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Smads分子及其介导的TGF—β超家族信号转导 总被引:1,自引:0,他引:1
朱帮福 《国外医学:分子生物学分册》1999,21(3):152-155
TGF-β超家族成员的重要生物学功能正日益引起人们的重视,该家族受体也在不断被克隆鉴定。配体通过受体的胞内信号转导研究近年有较大进展,特别是Mad及相关蛋白Smads的发现,为阐明TGF-β超家族作用机理提供了一条重要线索:Smads蛋白位于细胞浆,被受体激酶直接磷酸化后形成异源聚合体,转移至核内,激活靶基因转录。 相似文献
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细胞调节网上资源 总被引:1,自引:0,他引:1
TGF β信号转导1 TGF β的信号通路http : www .grt.kyushu u .ac.jp eny doc pathway tgf be ta .html该站点提供了一个可点击的TGF β信号通路图 ,它是信号通路数据库 (SPAD)站点的一部分。2 TGF β信号转导动画htt: ana30 .med .utotoronto .ca movie .htm这是由Attisano和Wrana实验室制作的动画电影。并有包括通过TGF β信号信号转导在内的多种情况的可操作模型的详细描述。值得访问 !MAPK信号通路3 MAPK信号… 相似文献
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转化生长因子 β(TGF β)是一类多功能肽类生长因子 ,具有特异的受体及信号转导系统 ,在控制细胞生长、分化、凋亡等方面均起重要作用。已经发现TGF β通过细胞内信号转导分子Smads调控各种基因的表达 ,从而在控制细胞外基质蛋白及细胞表面整合蛋白的合成中起重要作用[1] 。整合蛋白是一类存在于细胞表面的跨膜粘附分子 ,主要介导细胞与细胞外基质 (ECM)及细胞与细胞之间的粘附作用。整合蛋白由α和 β两种亚基以异源二聚体的形式组成二十余种不同的受体 ,现已证实在伤口愈合、炎症反应、血栓形成、肿瘤发生以及迁移等许多过… 相似文献
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SMADs是新近发现的参与TGF-β超家族的信号在细胞内声望地的一族蛋白,包括8个成员,分别称SMAD1-8。SMAD1、2、3、5和8属于一类,它们被TGF-β的受体或BMP的受体激活而磷酸化,称为受体调节SMAD,传导下TGF-β或BMP的信号。SMAD6和7属于另一类,它们抑制制受体调节SMAD的信号传导。SMAD4是第三类,它是受体调节SMAD传导信号的伴侣。受体调节SMAD传导信号必须先 相似文献
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基质衍生因子 1 (stromalderivedfactor 1 ,SDF1 )是CXC家族趋化蛋白 ,1 988年由日本学者Nishikawa等[1] 首先克隆发现 ,其受体为CXCR4,属G蛋白偶联受体家族。SDF1与CXCR4作用 ,构成SDF 1 CXCR4反应轴 ,转导特定的信号、介导不同的效应。过去认为 ,SDF1 CXCR4轴介导的效应主要包括参与胚胎、血管、心脏形成以及B细胞生成等生理过程 ,与炎症反应无关。近年来的研究报告显示SDF1 CXCR4轴在多种状态下发挥独特作用 :介导炎症细胞跨膜迁移、对T淋巴细胞增殖起共刺激… 相似文献
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SAMDs是TGFβ家族的细胞内信号介导。为了研究SMAD3的信号传递过程,我们以SAMD3为诱饵蛋白用酵母双杂交系统筛选与SAMD3相互作用的蛋白,发现Cyclin B可以与SMAD3发生相互作用,并在COS7细胞中证实了该相互作用。提示TGFβ可能通过SMADs与细胞周期素的相互作用来调节细胞周期的变化。 相似文献
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可溶性55kD人肿瘤坏死因子受体(shTNFR55)在变铅青链霉菌中的分泌表达 总被引:1,自引:0,他引:1
从 He La 细胞中提取总 R N A,采用反转录 P C R 技术,从该总 R N A 中扩增了约 530 bp 的sh T N F R55 基因的 c D N A,并克隆至质粒 p U C m el中酪蛋白酶 m el Cl 分泌信号肽编码序列的下游,构建成含融合基因 m el/ T N F R 的重组质粒 p U C m el/ T N F R.把融合基因 m el/ T N F R 插入链霉菌表达质粒 p I J459 的多克隆位点,使之位于 erm 强启动子的下游,得到重组表达质粒 p I J459 m el/s T N F R.经 Southern 杂交证明重组质粒 p I J459 m el/s T N F R 插入了 s T N F R55 基因片段.对重组菌株 Streptom yces lividans(p I J459 m el/s T N F R)的发酵液进行 S D S P A G E、受体配基杂交( Ligand blot)分析、对 T N F 敏感的 L929 细胞的细胞毒性中和试验表明,可溶性肿瘤坏死因子受体 s T N F R55 在链霉菌中得到了分泌表达,表达产物具有生物学活性.表达产物的分子量约在 26~28 k D 之间. 相似文献
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用酵母双杂交系统研究Smad3和Smad4的相互作用 总被引:3,自引:0,他引:3
Sm ad3 和 Sm ad4 是将 T G F β的信号从细胞外传递到细胞核内的重要的信号传导蛋白. T G F β与其受体结合后,激活受体的磷酸激酶,使 Sm ad3 发生磷酸化,活化的 Sm ad3 与 Sm ad4 结合,形成异源复合物,进入到核中.然后 Sm ad4 以 D N A 结合蛋白的形式与特定的 D N A 结合,将 T G F β的信号传到核内.激活转录,诱导背中胚层的形成,抑制细胞的分化等.经研究利用酵母双杂交试验,鉴定了 Sm ad3 和 Sm ad4 相互作用的功能区域.构建 Sm ad3 和 Sm ad4 的 C 端、 N 端和中间连接区的突变体,将这些突变体克隆到 p G A D424 和 p G B T9 载体中,并转化到 H F7 C 酵母中.通过 Leu- / Trp- / His- S D 平板上菌落的形成,和 X- gal显色反应鉴定转化到酵母中的两个克隆质粒的相互作用.结果显示 Sm ad4 与 Sm ad3 异源相五作用时,主要是通过 Sm ad4 的中间连接区.在同源作用时, Sm ad3 是通过 C 端,而 Sm ad4 是通过中间连接区进行的. 相似文献
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张宏翔 《中国生物工程杂志》2000,20(2):80-80
类别文献(篇数)专利(件数)AGENETICENGINEERINGANDFERMENTATIONA1NucleicAcidTechnology20574151A2Fermentation1326498BENGINEERINGB1BiochemicalEngineering432131CANALYSISC1SensorsandAnalysis11293DPHARMACEUTICALSD1.... 相似文献
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GM-CSF高亲和力受体至少由两条链组成,低亲和力的α链及无结合力活性的β链。本文采用RT-PCR的方法,从GM-CSF依赖细胞株TF-1中克隆了全长的GM-CSFRα链Cdna(包括信号肽部分),经酶切及全基因测序鉴定,并分别在原核及真核细胞表达系统中表达。在大肠杆菌中GM-CSFRα以GST融合蛋白形式表达,谷胱甘肽Sepharose4B亲和层析纯化融合蛋白。GSTCSFRαC无受体活性,推测主要与缺乏翻译后修饰有关。将全基因克隆入真核表达载体Psvl中,转染COS-7细胞瞬时表达以重建GM-CSF的低亲和力受体,125IGM-CSF平衡结合实验证明转染后的COS-7细胞膜上有受体的表达,Crosslinking显示表达的受体α链分子量略低于TF-1细胞。胞外区基因(CSFRαB)克隆入Psvl构建的Psvl/CSFRαB表达载体,转染COS-7细胞后,Westernblot检测表达细胞上清,有单一的反应带,表达上清有GM-CSF的受体活性。 相似文献
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采用PCR方法引入编码氨基酸残基序列为GGGGSGGGGS的镜头,将sTNFR1 cDNA与人IgG:Fc cDNA片段连接,构成融合基因fusion 1。将fusion 1克隆在pBSⅡ SK^+载体上。测定序列后,转入pRSET-B表达载体,在大肠杆菌中表达,得到分子量为45kDa的蛋白,超声破碎后电泳证明表达的蛋白为包涵体,经免疫蛋白印迹证实为我们构建的融合蛋白。 相似文献
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GRO家族:与细胞生长相关的趋化因子 总被引:4,自引:0,他引:4
RO(growth relatedoncogene)家族是一类属于CXC族的趋化因子 ,包括GROα、GROβ、GROγ ,系统命名为CXCL1、CXCL2、CXCL3。1 987年分离并测序了GROcDNA ,并推测其表达与细胞生长相关 ,类似于c fos原癌基因 ,因此而得名为GRO。因GRO可如丝裂原样刺激黑色素瘤细胞生长 ,曾被称为MGSA(melanomagrowthstimulatoryactivity)。小鼠的相对应基因为KC ,发现于COS细胞 ,是PDGF(platelet derivedgrowthfact… 相似文献
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TGF—β超家族信号传导机制研究进展 总被引:17,自引:0,他引:17
万秋红 《国外医学:分子生物学分册》2000,22(3):137-142
TGF-β超家族由一大类具有共同生物学特性的细胞因子所组成,在生长控制、物质代谢等方面均有极其重要的作用。它们与Ⅱ型受体和Ⅰ型受体形成异在聚体复合物后激活Ⅰ型受体,然后通过被称为SMAD蛋白的信号蛋白,将信号从细胞浆转导到细胞核中。 相似文献
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抗真菌蛋白Rs—AFPs基因在大肠杆菌中的表达 总被引:3,自引:0,他引:3
将抗真菌蛋白Rs-AFP1和Rs-AFP2全长cDNA插入表达质粒pET-22b/NcoI+SacI位点,构建成融合蛋白表达载体pRAF1和pRAF2.将不含信号肽编码序列的Rs-AFP1和Rs-AFP2cDNA分别插入pET-22b/Ncol+Sacl和pET-22b/Ndel+SacI位点,构建成不含信号肽序列的融合蛋白表达载体pRAF3、pRAF4和非融合蛋白表达载体pRAF5和pRAF6.将构建的上述各种表达载体转化E.coliBL21,挑菌落培养,IPTG诱导,使Rs-AFPs基因得到表达,并用体外抑菌试验检测表达产物的活性,结果表明,各种表达载体的表达产物均具有不同程度的抑菌活性,其中,pRAF3和pRAF4表达产物的抑菌活性较明显. 相似文献
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通过培养的人主动脉平滑肌细胞(hASMC)及脐静脉内皮细胞(hUVEC),应用3H-TdR参入、Northernblot分析、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、放射免疫分析(RIA)、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)对hASMC和hUVECDNA合成的作用及对血小板源生长因子(PDGF)、PDGF受体、转化生长因子β(TGF-β)、内皮素-1(ET-1)或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达和肾素-血管紧张系统(RAS)的影响,结果显示,HSPG明显抑制培养的hASMC基础的DNA合成(cpm值为:10385±3263vs,25541±6421,P<0.01)及外源性PDGF诱导的DNA合成(cpm值为:9878±1947vs.13481±44l0,P<0.05);抑制PDGFA链、TGF-Bp和ET-1mRNA表达,提高PDGFa和β受体mRNA的表达;显著降低hASMC培养液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的浓度和血管紧张素转换酶(ACE)的活性,推测HSPG抑制PDGFA链、TGF-β及ET-1mRNA表达,降低ACE活性及AngⅡ浓度是其抑制hASMC增殖的重要机 相似文献
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芸苔属植物S受体蛋白激酶的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
植物的发育过程中信号传导离不开接受信号的受体。受体是靶细胞接受信号或对其作出初步反应的一些特殊蛋白质。主要是细胞表面受体 ,是一类跨膜蛋白质 ,根据其结构和作用方式可分为三大类 :离子通道关联受体、G蛋白关联受体、酶联受体。酶联受体蛋白本身就是一种酶与酶相联系 ,通常是蛋白质激酶 ,可以使细胞内一些蛋白质磷酸化。在植物自交不亲和 (Self-incompatibility ,SI)反应中 ,有一种重要参与物质 ,称为S受体蛋白激酶 (Sreceptorkinase,SRK)就属于酶联受体。自交不亲和现象在芸苔属 (Bra… 相似文献