黑盖木层孔菌发酵液多糖的分离纯化及活性研究

黑盖木层孔菌发酵液醇沉得胞外粗多糖(PNM)。气相色谱分析PNM为一杂多糖,单糖组成为：木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖,质量比为0.05：0.63：0.31：1.00。PNM经冻融分级、Sevag法脱蛋白、Sepharose CL-6B柱层析得级分PNMⅠ,高效液相分析表明为单一级分,分子量约2.9×104。初步考察了PNM和PNMⅠ对小鼠离体淋巴细胞增殖的影响,二者都在400μg/ml时对淋巴细胞有极显著的增殖作用。     

小刺猴头菌液体深层培养过程中多糖积累及其特征的研究

本文探讨了气升环流反应器培养小刺猴头菌过程中菌体生物量、胞内外真菌多糖的积累规律,与同一菌株复元的子实体多糖的含量、组成分别进行分析对比,得到液体深层培养菌丝体多糖的含量为0．0918g／g（干）,而子实体仅为外0．378g／g（干）,发酵液中多糖含量达0．285g／l,它们的单糖构成比例均相同,即葡萄糖：甘露糖：半乳糖＝20．2：5．2：1,但液体深层培养的菌丝体多糖与人工栽培的子实体多糖的电荷性能不同。     

江西虫草发酵液脱色及其多糖提取分离的优化工艺*

通过单因素和正交试验法,优化了江西虫草发酵液脱色的工艺条件。即在提取多糖前,调节发酵液pH值至5,活性炭用量为3g／100mL,在25℃恒温条件下吸附5min后,发酵液脱色率可达到89．6％,发酵液多糖的耗损率仅为10．7％。在此基础上,采用正交试验法,对发酵液多糖提取工艺进行了优化。利用优化后的工艺,即经脱色和去蛋白后发酵液滤液浓缩至其总体积的1／7,加入乙醇,终浓度为80％,醇析16h,发酵液多糖的得率可达到0．38g／L。     

糖质溶液中发酵生产灰树花胞外多糖的研究

研究了葡萄糖浓度和pH值调控对糖质溶液中发酵生产灰树花胞外多糖的影响。葡萄糖浓度为5％时胞外多糖产量最高;发酵液pH控制为3．5－4．0时有利于胞外多糖的合成;并守试了重复使用菌丝体在糖质溶液中发酵生产灰树花胞外多糖的新方法。     

发酵法生产猪苓菌丝体及猪苓多糖的研究

采用经选育的猪苓PU－99菌作为生产菌株,研究了其培养基组成,优化了深层发酵条件。在1吨罐中生产猪苓菌丝体：发酵36h,其菌丝体干重达2．3％,粗多糖含量在31．0％。对得到的猪苓菌丝体进行了有效成分的提取,并测定了猪苓多糖的分子量,分子量为29054,峰面积72．02％。     

江西虫草发酵液脱色及其多糖提取分离的优化工艺

通过单因素和正交试验法,优化了江西虫草发酵液脱色的工艺条件。即在提取多糖前,调节发酵液pH值至5,活性炭用量为3g／100mL,在25℃恒温条件下吸附5min后,发酵液脱色率可达到89．6％,发酵液多糖的耗损率仅为10．7％。在此基础上,采用正交试验法。对发酵液多糖提取工艺进行了优化。利用优化后的工艺,即经脱色和去蛋白后发酵液滤液浓缩至其总体积的1／7,加入乙醇,终浓度为80％,醇析16h,发酵液多糖的得率可达到0．38g／L。     

平菇菌粗多糖的抗氧化活性研究

采用深层发酵技术生产平菇粗多糖,时其清除DPPH自由基、羟自由基的能力、铁离子螯合能力以及还原力进行了比较分析。结果表明：菌丝体粗多糖和发酵液粗多糖均具有较强的抗氧化能力,但2种多糖的抗氧化能力存在差异;茵丝体粗多糖清除DPPH自由基的能力较强,其EC。。值为2．20mg／mL;发酵液粗多糖清除羟自由基的能力、铁离子螯合能力以及还原力较强,其EC50值分别为0．72mg／mL、3．32mg／mL和7．91mg／mL。在一定的浓度范围内,多糖的浓度增加,其抗氧化能力也随之增强,呈量效依赖关系。     

深层培养云芝菌丝体蛋白多糖的提取及性质

采用水、３％草酸和０．２ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠为溶剂分别提取深层培养的云芝〔Ｐｏｌｙｓｔｉｃｔｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ（Ｌ．）Ｆｒ．〕菌丝体蛋白多糖,其得率分别为菌丝体干重的２０％、４９％和１９％。提取的粗多糖经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析进一步分离、纯化,纯化的多糖经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后呈现一个斑点,在ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析中有一个对称峰,紫外及红外光谱分析和蛋白质含量测定表明该多糖为蛋白多糖,其蛋白质和多糖含量在水提多糖中分别为１３％和６２％、在酸提多糖中分别为５％和９１％。在碱提多糖中分别为３％和８１％。组成该多糖的主要单糖是葡萄糖和木糖。     

小刺猴头菌液体体深层培养过程中多糖积累及其特征的研究

本文探讨了所升环流反应器培养小刺猴头菌过程中的菌体生物量、胞内外真菌多糖的积累规律,与同一菌株复元的子实体多糖的含量、组成分别进行分析对比,得到液体深层培养菌丝体多糖的含量为０．０９１８ｇ／ｇ,而子实体仅为０．０３７８ｇ／ｇ,发酵液为多糖含量达０．２８５ｇ／ｌ,它们的单糖构成比例均相同,即葡萄糖：甘露糖：半乳糖＝２０．２：５．２：１,但液体深层培养的菌丝体多糖与人工栽培的子实体多糖的电荷性能不同。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较*

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖 hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖。气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12：0.04：1.00：0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.25：0.41：0.31：1.00：0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000。猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

阿魏蘑多糖理化性质及免疫活性研究

以阿魏蘑Pleurotus ferulae Lanzi子实体和菌丝体为试验材料,采用水浸法提取阿魏蘑多糖,分别得到子实体粗多糖A和菌丝体粗多糖B。将A经Sevag法去蛋白、透析、CTAB络合、乙醇沉淀、NaCl溶液溶解、透析,得到多糖A1。紫外光谱分析鉴定多糖A1为均一组分。苯酚一流酸法测得多糖A1糖含量为82．9％。凝胶渗透色谱法测得多糖A1数均分子量Mn=141088,重均分子量MW＝142897。气相色谱分析多糖A1单糖组成及其摩尔比为Xyl:Gal:Gal=1:1.02:2.899。巨噬细胞吞噬作用试验、迟发型变态反应试验、白细胞介素－2（IL－2）的诱生与检测试验测得粗多糖A、粗多糖B具有免疫活性。     

蛹虫草菌产生的胞外多糖及其理化性能和抗氧化活性的初步研究

蛹虫草菌Cordycepsmilitaris在液体发酵条件下可产生胞外多糖,其粗多糖的蛋白含量在14．31％左右,氨基酸含量为13．8％,共有17种氨基酸,水分5％左右,多糖含量大约占80％。蛹虫草菌胞外多糖具有良好的增稠性、触变性、抗盐耐热和对广泛pH的稳定性能。蠕虫草菌丝体及其胞外多糖具有一定的抗氧化活性,在60℃的促进氧化条件下放置7天,0．05％含量的菌丝体及其胞外多糖降低油脂氧化率分别达到18．8％和19．8％。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖,气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12:0.04:1.00:0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,磨尔比为：0.25:0.41:0.31:1.00:0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000,猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

巴西蘑菇菌体深层发酵培养条件的优化及成分分析

对巴西蘑菇深层发酵条件进行了详细的研究,确定了巴西蘑菌体发酵的最成方案是：7％葡萄糖,1．5％酵母膏,0．3％磷酸氢二钾,0．1％硫酸镁,VB110mg/100ml,自然pH,接种量为15％,装液量为100mg/250ml三角瓶,150r/min,25℃恒温培养9天,菌丝干重达到1.8g每100ml发酵液。通过对巴西蘑子实体与深层培养菌丝体中蛋白质营养成分及多糖含量进行了分析比较,发现它们均是极好的营养食品之源。     

粗柄羊肚菌菌丝体多糖及胞外多糖的提取工艺

为了研究粗柄羊肚菌菌丝体多糖及胞外多糖的最佳提取工艺条件,采用超声波提取菌丝体多糖、菌丝体发酵液浓缩提取胞外多糖的方法。通过单因素试验和L9(34)正交试验设计,探讨二者的最佳提取工艺条件。研究结果表明菌丝体多糖的最佳提取工艺条件:料液比1∶20(g∶m L),超声波处理温度70℃,超声时间20 min,超声提取次数2次;胞外多糖的最佳提取工艺条件:浓缩倍数1∶5,浓缩温度50℃,醇沉浓度95%,p H为6。该项工艺研究得到菌丝体粗多糖平均含量56.761 2 mg/g,胞外多糖平均含量1.275 4 mg/m L,多糖产量稳定,且此试验方法稳定可行。     

多型炭角菌的培养及多糖提取

多型炭角菌在4%葡萄糖,1%蛋白胨,250mL三角瓶装培养液80mL,pH6.5,25℃的培养条件下生长最好,发酵终点为168小时。正交试验得到K+, Mg2+,Ca2+, Zn2+, Fe2+, Mn2+和Cu2+等金属离子的最适浓度分别为0.15%, 0.03%, 0.05%, 0.0015%, 0.001%, 0.00005%和 0.0002%。对培养得到的菌丝体进行多糖提取,得到2种粗多糖:X-1(水溶性多糖)和X-2(碱溶性多糖);从发酵液提取的粗多糖为X-3。经Sephadex G-100和 Sephadex G-150凝胶柱层析,收集、合并的单一峰位部分经聚丙烯酰胺凝胶电泳及纸层析均呈现为单一斑点。多糖酸水解后均能与茚三酮显色,蛋白质组成分析表明其分子中富含16种氨基酸。     

金针菇菌丝体的深层培养及多糖制取

从２０株金针菇菌株中筛选出适于液体发酵的９４Ｂ２株。该菌种适宜的摇瓶培养条件：培养温度２３～２４℃,ｐＨ６．５,接液体种量１０％,装液量≤５０ｍｌ／５００ｍｌ瓶;不同的间歇振荡形式对菌丝球产量和形态有显著影响。深层发酵工艺相似于抗生素发酵。发酵期间发酵液ｐＨ变化幅度很小,总糖、还原糖、氨基氮与菌丝生长量有一定的相关性。发酵酵的菌丝产量可达４７．５ｇ（湿重）／１００ｍｌ、胞外多糖达１７４．７ｋｇ／１００ｍｌ发酵液上清、胞内多糖达３３８．１ｍｇ／１００ｇ湿菌丝体。     

~(60)Coγ射线对不同细胞形态出芽短梗霉的辐射诱变效应

使用~(60)Coγ射线辐照诱变的方法处理出芽短梗霉AureobasidiumPullulansAP92菌株的原生质体、菌丝体片段、分生孢子悬液,经初筛、复筛与对突变株的遗传稳定性研究,发现采用原生质体进行诱变,所获突变株的正突变率、单株产多糖的提高幅度、正突变株的产多糖遗传稳定性均明显高于菌丝体与分生孢子。比较出发菌株AP92与经原生质体诱变获得的正突变株A81的性能,有如下明显改善：产多糖能力从16．35g／L提高到29．69g／L,糖转化率从32．7％升到61．4％,残糖从13．269／L降到3．06g／L,而发酵周期则可缩短约24小时。结果证明,对原生质体进行~(60)Coγ射线诱变,是优化出芽短梗霉菌种的有效途径。     

羊肚菌液体发酵培养基的优化及发酵液成分分析

通过液体深层发酵获得羊肚菌菌丝体和发酵液为羊肚菌的开发利用提供了新的途径,本文以胞内多糖和胞外多糖为综合指标,对羊肚菌的最佳培养基组成进行了优化,并对羊肚菌发酵液的成分进行了分析。     

猴头多糖HEP-2化学成分研究

猴头菌(Hericium erinaceus (Bull.) Pers．)的菌丝体培养物经水溶、乙醇沉淀、除蛋白等步骤得到猴头多糖(HEP),利用柱层析从HEP中分离得到两个组分HEP-1和HEP-2。用高效液相凝胶法(HPGPC)鉴定了HEP-2的纯度及分子量,通过有机元素分析、IR、ICP等多种分析方法确定HEP-2为一种硫酸化复合多糖,首次确定了猴头多糖的基本化学组成。