共查询到20条相似文献,搜索用时 31 毫秒
1.
红花菜豆(矮生红花变种,Phaseoluscoccineusvar.rubronanus)凝集素(PCL)识别高甘露糖型寡糖并与之结合,它的生物学作用都与其糖结合专一性有关。PCL的血凝作用不显示供血动物专一性和和血型专一性。PCL除凝集红细胞外亦凝集动物其它细胞,如小鼠脾细胞、人精细胞及某些肿瘤细胞如黑色素瘤细胞M21、胄癌细胞等。此外PCL亦凝集某些微生物如野生型和H.B.101大肠杆菌以及面包酵母。PCL具有促细胞分裂作用,使小鼠脾细胞和人外周血淋巴细胞转化的PCL的最低浓度为250μg/L。PCL能抑制某些癌瘤细胞的生长,在测试的几种细胞中,对人黑色素瘤细胞M21生长的抑制较为明显。PCL亦能抑制野生型大肠杆菌和面包酵母的生长,PCL的细胞凝集、促淋巴细胞转化和抑制细胞生长的作用,都是首先通过它的糖结合部位与细胞表面的糖基结合导致的。 相似文献
2.
黄精凝集素Ⅱ的纯化及部分性质研究 总被引:5,自引:0,他引:5
囊丝黄精(PolygonatumcyrtonemaHua.)的根状茎,经浸取、用硫酸铵分级沉淀、猪甲状腺球蛋白-Sepharose4B柱亲和层析、CM-Sepharose柱离子交换层析和SephadexG-100凝胶过滤,可以分离纯化出黄精凝集素Ⅱ(PCLⅡ).纯化的PCLⅡ在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示单一蛋白染色带;在快速高效液相色谱中亦为单一蛋白峰,经分子筛层析测得分子量为15.9kD,最大紫外吸收值在278nm,PCLⅡ只凝集兔红细胞,当浓度为0.25μg/ml时,即可发生凝集反应,此凝集兔红细胞的能力可被D-甘露糖和猪甲状腺球蛋白所抑制.氨基酸组成分析表明PCLⅡ分子中富含酸性氨基酸,N末端为丙氨酸.经测定PCLⅡ分子中含有3个色氨酸和2.4%的中性糖.原子发射光谱分析表明,该凝集素分子中含有Mg和Ca两种金属元素. 相似文献
3.
利用荧光光谱方法研究了红花菜豆凝集素(Phaseoluscoccineusvar.rubronanuslectin,简称PCL),结果表明PCL分子各亚基中的两个色氨酸(Trp)残基分别位于PCL分子表面和分子内。标记了DNS的PCL荧光偏振研究指出,致使PCL在10mmol/LSDS条件下失活的主要原因可能是亚基解离。荧光偏振研究还表明,甲状腺球蛋白、甘露聚糖、海参多糖硫酸酯可与PCL结合。荧光探针bis-ANS与PCL的结合可引起明显的荧光增强和发射谱蓝移,表明PCL分子中存有疏水区域。结合了的bis-ANS还可和PCL中的Trp发生能量传递。 相似文献
4.
芦荟凝集素的分离、纯化和部分性质的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
新鲜芦荟叶(Aloe vera L.var.chinensis(Haw.)Berger)于室温用低浓度NaCl溶液提取。离心和透析后,经N-乙酰氨基葡萄糖0Sepharose 4B亲和层析,分离纯化出芦荟凝集素(ACL)。用SephadexG-100测表观分子量为35KD,SDS-PAGE出现两条色带;染色 ;宽带和较浅的罕带。亚基分子量分别为15KD和20KD。能专一性凝集兔血细胞和人血红细胞 相似文献
5.
大瓶螺蛋白腺经磷酸盐缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、SephadexG-100和Sepharose4B凝胶过滤,可获得在不连续PAGE(pH4.3和pH8.9)上显示单一蛋白质染色带的大瓶螺凝集素(AGL).该凝集素对人血红细胞无血型专一性,但对A型血红细胞的凝集作用最强.AGL的血凝活力可被乳糖或半乳糖所抑制.AGL分子中的中性糖含量为0.24mg/mg蛋白质.用SDS-PAGE法测得其亚基分子量为15000,且只有一种亚基.AGL中Cys和Phe的含量较高,并较耐热. 相似文献
6.
大瓶螺凝集素的分离纯化及部分性质研究 总被引:2,自引:0,他引:2
大瓶螺蛋白腺经磷酸盐缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100和Sepharose 4B凝胶过滤,可获得在不连续PAGE(pH4.3和pH8.9)上显示单一蛋白质染色带的大瓶螺凝集素(AGL)。该凝集素对人血红细胞无血型专一性,但对A型血红细胞胞的凝集作用最强。AGL的血凝活力可被乳糖或半乳糖所抑制。AGL分子中的中性糖含量为0.24mg/mg蛋白质。用SDS-PAGE法测得其亚基分 相似文献
7.
从半夏块茎鲜汁分离的半夏蛋白具有凝集细胞和促使细胞分裂的作用。在已测试的红细胞中凝集羊、狗、猫、兔、豚鼠、大鼠、小鼠和鸽的红细胞,但不凝集人、猴、猪和鸡、鸭、鹅、龟、蟾蜍、鳝的红细胞。半夏蛋白的血凝作用和已知的多种凝集素一样存在供血动物种属专一性。半抗原抑制试验结果,所测各种单糖、双糖、聚糖和糖蛋白中,只有甘露聚糖和含有寡聚甘露糖苷核心的甲状腺球蛋白有抑制作用,表明半夏蛋白只与甘露聚糖结合,且其分子上与糖互补的位置远远大于一个单糖分子的范围。是目前已知的唯一只与甘露糖而不与葡萄糖结合的一种具有凝集素作用的蛋白质。除红细胞外半夏蛋白亦凝集其它细胞,已测细胞中小鼠脾细胞、人肝癌细胞(QGY7703-3和7402)、艾氏腹水癌和腹水型肝癌细胞均被半夏蛋白凝集,但它不凝集大鼠附睾和猪大网膜脂肪细胞,虽然能和这两种细胞结合。提示半夏蛋白的细胞凝集作用不仅具有动物种属专一性并存在细胞类别专一性。半夏蛋白的促细胞分裂作用亦有动物种属专一性,它促使兔外周血淋巴细胞转化,但不促使人外周血淋巴细胞分裂。 相似文献
8.
半夏蛋白的若干生物学性质 总被引:14,自引:0,他引:14
从半夏块茎鲜汁分离的半夏蛋白具有凝集细胞和促使细胞分裂的作用。在已测试的红细胞中凝集羊、狗、猫、兔、豚鼠、大鼠、小鼠和鸽的红细胞,但不凝集人、猴、猪和鸡、鸭、鹅、龟、蟾蜍、鳝的红细胞。半夏蛋白的血凝作用和已知的多种凝集素一样存在供血动物种属专一性。半抗原抑制试验结果,所测各种单糖、双糖、聚糖和糖蛋白中,只有甘露聚糖和含有寡聚甘露糖苷核心的甲状腺球蛋白有抑制作用,表明半夏蛋白只与甘露聚糖结合,且其分子上与糖互补的位置远远大于一个单糖分子的范围。是目前已知的唯一只与甘露糖而不与葡萄糖结合的一种具有凝集素作用的蛋白质。除红细胞外半夏蛋白亦凝集其它细胞,已测细胞中小鼠脾细胞、人肝癌细胞(QGY 7703-3和7402)、艾氏腹水癌和腹水型肝癌细胞均被半夏蛋白凝集,但它不凝集大鼠附睾和猪大网膜脂肪细胞,虽然能和这两种细胞结合。提示半夏蛋白的细胞凝集作用不仅具有动物种属专一性并存在细胞类别专一性。半夏蛋白的促细胞分裂作用亦有动物种属专一性,它促使兔外周血淋巴细胞转化,但不促使人外周血淋巴细胞分裂。 相似文献
9.
维甲酸对人肝癌细胞磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D的作用 总被引:3,自引:0,他引:3
为了解细胞信号转导与细胞分化间的关系,研究了诱导分化剂全反式视黄酸(ATRA)和13顺视黄酸对7721人肝癌细胞中磷脂酰胆碱专一性磷脂酶D(PC-PLD)的影响。发现ATRA和13cis-RA除能抑制7721细胞生长,并在形态上向正常方向分化外,分别在第2或第4天使膜结合性PC-PLD的比活力升高,用每瓶细胞的总活力计算,ATRA的作用在第2天也高于13cis-RA,但13cis-RAd tx 4 相似文献
10.
甘薯品种F3282的浸取液,经硫酸铵分级,甲壳素层析后,再经分子筛过滤,获得在PAGE上呈现单一蛋白质带的甘薯凝集素(Ipomoea Batatas Lectin,IBL)。IBL对鸽、兔、人血等红细胞均有凝集作用,其中对鸽血的凝集活性最高,最低凝集浓度为0.05μg/ml。IBL除凝集红细胞外,还可凝集小鼠脾细胞和肿瘤细胞;其对热相当稳定,90℃加热10min,仍有部分活性;IBL对酸处理较碱处理稳定,但可被阿拉伯糖或乳糖等解除凝集活性。IBL的中性糖含量为5.4%。 相似文献
11.
从豌豆(Pisum sativum L.)中提取总RNA, 逆转录出cDNA 第一条链后, 以大麦钙调蛋白结构基因两端的寡聚核苷酸为引物, 用PCR方法合成豌豆钙调蛋白基因, 克隆到Blue-script 载体上并测定其全序列。结果与已知的苜蓿(Medicago sativa L.)、水稻(Oryza sativaL.)、大麦(Hordeum vulgare L.)、电鳗(Electrophoridae)、根瘤(Aspergillus nidulans)、酵母(Saccharomycescerevisiae) 钙调蛋白基因相比,同源性较高(91.3% —60.8% ),其不同部分则常常是C和T相替换。进一步分析发现,上述七种来源的钙调蛋白基因之间,常有某些核苷酸替换方式占优势,它们对于氨基酸密码子的使用也各有偏爱 相似文献
12.
用各种化学试剂修饰红花菜豆(Phaseoluscoccineusvarrubronanus,Berry)凝集素(简称PCL)分子,测定与其活性相关的氨基酸残基.经NBS修饰表明PCL具有8个Trp残基,其中4个暴露于分子表面,此4个Trp残基被修饰后,PCL的凝血活性完全丧失.比较PCL修饰前后的CD光谱表明修饰不改变其二级结构。修饰Tyr,Arg,His残基和游离氨基及羧基不影响PCL的血凝活性.巯基也不是血凝活性所必需,但是PCL分子中的二硫键被还原,或被CNBr分解为两个片断则使蛋白质丧失血凝活性,提示分子的完整结构对PCL的血凝活力是重要的 相似文献
13.
黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)能产生降解木质素的胞外木质素过氧化物酶(LIP) 和锰过氧化物酶( MnP)同工酶。为研究LIP基因的转录调控机理, 对LIP基因( GLG3 和GLG6) 的5′端上游序列进行亚克隆, 获得6 个亚克隆DNA 片段, 然后应用凝胶迁移率变动分析技术筛选能与菌体蛋白质专一性结合的DNA片段。结果表明: LIP基因GLG6 的5′端上游有一个约670 bp 的DNA 片段能与总蛋白质组分专一性结合, 其核苷酸序列分析表明该片段可能含有蛋白质结合的序列特征。研究结果初步显示, 黄孢原毛平革菌可能存在有与LIP基因上游某些顺式调控元件相互作用的蛋白质, 调控着LIP基因的转录表达。 相似文献
14.
比较研究几种兼性和专一性CAM植物材料的PEPC同工酶表明:经自然干旱诱导,兼性CAM植物露花(Mesembryanthemumcordifolium)、长药景天(Sudumspectabile)有新的PEPC同工酶的出现,诱导前后各同工酶的天然分子量变化不大;而土三七(Sedumaizoon)则没有新的PEPC同工酶出现,但诱导后其同工酶的天然分子量有所增大。以上几种兼性CAM植物的PEPC同工酶酶谱无明显昼夜变化。专一性CAM植物的PEPC酶谱和天然分子量均较一致,亦无昼夜差异。 相似文献
15.
通过PCR程序克隆拟南芥(Arabidopsis thaliana(L.)Heynh.)的干旱诱导性启动子Prd29A及来自酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae Hansen)的海藻糖-6-磷酸合酶基因(TPS),并将它们组成可在植物中表达的载体RT。通过根癌土壤杆菌(Agroacterium tunefaciens(Smith et Townsend)Conn)LBA440 相似文献
16.
固氮相关的两个植物基因转化烟草及其表达 总被引:7,自引:0,他引:7
豆科植物凝集和血红蛋白分别在植物识别其相应的根瘤菌和在根瘤内降低氧分压保护固氮酶的共生固氮作用中起重要作用。将豌豆(Pisum sativa L.)凝集素基因(pl)和Paraqsponia andersonii血红蛋白基因(phb)构建到同一植物表达载体上,通过根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens(Smith et Townsend)Conn)介导法转化烟草(Nics 相似文献
17.
采用十六烷基磷酸胆碱(HPC)作为脂质体膜材,配以胆固醇和双十六烷基磷酸盐,反相蒸发法制备出HPC脂质体,连续5周每周测定一次它对CF(carboxyfluorescein,羧基荧光素)的包封率,可知制备的脂质体在前2周内相当稳定,5周后包封率仅减少24%,可满足实际应用的需要.冰冻蚀刻法测定脂质体的平均直径在500nm左右,该直径的脂质体较适于和细胞发生相互作用且稳定性比小单层脂质体好.四氮唑(dimethylthiazoldiphehyltetrazoliumbro-mide,MTT)分析可知,在脂质体浓度达15μmol/L,对HL-60细胞的增殖具有抑制作用.在相同的脂浓度下,HPC脂质体抑制HL-60细胞生长比游离HPC有较强的抑制细胞增殖作用,当HPC浓度低于5μmol/L时,细胞生长不受抑制.当HPC浓度在10μmol/L时,HPC脂质体表现出对细胞生长的抑制作用,而游离HPC在此浓度下的抑制作用较低 相似文献
18.
尖吻蝮蛇毒内一种新的抗血小板凝集蛋白agkisacuta … 总被引:1,自引:0,他引:1
从皖南尖吻蝮蛇毒中经阴离子交换层析和凝胶过滤层析分离纯化离纯化得到抗血小板凝集蛋白agkisacutacin,纯化的agkisacutacin由分子量为14kD和15kD的2条肽链通过二硫键连接,能有效抑制ristocetin诱导的血小板凝集(IC50为18.5mg/L),能轻微抑制凝血酶诱导的血小板聚集(IC50为1.22g/L),但对ADP、胶原诱导的血小板聚集无影响。agkisacutaci 相似文献
19.
鸡平滑肌肌球蛋白轻链激酶在NIH 3T3细胞中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在调节平骨肌细胞收缩过程中具有十分重要的作用。本言语通过将MLCKcDNA插到质粒pBKrsv中构建pBKrsv-MLCK,并转染至NIH3T3细胞中,DNA-PCR、RT-PCR和Western blot分析表达转染细胞可表达MLCK。活生分析表明所表达的MLCK具有生物学活性。为进一步研究MLCK在信号传导,调节平骨肌收缩等作用奠定了基础。 相似文献
20.
鸡Zong凝集素的分离纯化与性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
鸡Zong菌丝体浸取液依次经硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析和Sephadex G-100分子筛层析3个主要步骤纯化得到一种凝集素(TAL)。纯化的TAL在聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示一条蛋白质着色带。TAL的分子量为89.4kD,亚基分子量为38kD和51kD,提示TAL分子由两个不同亚基组成。TAL具有供血动物种属专一性,使Wistar大鼠红细胞凝集所需TAL最 相似文献