液膜体系中氨基酸迁移的研究

用Ａｌｉｑｕａｔ３３６－Ｓｐａｎ８０－甲苯制成液体表面活性剂的膜体系,对氨基酸的迁移行为进行了研究,确定了苯丙氨酸完全及快速迁移的制乳和适宜条件,２ｍｉｎ的迁移率可达９０％以上。在苯丙氨酸的最佳迁移条件下,其它氨基酸如天冬氨酸、精氨酸、甘氨酸等都能有较高的迁移率。此法适用于微量氨基酸的提取和分离。     

2-氰基-D,L-苯丙氨酸盐酸盐的合成

合成了非天然氨基酸２－氰基－Ｄ,Ｌ－苯丙氨酸盐以及四个中间体,其结构分别通过红外光谱、核磁共振、元素分析、熔点测试等手段得到确证。     

草鱼肠道对L-亮氨酸和L-苯丙氨酸的吸收

利用离体灌注法研究草鱼肠道对Ｌ－亮氨酸和Ｌ－苯丙氨酸的吸收规律。结果表明,草鱼肠道对两种氨基酸的吸收是一种逆浓度、需要转运载体的主动吸收方式。通过动力学特征分析表明,草鱼肠道对Ｌ－亮氨酸的吸收率强于Ｌ－苯丙氨酸,而肠道对Ｌ－苯丙氨酸的跨壁运输能力强于Ｌ－这氨酸。由氨酸酸浓度对吸收率的影响建立的动力学参数为Ｌｅｕ：Ｊｍａｘ＝０．７３２μｍｏｌ／ｇ．ｍｉｎ,ｋｔ＝５１．６０ｍｍｏｌ／Ｌ;Ｐｈｅ：Ｊｍａ     

活性炭色谱法分离苯丙氨酸、酪氨酸

根据活性炭对苯丙氨酸、酪氨酸的选择性吸附特性和二者在活性炭吸附中的差异,通过活性炭吸附与氨水、乙醇二步解吸的活性炭色谱法从多种氨基酸的猪血粉水解液、棉籽蛋白水解液中成功地分离提取了苯丙氨酸、酪氨酸。活性炭色谱法工艺对提取法、发酵法生产苯丙氨酸具有实用价值。还为联合离子交换色谱法分离水解液中其他氨基酸改善了物料条件,从而较好地解决了树脂毒化问题、氨基酸交叉重选问题,并使洗脱溶液中杂质少、纯度高,易于结晶。     

种子与花粉的随机迁移对植物群体遗传结构分化的影响

将Ｗｒｉｇｈｔ的经典岛屿模型拓广到植物群体上,同时考虑了含有花粉和种子随机迁移的影响。并给出了３种不同遗传方式的基因（双亲遗传,父本和母本遗传）频率的期望均值和方差。理论结果证明花粉或种子的随机迁移可增加基因频率方差,其幅度取决于迁移率和迁移基因频率的方差。同绝对迁移率一样,花粉和种子的迁移率方差及迁移基因频率的方差对群体遗传结构的分化有着同样的重要。一个重要结论就是花粉或种子的随机迁移率和随机迁     

浊度法测定发酵液中L—苯丙氨酸含量

本介绍浊度测定发酵液中Ｌ－苯丙氨酸含量的方法,根据指示菌生长的细胞密度与生长培养基内所含的苯丙氨酸量在一定浓度范围内呈线性关系的原理,摸索了浊度最和达条件,结果表明浊度法测定发酵液中的苯丙氨酸含量,简便,准确性高。     

DL-苯丙氨酸酶法拆分

ＤＬ－苯丙氨酸的拆分是以Ｎ－乙酰－ＤＬ－苯丙氨酸铵为起始原料,经猪肾酰化酶不对称水解作用,再经离子交换色谱分离,减压浓缩得到Ｌ－苯丙氨酸和Ｎ－乙酰－Ｄ－苯丙氨酸结晶。     

浊度法测定发酵液中L－苯丙氨酸含量

本文介绍浊度测定发酵液中Ｌ－苯丙氨酸含量的方法。根据指示菌生长的细胞密度与生长培养基内所含的苯丙氨酸量在一定浓度范围内呈线性关系的原理,摸索了浊度测定的最适条件。结果表明浊度法测定发酵液中的苯丙氨酸含量,简便、准确性高。     

深红酵母转化反式肉桂酸生成L-苯丙氨酸的研究

研究了深红酵母Ａｓ２．２７９产生Ｌ－苯丙氨酸解氨酸（ＰＡＬ）的条件、转化反式 桂酸（ｔＣａ）生成Ｌ－苯丙氨酸（Ｌ－Ｐｈｅ）的条件以及几种因素对ＰＡＬ稳定性的影响,结果表明,最佳转化条件为：１．０％ｔ－Ｃａ,８ｍｏｌ／Ｌ氨,ｐＨ１０．０,３０℃。在转化液中加入还原剂和充入Ｎ２有利于提高酶的稳定性,在此条件下可一次转化６４％的ｔ－Ｃａ,保留６０％的酶活。生成Ｌ－Ｐｈｅ浓度为５．８ｇ／Ｌ。     

由肉桂酸生物合成L－苯丙氨酸

由肉桂酸生物合成Ｌ－苯丙氨酸李清彪,何炳林化学进展１９９６,８（１）：４９－５６评述了Ｌ－苯丙氨酸的各种合成路线,国内研究现状及工业化情况,重点讨论了由肉桂酸和氨生物合成Ｌ－苯丙氨酸的路线,提出了在国内进一步工作为建议。从１９９１年文献报道来看,Ｌ－...     

牦牛乳酸脱氢酶B基因突变体的克隆鉴定研究

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证实牦牛（Bos grunniens）乳酸脱氢酶存在两种类型,根据LDH同工酶谱的特点推测牦牛LDH多态是由B基因变异所致,并由此将凝胶电泳中迁移率快的LDH同工酶谱带称为LDH－Bf类型,迁移率慢的称为LDH－Bs类型．为阐明牦牛LDH变异体的分子机制,实验从牦牛心脏组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法分别克隆了LDH－Bf和LDH-Bs两种类型的B基因cDNA全长序列;序列比对分析发现LDH-Bf和LDH-Bs基因存在4个碱基差异;依据cDNA序列推导的氨基酸序列的比对分析,发现两者之间存在两个氨基酸差异;利用Deepview分子建模软件进行的牦牛H亚基及LDH1突变体的高级结构预测,发现突变的两个氨基酸都能产生新的H键,影响整个蛋白分子的H键网络,并进一步导致蛋白分子空间结构的变化．     

菜心中SDS-PAGE向负极泳动的富含苯丙氨酸的蛋白的发现

在提取乙醇酸氧化酶同工酶的过程中, 发现了一种在SDS变性下向负极泳动的富含苯丙氨酸的碱性蛋白.在3次重复实验中, 均可以从SDS-PAGE后的负极缓冲液中获得这种蛋白, 其碱性与酸性氨基酸残基的比例分别高达1.46、1.28和0.89,而苯丙氨酸含量分别高达为60.00%、65.62%和62.30%.其余氨基酸残基的含量则和普通蛋白的相近似.由于该富含苯丙氨酸的碱性蛋白是水溶性的, 碱性氨基酸残基应主要分布在蛋白的表面,而苯丙氨酸则组成一个强疏水内核.     

不同施氮水平对烟草叶片游离氨基酸含量及脯氨酸和苯丙氨酸代谢的影响

人工施氮量是影响烟叶中游离氨基酸含量的重要因素,而后者很大程度上影响着烟叶的品质和风味。为了解不同施氮量对烟叶中游离氨基酸含量的影响,在大田条件下通过设置施氮量为60 kg/hm~2、90 kg/hm~2和120 kg/hm~2 3个施氮水平进行处理,用分光光度法和气相色谱-质谱联用法分析,研究了不同施氮水平对游离氨基酸含量以及脯氨酸和苯丙氨酸代谢关键酶及其基因表达的影响。结果表明,随施氮水平的不同,烟叶中总游离氨基酸、脯氨酸和苯丙氨酸含量随施氮水平增加而增高;而亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸和4-氨基丁酸含量在施氮水平为60 kg/hm~2时最高。脯氨酸代谢相关酶和苯丙氨酸代谢相关酶活性均随施氮水平升高而增强,其基因相对表达量也随之上调。上述研究结果表明施氮水平可显著影响烟叶中游离氨基酸含量、种类及其代谢过程。     

混浊诺卡氏菌固定化细胞在氢气高压状态下由苯丙酮酸和NH_4Cl重复批量生产L-苯丙氨酸

在筛选条件下,被检出的微生物中混浊诺卡氏菌具有最高的由苯丙酮酸生产苯丙氨酸活性。NH_4Cl 同氨基酸一样可用作苯丙氨酸生成的氨基供体。随着氢气压力增加苯丙氨酸产率增加。在含0.3%苯丙氨酸营养肉汤中培养混浊诺卡氏菌细胞,苯丙氨酸脱氢酶活性增加。结果苯丙氨酸产率从0.69增加到4.4μM/分钟/克干细胞。在生产苯丙氨酸前,固定化细胞应先在含 ZnCl_2的营养肉汤中活化。凝胶中的苯丙氨酸脱氢酶活性和细胞数量随保温时间增加而增加,保温36小时苯丙氨酸脱氢酶活性最大。然后用活化了的固定化细胞由苯丙酮酸,NH_4Cl 及100个大气压 H_2来产生苯丙氨酸。苯丙氨酸产率为0.24μM/分钟·cm~3凝胶。苯丙酮酸转化成苯丙氨酸的转化率为82%。固定化细胞重复使用11批,每批反应10小时仍可保留最初苯丙氨酸产率的76%。     

华东地区太子参品系的氨基酸比较分析

对江苏、安徽、山东、福建四省６个不同产地的栽培和野生太子参品系进行了１８各游离氨基酸含量分析测定。研究结果表明太子参各品系所含的氨基酸含量不同。在各品系的游离氨基酸中均以精氨酸的含量为最高。总氨基酸含量和必需氨基酸含量以安徽宣州品系为最高。江苏宜兴品系所含的γ－氨基丁酸含量最高。江苏老山野生品系的苯丙氨酸含量明显高于其他品系。本文为研究不同太子参品系质量及其医药价值提供科学资料。     

外源基因pheA、aroG和tyrB在苯丙氨酸合成途径中的共表达

利用基因工程技术提高了短杆菌的苯丙氨酸合成途径中关键酶活性,大幅度地增加了生物合成苯丙氨酸的产时。首先采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）从大肠杆菌的氟代苯丙氨酸抗性变异菌株基因组中扩增到与苯丙氨酸合成相关的ａｒｏＧ,ｐｈｅＡ和ｔｙｒＢ３个基因。ａｒｏＧ编码３－脱氧－２－阿拉伯庚酮糖－７－磷酸合成酶（ＤＳ）,ｐｈｅＡ编码双功能酶蛋白－分枝酸变位酶（ＣＭ）和预苯酸脱水酶（ＰＤ）,ｔｙｒＢ编码转氨酶（ＡＴ）。设     

大肠杆菌ppsA基因的克隆表达

L-苯丙氨酸是人体内8种必需氨基酸之一,是医药大输液的基本成分.苯丙氨酸和门冬氨酸组成的二肽甲酯是一种新型甜味剂,市场需求正在不断增长,因此构建高产酸的苯丙氨酸基因工程菌已成为形势所趋.苯丙氨酸工程菌的构建是基于芳香族氨基酸的生化合成途径进行的,包括单基因表达工程菌和多基因表达工程菌.单基因表达主要集中在芳香族转氨酶tyrB基因上,国内外有不少报道[1～3],苯丙酮酸转化为苯丙氨酸的转化率约为91%.在多基因表达方面,Ikeda等[4]克隆了3个芳香族氨基酸合成的有关基因,并进行多基因表达,苯丙氨酸产量为28g/L.磷酸烯醇式丙酮酸(P…     

苯丙酮尿症患者的血清氨基酸测定

本文使用日立835—50型高速氨基酸分析仪,测定了两例苯丙酮尿症患者的血清中游离氨基酸浓度,结果发现:8个月患儿的血清苯丙氨酸浓度比我国报道的7—13个月正常儿血浆中苯丙氨酸值高10倍,而孕妇患者比我市近年来测定的正常孕妇血清中苯丙氨酸高23倍多。这种测定对优生优育具有积极意义。     

固定化酶法拆分制备L-苯丙氨酸的工艺研究

<正> 苯丙氨酸是人体必需的八种氨基酸之一,在人体内有生理作用的是L-型的,故合成制得D L-苯丙氨酸必须进行拆分。六十年代末,日、美等国用固定化氨基酰化酶拆分制备L-氨基酸已应用于工业生产,由于固定化酶法拆分具有高度专一性,可反复使用,反应条件温和,酶不残留在产物中,产物易纯化、收率较高、无三废等优点,这也引起我国许多科研单     

大肠杆菌aroG基因的克隆表达及与pheA,tyrB基因的？…

３－脱氧－２－阿拉伯庚酮糖－７－磷酸合成酶（ＤＡＨＰ）是苯丙氨酸合成途径中关键酶之一,在大肠杆菌中由ａｒｏＧ基因编码。本文用ＮＴＧ诱变得到对苯丙氨酸类似物间氟苯丙氨酸（ｍＦＰ）和对氟苯丙氨酸（ｐＦＰ）有抗性的大肠杆菌突变株,采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增得到了ａｒｏＧ基因,在大肠杆菌中进行了表达。结果表明,该基因能在λ噬菌体的ｐＲ启动子驱动下得到表达,在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳图上出现清晰的条带