在中国壮族家系中发现的一例-α~T/-α~Q复合β~0β~0珠蛋白基因型

本文报道在我国广西隆林壮族中发现一个罕見的HbQ复合α,β地中海贫血家系。先证者女,18岁,贫血面容,肝脾肿大。化学结构分析确证本Hb变异体为HbQ Thailand[α74(EF3)Asp→His]。血红蛋白组成以及α和β珠蛋白基因分析结果表明,先证者的珠蛋白基因型为-α~Q/-α~T复合β°/β°(IVSI-1G→T/Codon17A→T);先证者父的基因型为-‘α~Q/-复合β~O/β~A(IVSI-1G→T/β~A);先证母的基因型为-α~T/αα复合β~O/β~A(Codon17A→T/β~A)。     

一个α,β地中海贫血复合家系β珠蛋白基因的进一步研究

 前文~[1]曾报道广西一个α,β地中海贫血复合家系的血红蛋白组成及α珠蛋白基因分析结果,并讨论了各成员可能的β珠蛋白基因结构情况。本文利用先进的PCR即基因扩增技术,结合特异寡核苷酸探针斑点杂交及扩增后直接测定DNA序列的技术,进一步研究并彻底搞请了该家系各成员的β珠蛋白基因结构情况。结果显示:母亲及两个弟弟都是编码子41—42TTCT四个碱基缺失造成框架位移所致β地中海贫血的杂合子。父亲与先证者的β基因均属正常。前三个成员均为α地贫复合β地贫,其α与β珠蛋白链合成的不均衡状态得到改善,贫血症状也明显轻。     

非连续聚丙烯酰胺凝胶电泳在珠蛋白链的分离及地中海贫血研究中的应用

首次应用非连续聚丙烯酰胺凝胶(12％和7.5％)电泳将胚胎、胎儿及成人溶血液中各种正常珠蛋白链分离。其电泳移动顺序为:α、β、Gγ、δ、Aδ、ε和ζ链,δ与Gγ链得到较好的分离。10例β—地中海贫血杂合子血样的δ链光密扫描测定结果为2.62±0.76％。重型β—地中海贫血患者的Gγ与Aγ比1.09～1.27,各类样品的α/非α链含量比约为1。结合网织红细胞体外培育,~3H—亮氨酸标记新合成的珠蛋白链,以放射性荧光自显影技术测定了五例α—地贫患者的珠蛋白链合成速率,其α/β合成比均小于1(0.79～0.89),而正常对照为0.97。在珠蛋白链的研究中,该方法具有简单、灵敏等优点。     

人胎儿γ-珠蛋白基因的再活化及在β血红蛋白病治疗中的

在个体发育过程中,人β类珠蛋白基因的表达存在从胎儿（γ）到成人（β）珠蛋白基因的表达转换（或称开关）.β-地中海贫血和镰刀型贫血症是两种最为常见的严重危害人类健康的单基因遗传病,通过诱导胎儿期血红蛋白（HbF,α2γ2）在成人期表达对该病的治疗是一种有效的策略.一些活化γ珠蛋白基因表达的转录因子和辅助因子已经被鉴定,一些可以增加胎儿血红蛋白在成人红细胞中表达的药物也已被鉴别和实验,它们的作用机制被部分揭示,这些研究为发展通过活化γ-珠蛋白基因治疗镰刀形细胞贫血和重型β-地中海贫血的方法提供了重要线索和实验依据.     

满族新生儿血红蛋白F中Gγ／Aγ比值测定及其异常者γ—珠蛋白基…

以聚丙烯酰胺凝胶电泳方法测定了３３１例辽宁满族新生儿脐带血血红蛋白Ｆ中Ｇγ／Ａγ比值。结果显示：高Ｇγ（＞８０％）者４例,占１．２１％,其基因频率（ｆ）为０．００６０４,低Ｇγ（３０－４８％）者６例,占１．８１％,其基因频率为０．００９０６,其余正常,Ｇγ平均值为６５．２３±６．３８％。未发现ＡγＴ链。对其中八例异常者（４例高Ｇγ值,４例低Ｇγ值）的染色体ＤＮＡ进行了基因图谱分析,确定４例高Ｇγ值     

中国人β—珠蛋白基因—530基序的变异性研究

应用双链ＤＮＡ循环则序法,对中国人群２０例血液学正体个体,７７例β－珠蛋白合成异常患者（４３例）及其部分亲属（３４例）的β珠蛋基因上游－５３０基序进行了序列分析。结果表明,中国人－５３０基序存在（ＡＴ）８Ｔ５,（ＡＴ）７Ｔ７和（ＡＴ）９Ｔ５三种主要的重排类型,以及一种未见报道的稀有重排类型（ＡＴ）１０Ｔ３。进一步经家系连锁分析,获得由β珠蛋白结构基因与－５３０基序重排组成的单体型,结果显示ＩＶＳ－     

与胎儿珠蛋白基因持续表达有关的(A_γδβ)°—地贫纯合子及杂合子的分子鉴别

我们分子鉴别了一个缺失型中国(A_γδβ)°-地贫家系。先证者为这一缺失的纯合子,具有中度贫血症状。家系的另五个成员均为这一缺失的杂合子,其胎儿血红蛋白(HbF)为16—21％,接近或达到HPFH杂合子的HbF水平,并且几乎不表现贫血症状。限制性内切酶图谱分析证明了β-珠蛋白基因簇内的DNA顺序缺失,缺失的5′端点位于Aγ基因IVSⅡ内,3′端点在β-珠蛋白基因下游区远端,距HPFH-2的3′缺失端点上游区约11kb。缺失的总长度约为80kb。本文讨论了这一缺失导致胎儿血红蛋白在成人中持续活跃表达的可能机制。     

中国人α珠蛋白基因-α3.7缺失亚型的研究

-α3.7是中国人常见的缺失型α-地中海贫血-2。根据重组位点的不同,-α3.7可分为-α3.7Ⅰ型、-α3.7Ⅱ型和-α3.7Ⅲ型,并且亚型的种类和频率具有种族差异性。本研究在中国人群中用PCR基因分析方法检出具有α珠蛋白基因-α3.7缺失的患者56例,然后用ApalⅠ和BalⅠ限制性内切酶进行分型。 结果表明,在这56例具有-α3.7缺失的患者中,有54例是-α3.7Ⅰ型,有2例是-α3.7Ⅱ型,尚未发现-α3.7Ⅲ型。此结果丰富了我国α地贫基因型谱的资料。 Abstract:-α3.7 is a common deletional α-thalassemia-2 in China.According to different recombination sites,-α3.7 can be divided into -α3.7Ⅰ、-α3.7Ⅱand -α3.7Ⅲ.The frequency and population distribution of these -α3.7 are quite different.In this study,we detected 56 patients among Chinese population of -α3.7 defect in alpha globin gene by PCR method,then the PCR product was digested by the restriction enzyme ApalⅠand BalⅠ.The sub-typing result shows that in the 56 cases of -α3.7 defect,54 out of 56 is -α3.7Ⅰ,2 out of 56 is -α3.7Ⅱ and none of -α3.7Ⅲ is detected.This result enriches the data about the alpha thalassemia genotypes of Chinese people.     

胎肝β—族珠蛋白基因中DNaseI超敏感点的定位及其结合…

本文以人３－４个月的胎儿组织为材料，测定了人胎肝中β－族珠蛋白基因上游－２５ｋｂ内的ＤＮａｓｅＩ超敏感点图谱。这些ＤＮａｓｅＩ超敏感点在胎肺、脑组织中不存在，通过凝胶电泳阻抑法实验，发现ＤＮａｓｅＩ超敏感点ＩＩ（ＨＳＩＩ）１．９ｋｂＤＮＡ片段有组织特异性和非组织特异性的结合蛋白。     

在我国裕固族中首次发现一例Hb沈阳

Hb沈阳是1982年在我国汉族中发现的一种新的不稳定血红蛋白。1986年作者在“丝绸之路”地 区进行血红蛋白群体普查时,发现一例裕固族泳速相当于J组的异常Hb,经一级结构分析表明为。链 第26位丙氨酸被谷氨酸取代,证实此例变异体为Hb沈阳〔a,,(B7)Ala-aGlu」在裕周族中系首次报 告。根据现有Hb沈阳的分布状况及有关资料,作者分析这种异常Hb基因可能源于我国。     

反转录病毒载体介导的人β—珠蛋白基因低水平表达的机制初探

以人 β 珠蛋白基因簇基因座控制区DNaseI高敏位点 2和高敏位点 3组合的微小基因座控制区作为调控元件 ,以 374bp第二内含子部分缺失的 2 .0kbβ 珠蛋白基因作为结构基因的反转录病毒重组体 ,通过建立 ψ 2产病毒细胞系和瞬时转染双向性包装细胞系 ψ A两种方法获得重组病毒。感染鼠红白血病细胞后 ,Southern杂交鉴定前病毒整合完整性 ,用RNase保护实验检测人 β 珠蛋白基因的表达 ,通过PCR产物测序确定前病毒结构。结果表明 ,在瞬时转染 ψ A来源的重组病毒转导和质粒转染的鼠红白血病细胞中 ,人 β 珠蛋白基因的表达水平分别达到内源性鼠α 基因表达的 (5 2 .4± 11.2 ) % (n =12 )和 (73.8± 14 .3) % (n =12 ,未确定整合拷贝数 ) ;而在 ψ 2产病毒细胞系来源的病毒转导的细胞中 ,表达水平低于 3% ,前病毒序列分析发现其高敏位点 2中出现一个点突变 ,这可能是人β 珠蛋白基因呈低水平表达的一个原因。     

中国人群的β地贫的可诊断率与产前诊断中遗传标记的选择策略

利用与β地中海贫血致病基因连锁的遗传标记进行产前诊断已成为可能,但群体中遗传标记与致病基因的不完全连锁决定了产前诊断的局限性。根据中国人群中7个遗传标记的多态性分布数据,我们计算了各遗传标记及其所有组合的可诊断率。又据各遗传标记及其组合的可诊断率,我们可以对:(1)所作出产前诊断的可诊断率进行预先评价;(2)选择适合于中国人群β地中海贫血产前诊断的最佳策略。本文提出了中国人群中选择遗传标记进行β地中海贫血产前诊断的最佳路线。同时将基因的连锁分析法与寡核苷酸法进行了比较。     

人β—簇珠蛋白基因LCR调控元件中HS3与反式调控因子相互作用的研究

Upstream of the human epsilon-globin gene is the Locus Control Region (LCR) of the human beta-globin cluster, which consists of four DNase-I hypersensitive sites(HS1-HS4). It has been reported in transgenic experiments that HS3 preferentially regulates epsilon-globin gene expression. In order to elucidate the regulatory function of HS3 in the expression of globin gene, nuclear extracts from mouse hematopoietic tissues at several developmental stages were prepared and the binding of the nuclear factors to HS3 was analysed by using electrophoresis mobility shift assay(EMSA). Our results showed that the binding patterns of HS3 with nuclear extracts of mouse hematopoietic tissues at day 13 and day 18 of gestation were completely different; furthermore, by Southwestern Blot, the distinction between both stages was also demonstrated. It has been known that GATA and CACCC binding motifs are contained within HS3 core region. Using competitive gel-retardation assay, we found that no shift bands could be competed by using CACCC motif as a competitor. However one shift band at day 13 and day 18 of gestation could be competed respectively by using GATA motif as a competitor. We suggested that the shift bands, which could not be competed by both motifs, might be novel and stage-specific factors. In addition, by using Western Blot, we demonstrated that the two shift bands at day 13 and day 18 of gestation, competed by GATA motif, were GATA-2 and GATA-1 respectively: GATA-1 was expressed in mouse hematopoietic tissues at day 18 of gestation and not expressed at day 13 of gestation; however, GATA-2 was only expressed in mouse hematopoietic tissues at day 13 of gestation. According to these results, we speculated that HS3 might play an important role in regulation of stage-specific expression of globin genes through interaction between stage-specific nuclear factors and HS3.     

云南白族中发现一例Hb J—Lome[β59(E3)Lys→Asn]

作者在云南白族中发现一例快泳异常血红蛋白(Hb)。经化学结构分析,确认这例快泳血红蛋白的β链第59位的赖氨酸被天冬酰胺取代,为Hb J-Lome,此为云南白族中首次发现。     

血红蛋白F乌鲁木齐[~Gγ~I22(B4)Asp→Gly]——在维吾尔族中发现的一种新的胎儿血红蛋白变异体

在乌鲁木齐市进行的一次脐带血普查中,检出一例慢速血红蛋白变异体,携带者为一维吾尔族新生儿。结构分析表明,γ链第22位的天冬氨酸被甘氨酸所替代;变异体的γ75位是异亮氨酸,γ136位是甘氨酸。这种变异[~Gγ~I22(B4)Asp→Gly]迄今在国内外文献中均未见报道,是一种新发现的胎儿血红蛋白变异体,命名为血红蛋白F乌鲁木齐(HbF Urumqi)。热不稳定试验阴性。