肠杆菌素特异性抗体对不同革兰阴性菌的体外生长抑制作用

正肠杆菌素(Ent)介导的高亲和力铁离子摄取系统对革兰阴性菌病原体的生存和侵染宿主至关重要。本研究建立了一种有效制备新型Ent结合疫苗的方法,制备的疫苗可诱导高水平的Ent特异性抗体,其抑菌特性与脂质运载蛋白(具有Ent高结合能力的先天免疫效应物)相似。糖基化的Ent可帮助肠道病原体逃避宿主脂质运载蛋白的铁载体螯合作用,在与沙门菌素在内的各种Ent衍生物发生交叉反应时,Ent特异性抗体显著优于脂质运载蛋白。     

氨基酸农药试验情况

<正> (昭和49年(1974)试验新农药 Lecithos)摘译自《今月农药》1975.2期1974年日本提供卵磷脂农药(70%的乳剂,40%的可湿性粉剂),在十二个地区进行试验,主要是针对各种蔬菜,而且主要是蔬菜的白粉病。在1974年并有所总结。1.对甜瓜类白粉病,乳剂2000ppm.6～7日散布,与(对照剂),虽有差异,但效果比较高,不存在药害。可湿性粉剂有同等效果,不污染果实。     

中国蓟马科七新记录种

笔者在周尧教授指导下从事中国蓟马科分类研究过程中,发现7个中国新记录种。现报导如下:1.黄细心扁蓟马Hydatothrips boerhaavlae(Sesh.＆Anan.,1954)Sericothrips(Hydatothrips)boerhaaviae Sesh.＆Anan.,1954.Ind J.Ent.16(3):210—212.Hydatothrips boerhaaviae(Sesh.＆Anan.),Bhatti,1973,Oriental Insects 7(3):422—424 观察标本:1,北京妙峰山,1964—Ⅶ—9,杨某昆采自杂草。     

蜜蜂克什米尔病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立和评价

蜜蜂克什米尔病毒(Kashmir bee virus,KBV)是一种高毒力的急性蜜蜂病毒,可以引起蜜蜂的死亡和蜂群崩溃.本研究旨在建立一种灵敏、快速检测KBV的TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法.参照GenBank中polymerase polyprotein有关基因序列,设计一组特异性引物和探针,并通过体外转录法制备RNA标准品作为阳性模板.在对反应体系进行优化的基础上,建立了 KBV的实时荧光RT-PCR检测方法并进行了特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样本验证.结果显示:该方法能有效扩增8×100拷贝/μL～8×107拷贝/μL 的KBV标准品,建立的标准曲线呈现良好的线性关系.该方法的检测灵敏度为8拷贝/μL,对其他蜜蜂病毒不发生交叉反应,具有很好的特异性;重复性试验结果显示组内和组间的变异系数分别低于1％和2％,重复性良好.应用本研究建立方法与常规RT-PCR方法对样品进行检测,TaqMan实时荧光RT-PCR检测方法的特异性优于常规RT-PCR.本研究建立的实时荧光RT-PCR检测具有良好的敏感性、特异性和重复性,为KBV的检测和流行病学调查提供技术支持.     

茚虫威对意大利蜜蜂毒性研究

通过单次饲喂高浓度茚虫威药液以及连续饲喂亚致死浓度茚虫威药液进行染毒,记录和分析急性慢性经口毒性试验中,意大利蜜蜂的中毒症状和死亡情况;测定慢性毒性试验中意大利蜜蜂每天药液消耗量,并计算危害商值进行初步风险评价。结果表明,98%茚虫威原药对意大利蜜蜂的半致死剂量48 h-LD_(50)为0.399μg a.i./bee,每日半数致死剂量240 h-LDD_(50)为0.0233μg a.i./bee/day,其中慢性毒性试验中1.66 mg a.i./L处理组的意大利蜜蜂死亡率在144 h之后呈现显著性的增加,240 h达到70%,且该处理组意大利蜜蜂的摄食量为17.6μL,少于对照组和其他处理组。此外,茚虫威根据目前推荐使用剂量计算出的危害商值基本大于50。茚虫威对意大利蜜蜂急性毒性(48 h)是高毒,存在较高的风险;亚致死浓度在144 h后会对意大利蜜蜂造成较大的威胁。     

10种杀菌剂对中华蜜蜂的急性毒性测定及风险评估

明确80%代森锰锌可湿性粉剂、50%啶酰菌胺水分散型粒剂、50%腐霉利可湿性粉剂、50%烯酰吗啉可湿性粉剂、100 g/L氰霜唑悬浮剂、20%叶枯唑可湿性粉剂、2%春雷毒素水剂、12.50%腈菌唑乳油、25%丙环唑乳油和15%咪鲜胺微乳剂等10种杀菌剂对中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂的急性毒性,并评价其对中华蜜蜂工蜂的风险性。在室内采用摄入法和点滴法测定10种杀菌剂对中华蜜蜂工蜂的急性经口和接触毒性。结果表明代森锰锌,啶酰菌胺,腐霉利等7种杀菌剂对中华蜜蜂的急性毒性均为低毒;腈菌唑和丙环唑对中华蜜蜂的急性经口毒性和急性接触毒性均为中毒,咪鲜胺对中华蜜蜂的急性经口毒性为高毒,急性接触毒性为中毒;这3种杀菌剂且均属于中等风险性。建议禁止咪鲜胺在蜜源作物开花授粉期施用,慎重选择中等毒性杀菌剂腈菌唑和丙环唑,尽量选择对蜜蜂低毒的杀菌剂,以保护中华蜜蜂的安全。     

黄其林教授著作目录

1946南京蛛类志《Rhopalocera from Nanjing)19525呱e intere硕ng Chinese spP.of〔刁o洲。蒯Proe.ent.soe.Wash.55 pp.6一9(wi比Rosa H.H.)1955几种舟峨科幼虫外形的比较(on the External mo印hol吃y of some Notodontidae larvae)昆虫学报 (Acta Ent.Siniea)5(3):275一286l956I’I.种斑蛾科幼虫外形的比较( On oome mo印hol眼ical fcatures of the Zyg耽nid larvae)昆虫学报(Aeta Ent.Shaea)‘(2):193一021956大叶黄杨斑蛾(乃口即沁血‘a Moore)幼虫上领的一种畸形构造(on the比norm以ity oft坛mandible. of az羚aenid larvae乃r…     

石豆兰属(Bulbophyllum)(兰科)中两个种的新名称(英文)

本文发表石豆兰属Bulbophyllum(Orchidaceae)中两个种的新名称:Bulbophyllum maanshanense和Bulbophyllum xiajinchuangense以取代两个应废弃的晚出同名:Bulbophyllum malipoense Z.J.Liu,L.J.ChenW.H.Rao(2010),non Z.J.Liu,S.C.ChenS.P.Lei(2008)和Bulbophyllum minus Z.J.Liu,L.J.ChenW.H.Rao(2010)"minor",non(De Wild.)De Wild.(1921)。     

中华蜜蜂工蜂王浆腺活性的变化

本试验以短期体外放射化学测定法,测定了中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂的王浆腺(HP)的活性,以意大利蜂(Apis mellifera ligustica)进行对比.结果表明工蜂的HP在体外培养液中1—6小时掺入的放射性DPM几乎呈直线增加.春夏繁殖期,中华蜜蜂7日龄工蜂的HP活性最强,而意大利蜜蜂是10日龄.中华蜜蜂的越冬工蜂的HP虽呈发育状态,但活性低.而在早春,当蜂群内部出现幼虫时,越冬工蜂的HP又呈现活性.     

福建中华蜜蜂种群形态数值分析

为了探明福建中华蜜蜂Apis cerana cerana的种群分布和种群形态特征, 探索中华蜜蜂种群分化规律, 本文对福建不同生态区的11个样点780头中华蜜蜂工蜂, 采用Ruttner (1988)提出的30个形态标记, 运用差异显著性分析、 逐步判别分析和聚类分析方法, 进行形态特征分析。结果显示： 福建中华蜜蜂存在较大的形态差异和种群分化, 至少存在3个中华蜜蜂种群： 福建北部种群、 福建中部种群和福建南部种群。福建北部中华蜜蜂种群具有较大的蜜蜂个体和器官, 包括吻长、 前翅、 蜡镜、 后足等以及独特的前翅翅脉角： 武夷中华蜜蜂具有最大的翅脉角G18, J10和L13, 最小翅脉角E9 (P<0.01); 光泽和政和中华蜜蜂表现较小翅脉角K19, O26和L13, 较大的翅脉角B4和N23 (P<0.01)。福建中部福州、 尤溪、 将乐、 宁德中华蜜蜂种群具有相对较大的蜜蜂个体和器官, 较大的翅脉角G18和K19 (P<0.01), 以及中等大小的翅脉角N23。福建南部龙岩、 永定、 武平、 漳州中华蜜蜂种群具有较小的个体 (P<0.01)。前翅翅脉角分析有可能成为一种更有效、 准确的种群形态分析方法。本研究结果对福建中华蜜蜂资源的保护和合理利用具有重要的指导意义。     

中草药精油对蜜蜂狄斯瓦螨的熏杀效果

在实验室条件下测定10种中草药精油对蜜蜂狄斯瓦螨Varroa destructor Anderson&Trueman的熏蒸效果,通过测定中草药精油对蜜蜂和螨的毒性,筛选出具有杀螨活性而对蜜蜂较安全的中草药精油。结果表明:中草药精油对蜜蜂都有一定的毒害;而在对蜜蜂无毒性的剂量下,48h时茴香油、丁香油、肉桂油分别能引起92.5%、54%和12%的螨死亡,显著高于对照组(P<0.05);根据初步筛选结果,选择茴香油和丁香油进行进一步毒力测定,结果表明48h时茴香油对螨的LD50为0.949μL,蜜蜂的LD50为4.033μL;丁香油对螨的LD50为0.795μL,蜜蜂的LD50为1.965μL。茴香油在48h时有着较高的选择比(蜜蜂的LD50/螨的LD50=4.250);GC-MS鉴定茴香油最主要成分是茴香脑(占总成分的88.72%),丁香油的主要成分是丁香酚(68.28%)和石竹烯(20.79%)。可见,茴香油和丁香油在控制狄斯瓦螨的应用上具有很大潜力。     

湖南的新记录植物(八)

报道了湖南种子植物新记录种6个,即:榕树Ficus microcarpa L.、封怀凤仙花Impatiens fenghwaiana Y.L. Chen、平坝凤仙花Impatiens ganpiuana Hook. f.、裂叶月见草Oenothera laciniata Hill、弯管马铃苣苔Oreocharis curvituba J. J. WeiW. B. Xu和象草Pennisetum purpureum Schum.(象草为归化种)。对部分种类的主要特征、生境和地理分布进行了初步讨论。     

黑龙江省发现二种鸟类新纪录

[1]刘晓龙,赵文阁,郭玉民,赵鲁安,刘清武.黑龙江省鸟类三种新纪录[J].四川动物,1998,17(4):175.[2]郭玉民,李显达,方克艰,李显志,陈景权,张晋.东北鸟类新纪录———红腹红尾鸲[J].野生动物,2002,23(1):47.[3]郭玉民,方克艰,李显达,陈景权,李显志,张晋,孟凡强.黑龙江省鸟类新发现———褐岩鹨[J].野生动物,2002,23(3):48.[4]郭玉民,李显达,方克艰,于晓东.东北鸟类新纪录———栗头莺[J].四川动物,2003,22(2):87.[5]约翰·马敬能,卡伦·菲利普斯,何芬奇.中国鸟类野外手册[M].长沙:湖南教育出版社,2000:319,478.[6]V Flint.Birds of Russ…     

Acerataspis属姬蜂一新种(膜翅目,姬蜂科)

Acerataspis UchidaCerataspis Uchida (nec Gray), 1934, Trans. Sapporo Nat. Hist. Soc., 13:273.Acerataspis Uchida, 1934, Ins. Mats., 9:23.Acerataspis Cushman, 1937, Arb. morph. taxon. Ent. Berlin-Dahlem, 4: 290.Acerataspis Michener, 1940, Psyche, 47(4): 121.Aceratospis(sic !)赵,1957, 昆虫学报, 7 (1): 109. Acerataspis Uchida是一个较小的属,已知有4种,即:日本的clavata(Uchida),属模式种,台湾的 formosana Cushman,广东的 sinensis Michener,和福建的fukienen-sis Chao。本文增加一个新种,称 A.szechuanensis Chao,sp.nov., 产于四川。这5种可根据下列检索表鉴定。     

关于ISSR反应弥散背景消除方法的几点讨论

目的:讨论消除ISSR反应弥散背景的一些方法。方法:对于不同的反应条件,分别进行梯度试验,包括:退火温度(45℃、47℃、49℃、50℃)、不同引物浓度(0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.6μmol/L、0.8μmol/L)、不同模板浓度(50ng、100ng、200ng)及不同纯度。结果:梯度试验结果如图1~10所示。退火温度47℃,引物浓度0.6μmol/L,模板浓度100ng左右,纯度高的模板,在这些条件下得到的电泳图谱比较清楚。结论:导致弥散背景产生的主要原因有:过低的退火温度;不适当引物浓度;较高的模板浓度;还有模板纯度不高。     

广谱BT杀虫剂田间试验报告

由于 99年底到 2 0 0 0年春在我地区气温偏低 ,猿叶虫的发生时间明显推迟 ,而且虫口密度亦较往年有所减少 ,在四月中旬进行虫情检查时比往年虫口数少 ,到 4月底发现越冬猿叶虫的孵块 ,到 5月 8日开始发现大量 1龄幼虫发生 ,本试验以 5月 8日开始进行。本试验面积0 .0 5ｈｍ2 ,共计对照组 ,市售ＢＴ组 ,ＡＶ农药组 ,ＬＣＪ 0 8粉剂 ,ＬＣＪ 1 2粉剂 ,ＬＣＪ 0 8悬液 6个试验组进行对比试验。1 .试验材料 :试验样品有中科院武汉病毒所提供的ＬＣＪ 0 8粉剂 ,ＬＣＪ 1 2粉剂 ,武汉市售ＢＴ粉剂。试验虫为小猿叶虫 ,试验作物为小白菜。2 .试验方…     

亚致死剂量吡虫啉胁迫对意大利蜜蜂内勤蜂与外勤蜂免疫解毒相关基因表达及免疫解毒酶系活力的影响

摘要: 【目的】吡虫啉(imidaclorprid)是广泛使用的新烟碱类杀虫剂之一。大量研究表明亚致死剂量吡虫啉影响意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称“意蜂”)幼虫的发育和成年蜜蜂的采集、学习等行为。本实验旨在探究亚致死剂量吡虫啉对意大利蜜蜂内勤蜂(1日龄成年工蜂)与外勤蜂(21日龄成年工蜂)免疫解毒相关基因表达及免疫解毒酶系活力的影响,进而为蜜蜂健康的维护提供科学依据。【方法】测定饲喂含0.1 ng/μL吡虫啉的50%蔗糖溶液不同时间后意蜂成年工蜂的存活率;利用荧光定量PCR检测饲喂含0.1 ng/μL吡虫啉的50%蔗糖溶液6 d后其体内免疫基因多酚氧化酶基因(PPOA3, GenBank登录号： GB43738), Abaecin类抗菌肽基因(ABA, GenBank登录号： GB18323),葡萄糖脱氢酶基因(GLD, GenBank登录号： GB43007)和解毒基因细胞色素P450基因(CYP450 6a2, GenBank登录号： GB49876)的表达,并采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验测定其体内细胞色素P450酶(cytochrome P450, CYP450)含量和多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活力。【结果】1日龄和21日龄意蜂成年工蜂连续饲喂6 d含0.1 ng/μL吡虫啉的50%蔗糖溶液后,其存活率与对照组(饲喂含0.1 ng/μL丙酮的50%蔗糖溶液)无显著差异;连续饲喂9 d含0.1 ng/μL吡虫啉的50%蔗糖溶液后,1日龄意蜂成年工蜂存活率与对照组无显著差异,而21日龄意蜂成年工蜂存活率与对照组有显著差异。1日龄意蜂成年工蜂自由取食含0.1 ng/μL吡虫啉的蔗糖溶液6 d后, PPOA3, CYP450 6a2, ABA和GLD表达水平,细胞色素P450含量以及多酚氧化酶活力与对照组相比均有显著下调趋势;而21日龄意蜂成年工蜂取食该药液6 d后,CYP450 6a2, ABA和GLD表达水平及多酚氧化酶活力与对照组相比均有显著下调趋势,PPOA3表达水平和细胞色素P450含量有显著上调趋势。【结论】亚致死剂量吡虫啉影响意大利蜜蜂内勤蜂与外勤蜂免疫解毒相关基因的表达及免疫解毒酶系活力;吡虫啉短期胁迫对意大利蜜蜂内勤蜂与外勤蜂的存活无显著影响,长期胁迫则会影响意大利蜜蜂内勤蜂与外勤蜂的存活。     

蜜蜂残翼病毒TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立

蜜蜂残翅病毒(Deform wing virus,DWV)已成为世界上最著名、分布最广、研究最为深入的昆虫病原.虽然DWV以前存在于蜜蜂种群中,但一种新的媒介一外寄生螨Varroa破坏体的到来和全球传播,极大地促进了 DWV的流行病学.为了建立快速、准确且能定量分析的蜜蜂残翅病毒,DWV检测方法,本研究参照GenBank中已登录的DWV高度保守的3C-RdRp基因区域,设计了 1对特异性引物和带有羧基荧光素(Fast Auxiliary Memory,FAM)与淬灭基团(Eclipse)标记的TaqMan探针,并对反应条件进行优化,建立了检测DWV的TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PCR检测方法(TaqMan qRT-PCR),同时对该检测方法的特异性、敏感性、重复性进行了试验,并对临床样品进行检测.结果显示:该方法最佳上下游引物和探针浓度分别为12.5μmol/L和10μmol/L,最佳退火温度为59℃;敏感性试验中,对DWV质粒标准品检测下限为2.58×101拷贝/μL;本方法特异性较好,对蜜蜂常见病毒-蜜蜂慢性麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)、蜜蜂急性麻痹病毒(Acute paralysis virus,ABPV)、黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)、囊状幼虫病毒(Sacbrood virus,SBV)、以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)和中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)无交叉反应;且批内变异系数和批间变异系数均小于2％.利用该方法对49份临床疑似样本进行检测,其中DWV阳性样本为35份,检出率高于常规RT-PCR方法,且病毒载量大于1×107拷贝/只样本数共24份,表明辽宁和河北部分地区感染DWV蜂群中病毒载量较高,流行情况比较严重.因此,本研究建立的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,能够用于DWV病原监测、流行病学调查和病毒定量分析等相关研究.     

氨基酸,肽和蛋白质的色谱分析及色谱制备

<正> CA 98(01)2387d J 质体中支链氨基酸和支链α酮酸的高压液相色谱测量,Nissen,Steven L.,etal:J.Chromatogr.1982,232(1),170—5(英文)CA 98(01)2403_f J     

意大利蜜蜂N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质分析

【目标】N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖糖苷酶(NAGase)是一种重要的几丁质分解酶,能从N-乙酰葡萄糖苷的非还原端催化去除β-1,4-N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基,参与了昆虫外骨骼的蜕皮过程。研究蜜蜂该酶的特征有助于阐明其在蜜蜂发育过程中的作用机制。【方法】采用40%-70%硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和葡聚糖G-100凝胶过滤层析的方法从意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica幼虫体内分离纯化NAGase。以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)为底物检测该酶的活力,用native PAGE和SDS-PAGE检测酶的纯度。IEF-PAGE测定该酶等电点。葡聚糖G-200凝胶过滤层析测定酶的总分子量。【结果】结果显示,纯化的NAGase酶的比活力为803. 09 U/mg,总分子量为77. 3 kD。结合SDS-PAGE表明该酶由两个具有相同分子量(39 k D)的亚基组成。该酶等电点为4. 8。酶水解底物pNP-NAG的过程遵循米氏方程,米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm)分别为0. 11 mmol/L和17. 65μmol/L·min。该酶水解反应的最适pH和最适温度分别为pH 5. 5和60℃。酶催化pNP-NAG反应的活化能为64. 8 k J/mol。Pb2+,Cu2+,Zn2+和Al3+对该酶有不同程度的抑制作用。【结论】本研究描述了意大利蜜蜂NAGase的分离纯化方法及其理化性质,为进一步进行蜜蜂NAGase的结构解析和功能研究奠定基础。