酶的微波孵育

我们在酶组织细胞化学技术中,应用微波辐射对生物组织进行快速孵育处理,获得满意的效果。具体操作;将小鼠断椎处死后立即打开腹腔,取出心、肾等组织,用刀片切成1mm~3左右的小块,放入2％多聚甲醛和2.5％戊二醛混合固定液中固定2小时。再用0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液浸洗3次,每次10分钟。     

青蛙胚胎三色染色法

一.杀死与固定青蛙产卵一般在四月中至六月底之间,在稻田及河沟中都可以采到,采集后选择所需要的发青时期,固定于施氏固定液中,固定时间24小时.固定后以流水冲洗24小时.然后依次换入30%、50%、70%、酒精中各2小时.胚胎就可以保存在70%酒精中.     

小型昆虫整体玻片标本的简便制法

1.处死固定将蚊、蚜等置于70%酒精中杀死固定. 2.脱脂将材料装人试管中注入适量70%的氢氧化钾或氢氧化钠溶液加热脱脂,待水开后,再用文火维持15分钟左右. 3.清水漂洗:脱脂后用纱布过滤碱液,用蒸馏水或清水漂洗2-3次,再用蒸馏水将材料浸泡半小时左右. 4.染色用75%酒精、酸性品红饱和液染     

斯氏狸殖吸虫肠上皮的光镜与电镜观察

斯氏狸殖吸虫(Pagumogonimus skrjabi(?),P.s)是人兽共患病的重要病原。本文报告P.s肠上皮光镜与电镜观察结果,以积累其形态生理和分类学方面的资料。 从陕西宁强县斯氏肺吸虫病流行区捕捉光泽华溪蟹(Sinopotamon dauidi)和陕西华溪蟹(S.shensicnse),分离囊蚴感染犬后100天剖检虫体。10％福尔马林固定石蜡切片,光镜观察;在解剖镜下用细针分离肠管中段,打开肠腔用小针固定在滤纸片上,滴生理盐水冲洗腔面,用含2.5％戊二醛的磷酸缓冲液予固定3小时,经磷酸缓冲液洗后入1％四氧化锻磷酸缓冲液后固定3小时,冼后逐级乙醇脱     

做减数分裂实验的几种好材料

1.大葱花序在地里越冬的大葱(2n=16),第二年春天三四月便可长出花序,待花序长到象枣大小时,颜色呈绿色(呈黄色时已晚),采摘花序,置于卡诺固定液中(3份酒精:1份冰醋酸),固定24小时,然后取出花序,挑取小花即可制片。如不及时制片,可将固定后的花序,用95％酒精冲洗后(直至闻不到醋酸味为止),放入70％酒精中,存于冰箱内,可随时取用。     

小鼠骨髓细胞的染色体制备

在实验教学中,我们借鉴有关方法,经过多次实践,证明用小鼠骨髓细胞作动物染色体的制备实验,方法简便可靠,结果明显.现介绍如下,供高等院校或中学生物学实验参考. 1.前处理实验用小白鼠(重25克左右),腹腔注射0.1毫升0.1％的秋水仙素溶液. 2.取材注射后2.5—3小时,用乙醚将小鼠麻醉(或直接处死小鼠),立即取出股骨,剔净肌肉. 3.低渗用剪刀将股骨两端剪开,用注射器吸入1毫升0.05M氯化钾低渗液,插入一端,冲洗出骨髓细胞,滴于培养皿中的载玻片上(载玻片置于二根玻棒之上).再加入适量的低渗液,并用滴管展开.盖上培养皿,在37℃下低渗处理20分钟. 4.固定低渗后,往培养皿中缓缓注入甲醇、冰醋酸固定液(3:1),盖上培养皿,固定100分钟.换入无     

金鱼精子鞭毛发生的特点

金鱼(Carassius auratus)是鲤形目鲤科硬骨鱼,精子为初级型,但在鞭毛上存在许多液泡。本文着重描述了在它的精子发生过程中,鞭毛形成的特点。现报告如下: 材料与方法 在不同季节从二龄金鱼(红龙睛)睾丸上不同部位取出小块组织,或在生殖季节用轻压腹部法挤出成热精子,即用2％戊二醛在室温下固定0.5小时,缓冲液稍洗后,在含0.8％亚铁氰化钾缓冲液内浸     

白菜、苹果得高产

1992年大连市郊区董家沟村农西屯林永宁,用高美施喷施大白菜.供试品种为鲁白2号,试验用400倍、600倍和800倍液,对照喷清水.各处理重复三次.喷施时间为9月14日和9月21日,即在包心始期午后叶面喷施两次. 喷施高美施,产量明显提高.11月8日收获后,测定对照实产为每亩4405.6公斤;喷400倍液的亩产5633.1公斤,比对照增产21.8%;喷600倍的亩产5326.9公斤,比对增产17.3%;喷800倍液的亩产5158.6公斤,比对照增产     

细鳞泥鳅味蕾的形态初步研究

一、材料与方法 本研究所用材料为细鳞泥鳅(Misgurnus mizolepis Günther.)土名为肉泥鳅。 将捕来的细鳞泥鳅先放入水族箱中生活1—2天,然后破坏脑脊髓(杀死),放入盛有生理盐水的直径为12厘米的大培养皿中,剪下口须、唇、舌、口腔顶壁和底壁、咽等部位的材料,再分别放入带标签儿的已盛好波恩式固定液的指管中固定,经8—12小时后,用50％酒精冲洗,待黄色变浅后放入70％酒精中保存。然后做石蜡切片。切片的厚度为7—8微米,用窦来飞-苏木精染色,伊红复染,使胞核呈蓝色,胞质     

一种快速、简便诊断布病的方法——虎红缓冲凝集试验

<正>1.浓集菌体:用牛种菌制成菌液,70—80℃1小时灭活,离心、浓缩、称湿重。 2.配制抗原:首先配制缓冲液和染料液。缓冲液为NaOH中和的乳酸生理溶液,pH3.65,染料液是用虎红染料配成1％水溶液。 将浓集菌体按每克加22.5ml酚盐水,     

焦性磷酸酶的组织化学显示法

甲) 硷性焦性磷酸酶(alkaline pyrophosphase)的显示法: 1) 新鲜组织片固定于冷的5%中性福尔马林液中(此液含有0.9%氯化钠)1小时。 2) 以0.9%氯化钠洗10—20分钟。 3) 冰冻切片(20—35微米),切片径入0.9%氯化钠中或酶作用基液中(Substrate solution)。 4) 切片入酶作用基液内,在37℃下作用3小时,基液之     

绿藻保色液的配制和使用方法

一、无鞭毛绿藻保色液的配制和使用方法1、保色液的配制取醋酸汞(HgACO)10克、中性醋酸铅(Pb(ACO)_2)10克,溶于1000毫升90%酒精(C_2H_2OH)中,混匀后静置24小时,取澄清液即得绿藻保色液。2、使用方法无鞭毛藻类如礁膜、刺松藻等,它们的植物体较大,处理较简单。只要把植物体冲洗干净,去掉杂藻,而固着物体大小适中,即可移入保色液中,一星期以后换液一次,然后蜡     

食品用米曲霉α-淀粉酶的制备

米曲霉(Aspergillus oryzae)突变株6-193麦麸固体培养物酶的浸出,采用自来水或pH4.6—5.0的缓冲液在室温至50℃之间浸泡1—2小时较好。用截流分子量10000的中空纤维超滤柱过滤即得高活力的浓缩酶液,制成食品用酶制剂,收率90%。制备粉剂时,酒精沉淀总收率为55.2%,丙酮沉淀总收率高达94.1%,冷冻干燥总收率达87.6%。     

昆虫保幼激素类似物对家蚕后部丝腺谷氨酸-丙酮酸转氨酶活性的影响

1.多化性蚕种南农七号五龄中期喷布保幼激素类似物(734-Ⅱ)的剂量为0.05微克/克幼虫体重,二化性蚕种为0.08微克/克幼虫体重。将使龄期延长18—24小吋,增加茧丝量12—24%。 2.正常情况下,五龄期后部丝腺转氨酶的活性以饷食后72小时为最大,以后渐次下降,熟蚕前又稍有回升。二化性蚕种的茧层量较多化性蚕种多一倍左右,同样它的转氨酶最大活性亦较多化性蚕种多70%。 3.用734-Ⅱ号处理后12—24小时内,后部丝腺的转氨酶活性较对照区明显下降,48小时后又回升并超过对照区,以后虽渐次下降,仍明显地高于对照区,熟蚕前则又有所回升。喷布734-Ⅱ号后使二化性蚕种的茧层量增加10—16%,而转氨酶活性增加10—25%。同样,多化性蚕种的茧层量增加18-24%,而转氨酶活性增加20—40%。可以认为734-Ⅱ号促进转氨酶活性的提高,是增产茧丝的生理上的原因之一.     

双载体固定化细胞的脱色研究*

将PVA包埋的细菌细胞涂布并固定于作为多孔载体的棉布上,进行染色废水的脱色试验。制备固定化细胞的条件为,细胞浓度20mg湿重/ml,PVA浓度5%,涂布量0.3ml/cm~2,饱阳硼酸液固定12小时,再用含染料的缓冲液活化细胞的脱色能力,可获得脱色能力较好的固定化细胞。在装填固定化细胞的反应柱中,分别用连续和间歇进水两种运行方式进行脱色效率的比较。在20天内,二者脱色率均在90%以上,尔后连续进水方式的脱色率下降,60天后脱色率仅为60%左右,而间歇进水方式仍能达到80%。后者的脱色效果明显高于前者。     

植物材料光学和电镜蛋白A-金胶体结合体标记技术

这里介绍一种可在光学显微镜薄切片和电子显微镜超薄切片上标记的技术。我们初步应用这一技术来做燕麦球蛋白的定位,结果是成功的(图版图1,2)。现将操作方法简述如下: 一、样品制备 1.把切成2—3微米~3的新鲜材料,用磷酸缓冲液(pH 7.1)配制的3—4％甲醛(加2.5％蔗糖),在室温固定2小时; 2.用磷酸缓冲液清洗两次,每次30分;     

底物对LDS变性肌酸激酶的修复作用

本文报导了底物能够诱导变性肌酸激酶活力和构象部分恢复的实验事实.92μm免肌酸激酶用47mMLDS在pH9.0的甘氨酸缓冲液中变性半小时,取1μl变性酶至2ml底物系统中,10分钟后可观察到酶活力的再现:半小时可达对照酶活力的10%.当把此变性酶液按同样倍数稀释至与测活系统相同的缓冲液中,不同时间取样测活,则观察不到活力再现.可见,前述活力再现来自底物对变性酶的作用.底物对变性酶修复后的活力随着变性程度的减小而增大.底物可使低浓度LDS变性酶活力恢复至天然酶水平.ATP对构象修复起着主要作用.     

甘草次酸结肠靶向微丸的研制

目的:确定甘草次酸结肠靶向微丸的制剂处方,评价其释药特性。方法:采用挤出-滚圆法制备甘草次酸素丸,利用流化床包衣技术对甘草次酸素丸进行包衣,用浆法评价微丸的体外释药性能。结果:采用微晶纤维素和甘草次酸,同时加入黏合剂羧甲基纤维素钠,经过充分搅拌混合,以30%的乙醇作为润湿剂,通过挤出-滚圆制得甘草次酸素丸。以尤特奇S100为膜控材料,加入适量柠檬酸三乙酯与滑石粉配制包衣液,对甘草次酸素丸进行包衣,制得甘草次酸包衣微丸。释放度实验表明甘草次酸素丸在其增重20%时,在0.1 mo L/L的盐酸溶液中不释放,在p H6.8的磷酸缓冲液条件下6 h内其释放率不到20%。而在p H7.4的磷酸缓冲液条件下2 h内释放率达到80%以上。结论:所制的甘草次酸素丸处方合理,制剂工艺简便,通过流化床包衣技术所制的甘草次酸包衣微丸在模拟的胃液中不释放,在小肠液中释放缓慢,在结肠液中释药良好,具有良好的结肠靶向作用。     

大熊猫舌解剖二例

有关大熊猫食性的分析已有详细研究,但与其食性相适应的消化系统各器官的解剖及组织学研究则甚少(张鹤宇等,1959;Keymer,1976;王平等,1983)。本文对两例成体大熊猫的舌作解剖和组织学观察,现报道如下:材料和方法两例用10%福马林液浸泡处理的成体雄性大熊猫(分别编号Ⅰ、Ⅱ),用大体解剖方法,剖开口腔充分暴露舌及营养舌的血管。制作组织切片时,分别切取舌尖、舌体、界沟处轮廓乳头和舌根侧面的叶状乳头等4个部位舌组织各一小块,以流水冲洗24小时后再用波恩氏液(Bouin fluid)固定24小时,石蜡包埋,HE染色,PAS染色。光学显微镜观察,测微尺测…     

一种用于染色体观察的改良绒毛细胞直接制备法

为弥补羊水检查时间过晚之不足,1984年 Simoni利用绒毛标本直接制备法观察染色体获 得成功,此后,即日益为人们所注目。我们改良 了绒毛细胞直接制备方法,以胶原酶代替乙酸 处理,对绒毛细胞直接制备法（简称乙酸法）和 改良法（简称胶原酶法）进行了比较。大致过程 如下： 取妊娠6-7周人流绒毛组织50mg左 右,严格挑选后,生理盐水洗净,移人含最终浓 度0.5,ug/ ml秋水仙素的RPMI 1640培养液中 孵育1小时（pH7.2, 370C),然后分成两份。一 份按乙酸处理法进行制片：(1)去除培养液,加 3m11.5外拘椽酸钠溶液低渗15分钟;(2）加人 数滴3:1的甲醇：冰乙酸预固定10分钟;(3）吸 弃固定液,重复固定巧分钟;(4)吸弃固定液, 加入1m160并乙酸水溶液,处理2分钟,即追加 纯甲醇2ml; (5)吸取细胞悬液于离心管内离心 (1500-1800rpm); (6）冰水滴片,风干,Giemsa 染色。另一份按改良的胶原酶法制备染色体,大 致如下：(1)弃培养液加人15ng/ml胶原酶4ml, 孵育15-20分钟（370C); (2）加人4m1生理盐 水,离心（1000rpm),分钟,弃上清液,经0.75% 氯化钾4 ml低渗20分钟（370C),用甲醇冰醋 酸固定液lml预固定后,依上法离心,弃上清 液;(3）甲醇冰醋酸（3:1)重复固定15分钟,混 匀后自然沉降,吸上层细胞悬液离心,如此重复 二次后,再固定15分钟,气干法制片。28例实 验结果见表1,无论是可数分裂相,还是完整分 裂相出现率,胶原酶法均比乙酸法为高,二者间 有显著差异。