志贺氏菌属virG基因半抗原——Digoxigenin标记探针的制备及其同源性分析

用半抗原——Digoxigenin标记的福氏2a YSH6000的1．4kb virG DNA探针,检测73株痢疾杆菌(宋氏64株、福氏5株、志贺氏4株)、32株EIEC、17株耶氏菌属菌、5株伤寒杆菌和5株大肠杆菌的DNA同源性。前3种菌同时作Sereny试验,以进行比较。结果表明,痢疾杆菌及EIEC中均含virG同源区,其它被测菌则无此同源区。virG DNA仅与痢疾杆菌及EIEC的Sereny试验相关．而与耶氏菌属的Sereny试验无关。用virG DNA探针检测宋氏痢疾杆菌及EIEC的毒力,与Sereny试验结果比较。符合率分别为87．5％和90．9％。     

志贺氏Ⅰ型痢疾杆菌污染甜酒引起爆发性食物中毒的调查报告

1988年6月5日襄北某农机修造厂,因饮食甜酒而导致92人食物中毒。经流行病学、临床表现及实验室诊断,一致证实此次食物中毒是由志贺氏Ⅰ型痢疾杆菌引起。该厂于下午7时晚餐。进餐人数为146人,饮食甜酒者92人。饮用4小时发病,年龄最大者58岁,最小者15岁,平均年齿23.1岁。饮食者100％发病,无一幸免,未饮食者无一例发病。临床表现可为头痛、头晕、恶心,继之脐周痛,阵发性,随后出现腹泻。腹痛、腹泻率100％。体温37.8—39.2℃,抗生素冶疗后,全部治愈,无死亡。实验诊断:采集剩余甜酒、患者呕吐物及粪便进行细菌培养,共分离出41株志贺氏Ⅰ型痢疾杆菌,而在其他食品及健康人未分离出该菌。因此确定此次食物中毒爆发是由志贺氏Ⅰ型痢疾杆菌引起。     

1964年湘西地区痢疾桿菌的分型调查

痢疾杆菌的分型工作,国内外报告很多,湘西土家族苗族自治州少数民族地区这方面的资料很少,现将我站在1964年由凤凰、花垣、州人民医院化验科收集的,以及我站工作组深入现场采集患者大便分离的痢疾菌株,进行鉴定与分型后报告如下。实验方法是按国内所采用的一般方法,进行生化反应观察及血清凝集试验,所用之痢疾诊断分型血清系兰州生物制品研究所供应的。实验结果一共分离出46株痢疾杆菌。     

在试管内诱导痢疾杆菌对合霉素的抗药性试验

我们曾报告从病人标本中分出的肠道致病菌中,痢疾杆菌的抗药菌株远比伤寒杆菌为多,而各型痢疾杆菌中,则以宋氏痢疾杆菌的抗药菌株为最多见,而舒密次氏痢疾杆菌为最少。为了探讨这两种痢疾杆菌对合霉素产生抗药规律性,我们用递增药物浓度的方法在试管中进行诱导,试图发现用人工法诱导抗药性和在自然条件下产生抗药性之间有无相似之处。结果发现不同种类痢疾杆菌在试管内对合霉素产生抗药性的速度与强度有一定差别,这和在自然情况下所产生的抗药性颇相类似,但抗药性不很稳定。在诱导过程中,许多菌株在产生抗药性的同时,出现了其他特性的改变,主要表现在生长速度减慢与发酵能力减弱。虽然从文献中尚未见到来自病人标本的抗药痢疾菌株有类似的变异,但这种可能性是值得考虑的。     

金樱子茎提取物体外抑菌活性研究

采用纸片扩散法和试管稀释法,研究金樱子茎不同溶剂粗提取物对临床常见病原细菌的抑菌活性。结果表明,金樱子茎水提取物对绿脓杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌无抑菌活性;对伤寒杆菌的最低抑菌浓度（MIC）为20 mg（生药）/mL;对金黄色葡萄球菌的MIC为10 mg（生药）/mL。金樱子茎75%乙醇提取物对绿脓杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、变形杆菌无抑菌活性;对金黄色葡萄球菌MIC为10 mg（生药）/mL。金樱子茎乙酸乙酯、氯仿、石油醚提取物对绿脓杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌无抑菌活性。     

2005～2008年儿童菌痢病原菌与药敏分析及临床意义

目的了解儿童细菌性痢疾病原菌的分布特征及药敏特点,为临床更严谨更规范使用抗生素提供支持与依据。方法对2005年10月至2008年10月57例儿童菌痢的菌型、药敏及耐药性进行分析。结果儿童细菌性痢疾病原菌亚型分类中宋氏痢疾杆菌（D群）占14．0％,福氏痢疾杆菌（B群）占86．0％;痢疾杆菌对常用抗生素耐药率由低到高依次为头孢噻肟,丁胺卡那霉素,庆大霉素,头孢哌酮,头孢三嗪,头孢他啶,头孢唑啉,环丙沙星,氯霉素,复方新诺明,氨苄青霉素;痢疾杆菌单株对多种抗生素的总耐药率为39．2％,多重耐药率为43,9％,且各组间差异无显著性（χ^2=1．608,P=0．996）,痢疾杆菌的耐药问题依然严重。结论新乡市区儿童细菌性痢疾病原菌亚型分类D组已呈明显上升趋势,但总体仍以B群感染为主（86％）;痢疾杆菌的耐药问题依然严重;对儿童菌痢选用抗生素应结合药敏首选头孢噻肟等第三代头孢类抗生素或头孢唑啉,年长儿也可选用丁胺卡那霉素、庆大霉素等氨基苷类,而以环丙沙星为代表的喹诺酮类药物不宜作为儿童尤其7岁以下小儿菌痢的备选药物;氯霉素、复方新诺明及氨苄青霉素已不再作为小儿菌痢的抗菌选择。     

以豚鼠和家兔的眼晴感染法快速鉴别痢疾杆菌

在防治细菌性痢疾的病原学调查工作中,常遇到一些双糖琼脂斜面反应和生化反应近似痢疾杆菌而诊断血清不凝集的菌株,给鉴别痢疾杆菌带来一定的困难。为了观察这些非痢疾杆菌和痢疾杆菌的致病性,我们使用了注射法和滴入法作动物眼睛的感染试验来鉴别。     

痢疾结合疫苗LPS制备条件的优化研究

通过对痢疾杆菌LPS提取过程中主要制备环节的优化和改进,确立最佳提取条件和纯化过程,并应用优化后的工艺路线分别制备八批次福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌LPS;福氏2 a痢疾杆菌LPS批平均产量为1.633g,宋内氏痢疾杆菌LPS批产量平均为1.251g,批产量相对稳定,平均产量比优化改进前提高20%以上。LPS经过酸水解、柱层析纯化获得目标O-SP,福氏2 a痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌O-SP的得率分别为20%和28%。检测结果证明,LPS和O-SP各项指标均符合规程(草案)相关要求。实验为今后痢疾结合疫苗大规模制备工艺的改进和提高打下了基础。     

学术动态

<正>应我所邀请,美国陆军研究所微生物专家劳瑞·黑尔,纽兰德九月一日至六日来我所进行学术活动,并作了《福氏痢疾杆菌的毒力及对痢疾感染的免疫反应》,《痢疾毒素的遗传》学术报告。     

哈尔滨地区102株痢疾杆菌耐药性测定

近年来,由于临床上广泛使用抗菌素和有些人擅自滥用抗菌素,致使耐药菌株不断增加,也有些由肠道致病菌耐药株引起爆发流行的报导,其中以痢疾杆菌的耐药问题最为严重。为了解哈尔滨地区痢疾杆菌耐药情况,我们对1990年自痢疾患者分离的102株痢疾杆菌进行了药敏试验及结果分析,现报告如下:     

耐药性福氏痢疾杆菌的研究

临床上急性细菌性痢疾病人,在接受不规则的药物治疗后,转为慢性痢疾或带菌状态的发生率是比较高的。这在促成痢疾杆菌产生耐药性方面可能是重要因素之一。为了探讨自然界中痢疾杆菌形成耐药菌株的规律性。     

痢疾杆菌菌型分布和药物敏感试验

细菌性痢疾是我市夏秋季多发病和常见的肠道传染病,了解痢疾杆菌菌型的分布和痢疾杆菌对常用药物敏感度,对于流行病学的调查,特殊预防,以及临床治疗方面,具有重大意义,同时为我市今后使用痢疾杆菌菌苗提供了可靠依据,现将试验结果介绍如下:     

痢疾杆菌侵袭HeLa细胞基因表达谱的研究

采用cDNA微阵列技术检测了HeLa细胞被痢疾杆菌侵袭1h和3h后的基因表达变化,共发现2倍以上差异表达基因752个,上调基因有509个,下调基因有306个,并初步推测HeLa细胞通过激活某些信号通路,诱导表达多个基因,产生整体的细胞效应,以对抗痢疾杆菌的侵袭。对显著差异表达的两个基因TNFR 1B和ERBB2,在痢疾杆菌侵袭HeLa细胞1h和3h后的表达量经荧光实时定量PCR验证,确定这两个基因的确在痢疾杆菌侵袭期间高表达,它们在细胞对痢疾杆菌2457T侵袭反应中起重要的作用。这些结果促进了对痢疾杆菌分子致病机理的认识,也为形成预防和治疗痢疾的策略提供了理论基础。     

痢疾与痢疾多糖蛋白结合疫苗

<正>痢疾是世界性流行性传染病,在发展中国家尤为严重,发病率高达20000/10万人口,而发达国家只有50/10万人口。痢疾的发病率在1～5岁儿童中最高。尽管痢疾杆菌有30多个血清型,但在一定地区范围内通常只有2～3个流行型,在发展中国家主要是福氏痢疾杆菌,在发达国家主要是宋内氏痢疾杆菌。目前大多数发展中国家无力改善水源、食品和环境卫生状况,加之痢疾杆菌抗药性的出现,使控制痢疾流行更为困难。目前国内外学者都在致力于研制安全有效的痢疾疫苗。     

黄芩茎叶和藤茶抑菌作用及其联合应用研究

为探讨黄芩茎叶、藤茶及两者联合应用对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌的抑制作用,研究采用微量肉汤稀释法分别测定黄芩茎叶和藤茶对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibit concentration,MIC)及时间-杀菌曲线;采用棋盘式微量稀释法测定两者联合使用后的FIC指数。结果显示,黄芩茎叶和藤茶对金黄色葡萄球菌的MIC分别为1、0.25 mg/mL,对痢疾杆菌的MIC分别为4、0.50 mg/mL。两者联合使用,对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌的FIC指数分别为0.75、0.625,表现出相加的作用效果。研究提示基于联合使用,可进一步提高黄芩茎叶的抑菌效力,为实现黄芩茎叶的资源化利用提供科学依据。     

痢疾杆菌大质粒的快速分离与检测

质粒是细菌染色体外小的共价闭环DNA(cccDNA)。质粒的分离与检测是微生物遗传学、基因工程等研究中的基本手段之一。Kopecko叙述了痢疾杆菌大质粒的分离方法,但过程较繁。国内分离痢疾杆菌大质粒并检测其分子量的工作尚未见报道。     

在链霉素、合霉素和磺胺噻唑钠的弱导下耐药性伤寒杆菌和痢疾杆菌的研究

1．本文研究了伤寒杆菌和痢疾杆菌在不同浓度链霉素、合霉素和磺胺噻唑纳合菊培养基中,连续传代后的变异现象。 2．伤寒杆菌和痢疾杆菌对磺胺噻唑钠,不容易形成耐药性,至120代时,其敏威度仅为原始菌株的二倍。但对链霉素较对合霉素更易形成耐菊性。“伤鲢”檬和“弗键”株至110代,其耐菊性分别为原始菌株的1,000倍和16,000倍。“伤合”株和“弗合”株至120代,分别为原始菌株的120—190倍和125倍。 3．耐药菌株生物学特性方面有若干变化,如菌落变小、菌落生长授慢、生化反应减弱或不规律、凝集力下降。耐药性痢疾杆菌毒力不变,耐药性伤寒杆菌毒力有下降趋势。 4．耐药性痢疾杆菌的耐药性最不稳定,在无药肉汤中,传70代后,耐藕性降为原来的1／22,400。耐药性伤寒杆菌,传70代后,耐药性降为原来的1／90。     

基因芯片技术检测3种肠道病原微生物方法的建立

目的:建立一种运用多重PCR和基因芯片技术检测和鉴定伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌和单核细胞增生利斯特菌的方法。方法:分别选取伤寒沙门氏菌染色体ViaB区域中编码调控Vi抗原表达的基因(vipR)、痢疾杆菌编码侵袭质粒抗原H基因(ipaH)和单核细胞增生利斯特菌溶血素基因(hlyA)设计引物和探针,探针3'端进行氨基修饰,下游引物标记荧光素Cy3。在优化的PCR和杂交反应条件下,进行三重PCR扩增,产物与包括3种致病菌特异性探针的基因芯片杂交。在评价基因芯片的特异性和灵敏度之后,对临床样本进行检测。结果:只有3种目的致病菌的PCR产物在相应探针位置出现特异性信号,其他阴性细菌均无信号出现;3种致病菌的检测灵敏度均可达到103CFU/mL;检测30例临床样本的结果与常规细菌学培养结果一致。结论:所建立的可同时检测伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌和单核细胞增生利斯特菌的基因芯片方法快速、准确,特异性高,重复性好,为3种肠道致病菌的快速检测和鉴定提供了新方法和新思路。     

痢疾杆菌大质粒的快速分离与检测

质粒是细菌染色体外小的共价闭环DNA (cccDNA)。质粒的分离与检测是微生物遗传 学、基因工程等研究中的基本手段之一。Kopeckots, 叙述了痢疾杆菌大质粒的分离方法,但过 程较繁。国内分离痢疾杆菌大质粒并检测其分 子量的工作尚未见报道。     

539株痢疾杆菌生化反应报告

为了探索痢疾杆菌在生化特性方面的变异确地鉴定出痢疾杆菌,我们于1975—1978年先情况,摸清各菌型之间的生化反应规律,以便准后收集了539株痢疾杆菌,做了较系统的生化