热锻炼能提高菜豆细胞可溶性蛋白、SOD、膜ATP酶和质子泵在体外的热稳定性

以菜豆为实验材料,研究了蛋白质分子和生物膜在体外热稳定性的变化和原因。实验结果表明：热锻炼可增加细胞的耐热性,并赋予ＳＯＤ、膜ＡＴＰ酶和生物膜质子泵在体外的热稳定性;通过对可溶性蛋白热变性后的浊度分析和用ＡＮＳ荧光探针探测蛋白质的结构变化,发现蛋白热变性的原因是疏水区的暴露和分子相互团聚,~（３５）Ｓ－Ｍｅｔ标记分析和二维电泳谱揭示,热锻炼诱导合成的热激蛋白具有阻止蛋白质热变性和生物膜热破坏的功能。     

蓝光对浮游状态和生物膜内铜绿假单胞菌的抗菌作用

目的：探讨450 nm-470 nm可见光（蓝光）是否具有杀灭浮游状态和生物膜内铜绿假单胞菌的作用。方法：分别采用不同能量密度的蓝光照射浮游状态铜绿假单胞菌,与红光对照组、空白对照组相比,将照射后细菌采用平板涂板法评价蓝光杀菌效果;制作铜绿假单胞菌生物膜模型,16 J/cm2能量密度蓝光照射后通过激光共聚焦显微镜和扫描电子显微镜观察生物膜内细菌存活情况以及生物膜结构变化。结果：与空白对照组相比,2 J/cm2及以上能量密度组蓝光照射后,细菌数目明显减少,杀菌率明显增加（P〈0.05）,并呈剂量效应关系;16 J/cm2能量密度光照后生物膜内细菌死亡数较空白对照组明显增加且生物膜结构变稀疏。结论：450 nm-470 nm可见光（蓝光）具有高效杀灭浮游状态和生物膜内铜绿假单胞菌的作用。     

“生物膜的流动镶嵌模型”单元式教学设计

构建6个主题单元：①变形虫告诉我们（导入）；②模型构建中的逻辑推理和实验观察；③实验技术进步对生物膜研究的作用；④模型构建中结构与功能的适应；⑤假说的提出和修正；⑥体验美和创造关（结尾），着力于知识的理解、创新精神和实践能力的培养以及情感的渗透。     

蛋白质合成模型的制作及使用

蛋白质合成模型的制作及使用张希一（山东省寿光县第三中学２６２７０４）现行高中《生物》（必修）教材中，关于“基因控制蛋白质的合成”内容是教学中的难点。为解决这个难点，我制作了“蛋白质合成模型”。通过３年的实践证明，使用该教具能加强直观教学，促进学生对问...     

红霉素、氨溴索与环丙沙星雾化吸入对实验大鼠铜绿假单胞菌生物膜的影响

目的研究红霉素和氨溴索分别联合环丙沙星雾化吸入对铜绿假单胞菌成熟生物膜的干预效果。方法平板法培养成熟铜绿假单胞菌生物膜;微量肉汤稀释法测量红霉素和环丙沙星的最低抑菌浓度;制作气管插管铜绿假单胞菌生物膜感染模型;平板计数法计算红霉素、氨溴索分别联合环丙沙星对生物膜菌落数的影响;日本岛津紫外-可见光分光光度计UV1700测铜绿假单胞菌菌液的A值;石蜡切片HE染色定性观察肺组织的炎症情况;扫描电镜定性观察各处理组的生物膜结构变化。结果各处理组干预7 d后肺组织细菌菌落计数（×10^4CFU/m l）：干预组分为：生理盐水对照,氨溴索,红霉素,红霉素联合环丙沙星,氨溴索联合环丙沙星,各组分别为139.250±42.0162、101.625±40.4190、109.625±33.4747、57.750±37.8295和22.250±17.3184,前3组与后2组对比差异均有显著性（P〈0.05）,前3组之间对比差异没有显著性（P〉0.05）,后2组对比差异有显著性（P〈0.05）。导管生物膜细菌菌落计数（×10^4CFU/m l）：5组分别为170.000±48.3263、127.625±39.0163、133.500±33.6876、70.375±35.7768和38.125±19.1045,结论和肺组织菌落计数是一致的。导管生物膜电镜观察：第1组导管内表面均有较厚基质覆盖,2、3组减少不明显,而联合用药组导管内表面生物膜明显减少,其中第5组效果更好。结论氨溴索与红霉素分别联合环丙沙星雾化吸入在控制导管生物膜和呼吸系统相关感染均具有显著效果,其中氨溴索联合环丙沙星疗效更好。     

β-细辛醚对AD大鼠海马神经元蛋白质组图谱的影响

目的：探讨β-细辛醚对痴呆大鼠海马神经元蛋白质表达谱的影响。方法：SD大鼠随机分为正常时照组、模型组和β-细辛醚治疗组。模型组和β-细辛醚治疗组大鼠行脑立体定位注射术,模型组从大鼠右侧海马注入β淀粉样蛋白（Aβ1-40）5μg;治疗组：将Aβ1-40和β-细辛醚（0.12%）混合后注入大鼠右侧海马。抽提各组大鼠海马神经元组织蛋白质,行双向电泳,采用PDQuest-7.1.1分析软件解析各组之间有明显差异表达的蛋白质。结果：β-细辛醚治疗组α-烯醇化酶（α-enolase）、钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶（Ca^2＋/Calmodulin-dependent protein kinase）的表达高于模型组,而尿激酶型纤溶酶原激活物（urokillasc plasminogen activator surface）、P53抑癌基因（P53 tumor suppressor）和未知蛋白（SSP6001）表达则低于模型组。结论：β-细辛醚可能通过上调或下调上述蛋白质的表达,参与促进大鼠海马受损神经元保护作用。     

近红外光谱测定小麦粉常规营养成分的模型优化

目的：应用近红外光谱（NIR）结合偏最小二乘法（PLS）建立小麦粉常规营养成分蛋白质、水分和脂肪的含量预测模型,并选择最佳模型。方法：收集117份小麦粉样品的近红外光谱,化学法测定蛋白质、水分和脂肪的含量,利用主成分分析（PCA）随机分组,81份样品用于构建模型、36份样品用作验证模型的预测能力。探讨波长范围和光谱预处理方法对所建模型预测能力的影响。结果：3个营养成分预测能力最好的模型分别是：对于蛋白质,预处理采用矢量归一化（SNV）,波长选取7 505.9~5 446.2 cm-1和4 605.4~4 242.8 cm-1,预测模型的RPD值是7.02;对于水分,无预处理,波长选择全谱12 800~3 960 cm-1,模型的RPD值是6.83;对于脂肪,无预处理,波长在9 000~4 000 cm-1,模型的RPD值是5.06。结论：近红外光谱法可以实现对小麦粉常规营养成分的快速预测,通过选择波长范围和光谱预处理方法可以显著提高模型的预测能力。     

穿心莲内酯等中药有效成分对表皮葡萄球菌生物膜渗透性的比较

目的比较穿心莲内酯、大黄素、盐酸小檗碱等对表皮葡萄球菌生物膜的渗透性,为中药治疗表皮葡萄球菌引起的相关感染提供相关研究的依据。方法在体外建立SE—BF（表皮葡萄球菌生物膜模型）和PB（生物膜渗透模型）,观察穿心莲内酯、大黄素、盐酸小檗碱等中药有效成分对PB的渗透率。结果大黄素、穿心莲内酯36h渗透率分别达到88．00％、82．89％,而盐酸小檗碱渗透率在几种药物中相对较差。结论中药有效成分对表皮葡萄球菌生物膜有较强的渗透性。     

膜蛋白侧向扩散运动的测定

根据生物膜流动镶嵌模型,生物膜的基本结构是功能蛋白质分子浮动镶嵌于类脂双分子层中。带有双亲性基团(亲水基和疏水基)的类脂分子在水解质中由于其结构特性可形成有序的溶致近晶相液晶,蛋白质分子嵌于双层膜内,它处于液晶态环境里,具有快速扩散的可能性。在合适的条件下,蛋白质分子在膜中可进行快速的自由旋转扩散和侧向扩散运动。由于     

肺炎克雷伯菌生物膜对小鼠腹腔巨噬细胞TLRs受体表达的影响

目的研究肺炎克雷伯菌生物膜对小鼠腹腔巨噬细胞TEas受体表达的影响,探索机体抗生物膜（biofdm,BF）感染免疫的特点。方法将雄性昆明种小鼠40只随机分成2组,一组腹腔植入体外形成肺炎克雷伯菌生物膜的硅胶片,建立留置性医疗装置BF感染模型实验组,另一组植入与实验组同等量的浮游菌作为对照组。实时定量PCR分析2组巨噬细胞TLRsmRNA的表达水平,流式细胞仪检测分析蛋白的表达水平。结果实验生物膜组巨噬细胞TLR2、TLR4mRNA相对表达量是对照浮游菌组的0．23和0．24倍：实验组TLR2、TLR4蛋白表达率分别是（23．27±2．73）％和（15．83±2．04）％,明显低于对照组的（33．42±3．72）％、（21．75±1．25）％（P〈0．05）。结论与浮游菌相比,BF能下调小鼠腹腔巨噬细胞TLR2、TLR4表达,从而影响机体的免疫功能,这可能是BF相对浮游菌更容易逃脱机体免疫防御系统、引起慢性感染的机制之一。     

黄芩苷联合氟康唑对白念珠菌生物膜的抑制作用研究

目的：探讨中药有效成分黄芩苷（ baicalin,BA）联合氟康唑（ fluconazole,FLC）对白念珠菌（ Candida albicans,C． albicans）生物膜的抑制作用。方法通过棋盘法考察BA联合FLC对白念珠菌浮游菌与生物膜的部分抑菌浓度指数（ FI?CI）;通过时间?杀菌曲线检测两药联合对白念珠菌标准株（C．albicans SC5314）的杀菌作用;以XTT减低法和干重法检测两药联合对白念珠菌SC5314生物膜代谢及生物量的影响;采用扫描电镜（ Scanning electron microscopy,SEM）和激光共聚焦显微镜（ Confocal laser scanning microscopy,CLSM）观察两药联合对白念珠菌SC5314生物膜形态结构的影响;以水?烃法检测两药联合对白念珠菌SC5314生物膜细胞表面疏水性（ cell surface hydrophobicity,CSH）的影响;通过实时荧光定量PCR （ quan?titative real time PCR,qRT?PCR）检测两药联合对白念珠菌生物膜和CSH相关基因表达的影响。结果黄芩苷与氟康唑联用抗白念珠菌浮游菌的FICI介于0．28～0．75之间,对生物膜的FICI介于0．16～0．5之间,表现为协同作用;SEM和CLSM在生物膜结构上验证了两药的协同效果;两药联合可降低生物膜表面疏水性,以及使ALS1、ALS3、EAP1、SUN41和CSH1分别下调6％、51％、24％、13％和39％。结论黄芩苷具有协同氟康唑抗白念珠菌生物膜作用。     

生命的“脊梁”——液晶

生命的“脊梁”——液晶黄平（湖南益阳卫生学校,益阳４１３０００）黄智（北京大学化学与分子工程学院,北京１００８７１）关键词液晶生物膜众所周知,由生物膜包围着的细胞是生命的基本单元,而一些重要的生命功能都是以生物膜为舞台展现出来的。组成生物膜特有的脂质...     

脑出血与脑缺血动物模型脾淋巴细胞的蛋白质组学研究

目的：通过比较正常与脑出血及脑缺血模型大鼠脾淋巴细胞蛋白质表达的差异,初步探讨细胞免疫功能与脑血管病之间的关系。方法：将SD大鼠随机分为正常组、脑出血模型组（采用VII型胶原酶诱导脑出血）和局灶性脑缺血模型组（采用线栓法造成大脑中动脉阻塞）,分离大鼠脾淋巴细胞,提取总蛋白质后进行双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色,PDQUEST软件分析,对差异蛋白质点采用基质辅助激光解析电离质谱（MALDI-TOF-MS）技术进行鉴定并分析。结果：胶质细胞成熟因子 等9个蛋白在脑出血和脑缺血模型组表达上调,膜联蛋白III在脑出血和脑缺血模型组表达下调。结论：建立了分辨率高重复性较好的脑出血及局灶性脑缺血脾淋巴细胞总蛋白的双向凝胶电泳图谱,并鉴定一些与脑血管病脑损伤相关的差异表达蛋白质,为深入研究脑血管病细胞免疫功能改变与脑血管病之间的关系奠定了基础。     

大鼠心肌整体缺血及离体再灌注致生物膜的损伤作用

目的和方法：利用整体大鼠异丙肾上腺素损伤（ISO）和离体大鼠全心停灌／再灌（I／R）两种模型,观察了心肌缺血和缺血／再灌注对心肌生物膜－线粒体膜及肌纤维膜损伤的影响。结果：ISO（5mg/kg,皮下注射）和I／R（20min/20min)可导致大鼠心脏生物膜产生严重损伤,表现为心肌线粒体脂质过氧化产物明显增加,线粒体磷脂酶A2（PLA2）激活,从而导致线粒体膜磷脂（PL）含量减少,磷脂分解产物游离脂肪酸（FFA）增加,膜脂流动性（LFU）降低,线粒体Ca^2 -ATPase及肌纤维膜Na^ ,K^ -ATPase活性降低,线粒体呼吸功能降低、呼吸链氧化磷酸化解偶联,高能磷酸化合物生成减少。结论：整体ISO和离体I／R可导致大鼠心肌线粒体、肌纤维膜结构和功能损伤。     

热锻炼能提高菜豆细胞可溶性蛋白,SOD,膜ATP酶和质子泵在体外的…

以菜豆为实验材料,研究了蛋白质分子和生物膜在体外热稳定性的变化和原因,实验结果表明：热锻炼可增加细胞的耐热性,并赋予ＳＯＤ、膜ＡＴＰ酶和生物膜质子在体外的热稳定性;通过对可溶性蛋白热变性后的浊度分析和用ＡＮＳ荧光探针探测蛋白质的结构变化,发现蛋白热变性的原因是疏水区的暴露和相互轩聚,＾３５Ｓ－Ｍｅｔ标记分析和二维电泳谱揭示,热锻炼诱导合成的热激蛋白具有阻止蛋白质热变性和生物膜热破坏的功能。     

鼠伤寒沙门菌pStSR100质粒对生物膜形成的影响

目的：鼠伤寒沙门菌在多种表面形成的生物膜对其致病性和引起食物中毒等方面起着重要作用,本研究探讨鼠伤寒沙门菌pStSR100质粒对细菌在不同材质表面生物膜形成的影响。方法：用LB（Lufia—Bertani,LB）培养基和TSB（TryptoseSoyaBroth,TSB）培养基分别将携带pStSR100质粒的野生株在96孔板与放置无菌小圆玻片的24孔板中静态培养48h,用结晶紫半定量法确定生物膜形成的适宜培养基。将野生株与消除质粒的突变株,用结晶紫半定量法和激光共聚焦显微镜（ConfocalLaserscanningmicroscopy,CLSM）观察其在聚苯乙烯培养板和小圆玻片表面形成生物膜的差异。结果：用LB培养时细菌生物膜的形成能力高于用TSB培养,LB培养基更适宜生物膜形成;结晶紫半定量法结果表明野生株比突变株在小圆玻片表面形成生物膜的能力明显增强,而在聚苯乙烯培养板表面两者则无明显差异;CLSM观察发现,野生株在小圆玻片表面形成融合成片的大克隆,突变株仅形成较小克隆。结论：鼠伤寒沙门菌pStSR100质粒能促进该茵在亲水性材质表面生物膜的形成,但其对该菌在疏水性材质表面生物膜的形成未见明显影响,这一新发现为进一步研究鼠伤寒沙门菌生物膜形成的调控机制,研制抗感染材料提供了理论和实验依据。     

从单分子到细胞的生物膜与膜蛋白研究棗美国Purdue大学关于生物膜的研究计划简介

生物膜是由脂质、蛋白质和碳水化合物组成的令人惊讶的多功能"海洋",在生命活动中起着非常重要的作用（如物质运输、代谢调节、分子识别、细胞免疫及激素与药物的作用）。然而,我们目前对于膜的组织结构、动力学和功能等许多方面仍知之甚少.     

靛玉红、蛇床子素抗外阴阴道念珠菌病混合菌生物膜作用的研究

目的研究中药有效成分靛玉红、蛇床子素抗外阴阴道念珠菌病混合菌生物膜的作用。方法体外建立白念珠菌（Candidaalbicans）铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa,P．a）混合菌生物膜（Biofilm,BF）,XTT减低法及形态学观察白念珠菌混合茵生物膜的形成过程;形态学观察、活菌计数法评价中药有效成分靛玉红（indirubin）、蛇床子素（Ostho）对白念珠菌混合菌生物膜的最小抑膜浓度（SMIC）,并经扫描电镜确认。结果白念珠菌混合菌48h能形成成熟的生物膜;62．5mg／L浓度的靛玉红能抑制白念珠菌混合菌生物膜的形成。500mg／L浓度的蛇床子素未见有抑制白念珠菌混合菌生物膜的作用。结论靛玉红由于具有抗生物膜的作用,可用于预防外阴阴道念珠菌病的复发。     

五红汤对小鼠抗氧化作用的初步研究

文章主要研究五红汤的抗氧化、缓解焦虑、补气补血功效。采用小鼠分组，按相应剂量灌胃五红汤饲养30 d的研究方法。通过灌胃50%乙醇溶液建立氧化损伤模型，与灌胃五红汤后还原性谷胱甘肽（GSH）含量、蛋白质羰基（PCO）含量对比，验证五红汤的抗氧化能力；幽闭小鼠建立焦虑模型，对比糖水偏好、强迫游泳时间及出凝血时间，验证五红汤的抗焦虑功效及补气补血作用。因此得到实验结果如下：（1）GSH含量：五红汤可提高小鼠体内的GSH含量；（2）糖水偏好：五红汤有升高小鼠糖水偏好的趋势；（3）强迫游泳时间：五红汤可缩短小鼠抑郁后行为绝望的时间；（4）出血时间、凝血时间测定：五红汤可缩短小鼠出凝血时间；（5）PCO含量：五红汤可降低PCO含量。最终可得到以下实验结论：五红汤可提高小鼠抗氧化、缓解焦虑和补气养血能力。     

蛋白质的豆蔻酰化

蛋白质的豆蔻酰化许正平李伯良（浙江大学生物科学与技术系,杭州３１００２７）（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）蛋白质豆蔻酰化是指真核细胞中豆蔻酰基在豆蔻酰ＣｏＡ：蛋白质Ｎ端豆蔻酰转移酶（ＭｙｒｉｓｔｏｙｌＣｏＡ：ｐｒｏｔｅｉｎＮｍｙｒ...