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1.
纯化了ArthrobacterD-木糖异构酶的三个突变体。T89S,V134I的比活(U/mg)分别为3.42和6.18,W136E没有活性。T89S和V134I的活性需要二价阳离子,对于T89S,Mg2+的作用强于Co2+.在以木糖为底物时,T89S的Km值为49.8mmol/L,V134I的Km值为9.8mmol/L.在以果糖为底物时,木糖醇对T89S是竞争性抑制剂,山梨糖醇对T89S和V134I都显示了混合型的抑制作用。 相似文献
2.
目的和方法:采用双微电极电压钳(TEV)法研究细胞外Mn^2+对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道(IRK1)的阻断作用。结果:细胞外Mn^2+浓度分别为1、1.25、2.5、5、10和20mmol/L,K^+浓度为90mmol/L,可见Mn^2+对IRK1的瞬间电流(旋加电压后2ms)具有Mn^2+浓度依赖性和电压依赖性阻断作用;细胞外加Mn^2+浓度较高时强;细胞外K^+浓度为90mmol/ 相似文献
3.
机械力对鼠脑微血管内皮细胞膜电流的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
采用膜片钳技术以全细胞方式在鼠脑微血管内皮细胞中记录到一延迟外向电流,对K^+具有高度特异性,胞外施加20mmol/L的TEA-Cl在明显抑制该电流。实验的保持电位定在-100mV,测试电位从-100mV至+90mV,每次增加10mV,刺激波宽为2100ms。该电流具有TEA敏感,并有浓度依赖性,其IC50约为2.0mmol/L,类似延迟整流性钾电流特征(IKv)。机械力作用下可引出一外向电流,膜 相似文献
4.
杜氏盐藻细胞吸收K^+的Km为2.86mmol/L,Vmax为1.39μmol/10^8cells.h。钒酸钠和DES、CCCP、Li^+抑制藻细胞对K^+的吸收。高渗震动促进藻细胞H^+的分泌,降低K^+的吸收速率,CCCP和Li^+减弱了高渗震动对藻细胞K^+吸收的抑制。高渗震动对藻细胞K^+分泌有轻微的抑制作用。 相似文献
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6.
6—BA诱导的带正电荷的葡萄叶过氧化物酶 总被引:7,自引:0,他引:7
河岸葡萄叶的带正电荷过氧化物酶可受6-BA诱导,但盐,H2O2或Fe^2++H2O2均使叶片COPD活性明显下降,而高浓度的无机盐明显刺激纯COPD活性增加。在以愈创木酚为底物时CPOD最适pH为4.60-5.75,对H2O2的表面Vmax和Km值分别为110U/mg蛋白和1.15mmol/L。 相似文献
7.
采用膜片钳技术以全细胞方式在小鼠腹腔渗出巨噬细胞(PEM)中记录到一种不完全失活的外向K+电流(Io),该电流在膜电位正于-10mV时激活,对K+具有高度特异性,其半值电导电位V1/2为79.5mV,在膜电位正于30mV时,该电流失活,在60-120mV的膜电位范围内,其失活时间常数τi与膜电位无关.随着胞外K+离子浓度([K+]o)升高,该电流的失活过程减慢。在生理电压范围内(-80-0mV),该电流缺乏稳态失活,且其失活不具有频率依赖性。胞外4-AP(3mmol/L)、Ba2+(3mmol/L)及TEA(5mmol/L)可抑制该电流,抑制率分别为85%,66%及31%。胞外Zn2+(1mmol/L)可影响该电流活性,对该电流的抑制具有电压依赖性 相似文献
8.
背角无齿蚌碱性磷酸酶的分离,纯化及其动力学研究 总被引:24,自引:2,他引:24
作者对背角无齿蚌外套膜的碱性磷酸酶(AKP)进行了分离纯化,并对其动力学性质进行了初步研究,外套膜匀浆,经正丁醇抽提,盐析,SephadexG-100凝胶过滤等步骤,得到了比活力主国149.6单位/mg蛋白的酶制品,通过动力学方法测得其最适pH值为9.5,最适温度为40℃,以磷酸苯二钠作底物的Km值为0.57mmol/L,Mg^2+,Ca^2+对酶有激活作用,而Cu^2+,Zn^2+,KH2PO4 相似文献
9.
用电泳迁移分析方法研究了21nt脱氧寡核苷酸G3TG2TGT2G5TG2TGT(CP1)与129bp的乙肝病毒(HBV)核衣壳启动子(Cp)片段内一位点结合形成的三链DNA的特异性及稳定性.在克隆有HBV基因组的质粒pCP10的酶切产物中,CP1仅与含Cp的129bp片段结合.在20mmol/LMg2+溶液中其解离常数(Kd)为1.4×10-7mol/L.不同离子稳定三链DNA的效果依次为sp4+(精胺)>Mg2+>Zn2+>Na+>K+,离子之间存在相互竞争作用.比CP1多一误配碱基的脱氧寡核苷酸G2TG2TGTG3TG2TG2TG2T(CP2)在20mmol/LMg2+溶液中与Cp结合的Kd值约为CP1的1/7,而在60mmol/LK+或5mmol/LZn2+溶液中检测不到它与Cp的结合,这进一步显示了三链DNA形成的特异性.细胞的生理离子浓度被认为是:Sp4+1mmol/L,Mg2+10mmol/L,K+140mmol/L,因此,CP1在细胞内将能特异地与Cp结合并具有较好的稳定性. 相似文献
10.
本文从含ArgRS306KR基因args306KR的pUC18重组质粒的大肠杆菌TG1转化子中经DEAE-Sephacel和Blue-Sepharose两步柱层析,得到电泳一条带的ArgRS306KR。纯酶的比活为2790单位/毫克。该酶氨酰化和ATP~PPi交换活力的最适pH分别为pH8.3和pH7.5。氨酰化活力对ATP、Arg和tRNA的Km分别为2.6mmol/L、14.0μmol/L和5.0μmol/L:Vmax为7630单位/毫克;koat为9S-1。ATP~PPi交换活力对ATP和Arg的Km分别为8.3mmol/L和99μmol/L;Vmax为16320单位/毫克;kcat为18S-1。 相似文献
11.
细胞外Ba^2+对内向整流钾通道的阻断作用 总被引:1,自引:0,他引:1
实验采用双微电极电压箝(TEV)法研究Ba^2+对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道(IRK1)的阻断作用。细胞外Ba^2+浓度分别为0,1,3,10和100μmol/L,K^+浓度分别为10和90mmol/L,可见快速开通道阻断剂Ba^2+对IRK1的瞬间电流(施加电压后1ms)的阻断作用依赖Ba^2+、K^+、时间和电压;但对IRK1的开关特性几乎无影响,IRK1对之不通透。三级指数拟合的结 相似文献
12.
邱全胜 《Acta Botanica Sinica》1999,41(9):962-966
以大豆( Glycine max L.) 下胚轴为材料, 采用二相法制得高纯度质膜微囊。实验发现,K+ 对质膜H+_ATPase水解活力和转运活力刺激差别显著,对转运活力刺激850% , 对水解活力仅刺激28 .2% 。动力学结果表明,有K+时ATP水解的Km 值为0.70 mmol/L,Vmax 为344 .8 nmol Pi·mg-1 protein·min-1 ; 无K+ 时ATP水解的Km 值为1 .14mmol/L, Vmax为285.7 nmol Pi·mg-1 protein·min-1 。K+ 对ATP水解的最适pH 值也有影响,有K+ 时为6 .5 ,无K+ 时降低到6.0 。进一步实验发现,K+ 对羟胺和钒酸钠的抑制作用影响较大,K+ 可以提高质膜H+_ATPase 对羟胺和钒酸钠的敏感性。结果表明,K+ 可以调节大豆下胚轴质膜H+_ATPase 水解与转运活力之间的偶联程度 相似文献
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P物质对大鼠DRG神经元胞体膜的作用 总被引:17,自引:1,他引:17
本文在大鼠DRG神经元标本上应用细胞内记录,以确定SP对DRG细胞的膜反应及其可能的离子机制。实验所测DRG细胞静息膜电位为-58.9±8.2mV(X±SE,n=81)。传导速度:A_(α/β)细胞为20.4±4.8m/s(X±SE),范围14.1-28.7m/s(47/60);Aδ及C类细胞为9.8±5.2m/s,范围1.2-13.7m/s(13/60)。浴槽滴加SP(10 ̄(-7)-3×10 ̄(-4)mol/L)在大多数细胞可引起明显的膜去极化反应(56/60)。少数细胞对SP无反应(4/60)。在SP去极化期间膜电导值有所增加,从平均值2.72×10 ̄(-8)mho增加24.6%(n=3)。所测逆转电位值在+40-+50mV之间(n=3)。浊流平衡液(BSS)中NaCl以氯化胆碱置代,或用含TTX(10 ̄(-5)mol/L)的BSS灌流,可使SP-去极化幅值大大减小但不能完全消除。而高(20mmol/L)和低(0mmol/L)Ca ̄(2+)的BSS灌流时,使SP-去极化幅值相应的增加和降低。用含10 ̄(-4)mol/LCd ̄(2+)及10 ̄(-2)mol/LTEA的BSS灌流,均使SP-去极化明显减小。 相似文献
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人血红细胞酷氨酸蛋白磷酸酶(PTPP)的研究:Ⅱ.胞浆PTPP的分离纯… 总被引:1,自引:0,他引:1
人血红细胞胞浆部分经(NH4)2SO4沉淀,DEAE-纤维素(DE2)柱层析,磷酸纤维素柱层析(P11)得到部分纯化的PTPP,产率;5.7%,提纯1075倍。以^32P-Tyr-Poly(G4:T)作底物,测得其表征Km约为0.5-0.8μmol/L。该酶的最适pH和最适温度分别为7.0-7.8及37-40℃。Zn^2+等二价金属离子及Na3VO4等酸根基团对其活性有明显的抑制作用;EDTA、甘 相似文献
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渗透胁迫对高粱根中K^+累积的刺激作用 总被引:4,自引:0,他引:4
本工作中发现,2,4-二硝基酚可有效地洗去高粱根中的K^+,从而提高了测定和比较K^+累积量的显示度和准确性,渗透胁迫下,高粱根中K^+的累积量比对照增加高达6.7倍;同时,组织的H^+分泌明显受到促进,动力学研究表明,经PEG胁迫的高粱根对K^+的亲和力显著增强。对照:Km=9.25mmol/L,Vm=23.6μmol g^-1DW min^-1;PEG处理者:Km=27.25μmol/L,Vm 相似文献
18.
回加Ca^2+对NaCl(2 mol/L)处理菠菜PSⅡ颗粒放氧活恬的作用表现出有两种Km值分别为0.021和0.545mmol/L高亲和与低亲和的Ca^2+重结合过程。高浓度NaCl和低pH(3.0)处理支Ca的PSⅡ颗粒的光抑制放氧活性半衰期明显减小,重结合Ca^2+后,虽然大部分丧失的放氧活性可恢复,但PSⅡ颗粒放氧活性对光抑制的敏感性却并不随之恢复,t1/2无明显改变。显然,重组Ca^2+ 相似文献
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铝和铝+钙对小麦幼苗根尖质膜,液泡膜微囊ATP酶和膜流动性?… 总被引:7,自引:0,他引:7
研究了铝和铝+_钙对小麦功苗根尖质膜、液泡膜微囊H^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶、Mg^2+-ATP酶活性及共动力学参数和膜流动性的影响。在质膜和液泡膜微囊制剂中加入1.0mmol/L的AI^3+(AICI3)时,H^2+-ATP囊制剂中加入1.0mmol/L的AI^3+(AICI3)时,H^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶、Mg^2+-ATP酶活笥和酶促反应的Vmax及膜流动性下降,而酶 相似文献
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三丁基锡对人红细胞膜Na^+,K^+—ATPase活性的抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
三丁基锡(TBT)是人红细胞膜上Na^+,K^+-ATPase的一种抑制剂。该化合物对Na^+,K^+-ATPase有很强的抑制能力。在正常的反应体系中,TBT浓度仅为10μmol/L时,该酶的活性全部丧失;其抑制Na^+,K^+-ATPase的IC50值为2.2μmol/L.K^+能增强TBT的这种抑制作用,TBT为K^+的反竞争性抑制剂。 相似文献