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1.
由于精胺(spermine)能特异地刺激哺乳动物tRNA~(Ile)的氨基酰化,本文用纯化的牛肝tRNA~(Ile)观察了精胺和Mg(2+)对tRNA~(Ile)CD光谱的影响。结果显示:Mg(2+)可使牛肝tRNA~(Ile)CD光谱峰向短波方向偏移2nm,波峰为263nm,峰值被增大约10%,ΔθMg(2+)=2.3×103deg·cm2/dmol;而精胺使牛肝tRNA~(Ile)CD光谱峰减少40%,Δθspermine=1×10(-4)deg·cm2/dmol;精胺和Mg(2+)对肝tRNA~(Ile)-IleRS复合物或IleRS的CD光谱基本无影响。表明Mg(2+)和精胺可影响牛肝tRNA~(Ile)的构象。实验同时以酵母tRNA(Phe)和E·colitRNA~(Ile)作为对照。 相似文献
2.
精胺和Mg^2+对tRNA^Ile圆二向色谱的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
由于精胺能特异异地刺激哺乳动物tRNA^Ile的氨基酰化,本文用纯化的牛肝tRNA^Ile观察了精胺和Mg^2+对tRNA^IleCD光谱的影响。结果显示:Mg^2+可使牛肝tRNA^IleCD光谱峰向短波方向偏移2nm,波峰为263nm,峰值被增大约10%ΔθMg^2+=2.3×10^3deg.cm^2/dmol;而精胺使牛肝tRNA^IleCD兴谱峰减少40%,Δθspermine=1×10^ 相似文献
3.
利用T7RNA聚合酶/启动子表达系统在大肠杆菌JM109(DE3)中表达化学合成的大鼠肝tRNA^Ile基因,经酚抽提,DEAE-52离子交换柱层极及PLC层析,分离纯化大鼠肝tRNA^Ile,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Noprthern-blot鉴定表明,大鼠肝tRNA^Ile基因成功地获得表达,氨酰化活性检测表明,纯化后,每1A260(40μg)的tRNA^Ile可负载约650pmol的Ile 相似文献
4.
大鼠肝tRNA^Ile基因的克隆与体外转录 总被引:1,自引:1,他引:0
采用PCR扩增出大鼠肝tRNA^Ile基因,构建了重组质粒pGWIW,并用T7RNA聚合酶/启动子系统对其进行了体外表达。经过对转录产物片段大小及运用Northermblot鉴定,证明了获得了不含修饰核苷酸的大鼠肝tRNA^Ile。生物学活性检测显示:合成基因体外转录产物氨基酰经活性是天然tRNA的40%,提示修饰核苷酸在哺乳动物Ile-tRNA合成酶的识别过程中起重要作用。 相似文献
5.
本实验用纯化的牛肝异亮氨酸tRNA(tRNA~(Ile))和异亮氨酰tRNA合成酶(IleRS),研究了精胺对Ile-tRNA复合物形成及IleRS活性的作用。结果表明:精胺能特异地促使牛肝tRNA~(Ile)氨基酰化反应;对IleRS活性无影响;能明显地增加形成Ile-tRNA复合物反应的Vmax和tRNA~(Ile)的Km值。 相似文献
6.
构建了3种来源于水稻、人和啤酒酵母的线粒体tRNA^Trp基因。实验表明这些线粒体tRNA^Trp的体外转录产物具有被枯草杆菌色氨酰-tRNA合成酶(TrpRS)氨酰化的能力,但是不能被鼠肝来源的氨酰tRNA合成酶粗酶所催化。动力学资源常数测定表明枯草杆菌TrpRS对线粒体tRNA^Trp的亲和力为野生型tRNA^Trp的一半,而在催化效率上,水稻和啤酒酵母线粒体tRNA^Trp的色氨酰化能力比野 相似文献
7.
我们测定了鲁鱼线粒体半胱氨酸tRNA基因和轻链复制起始区的核苷酸序列,绘制了半胱氨酸tRNA三叶草形的二级结构以及L链复制区的茎环结构。通过种脊椎动物tRNA^CYS基因的核苷酸序列分析发现,鲤鱼线粒体tRNA^CYS基因的不寻常的结构特点。鲤鱼线粒体L链复制起始区含有36个碱基,复制起始区茎环名的茎含有11对碱基,而环则是由14个碱基组成。同其它10种脊椎动物L-链复制起始区的核苷酸序列比较发现 相似文献
8.
大肠杆菌精氨酰—tRNA合成酶变种ArgRS381KA的基本性质 总被引:1,自引:1,他引:0
本文研究了Ly381变为Ala的精氨酰-tRNA合成酶(ArgRS)变种ArgRS381KA的最适pH和稳态动力学性质;比较了此酶与天然酶ArgRS的荧光光谱性质和热稳定性。实验结果表明ArgRS381KA的氨酰化活力和ATP ̄PPi交换活力的最适pH分别为8.0和7.0,与天然酶相同;ArgRS381KA的氨酰化活力对精氨酸、ATP和tRNA^Arg的Km分别为12μmol/L、0.3mmol/ 相似文献
9.
tRNA个性研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
tRNA参与蛋白质生物合成中至关重要的两个功能上相连的生物化学事件。一种是由氨基酰-tRNA合成酶(aaRS)催化的tR-NA的氨基酰化(tRNA的个性),通过aaRS对tRNA的序列和结构元件的专一识别和氨基酰化,使tRNA转化为氨基酰tRNA。另... 相似文献
10.
小麦锈病与活性氧代谢的关系 总被引:7,自引:0,他引:7
小麦抗锈病品种抽穗期叶片中SOD和CAT活性较低,O2^-产生速率较高,但籽粒形成之后能保持较高的SOD,CAT活性,O2^-积累较少,细胞膜脂过氧化水平较低,叶绿素和脯氨酸含量较高。感病品种则相反。 相似文献
11.
12.
本文利用pAmy413质粒通过定点诱变技术,在α-淀粉酶基因的287和291位分别引入1个G和C,代替原来的T和G,构建成质粒pAMY413B使成熟的α-淀粉酶N-端^7Leu^8Met变为^7Arg^8Ile,pAmy413Lα-淀粉酶信号序列因引入1个多酶切点接头而比pAmy413的29个氨基酸增加了13个氨基酸,创造了1个新的信号肽酶I识别窗口Ala-Gln-AlaSer,利用计算机对该信号 相似文献
13.
用苯酚法,DEAE-SephadexA_(25)柱层析分离并纯化了河西走廊分布的不同生境芦苇的tRNA。用tR-NA结合 ̄3H-Leu、 ̄3H-Gly及 ̄3H-Ala的氨酰化活性研究了四种生境芦苇的tRNA氨酰化特性。结果表明,三种 ̄3H-氨基酸的tRNA氨酰化活性在不同生境之间及同一生境芦苇的不同发育时期表现出极大差别;tRNA含量也存在类似的变化,表现在沙生芦苇与沼泽芦苇5-9月份含量均增高,盐化草甸-沙丘过渡带芦苇中tRNA含量均较其它生境芦苇低,而盐化草甸芦苇中以7月份含量最高;蛋白水解酶活性除沙生芦苇9月份降低外,其余三种生境芦苇均呈增高趋势;蛋白质含量在盐化草甸芦苇中与总氨酰化活性变化相一致,而过渡带芦苇与蛋白水解酶活性变化类似,沙生芦苇5月份表现为水解占优势后期则主要与合成有关,沼泽芦苇7、9月份却与水解相关。产生这些结果的原因之一是芦苇代谢对各自生境适应的差异性。 相似文献
14.
草鱼(Ctenopharyngodon idellus)线粒体DNA控制区及其两侧tRNA基因的克隆与结构分析 总被引:3,自引:0,他引:3
动物线粒体DNA控制区是线粒体基因组复制与基因表达的最主要的调控区.采用杂交和测序的方法对草鱼线粒体DNA控制区进行定位、克隆并测定了控制区及其旁侧的tRNAPhe、rRNAPro和rRNAThr三个基因的序列,与多种脊椎动物的相应序列进行了比较,并进行了结构分析.草鱼线粒体控制区全长927bp,含有与酵母和爪蟾线粒体启动子相似的序列,其CSBⅠ、CSBⅡ和CSBⅢ序列与其他几种动物的CSB比较相当保守,TAS与其回文基序可形成稳定的茎环结构,成为H-链复制的终止信号.草鱼线粒体tRNAPhe、tRNAPro和tRNAThr可折叠成三叶草形二级结构,其基因具有许多不同于细胞质tRNA基因的结构特点,可能反映了线粒体tRNA与线粒体核糖体具有不寻常的作用方式 相似文献
15.
识别位碱基G73,为tRNA^Trp的主要个性元件之一,tDNA^Trp-NCCrA的氨酰化活力测定及圆二色谱均表明在相同的pH条件下,识别位碱基的改变将影响到tRNA3′端的构象,而具有同一识别位碱基的tDNA^Trp在不同pH条件下,亦显示出不同的构象及氨酰化活力,tDNA^Trp的研究表明,是tRNA的构象而不是碱基本身决定了tRNA与其相应合成酶之间的精确识别。 相似文献
16.
用1HNMR法测定TDK肽在H2O(HODK),50%六氟丙醇(FPDK)和2mol/LGu·HCl(GUDK)中的溶液构象。在HODK和FPDK中,TDK肽的两段序列Asp0~Ile4,Ser9~Ile17分别具有较稳定的α-螺旋含量;而GUDK的SALS序列仍能检测到有序残存结构。并假设SALS序列是肽链形成二级结构的原始核心。 相似文献
17.
淋球菌营养型及质粒类型是其重要的生物表型。我们对93 ̄94年度在长春地区分离的98株淋球菌,进行了营养型分布,质粒微生态分布的实验研究,结果,属于原养型(Wr)38株,占38.7%;AHU^-型34株,占34.7%;Pro^-型17株,占17.4%;Ser^-型6株,占6.12%;Ile^-型3株,占3.1%,未见PAV^-型。所有菌株中,共检出四种类型的质粒,其分子量分别为2.6Md,4.5Md 相似文献
18.
为研究tRNA^Trp与色氨酰-tRNA合成酶(TrpRS)的相互识别及其结构、功能关系,纯化了枯草杆菌TrpRS并用溴化氰活化的Sepharose4B将TrpRS固定化,固定化TrpRS的蛋白质回收率为为95.5%,活力回收率为31.3%。研究了固定化TrpRS的酶学性质。其热稳定性和贮存稳定性方面均比液相TrpRS有了较大的提高,最适温度、最适pH均有一定程度的增大,工作稳定性良好。以固定化T 相似文献
19.
脑内P物质在谷氨酸兴奋中央杏仁核引起的升压反应中的作用 总被引:7,自引:0,他引:7
脑内P物质能神经元及其轴突末梢和相应受体广泛分布在中央杏仁核及其抽射的重要或压区,本工作显示:1.谷氨酸兴奋AC或将SP分别注入AC投射区;蓝斑,臂旁核,中脑导水管周围灰质或外侧下丘脑-穹窿周围区均引起升压反应;2.LC,NPB,PAG或LG/PF内预先注入「D-Pro^2,D-Phe^7,D-Trp^9」-SP均能衰减谷氨酸兴奋AC引起的升压反应;3.延髓头端腹外侧区内预先分别注射酚妥拉明,心得 相似文献
20.
采用高表达大肠杆菌tRNALeu菌株提取、纯化了亮氨酸等受体转移核糖核酸tRNALeu1和tRNALeu2.利用稳态动力学手段研究了tRNALeu1及脱镁tRNALeu1在不同稀土离子作用下与纯化亮氨酰-tRNA合成酶的氨酰化作用.tRNALeu1与亮氨酰-tRNA合成酶的结合及催化效率均受参与稀土离子的影响,表观Km值有较明显的变化.结果表明,亮氨酰-tRNA合成酶催化的tRNALeu1氨酰化反应所需Mg2+能够被稀土离子取代,但亲合性能不同. 相似文献