炎症条件下Ltbp2促进淋巴细胞跨内皮细胞迁移

目的:探讨组织内转化生长因子β结合蛋白2(Ltbp2)在炎症条件下促进淋巴细胞及其亚群跨内皮细胞的迁移。方法:利用CRISPR/Cas9敲除MS1细胞上的Ltbp2基因;淋巴细胞与内皮细胞黏附实验比较淋巴细胞对MS1细胞和敲除细胞Ltbp2~(-/-)MS1的黏附能力,RT-PCR及流式细胞术比较MS1细胞和敲除细胞Ltbp2~(-/-)MS1表面黏附分子的表达情况;Transwell实验比较淋巴细胞及其亚群穿过MS1细胞和敲除细胞Ltbp2~(-/-)MS1的能力。结果:在炎症条件下,淋巴细胞的黏附及跨MS1细胞的迁移能力显著高于敲除细胞Ltbp2~(-/-)MS1。结论:在炎症条件下,Ltbp2促进淋巴细胞与内皮细胞的黏附及跨内皮细胞迁移。     

淋巴细胞亚群成员研究进展

淋巴细胞是人体重要的免疫细胞,占外周血白细胞总数的20﹪~45﹪,主要分为T细胞、B细胞和NK细胞三大类。根据细胞表面标志及功能特征,将淋巴细胞亚群分为CD3~+CD4~+辅助性T细胞、CD3~+CD8~+的细胞毒性T细胞、CD19~+B细胞、CD16~+CD56~+NK细胞。随着基础免疫学及免疫学技术的不断发展,临床和科研工作者不断地将淋巴细胞亚群细化并发现一些新的亚群,包括γδT细胞、Th1/Th2细胞、Th17细胞、Th9细胞、Tfh细胞、Treg细胞、Breg细胞、NKT细胞和NKB细胞等,淋巴细胞亚群的内容也随之被赋予了新的定义,现将近年来淋巴细胞亚群的研究进展进行综述。     

白细胞介素

一、免疫系统 哺乳动物体内存在着具有抗感染、抗肿瘤及排斥异体组织功能的免疫系统,已为人们认识二百多年了。已知参与哺乳动物免疫功能的细胞有多种类型,主要包括巨噬细胞、粒细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞。前两类细胞能吞噬和降解外来异物;T淋巴细胞可杀伤肿瘤细胞(病毒感染细胞)及异体组织;     

人类免疫缺陷病毒感染与特异性细胞毒性T淋巴细胞反应

特异性细胞毒性T淋巴细胞是一种能直接杀伤病毒及抗细胞内感染的效应细胞,大多数细胞毒性T淋巴细胞为CD8细胞,其反应是控制人类免疫缺陷病毒感染的重要免疫反应,但细胞毒性T淋巴细胞不能完全清除人类免疫缺陷病毒,这与病毒在体内的高度变异及病毒攻击人体免疫系统导致免疫功能改变有关。     

淋巴细胞的凋亡和调控

免疫系统中,细胞凋亡调节着体内免疫细胞群的合适比例,制约免疫应答的过程及强度,决定免疫耐受和免疫记忆的产生。本文将综述细胞凋亡在淋巴细胞发育中的作用,淋巴细胞凋亡的途径及调控因素。     

正常人末梢血淋巴细胞的电泳组分

正常人末梢血淋巴细胞是一不均一的群体。它主要由T淋巴细胞及B淋巴细胞等亚群组成。目前已有多种识别T、B淋巴细胞的方法,如E玫瑰花试验、酸性酯酶染色试验,以及检测细胞表面免疫球蛋白、Fc受体及补体受体等技术,但均因易受多种因素影响而不够完善。用细胞电泳技术分析淋巴细胞亚群国外已研究多年,但国内报道甚少。我们对50例正常人末梢血淋巴细胞进行了电泳研究,重点分析了淋巴细胞的电泳组分及其与T、B淋巴细胞亚群之间的关系。我们认为用这一方法识别淋细胞亚群是可行的。     

人外周血T淋巴细胞凋亡与胀亡研究及氨茶碱的诱导作用

目的:在前期研究的基础上进一步观察氨茶碱对人外周血T淋巴细胞凋亡与胀亡的诱导作用。方法:密度梯度离心法及尼龙棉柱法分离健康成年人外周血T淋巴细胞,分空白组及氨茶碱组,培养后观察细胞光镜及电镜形态学、FDA/PI荧光染色,并用流式细胞仪检测凋亡和胀亡细胞比例变化。结果:①人外周血T淋巴细胞经体外培养,可自然出现典型的细胞凋亡与胀亡形态学改变。②人外周血T淋巴细胞在氨茶碱诱导作用下,凋亡率有显著增高,但胀亡率相对无显著增高。结论:人外周血T淋巴细胞存在凋亡与胀亡现象,氨茶碱可诱导人外周血T淋巴细胞凋亡,但不能有效的诱导健康人外周血T淋巴细胞胀亡。     

表达小鼠白细胞介素21的Sp2／O细胞体外对鼠肿瘤特异性淋巴细胞增殖及功能的影响

目的：研究表达小鼠白细胞介素21（mIL-21）的Sp2／O细胞与用Sp2／0细胞预先免疫的小鼠淋巴细胞体外共培养,是否对预致敏淋巴细胞增殖及功能有影响。方法：获取灭活Sp2／0细胞免疫的小鼠淋巴细胞,在mIL-2存在的条件下,以mIL-21转染的Sp2／0细胞为刺激细胞,用流式细胞术检测CFSE标记的淋巴细胞增殖和7-AAD标记的细胞毒活性;用ELISpot法确定分泌IFN-γ的淋巴细胞数量。结果：转染mIL-21的Sp2／0细胞对预致敏的淋巴细胞增殖有明显影响,活化的淋巴细胞对靶细胞的杀伤率（39.57％±4.72％）与对照组（23.18％±2.94％）相比有较大的提高（P〈0.05）,且分泌IFN-γ的细胞数量明显增加。活化增殖后的淋巴细胞回输至环磷酰胺预处理的小鼠,能延长小鼠的成瘤时间。结论：表达mIL-21的Sp2／0细胞可有效促进肿瘤抗原特异性淋巴细胞活化及增殖,并增强其对肿瘤细胞的杀伤功能。     

日本七鳃鳗类淋巴细胞的分离及细胞学特征

为分离纯化并鉴定日本七鳃鳗(Lampetra japonica)血液中的类淋巴细胞,采用Ficoll密度梯度离心法分离出单个核细胞层,并得到分离单个核细胞层的最佳分离液比重为1.092。利用流式细胞仪对分离到的单个核细胞层细胞进行分选,根据细胞的前向光及侧向光散射特征成功分选出类淋巴细胞,分选效率为95.68%,每毫升外周血可分离纯化得到类淋巴细胞2.4×106个。通过透射电镜观察七鳃鳗类淋巴细胞,细胞为圆形或椭圆形,细胞表面有突起、无微绒毛,胞质内含有板状嵴线粒体、粗面内质网、游离核糖体和液泡等。淋巴细胞异质性实验结果表明,日本七鳃鳗血液白细胞中尚未发现T淋巴细胞、B淋巴细胞的分化。     

CD127与T淋巴细胞

CD127是IL-7受体α链,T淋巴细胞对IL-7的特异性应答主要通过CD127的表达实现的。CD127在胸腺细胞向T淋巴细胞的发育过程、成熟T细胞内环境稳态的维持、病毒感染后T细胞的免疫应答及记忆性T细胞的分化及幸存等方面发挥重要的作用。在整个T淋巴细胞生命周期中仅有两个阶段缺乏CD127的表达：即双阳性CD4+CD8+T细胞及激活的T细胞。近期,随着对CD127研究的不断深入,发现CD127在作为记忆性T细胞及调节性T细胞特异性的表面标记物方面也发挥着重要作用。本文简要介绍了CD127在T淋巴细胞生命周期的不同阶段所发挥的调节作用及其机制。     

带有F_c受体和绵羊红血球(SRBC)受体的双重标志淋巴细胞的研究

淋巴细胞亚群的研究是免疫学研究中一个重要方面,已经显示淋巴细胞有 T 淋巴细胞、B 淋巴细胞、K 细胞等亚群,这些细胞表面都有特征性表面标志。近年亦注意到有些淋巴细胞表面不但有 T 淋巴细胞表面特征,亦同时有 B 细胞或 K 细胞表面特征,这些称为双重标志淋巴细胞。     

特异性细胞毒性T淋巴细胞体外检测方法的进展

抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞在免疫反应中起着重要作用,本文就近年来抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞反应的体外检测方法的原理及评价进行综述。     

人外周血T淋巴细胞凋亡与胀亡研究及地塞米松的诱导作用

目的:观察分离培养的人外周血T淋巴细胞的调亡与胀亡.方法:密度梯度离心法及尼龙棉柱法分离健康成年人外周血T淋巴细胞,分空白组及地塞米松(DXM)组,培养后观察细胞光镜及电镜形态学、FDA/P1荧光染色,并用流式细胞仪检测凋亡和胀亡细胞比例变化.结果:①人外周血T淋巴细胞经体外培养,可自然出现典型的细胞凋亡与胀亡形态学改变.②人外周血T淋巴细胞在地塞米松诱导作用下,凋亡率与胀亡率皆有显著增高.③随着培养时间的增加人T淋巴细胞凋亡与胀亡率亦有升高.结论:人外周血T淋巴细胞存在凋亡与胀亡现象,DXM可诱导人外周血T淋巴细胞凋亡与胀亡.     

表达小鼠白细胞介素21的Sp2/0细胞体外对鼠肿瘤特异性淋巴细胞增殖及功能的影响

目的:研究表达小鼠白细胞介素21(mIL-21)的Sp2/0细胞与用Sp2/0细胞预先免疫的小鼠淋巴细胞体外共培养,是否对预致敏淋巴细胞增殖及功能有影响.方法:获取灭活Sp2/0细胞免疫的小鼠淋巴细胞,在mIL-2存在的条件下,以miL-21转染的Sp2/0细胞为刺激细胞,用流式细胞术检测CFSE标记的淋巴细胞增殖和7-AAD标记的细胞毒活性;用ELISpot法确定分泌IFN-y/的淋巴细胞数量.结果:转染mIL-21的Sp2/0细胞对预致敏的淋巴细胞增殖有明显影响,活化的淋巴细胞对靶细胞的杀伤率(39.57%±4.72%)与对照组(23.18%±2.94%)相比有较大的提高(P＜0.05),且分泌IFN-y的细胞数量明显增加.活化增殖后的淋巴细胞回输至环磷酰胺预处理的小鼠,能延长小鼠的成瘤时间.结论:表达mIL-21的Sp2/0细胞可有效促进肿瘤抗原特异性淋巴细胞活化及增殖,并增强其对肿瘤细胞的杀伤功能.     

P388白血病小鼠胸腺哺育细胞的细胞化学观察

采用ANAE、ACP、β-Gase和PAS细胞化学方法,对接种P388白血病细胞后3天和9天患鼠的胸腺哺育细胞(Thymic nurse cell,TNC)、外周血淋巴细胞及腹水细胞进行了观察,并与对照组加以比较。结果表明,3天组患鼠TNC对三种酶均呈局部阳性反应;TNC内的淋巴细胞(TNC—L)ACF和β-Gase阳性率显著增加,而ANAE阳性率则显著下降;外周血未见异常;患鼠无腹水。9天组患鼠,外周血白细胞总数显著增加,以淋巴细胞为主,淋巴细胞三种酶和PAS的阳性率均显著增高;患鼠腹水明显,其大部分腹水细胞三种酶呈弥漫性强阳性反应,PAS也为强阳性反应;但很难分离到TNC。外周血淋巴细胞和9天组患鼠腹水细胞POX呈阴性反应。对上述结果作了讨论。     

白细胞介素12的研究进展

白细胞介素１２（ＩＬ－１２）是由巨噬细胞和Ｂ淋巴细胞等产生的糖蛋白类细胞因子,由４０ｋＤ和３５ｋＤ两个亚基组成。ＩＬ－１２能促进Ｔｈｌ细胞的分化与增殖,控制细胞介导免疫;促进Ｔ淋巴细胞、ＮＫ细胞的发育与增殖,并刺激这些细胞产生ＩＦＮ－γ;增强ＮＫ细胞和细胞毒淋巴细胞的细胞毒活性以及ＩＬ－２诱导ＬＡＫ细胞的活力。ＩＬ－１２在培育新疫苗、防治利什曼病和ＡＩＤＳ等免疫系统疾病及肿瘤的免疫治疗中,有着广阔     

DC-CIK治疗大肠癌的研究进展

大肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一,发病率和死亡率均较高。过继免疫治疗是当今肿瘤治疗的热点,已逐步成为一些肿瘤的首选治疗方法。树突状细胞(DC)是目前已知功能最强大的抗原呈递细胞,具有呈递肿瘤抗原和抵制肿瘤细胞免疫逃逸及刺激T淋巴细胞产生免疫应答的作用。细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)由多种细胞因子诱导而成,具有T淋巴细胞及NK细胞抗肿瘤作用的特点。DC和CIK细胞有效结合可以同时促进DC细胞的增殖和免疫功能及加强CIK细胞的抗肿瘤作用。本文就近年来国内外应用DC-CIK治疗大肠癌的研究进展进行综述。     

流式细胞仪分选人外周血T淋巴细胞的方法建立与评价

目的:利用流式细胞仪同时分离外人周血单个核细胞中T淋巴细胞并检测其分离纯度及存活率。方法:本文采用流式细胞仪同时分选人外周血CD4~+、CD8~+T淋巴细胞为例,推而广之,采用人外周血淋巴细胞分离液梯度离心法制备外周血单个核细胞,采用流式细胞仪同时分选CD4~+、CD8~+T淋巴细胞,分离细胞再通过流式细胞仪回测其分离纯度并通过台盼蓝染色检测分离细胞的存活率。结果:采用此方法能有效人外周血细胞CD4~+、CD8~+T淋巴细胞,分选前CD4~+淋巴细胞纯度为(50.5±11.5)%、CD8~+T淋巴细胞纯度为纯度为(15.4±7.1)%;分选后CD4~+T淋巴细胞纯度为(94.3±1.3)%、CD8~+T淋巴细胞纯度为(93.6±1.6)%;分选后CD4~+T淋巴细胞存活率为(95.3±1.8)%,CD8~+T淋巴细胞存活率为(94.8±1.5)%,细胞的形态完整。结论:采用人外周血淋巴细胞分离液梯度离心法制备外周血单个核细胞后利用流式细胞仪分选的方法能够高效、快速的分离人外周血CD4~+、CD8~+T淋巴细胞,且存活率高,为进一步研究其功能提供了保证。采用不同的荧光抗体标记其他淋巴细胞亚群,也能高效、快速的分离出细胞。     

中国鲎和圆尾鲎血淋巴细胞分类和特征的比较研究

为了更好地了解中国鲎(Tachpleus tridentatus)和圆尾鲎(Carcinoscorpius rotundicauda)血淋巴细胞的种类组成和特征差异,综合运用光学显微镜、扫描电镜和粒度仪,较为系统地对两种鲎的血淋巴细胞进行了分类和特征研究,从而为两种鲎的血淋巴细胞和分子生物学研究提供基础资料。根据血淋巴细胞大小、核质比、细胞着色特点、细胞中颗粒存在与否、颗粒的密集程度等,中国鲎和圆尾鲎的血淋巴细胞均可分为大颗粒细胞、小颗粒细胞和透明细胞三种主要类型,且两种鲎的血淋巴细胞均以颗粒细胞为主,透明细胞在血淋巴细胞中所占比例最小,但具有高核质比。两种鲎的同类血淋巴细胞在染色和形态上无显著性差异,但在同一种鲎中,血淋巴细胞密度存在显著的雌雄差异。       

免疫诊断细胞方法(续七)

五、致敏淋巴细胞对相应抗原的转化反应 淋巴细胞在刺激物的作用下转化成核体变大的转化细胞是免疫反应的重要现象之一。在非特异刺激物的作用下,如多克隆性致有丝分裂原可使大量的淋巴细胞群体发生反应(8～12%的PHA,23～26％的ConA),因此,细胞转化率高达80%。在抗原和不完全抗原的作用下,只有少部分被致敏的淋巴细胞变成转化细胞。因此细胞转化指数不高(转化率15～30％),在致有丝分裂原作用下淋巴细胞转化首先可用于评价淋巴细胞的活性。但是淋巴细胞对抗原的类似反应,尽