愈合提供了有利的条件。     

嗜硷性芽孢杆菌硷性蛋白酶的研究——Ⅲ.产品的急性毒性及微核试验

为了解嗜硷性芽孢杆菌(Bacillus basophilus)硷性蛋白酶用于洗涤剂中的安全性,对该酶进行了急性毒性及微核试验的研究。结果表明,嗜硷性芽孢杆菌硷性蛋白酶由小鼠经口剂量达10g/kg时,未见动物死亡;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,未见微核率有异常增加。所以,认为嗜硷性芽孢杆菌硷性蛋白酶可广泛应用于洗涤剂中。     

利用ELISA与荧光定量PCR技术筛查新生儿巨细胞病毒感染水平及探讨与肝脏损害的相关性

目的:了解目前淄博地区新生儿感染巨细胞病毒(HCMV)的现状,找出最佳检测方法,提高诊断水平,并探讨巨细胞病毒对肝功能的损害.方法:采用抗体捕获酶联免疫吸附试验(ELISA)及荧光定量PCR(qPCR)对2011年12月至2012年5月出生的2596例新生几分别进行血清HCMV-IgM抗体和尿液HCMV-DNA定量检测,并对符合HCMV感染的阳性标本进行肝功能回顾性分析.结果:用ELISA检测血清CMV-IgM阳性29例(1.117％),用qPCR检测尿液HCMV-DNA阳性39例(1.502％),两种方法阳性符合率71.79％,差异有统计学意义(P＜0.01);共有40例阳性患儿回顾性分析肝功能指标血清总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)均高于正常值,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:淄博地区新生儿巨细胞病毒感染率较高,危害性大,对新生儿早期检测和诊断十分重要,定量荧光PCR法检测敏感性要高于ELISA法检测,具有良好的应用价值;检测出的HCMV感染患儿肝脏易受病毒侵害,造成肝功能损害.     

饲料中添加心得安降低北京鸭体脂的研究

心得安是一种β-肾上腺能阻断剂。近年来发现心得安对人脂肪组织和牛乳中脂蛋白脂酶有很强的抑制作用;我们对北京鸭腹脂肪离体试验表明,心得安对鸭脂肪组织脂蛋白脂酶亦有明显抑制作用。由于鸭脂肪组织生长主要依赖脂蛋白脂酶摄取来自肝脏生脂作用产生的脂质,因此设想以饲     

黄芪决明子微乳对综合因素复制的脂肪肝大鼠的影响研究

目的:研究黄芪决明子微乳(ACM)对脂肪肝大鼠的防治作用,并进行相关机理探讨.方法:采用高脂饮食饲养,灌服酒精及注射小剂量四氧化碳制备大鼠脂肪肝模型,同时给予ACM制剂进行治疗.通过检测血清TC,TG,LDL-C,HDL-C,ALT,AST等指标及肝组织中TC,TG含量,肝组织SOD活性,MDA含量等各项指标,观察肝组织病理学变化,从而考察不同剂量ACM对大鼠脂肪肝的防治作用.结果:ACM能明显改善脂肪肝大鼠肝组织病理学表现,减轻肝脂变程度;降低的血清中ALT的含量;显著升高血清HDL-C含量,降低血清TC,LDL-C,VLDL-C含量;降低肝组织TC,TG含量,降低肝组织MDA含量,增强肝组织SOD活性.结论:ACM对大鼠脂肪肝有良好的防治作用,防治机理与其具有调节血脂,降低肝脂,改善肝功能,增强肝脏抗氧化,清除肝毒性物质等作用相关.     

PPARα在肝脏相关疾病中作用的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体α(perixisome proliferation-activated receptor alpha,PPARα)是核受体超家族成员,是参与肝脏β氧化的主要调控蛋白,通过诱导下游靶基因转录,从而发挥其重要的生物学功能。近年来,肝脏相关疾病的研究备受关注,肝癌(主要以肝细胞性肝癌为主)也呈年轻化趋势。PPARα的活化能够降低高脂喂养小鼠肝脏中甘油三酯的含量或脂肪的生成量。此外,PPARα通过调控细胞增殖与凋亡进程等多种机制参与肝癌进程。现综述PPARα在非酒精性脂肪肝、酒精性脂肪肝和肝细胞性肝癌进程中的作用。     

肥胖、2型糖尿病过程中大鼠肝脏形态结构变化的比较

目的:探讨在肥胖、糖尿病过程中大鼠肝脏形态结构的变化.方法:Wistar雄性大鼠,随机分为:普通饮食组,高脂饮食组,高脂饮食+链脲佐菌素组.第0周随机抽取6只大鼠处死后取肝脏进行石蜡包埋,HE染色,制成切片.在饲养过程中选取不同时间点,各组随机处死2只大鼠,取肝脏进行石蜡包埋,HE染色,切片,镜下观察,比较各组差异.结果:与对照组相比,肥胖组大鼠肝脏组织中脂肪细胞数目增多、体积变大,随肥胖程度的增加而加剧,导致肝发生中、重度脂肪变性.肝细胞肿胀,肝窦间隙变窄,可见炎性细胞浸润增多,凋亡细胞增多.糖尿病组大鼠,肝脏组织中脂滴形成,出现大的脂囊.肝细胞出现细胞核固缩,凋亡细胞增多,有炎性细胞浸润,以淋巴细胞为主,未见巨噬细胞增多.血管壁硬化、玻璃样变性.结论:在肥胖/糖尿病发生、发展过中,大鼠肝脏中有脂肪的异位储存(肝脂肪样变性),并伴随有炎性细胞的浸润.     

豚鼠动脉粥样硬化模型形成机制:LDL-C代谢异常

目的建立豚鼠动脉粥样硬化模型并探讨其形成机制,同时与大鼠进行比较,阐明模型特点及优势。方法应用高脂饲料诱导方法,观察豚鼠和大鼠动脉粥样硬化病变的形成情况。HE染色法分析主动脉内膜-中膜厚度、内膜炎性细胞浸润和内膜表层斑块的形成情况;酶法检测血脂,酶联免疫吸附法测定血清Ox-LDL浓度,实时定量PCR检测肝脏LDL-R mRNA表达的变化,免疫组化检测血管内膜CD36蛋白表达的变化。结果与对照组比较,豚鼠模型组动脉内膜明显增厚,单核细胞、巨噬细胞浸润与聚集增加,大量的泡沫细胞聚集形成斑块,而大鼠模型组未出现类似动脉粥样硬化病理改变。机制研究表明豚鼠较大鼠易于诱发形成动脉粥样硬化原因主要在于豚鼠血清Ox-LDL水平明显升高,肝脏LDL-R mRNA表达下调,动脉内膜CD36蛋白表达明显增强等。结论与大鼠不同,经高脂饲料诱导10周后,豚鼠可形成典型动脉粥样硬化病变,其机制主要在于LDL-C代谢异常。     

不同运动方式对肥胖大鼠肝脏脂质沉积及FGF21分泌的影响*

目的: 研究持续性运动训练(CT)与高强度间歇运动训练(HIIT)对正常和肥胖大鼠血清和肝脏FGF21蛋白含量及肝脏脂肪代谢的影响。方法: 雄性SD大鼠随机分为两组:普通饲料及45%高脂饲料喂养,8周后以普通饲料喂养,大鼠体重增加20%为肥胖造模成功标准。将正常大鼠随机分为正常安静组(LC)、正常高强度间歇运动训练组(LHI)、正常持续性运动训练组(LCT),肥胖大鼠随机分为肥胖安静组(OC)、肥胖高强度间歇运动训练组(OHI)及肥胖持续性运动训练组(OCT),每组10只,运动干预组大鼠进行8周不同方式负重游泳运动训练干预,末次运动干预间隔24 h后取血液检测血清炎症因子、FGF21水平,取肝脏组织检测脂质含量、脂代谢酶含量及FGF21表达水平。结果: 与LC组比较,OC组大鼠体重、血清炎症因子、肝脏甘油三酯(TG)含量显著增高(P＜0.05),LHI组肝脏TG含量显著降低,LCT组肝脏FGF21表达水平显著增高(P＜0.05)。与OC组比较,OHI组大鼠肝脏TG含量显著降低(P＜0.05),线粒体CPT-1β、β-HAD酶含量显著升高(P＜0.05),OCT组大鼠肝脏LPL、FAT/CD36酶含量显著增高,血清、肝脏FGF21水平均显著上升(P＜0.05)。结论: 两种运动方式均能降低正常、肥胖大鼠体重及肥胖大鼠肝脏脂质沉积现象,其中HIIT上调线粒体脂肪氧化水平,显著降低正常、肥胖大鼠肝脏TG含量,而CT通过提高正常、肥胖大鼠肝脏FGF21蛋白表达及血清FGF21水平,促进肝脏摄取脂肪酸,对缓解肥胖大鼠肝脏脂质沉积效果有限。