虎纹捕鸟蛛毒液中透明质酸酶的纯化和部分性质的研究

用分子筛（岛津ＤＩＯＬ－１５０柱）和阳离子交换（岛津ＷＣＸ－１柱）高效液相色谱从虎纹捕鸟蛛（Ｓｅｌｅｎｏｃｏｓｍｉａｈｕｗｅｎａ）毒液中分离提纯透明质酸酶（Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ,ＥＣ３．２．１．３５）．经等电聚焦电泳为一条带,ｐＩ＝７．２．经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为４０ｋＤ,经凝胶过滤测得分子量为４０．７ｋＤ。以透明质酸为底物时在ｐＨ３．５─５．５范围内有较大活性,最适ｐＨ值为４．０;在ｐＨ４．５─６．０范围内稳定,在反应温度为３０─６０℃时有较大活性,最适温度为５０℃;对热稳定,０．１５ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ对酶活性有一定的稳定作用．３％的肝素、５００μｍｏｌ／Ｌ的Ｈｇ~（２＋）、Ｆｅ~（２＋）、Ｃｕ~（２＋）对酶活性有明显的抑制作用。     

虎纹捕鸟蛛毒的生物学活性鉴定

本文报道了采集广西产虎纹捕鸟蛛（Selenocosmia huwena)毒液的方法,并对粗毒进行了部分生物学活性的测定,该粗毒对小鼠和蜚蠊的LD50分钟为1．16mg/kg和300ug/g,该粗毒具有透明质酸酶,碱性磷酸酶,蛋白水解酶和脱氧核糖核酸酶活性,未测到磷脂酶A和胆碱脂酶性,通过电生理实验发现该粗毒含有阻断蟾蜍神经肌肉接头传递的毒素,并观察到当小鼠接受腹腔注射致死剂量（5mg/kg)粗毒后便迅速出现呼吸麻痹。     

虎纹捕鸟蛛雄蛛的修订（蜘蛛目：捕鸟蛛科）

修订了王家福等所订虎纹捕鸟蛛ＳｅｌｅｎｏｃｏｓｍｉａｈｕｗｅｎａＷａｎｇｅｔ．ａｌ,１９９３的雄蛛,并将近期所采得的该种雄蛛作了重新描述。     

中国虎纹捕鸟蛛的生态学

文中首次报道了虎纹捕鸟蛛种群生态分布特点、洞穴结构、活动规律、捕食、繁殖、防御和进攻行为，并初步分析了其种群分布与栖息地结构之间的关系。     

虎纹捕鸟蛛发育起点温度和有效积温研究

实验设置5个温度、3个湿度。对虎纹捕鸟蛛卵袋和幼蛛的发育速率进行测定。结果表明：温度是影响虎纹捕鸟蛛发育的重要因子。湿度对卵历期、幼蛛历期有显著影响。运用优选法计算虎纹捕鸟蛛发育起点温度和有效积温。所得卵和全世代的发育起点温度T0分别为14．3℃。7．0℃。有效积温K分别为712．66日度和6161．80日度。     

虎纹捕鸟蛛生物学特性的观察

虎纹捕鸟蛛（Ornithoctonus huwenna)个体大,毒性强,有强烈的攻击性,蛛毒含量大,采毒易,是进行蛛毒,蛛蛋白研究的理想试验材料,研究在饲养条件下虎纹捕鸟蛛的生活习性,捕食特点,雌蛛产卵,护卵习性,卵的孵化,蜕皮及幼蛛的发育,以及耐饥饿,耐干旱能力。     

虎纹捕鸟蛛毒素-III及其天然突变体的纯化与鉴定(英文)

虎纹捕鸟蛛毒素 III及其天然突变体是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离得到的两个毒素多肽。虎纹捕鸟蛛毒素 III含 33个氨基酸残基 ,其中包含 6个半胱氨酸残基 ;而其天然突变体只比虎纹捕鸟蛛毒素 III少了C端的色氨酸残基。MALDI TOF质谱测得虎纹捕鸟蛛毒素 III及其天然突变体的分子量分别为 385 3.35和 36 6 7.4 0。通过比较其理论分子量和质谱测定的分子量表明两个多肽的 6个半胱氨酸残基分别形成了三对二硫键。虎纹捕鸟蛛毒素 III与从同一种蜘蛛分离得到的凝集素 I具有 70 .5 %的序列相似性。生物学活性实验表明 ,虎纹捕鸟蛛毒素 III具有使美洲蜚蠊可逆的致瘫作用 ,其半有效剂量 (ED50 )为 (1 92 .95±1 2 0 .84 ) μg/g (P =0 .95 ) ,而且能加强由电刺激引起的大鼠输精管收缩 ;而其天然突变体却不具有上述生物学活性 ,表明C端色氨酸残基为虎纹捕鸟蛛毒素 III生物学活性相关残基 ;同时虎纹捕鸟蛛毒素 III及其天然突变体都不具有类似于凝集素 I对红细胞的凝集活性 ,表明虎纹捕鸟蛛毒素 III和凝集素 I两者氨基酸序列中不同氨基酸残基对于决定两者的生物学活性有着重要的作用     

温湿度对虎纹捕鸟蛛繁殖力影响的研究

研究不同温湿度对虎纹捕鸟蛛繁殖力的影响,结果表明：虎纹捕鸟蛛繁殖力在26℃恒温和RH80％的因子水平组合中较大。在24－26℃变温和RH80％的组合中为最大。     

虎纹捕鸟蛛毒效的实验观察

虎纹捕鸟蛛是一种大型蜘蛛。在我国主要分布在长江以南地区。为了验证其螯牙射出的汁液的毒效,用家兔做实验结果表明：一只成年虎纹捕鸟蛛一次射出的毒液,经１５分钟左右,能杀死一只成年家兔。毒液能使静脉血管扩张,使呼吸和以及搏动先加快、后减慢;呼吸停止,心脏搏动停止。家兔死亡后,全身软绵绵的。     

虎纹捕鸟蛛毒素及类似多肽

虎纹捕鸟蛛毒素及类似多肽梁宋平（湖南师范大学生物学系,长沙４１００８１）关键词虎纹捕鸟蛛毒素多肽神经毒素对研究离子通道、神经递质受体、神经突触传递等神经生物学和神经药理学问题具有重要意义。继在蛇、蝎和芋螺等动物毒中发现很多有重要价值的专一性神经毒素之...     

虎纹捕鸟蛛毒素的抗菌活性探讨

从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离得到2种多肽毒素,huwentoxin-I和huwentoxin-II,抗菌实验结果表明,这2种多肽毒素能抑制革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌及啤酒酵母菌的生长,并且这两种多肽毒素有一定的协同抗菌作用。     

虎纹捕鸟蛛的拉丁学名

虎纹捕鸟蛛常作为实验动物用于毒素等领域的研究。关于该种的行为学、生态学等方面的研究工作,也常见于国内各刊物。但在诸多的文献中,该种的拉丁学名写法不一,造成一些误解,也不便于检索。实际上,该种通用的拉丁学名是Haplopelma huwenum（Wang,Peng＆Xie,1993）。     

我国捕鸟蛛两种雄蛛的描述(蛛形纲,蜘蛛目)

中国捕鸟蛛科2)过去记述5种.除虎纹捕鸟蛛Ornithoctonus huwena外,其它4种均为单性描述.经补充采集,发现了广西近捕鸟蛛Plesiophrictus guangxiensis Yin et Tan,2000和海南捕鸟蛛Selenocosmia hainana Liang,Peng,Wang et Chen,1999的雄性个体.补充描述如下.标本保存在湖南师范大学生命科学学院,文中量度单位均为mm.     

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ的化学合成及其结构与生理活性分析

应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相方法化学合成了虎纹捕鸟蛛毒素-I,合成采用Fmoc氨基酸五氟苯酯,各侧链保护措施如下:羧基和酚羟基用叔丁基(tBu)保护,赖氨酸和组氨酸侧链用叔丁氧羰基(Boc)保护,精氨酸胍基用4-甲氧-2,3,6-三甲基苯磺酰基(Mtr)保护,半胱氨酸巯基用三苯甲基(Trt)保护.固相载体为需活化的乙二胺-聚乙二醇-聚苯乙烯(EDA-PEG-PS)树脂.合成产物(肽树脂)用苯甲硫醚-乙二硫醇-苯甲醚-三氟乙酸系统一步裂解以及去除侧链保护基,然后用二硫苏糖醇(DTT)还原,再通过氧化型和还原型谷胱甘肽系统促使其形成正确的二硫键配对.对HPLC分离纯化得到的合成产物,进行了氨基酸组成、肽谱、氨基酸顺序以及一维核磁共振谱分析.分析结果表明合成毒素具有与天然毒素相同的化学结构和空间构象.生理实验结果表明,其生物学活性与天然Huwentoxin-I也相同.     

虎纹捕鸟蛛实验种群的生态观察

对虎纹捕鸟蛛在人工饲养条件下的各种生态条件进行了多方面的实验,观察和分析。结果表明,该蛛对低温的耐受能力较差,对强光呈负趋性,土壤湿度最适范围为16%-22%。土壤pH值最适范围为5.1-5.5。对噪声敏感,具较强的耐饥力和相互残杀习性。     

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ cDNA克隆及序列

 从中国珍稀毒蛛种虎纹捕鸟蛛 (Selenocosmia huwena)毒腺中分离纯化的虎纹捕鸟蛛毒素 - (Huwentoxin ,HWTX- ) ,其一级结构、二级结构和溶液构象均已阐明 ,生理功能实验已证实 HWTX- 是一种作用于突触前膜的神经毒素和高阈值钙通道抑制剂 .为深入开展对 HWTX- 的应用研究 ,根据 HWTX- 多肽氨基酸序列 ,设计其 N-端、C-端和中间段 3组简并引物 (引物 、引物 和引物 ) .从虎纹捕鸟蛛毒腺提取制备 m RNA,逆转录合成 c DNA.以引物 和引物 为引物 ,采用 PCR方法对虎纹捕鸟蛛毒腺总 c DNA进行简并引物扩增 ,得到两条相对特异性的 DNA片段 ,产物直接与 PCR克隆载体 p UC- T连接 .重组子经原引物再次 PCR扩增和同位素标记引物 进行 Southern分子杂交鉴定 .对 4个重组子测序结果表明 ,有 1个重组子所对应的氨基酸顺序与 HWTX- 一致 ,Gen Bank数据检索说明 HWTX- c DNA编码序列确实是一个从未报道的序列 .本研究结果为 HWTX- 在真核细胞表达 ,大量获取蜘蛛毒素组分奠定了基础 .     

虎纹捕鸟蛛生物学的初步观察

虎纹捕鸟蛛Selenocosmia huwena Wang et al.,产自广西宁明县。雌蛛比雄蛛个体大,体长约6～9mm;步足长约7～10 cm,重46～58g;遍体多黑褐色绒毛和长毛,腹部背面有5条虎皮状花纹。螯爪长约1cm。该蛛穴居地下,穴呈圆形,结构简单,深约50～100 cm,洞口布以蛛网。据文献报道,该蛛毒液具有较强的哺乳动物毒性和一定的昆虫毒性,在开发新型抗感染、抗肿瘤药物方面可能有一定的前景。1995～1998年期间,笔者在室内自然变温条件下对虎纹捕鸟蛛生活史进行了初步观察,现整理报道如下。     

温度和食物对虎纹捕鸟蛛发育和繁殖力影响的研究

研究不同温度和食物对虎纹捕鸟蛛生长发育和繁殖力的影响,结果表明,虎纹捕鸟蛛在２４℃－２６℃变温范围,饲以人工混合饲料溶液时生长发育最快,在这个温度范围外饲以单一食物为最低。最有利于虎纹捕鸟蛛繁殖的因子水平组合为２４℃－２６℃,食物为人工混合饲料溶液。